梅毒血清固定患者中NOD样受体蛋白3和Toll样受体4表达与Th1/Th2相关细胞因子的相关性研究

目的探究梅毒血清固定患者中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、Toll样受体4(TLR4)表达与辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)相关细胞因子的相关性。方法选取2021年2月至2022年4月川北医学院附属三台医院收治的197例梅毒患者作为研究对象。将进行驱梅治疗后血清转阴者纳入转阴组(n=88),未进行驱梅治疗者纳入梅毒组(n=45),接受驱梅治疗后血清固定者纳入固定组(n=64)。另选取同期进行体检的健康人作为对照组(n=53)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测外周血单个核细胞(PBMCs)中NLRP3、TLR4 mRNA相对表达水平;采用酶联免疫吸附试验法检测Th1/Th2相关细胞因子的表达水平;采用Pearson法分析TLR4、NLRP3 mRNA与Th1/Th2相关细胞因子的相关性。结果各组PBMCs中TLR4、NLRP3 mRNA表达水平比较,梅毒组>转阴组>对照组>固定组,差异具有统计学意义(P<0.05);各组白介素(IL)-2、γ干扰素(IFN-γ)水平比较,对照组>转阴组>梅毒组>固定组,差异具有统计学意义(P<0.05);各组IL-1β、IL-4、IL-10及IL-18水平比较,对照组<转阴组<梅毒组<固定组,差异具有统计学意义(P<0.05);梅毒血清固定患者TLR4、NLRP3 mRNA表达与IFN-γ、IL-2呈正相关,与IL-1β、IL-4、IL-10、IL-18呈负相关(P<0.05)。结论梅毒血清固定患者NLRP3、TLR4 mRNA表达水平显著降低,且与Th1/Th2相关细胞因子密切相关。

NOD样受体蛋白3炎症小体在多柔比星诱导心脏毒性中的意义

晚期肿瘤病人的生命周期因新药的出现不断延长,同时,抗肿瘤药物所致的毒副作用也受到重视。多柔比星(DOX)作为强大的广谱抗肿瘤药物虽极大地延长了肿瘤病人的生存周期,但其诱导的剂量相关性的心脏毒性限制了其临床应用。NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体在DOX诱导的心脏毒性(DIC)的炎症过程发挥着重要作用,且一些炎症小体抑制剂还可减轻DIC。该文根据近5年的最新进展,围绕NLRP3炎症小体参与DIC的作用及机制等做一归纳、总结。

老年髋关节置换术患者行椎管内麻醉的效果及对术后认知功能、NOD样受体蛋白3炎性小体的影响

目的:探讨老年髋关节置换术患者实施椎管内麻醉的临床价值。方法:选取收治的120例老年髋关节置换术患者为研究对象,以系统抽样法分为对照组与观察组各60例,对照组实行全身麻醉,观察组实行椎管内麻醉;评估、比较两组麻醉效果。结果:术后12 h内蒙特利尔认识评估表(MOCA)、简易智力状态检查量表(MMSE)评分明显下降,之后逐渐回升,同期观察组评分更高,同时观察组不良反应率明显更低(P<0.05);术后3d观察组NOD样受体蛋白3(NLRP3)mRNA、白细胞介素(IL-10)水平更低(P<0.05);术毕拔管(T1)~术后1 d(T3)时肾上腺素(AD)、去甲肾上腺素(NE)、皮质醇(Cor)、内皮素(ET)水平和两组不同时间点的AD、NE、Cor、ET水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);观察组留观时间、住院时间与对照组比较,相对更短(P<0.05)。结论:椎管内麻醉用于老年髋关节置换术患者,降低对认知功能的影响,减轻应激反应。

参附注射液辅助治疗对急性心肌梗死大鼠NOD样受体蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1介导的细胞焦亡信号通路以及炎性因子水平的影响

目的探讨参附注射液辅助治疗对急性心肌梗死(AMI)大鼠NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)介导的细胞焦亡信号通路以及炎性因子水平的影响。方法40只大鼠随机分为假手术组、模型组、倍他乐克组(0.9 mg/kg)和联合组(倍他乐克0.9 mg/kg联合参附注射液6 mL/kg),每组10只,连续灌胃3周。检测造模前、造模后和治疗3周时大鼠血清肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。造模后和治疗3周时,比较各组大鼠左心室射血分数(LVEF)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)等心脏彩超参数以及心肌梗死面积。应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)及Western blot检测心肌梗死面积NLRP3、Caspase-1的mRNA及其蛋白表达水平。结果与假手术组相比,模型组造模后和治疗3周时cTnI、CK-MB、IL-6、IL-1β、TNF-α、心肌梗死面积、NLRP3 mRNA和Caspase-1 mRNA表达量均升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,倍他乐克组和联合组治疗3周时cTnI、CK-MB、IL-6、IL-1β、TNF-α、心肌梗死面积、NLRP3 mRNA和Caspase-1 mRNA表达量均降低,且联合组上述指标均低于倍他乐克组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论参附注射液辅助治疗AMI能够进一步减轻心肌细胞损伤,缩小梗死面积,抑制炎症反应和细胞焦亡活性。

NOD样受体蛋白3在心肌纤维化中的相关研究

心肌纤维化(MF)是导致心功能不全的主要原因,越来越多的证据表明无菌性炎症在导致心肌纤维化中起着非常重要的作用,NOD样受体(NLR)家族成员是控制炎症反应的核心角色,NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎性体的NOD样受体家族吡喃结构域是最具特征的炎性体,现就NLRP3在多种疾病所致心肌纤维化中的作用及相关预防进行综述。

吴茱萸碱调节Nod样受体蛋白3信号通路对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织损伤的影响

目的探讨吴茱萸碱调节Nod样受体蛋白3(NLRP3)信号通路影响非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织损伤情况。方法2022年5—11月选取大鼠喂食高脂饲料8周后,通过随机数字表法将大鼠分为模型组、吴茱萸碱低剂量组(吴茱萸碱4 mg/kg)、吴茱萸碱中剂量组(吴茱萸碱8 mg/kg)、吴茱萸碱高剂量组(吴茱萸碱16 mg/kg)、阳性药组(多烯磷脂酰胆碱200 mg/kg)和NLRP3组(吴茱萸碱16 mg/kg+1 mg/kg NLRP3信号通路激活剂尼日利亚菌素),每组各10只,另有10只大鼠喂食普通饲料作为对照组,所有大鼠均给予相对应药物干预,给药4周;生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、胆固醇、三酰甘油(TG);HE染色观察肝组织病理;油红O染色观察肝组织脂肪沉积;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-18、IL-1β水平;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法检测大鼠肝脏组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1(caspase-1)表达水平。结果与对照组相比,模型组大鼠肝组织肝小叶结构紊乱,肝细胞增大,可见明显颗粒状脂滴以及脂质积累,并伴有炎症细胞浸润,肝组织脂肪变性明显,大鼠体质量[(582.65±16.25)g比(476.29±10.62)g]、肝指数[(3.79±0.25)%比(2.48±0.18)%]、血清GPT[(79.62±3.59)U/L比(36.22±2.15)U/L]、GOT[(185.25±5.18)U/L比(71.69±3.56)U/L]、胆固醇[(2.93±0.19)mmol/L比(1.72±0.12)mmol/L]、TG[(1.19±0.11)mmol/L比(0.56±0.07)mmol/L]、TNF-α[(162.48±4.25)ng/L比(41.76±2.49)ng/L]、IL-18[(135.75±3.37)ng/L比(23.52±2.02)ng/L]、IL-1β[(201.88±4.67)ng/L比(92.64±2.99)ng/L]水平,肝组织NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA表达以及NLRP3、ASC、活化胱天蛋白酶-1(cleaved caspase-1)蛋白表达均明显升高(P<0.05);与模型组相比,吴茱萸碱低、中、高剂量组和阳性药组大鼠肝组织损伤、肝脏脂肪变性、炎症细胞浸润和脂滴积累明显减轻,大鼠体质量[(551.37±15.72)g、(530.52±15.49)g、(509.48±15.18)g、(517.71±12.73)g比(582.65±16.25)g]、肝指数[(3.41±0.20)%、(3.13±0.16)%、(2.81±0.17)%、(3.02±0.213)%比(3.79±0.25)%]、血清GPT[(68.16±3.41)U/L、(55.94±3.05)U/L、(46.45±2.72)U/L、(48.71±2.34)U/L比(79.62±3.59)U/L]、GOT[(161.32±4.73)U/L、(138.64±4.50)U/L、(113.57±4.05)U/L、(121.48±4.11)U/L比(185.25±5.18)U/L]、胆固醇[(2.58±0.17)mmol/L、(2.25±0.16)mmol/L、(1.91±0.13)mmol/L、(1.99±0.15)mmol/L比(2.93±0.19)mmol/L]、TG[(1.01±0.10)mmol/L、(0.83±0.08)mmol/L、(0.62±0.07)mmol/L、(0.70±0.09)mmol/L比(1.19±0.11)mmol/L]、TNF-α[(137.15±3.69)ng/L、(113.53±3.34)ng/L、(79.37±2.92)ng/L、(85.61±3.07)ng/L比(162.48±4.25)ng/L]、IL-18[(111.34±3.05)ng/L、(72.98±2.66)ng/L、(47.61±2.438)ng/L、(51.59±2.55)ng/L比(135.75±3.37)ng/L]、IL-1β[(171.52±4.34)ng/L、(152.23±4.02)ng/L、(129.95±3.51)ng/L、(517.71±12.73)ng/L比(136.76±3.73)ng/L]水平,肝组织NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA表达以及NLRP3、ASC、cleaved caspase-1蛋白表达均明显降低(P<0.05);NLRP3信号通路激活剂尼日利亚菌素的加入明显减弱了吴茱萸碱对NAFLD大鼠肝组织的保护作用。结论吴茱萸碱可通过抑制NLRP3信号通路明显改善NAFLD大鼠肝组织损伤、脂肪病变和炎症反应。

基于NOD样受体蛋白3/半胱天冬酶-1信号通路探究槲寄生滴眼液对干眼症模型小鼠的治疗效果

目的基于NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱天冬酶-1(Caspase-1)信号通路探究槲寄生滴眼液对干眼症模型小鼠的治疗效果。方法将干眼症模型小鼠(采用苯扎氯铵溶液滴眼造模)随机分为模型组(以生理盐水干预)、槲寄生滴眼液组(槲寄生滴眼液滴眼5μL,每天2次)、NLRP3/Caspase-1通路抑制剂(VX-765)组(腹腔注射50 mg/kg VX-765,每天1次)、槲寄生滴眼液+VX-765组(槲寄生滴眼液滴眼5μL,每天2次,腹腔注射50 mg/kg VX-765,每天1次),每组12只。另取12只健康小鼠作为对照组(以生理盐水干预)。各组均持续给药14 d。酚红棉线测定泪液分泌情况;苏木精-伊红染色观察结膜上皮和泪腺组织病理改变情况;酶联免疫吸附试验测定血清白细胞介素(IL)-18、IL-1β水平;荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别测定结膜上皮和泪腺组织NLRP3、Caspase-1 mRNA和蛋白表达。结果与对照组比较,模型组结膜上皮细胞排列紊乱,杯状细胞数量减少,固有层可见淋巴细胞浸润等病理损伤,泪腺组织呈现腺泡空泡样改变,结构不清晰,大小不均一,各小叶及腺泡间细胞排列紊乱等病理变化,泪液分泌量(酚红棉线被浸湿的长度,下同)[(2.66±0.42)mm比(6.14±1.09)mm,P<0.05]显著减少,血清IL-18[(53.16±6.95)pg/mL比(15.04±2.14)pg/mL,P<0.05]、IL-1β[(57.28±7.11)pg/mL比(24.51±3.06)pg/mL,P<0.05]、结膜上皮及泪腺组织NLRP3、Caspase-1 mRNA和蛋白[NLRP3 mRNA:(3.05±0.43)比(1.00±0.05),P<0.05;Caspase-1mRNA:(4.41±0.62)比(1.00±0.06),P<0.05;NLRP3蛋白:(1.33±0.21)比(0.17±0.03),P<0.05;Caspase-1蛋白:(1.51±0.26)比(0.20±0.04),P<0.05]表达显著升高。与模型组比较,槲寄生滴眼液组、VX-765组和槲寄生滴眼液+VX-765组结膜上皮和泪腺组织上述病理损伤减轻,泪液分泌量[(4.15±0.53)mm、(4.11±0.55)mm、(5.38±0.62)mm比(2.66±0.42)mm,P<0.05]显著增加,血清IL-18[(36.03±5.71)pg/mL、(35.92±5.66)pg/mL、(20.07±3.38)pg/mL比(53.16±6.95)pg/mL,P<0.05]、IL-1β[(40.85±5.04)pg/mL、(41.06±5.12)pg/mL、(28.08±4.57)pg/mL比(57.28±7.11)pg/mL,P<0.05]、结膜上皮和泪腺组织NLRP3、Caspase-1 mRNA和蛋白[NLRP3 mRNA:(2.11±0.32)、(2.09±0.29)、(1.37±0.22)比(3.05±0.43),P<0.05;Caspase-1 mRNA:(2.93±0.38)、(2.89±0.36)、(1.58±0.25)比(4.41±0.62),P<0.05;NLRP3蛋白:(0.60±0.11)、(0.59±0.09)、(0.19±0.04)比(1.33±0.21),P<0.05;Caspase-1蛋白:(0.72±0.12)、(0.74±0.11)、(0.23±0.05)比(1.51±0.26),P<0.05]表达显著降低。与槲寄生滴眼液组和VX-765组比较,槲寄生滴眼液+VX-765组结膜上皮和泪腺组织上述病理损伤进一步减轻,泪液分泌量[(5.38±0.62)mm比(4.15±0.53)mm、(4.11±0.55)mm,P<0.05]显著增加,血清IL-18[(20.07±3.38)pg/mL比(36.03±5.71)pg/mL、(35.92±5.66)pg/mL,P<0.05]、IL-1β[(28.08±4.57)pg/mL比(40.85±5.04)pg/mL、(41.06±5.12)pg/mL,P<0.05]、结膜上皮和泪腺组织NLRP3、Caspase-1 mRNA和蛋白[NLRP3 mRNA:(1.37±0.22)比(2.11±0.32)、(2.09±0.29),P<0.05;Caspase-1mRNA:(1.58±0.25)比(2.93±0.38)、(2.89±0.36),P<0.05;NLRP3蛋白:(0.19±0.04)比(0.60±0.11)、(0.59±0.09),P<0.05;Caspase-1蛋白:(0.23±0.05)比(0.72±0.12)、(0.74±0.11),P<0.05]表达显著降低。结论炎症,可能通过下调NLRP3/Caspase-1信号通路实现。

NOD样受体蛋白3炎症小体在动脉粥样硬化中的作用机制及研究进展

炎性小体是一种胞内多蛋白复合物,是固有免疫的重要组分,其中以NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体研究最为广泛。动脉粥样硬化(AS)是诱发心血管疾病的重要风险因素。在AS病情发展过程中,机体通过释放白细胞介素-1β、白细胞介素-18等位于NLRP3炎性小体下游的促炎因子参与AS发病,但NLRP3炎性小体在AS发病机制中的作用仍需深入探讨,该文总结与分析NLRP3炎症小体在AS中的作用机制及研究进展。

热性惊厥患儿外周血NOD样受体蛋白3炎症小体表达水平及临床意义

目的:探讨外周血NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体表达水平与热性惊厥患儿(FS)发生及预后的相关性。方法:选取90例FS儿童作为研究对象(FS组),其中52例单纯性热性惊厥患儿(SPS组);38例复杂性热性惊厥患儿(CFS组);另选取同期在我院因上呼吸道感染导致发热的25例患儿作为发热对照组及25名健康儿童体检者作为健康对照组。使用荧光定量PCR法检测各组外周血NLRP3炎症小体(NLRP3、ASC、Caspase-1)mRNA表达水平;比较各组间血清NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA表达水平等指标的差异;使用Pearson相关分析法探讨NLRP3 mRNA表达水平与FS患儿血清白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等指标的相关性;并使用受试者工作特征(ROC)曲线评价NLRP3 mRNA表达水平对FS的诊断价值和预后判断效能。结果:FS组外周血NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA表达水平高于发热对照组和健康对照组(P<0.05),且CFS组高于SPS组(P<0.05)。FS患儿外周血NLRP3 mRNA表达水平与FS患儿血清IL-1β(r=0.351)、IL-6(r=0.339)、TNF-α(r=0.342)水平均呈正相关关系(P<0.05)。与预后良好组(n=68)相比,预后不良组(n=22)外周血NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA表达水平增高(P<0.05)。ROC曲线分析显示,NLRP3 mRNA表达水平诊断FS的曲线下面积(AUC)为0.724(95%CI:0.617~0.814),预测预后的AUC为0.715(95%CI:0.611~0.809)。结论:NLRP3炎症小体可能参与了FS的发生及发展,其检测对于临床诊治和预后判断有重要意义。

NOD样受体蛋白3炎症小体在女性生殖系统疾病中的作用及机制研究进展

NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体是涉及免疫系统和炎症反应的蛋白质复合物。NLRP3炎症小体可被各种内源性或外源性因素激活,从而介导caspase-1依赖的细胞焦亡,触发促炎细胞因子白细胞介素-1β和白细胞介素-18的释放,是目前最受关注的炎症小体之一。NLRP3炎症小体与女性生殖系统相关疾病如盆腔炎症性疾病、生殖系统肿瘤、生殖内分泌疾病、妊娠相关疾病的发生、发展有关。本文就近年来NLRP3炎症小体在女性生殖系统相关疾病中的作用及机制进行综述,以期为进一步的研究提供思路。

电针百会、神庭对脂多糖诱导的抑郁样小鼠行为及海马NOD样受体蛋白3炎症小体的影响

目的观察电针百会、神庭对脂多糖(LPS)诱导的抑郁样小鼠行为及NOD样受体蛋白3炎症小体(NLRP3)的影响。方法将32只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、电针组和氟西汀组,每组8只。模型组、电针组、氟西汀组小鼠每日予腹腔注射脂多糖(LPS)建立急性抑郁小鼠模型,连续5天。在造模同时,电针组每日予百会、神庭穴电针治疗,氟西汀组每日予氟西汀20 mg/kg灌胃,对照组、模型组小鼠每日予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃,连续5天。干预结束后采用旷场实验、强迫游泳实验进行行为学测试,评估各组小鼠行为学变化。采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测海马组织NLRP3、半胱天冬酶-1(Caspase-1)、白细胞介素1β(IL-1β)的蛋白表达。结果旷场实验结果显示,各组小鼠的总运动总路程比较差异无统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠中央区域停留时间明显缩短(P<0.05);与模型组比较,电针组、氟西汀组小鼠中央区域停留时间均明显延长(P<0.05);与电针组比较,氟西汀组小鼠中央区域停留时间延长(P<0.05)。强迫游泳实验结果显示,与对照组比较,模型组小鼠不动时间明显延长(P<0.05);与模型组比较,电针组、氟西汀组小鼠不动时间均缩短(P<0.05);与电针组比较,氟西汀组小鼠不动时间缩短(P<0.05)。Western Blot结果显示,与对照组比较,模型组海马NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达均升高(P<0.05);与模型组比较,电针组、氟西汀组NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达均降低(P<0.05);电针组与氟西汀组组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论电针治疗可显著改善LPS诱导的小鼠抑郁样行为,其作用机制可能与抑制NLRP3信号通路的活化有关。

外周血微RNA-223、Nod样受体蛋白3水平与心绞痛病人冠状动脉钙化的关系

目的检测心绞痛病人外周血微RNA-223(miR-223)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)水平并探究其与冠状动脉钙化及严重程度的关系。方法回顾性选取2019年12月至2021年12月在河北中石油中心医院接受治疗286例心绞痛病人,入院进行CT心脏冠状动脉成像检查,根据有无冠状动脉钙化将其分为非钙化组(70例)及钙化组(216例)。再根据病人冠状动脉钙化积分为轻度钙化组、中度钙化组及重度钙化组。以荧光定量PCR方法检测外周血miR-223水平。以酶联免疫吸附法检测外周血NLRP3水平。Pearson相关性分析外周血miR-223、NLRP3水平及二者与高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平的相关性。Spearman相关分析miR-223、NLRP3与冠脉狭窄程度(Gensini)积分的相关性。多因素logistic回归分析影响冠状动脉钙化发生的危险因素。结果钙化组NLRP3、hs-CRP、Gensini积分水平[(74.12±7.36)ng/L、(3.67±1.35)mg/L、(40.95±5.23)分]明显高于非钙化组[(55.12±6.78)ng/L、(3.15±1.12)mg/L、(13.05±2.59)分](P<0.05),miR-223水平(0.52±0.11)低于非钙化组(0.98±0.32)(P<0.05);轻度、中度、重度钙化组NLRP3水平[(65.42±6.45)ng/L、(72.49±7.23)ng/L、(87.79±8.75)ng/L]、Gensini积分[(31.33±4.42)分、(41.82±5.63)分、(52.69±5.80)分]依次升高(P<0.05),miR-223水平[(0.72±0.15)、(0.51±0.12)、(0.28±0.06)]依次降低(P<0.05);Pearson相关性分析显示,NLRP3与hs-CRP水平、Gensini积分呈正相关(P<0.05),miR-223与NLRP3、hs-CRP、Gensini积分水平呈负相关;行多因素logistic回归分析显示,NLRP3、hs-CRP、合并糖尿病、miR-223为影响冠状动脉钙化的独立危险因素(P<0.05)。结论心绞痛病人外周血NLRP3呈高表达,miR-223呈低表达,与疾病严重程度及炎症反应关系密切,为影响冠状动脉钙化发生的危险因素。

降钙素基因相关肽通过抑制Nod样受体蛋白3表达促进小鼠成骨细胞分化的研究

目的研究降钙素基因相关肽(CGRP)作用下相关炎症体和信号因子的表达变化,探讨CGRP对成骨细胞分化的作用机制。方法将不同浓度的CGRP(0、10、30、100 ng·m L-1)加入到成骨细胞中,采用实时聚合酶链反应技术检测细胞内Nod样受体蛋白3(NLRP3)及白细胞介素-1β(IL-1β)m RNA的表达水平,蛋白质印迹法检测NLRP3的蛋白表达,酶联免疫吸附测定检测IL-1β的蛋白表达,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量,茜素红染色显示成骨细胞分化情况。结果随着CGRP浓度的增加,NLRP3和IL-1β的蛋白表达及m RNA表达均呈降低趋势(P<0.05),而且细胞内ROS浓度逐渐下降(P<0.05)。100 ng·m L-1CGRP实验组较0 ng·m L-1CGRP对照组显著促进成骨细胞分化。结论 CGRP在一定条件下,可通过抑制细胞内炎症因子的表达促进成骨细胞分化。

二甲双胍激活腺苷酸活化蛋白激酶抑制心肌缺氧再灌注损伤介导的NOD样受体蛋白3炎症体活化的研究

目的:评价腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)介导的NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症体活化在二甲双胍后处理保护心肌缺氧再灌注(H/R)损伤中的作用及机制。方法:选取健康雄性SD大鼠64只,进行麻醉,开胸直接取心脏,将心脏悬挂在Langendoff灌注装置上建立离体心肌缺氧再灌注模型。随机分为4组(n=16):持续灌注组、缺氧再灌注组(H/R组)、二甲双胍后处理组(MET组)、二甲双胍后处理+AMPK抑制剂(CC)组(MET+CC组)。各组进行相应处理后,监测血流动力学指标,测定心肌梗死面积,观察心肌细胞超微结构,ELIS法测定心肌组织内乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,心肌组织原位缺口末端标记法(TUNEL)染色检测细胞凋亡发生;蛋白免疫印迹(Western blot)法测定磷酸化AMPK、AMPK、NLRP3、活化含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(caspase-1)、IL-1β和GAPDH蛋白表达水平。结果:与持续灌注组比较,H/R组心肌梗死面积增大(P<0.05),LDH、CK-MB水平增加(P<0.05),心肌细胞凋亡率显著升高(P<0.05);与H/R组比较,MET组心肌梗死面积缩小(P<0.05),LDH、CK-MB水平降低(P<0.05),心肌细胞凋亡率下降(P<0.05),磷酸化AMPK/AMPK比值显著增加(P<0.05),而NLRP3、活化caspase-1和IL-1β表达显著下降(P<0.05);与MET组比较,MET+CC组抑制AMPK激活后心肌梗死面积进一步增大(P<0.05),LDH和CK-MB水平进一步升高(P<0.05),心肌细胞凋亡率明显升高(P<0.05);磷酸化AMPK/AMPK比值降低(P<0.05),而NLRP3、活化caspase-1和IL-1β表达显著升高(P<0.05)。结论二甲双胍通过激活AMPK信号通路,抑制心肌内NLRP3炎症体活化,从而减轻离体大鼠心肌缺氧再灌注损伤。

藏红花素对慢性阻塞性肺疾病急性加重期大鼠 肺组织NOD样受体蛋白3表达及血清IL-1β水平的影响

目的:探讨藏红花素对慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期大鼠NOD样受体蛋白3(NLRP3)表达及血清白细胞介素-1β(IL-1β)水平的影响。方法:将40只大鼠随机分为对照组、模型组和藏红花素小、大剂量组。采用肺功能检测仪检测大鼠肺功能指标,TUNEL染色检测肺上皮细胞凋亡情况,比色法检测血清丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)水平,RT-qPCR和Western blot法检测NLRP3表达,ELISA法检测大鼠血清IL-1β水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠呼气峰流量(PEF)、吸气峰流量(PIF)、0.3秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV0.3/FVC)显著降低(均P<0.05),肺泡上皮细胞凋亡率、肺组织NLRP3表达水平以及血清IL-1β、MDA和LDH水平显著升高(均P<0.05)。与模型组比较,藏红花素小、大剂量组大鼠PEF、PIF、FEV0.3/FVC显著升高(均P<0.05),肺泡上皮细胞凋亡率、肺组织NLRP3表达水平及血清IL-1β、MDA和LDH水平显著降低(均P<0.05)。结论:藏红花素可有效改善COPD急性加重期大鼠的肺功能,抑制氧化应激和炎症反应,减少肺泡上皮细胞凋亡,其机制与下调NLRP3表达有关。

滋膵益肾汤对老年糖尿病肾病疗效及外周血NOD样受体蛋白3炎性小体和血管内皮生长因子的影响

【目的】研究滋膵益肾汤对老年糖尿病肾病疗效及外周血NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体和血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响。【方法】将112例老年糖尿病肾病气阴两虚兼血瘀证患者随机分为研究组和对照组,每组各56例。2组患者均给予降压、调脂、降糖、纠正电解质紊乱、应用肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)抑制剂和补充优质蛋白质等基础治疗,在此基础上,研究组给予口服滋膵益肾汤治疗,疗程为3个月。观察2组患者治疗前后糖代谢指标、肾功能指标、血液流变学指标及血清NLRP3、VEGF水平的变化情况,评价2组患者的中医证候疗效及安全性。【结果】(1)中医证候疗效方面:治疗3个月后,研究组的总有效率为89.3%(50/56),对照组为75.0%(42/56),组间比较,研究组的中医证候疗效明显优于对照组(P<0.05)。(2)糖代谢指标方面:治疗后,2组患者的空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平均较治疗前降低(P<0.05),且研究组的降低作用均明显优于对照组(P<0.05)。(3)肾功能指标方面:治疗后,2组患者的肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白量均较治疗前明显改善(P<0.05),且研究组的改善作用均明显优于对照组(P<0.05)。(4)血液流变学指标方面:治疗后,2组患者的全血高切黏度、全血低切黏度、血浆黏度均较治疗前明显改善(P<0.05),且研究组的改善作用均明显优于对照组(P<0.05)。(5)血清NLRP3、VEGF水平方面:治疗后,2组患者血清NLRP3、VEGF水平均较治疗前明显下降(P<0.05),且研究组的下降作用均明显优于对照组(P<0.05)。(6)安全性方面:治疗期间,2组患者均未发生严重不良反应,也均无严重胃肠道不适及过敏反应等情况发生。【结论】滋膵益肾汤治疗老年糖尿病肾病气阴两虚兼血瘀证患者疗效确切,能够有效降低患者FBG、2h PG、HbA1c水平,改善肾功能,减少24 h尿蛋白量,降低血黏度和体内NLRP3、VEGF水平。

基于Nod样受体蛋白3炎性小体通路探讨滋肾活血方对血管性痴呆大鼠海马神经血管单元的影响

目的探讨滋肾活血方对血管性痴呆(Vascular dementia,VD)大鼠Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor pyrin domain3,NLRP3)炎性小体通路的调控作用及海马神经血管单元(Neurova-scular Unit,NVU)的影响。方法选取SD大鼠60只进行VD造模,其中10只在手术过程只分离颈总动脉而不结扎作为假手术组,其余大鼠随机分为模型组,阳性药组,滋肾活血方低、中、高剂量组。阳性药组给予盐酸多哌奈齐,滋肾活血方低、中、高剂量组给予不同剂量的滋肾活血方,假手术组和模型组给予生理盐水,各组均灌胃给药。干预4周后,水迷宫法检测各组大鼠痴呆情况,试剂盒检测海马组织活性氧(Reactive oxygen species,ROS)、超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase,SOD)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平。Western blot法检测海马区神经元生长相关蛋白-43(Growth associated proteins-43,GAP-43)、突触素(Synaptophysin,SYN)、水通道蛋白4(Recombinant aquaporin 4AQP4)、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-related dot-like protein,ASC)、半胱天冬酶1(caspase-1)表达,ELISA法检测海马组织通路下游炎性因子白介素-18(Interleukin 18,IL-18)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)表达情况。结果模型组与滋肾活血方低、中剂量组大鼠逃避期均高于假手术组,跨平台数均低于假手术组,阳性药组,滋肾活血方低、中、高剂量组逃避期均低于模型组,跨平台数均高于模型组,滋肾活血方低、中剂量组逃避期均高于阳性药组,跨平台数均低于阳性药组(P<0.05)。模型组,阳性药组,滋肾活血方低、中剂量组ROS、LDH水平均高于假手术组,SOD水平均低于假手术组,阳性药组,滋肾活血方低、中、高剂量组ROS、LDH水平均低于模型组,SOD水平均高于模型组,滋肾活血方高剂量组ROS、LDH水平均低于阳性药组,SOD水平均高于阳性药组(P<0.05)。低、中剂量组ROS、SOD、LDH水平与阳性药组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。模型组GAP-43、SYN、AQP4蛋白表达均低于假手术组,滋肾活血方高剂量组GAP-43、SYN、AQP4蛋白表达均高于模型组(P<0.05)。模型组,阳性药组,滋肾活血方低、中剂量组在GAP-43、SYN、AQP4蛋白表达方面比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。模型组NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达均高于假手术组,滋肾活血方高剂量组NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达均低于模型组(P<0.05)。模型组,阳性药组,滋肾活血方低、中剂量组在NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。模型组IL-18、IL-1β水平均高于假手术组,滋肾活血方高剂量组IL-18、IL-1β均低于模型组、阳性药组(P<0.05)。模型组,阳性药组,低、中剂量组在IL-18、IL-1β水平方面比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论高剂量滋肾活血汤可改善大鼠海马NVU所处微环境,进而提高其学习、记忆功能,这一作用可能是通过抑制NLRP3炎性小体通路相关蛋白的表达,进而减少IL-18、IL-1β等炎性因子的分泌实现。

Nod样受体蛋白3炎症小体与动脉粥样硬化关系的研究现状与进展

动脉粥样硬化能导致多种威胁人类健康的严重心血管疾病。除高血脂等经典危险因素外,炎症免疫因素作为新的危险因素已得到研究者的共识。Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体是机体固有免疫系统的一员,能够活化Caspase-1进而产生并释放成熟的促炎因子白细胞介素1β和白细胞介素18,参与体内非感染性炎症反应。研究证实NLRP3炎症小体活性与动脉粥样硬化的病变显著相关,并发现了多条NLRP3炎症小体激活通道。本文拟对NLRP3炎症小体与动脉粥样硬化形成之间关系的研究进展作一综述,并对具有潜力的药物靶点进行阐述。

NOD样受体蛋白3炎症小体在老年2型糖尿病微血管病变患者中的表达

目的探讨NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体在老年2型糖尿病(T2DM)微血管病变患者中的表达情况。方法 120例老年T2DM患者根据是否存在微血管病变分为观察组(74例,有微血管病变)和对照组(46例,无微血管病变),比较两组FBG、餐后血糖、TC、TG、HDL-C、LDL-C、糖化血红蛋白、肌酐、尿酸等生化指标及NLRP3炎症小体、白细胞介素(IL)-1β水平。结果两组餐后血糖、TC、TG、HDL-C、LDL-C比较,差异无统计学意义(P>0.05),但观察组FBG、糖化血红蛋白、肌酐、尿酸均高于对照组(P<0.05),且NLRP3炎症小体及IL-1β水平均高于对照组(P<0.05)。结论 NLRP3炎症小体及其下游炎性因子IL-1β或参与老年2型糖尿病微血管病变。

炎症小体Nod样受体蛋白3及胱天蛋白酶募集域蛋白8基因多态性与急性冠脉综合征的相关性

目的 探讨Nod样受体蛋白3（NLRP3）rs10754558位点C〉G和胱天蛋白酶募集域蛋白8（CARD8）rs2043211位点A〉T多态性与急性冠脉综合征（ACS）发病的关系。方法 入选450例ACS患者和380例对照组人群,使用ABI Snapshot方法分析NLRP3rs10754558位点和CARD8rs2043211位点多态性;冠状动脉造影后以Gensini评分评价冠脉狭窄程度;Elisa测定血清白细胞介素-1β（IL-1β）浓度。结果 NLRP3rs10754558位点对照组和ACS组基因型频率比较差异有统计学意义（χ~2=7.64,P=0.022）,NLRP3rs10754558位点G等位基因与ACS发病相关（AOR=1.334,95%CI=1.085~1.642,P=0.006）。而CARD8rs2043211位点两组间基因型频率比较差异无统计学意义（χ~2=1.08,P=0.582）,且与ACS发病无明显关系（AOR=1.168,95%CI=0.942~1.449,P=0.156）。ACS患者NLRP3rs10754558位点GG基因型Gensini评分高于CC基因型（74.07±2.13 vs.42.91±1.80,P〈0.001）;IL-1β质量浓度GG基因型显著高于CC基因型[（3.21±2.68）pg/mL vs.（1.37±1.36）pg/mL,P〈0.001]。结论NLRP3rs10754558位点C〉G基因多态性与中国汉族人群ACS发病及冠状动脉狭窄程度有关;G等位基因是ACS发病的危险等位基因,其作用与IL-1β浓度升高有关。