中华鳖诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因的表达分析

一氧化氮(NO)参与生物体内多种重要的生理病理活动,可增强机体的免疫功能,而诱导型一氧化氮合酶(iNOS)是一氧化氮合成过程中的关键限速酶。为了探明iNOS在中华鳖(Pelodiscus sinensis)先天免疫中的作用,研究了iNOS基因在中华鳖组织的分布及外源刺激物对其基因和蛋白表达的影响。荧光定量PCR结果显示,iNOS基因在中华鳖的心脏、肝脏、肾脏、脾脏、肌肉、小肠和大肠中均有表达,其中在大肠中表达量最高,其次是小肠、肾脏和脾脏。在受脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激后,肝、脾、肾、肌肉和小肠iNOS mRNA的表达显著升高。免疫组化实验结果显示LPS刺激后12 h、24 h iNOS蛋白在小肠、脾脏表达水平显著高于生理盐水对照组。研究结果表明iNOS可能参与了中华鳖的机体免疫反应。

活脑康对急性脑梗死大鼠血浆一氧化氮合酶(NOS)和一氧化氮(NO)的影响

目的 :观察活脑康对急性脑梗死大鼠血浆一氧化氮合酶 (NOS)活力和一氧化氮 (NO)含量的影响 ,探讨其治疗作用机制。方法 :应用线栓法制备大鼠急性脑梗死模型 ,给予中药活脑康灌胃 10d后 ,测定血浆中NO含量和NOS的活力。结果 :中药治疗组血浆NO含量和NOS活力明显下降 ,与模型组相比差异显著 (P <0 .0 1)。结论 :中药活脑康可降低急性脑梗死大鼠血浆NO含量和NOS的活力 ,抑制缺血性脑损伤。

蒙族高血压患者内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因多态性研究

目的旨在探讨一氧化氮合酶(eNOS)基因(G894T、T786C)多态性与中国蒙古族高血压患者的相关性。方法采用聚合酶链反应和限制性酶切的片段长度多态分析方法检测蒙族高血压患者100例和健康人50例的一氧化氮合酶(eNOS)基因(G894T、T786C)多态性。结果一氧化氮合酶基因T894G(GT、TT)、T786C(CT、CC)基因型及T、C等位基因频率在高血压组显著高于对照组(P <0．05)。同时具有eNOS894TT、786CC和894TG、786TC基因型者高血压组比对照组多,差异有显著性(P<0．05)。结论一氧化氮合酶基因T894G、T786C基因多态性与蒙族高血压相关,但尚需在更大的人群中进一步验证。

低氧训练对大鼠骨骼肌一氧化氮合酶(NOS)系统的影响

目的:探讨不同低氧训练模式对机体骨骼肌一氧化氮合酶(NOS)系统影响的机制。方法:选用6周龄SD雄性大鼠120只,经3周适应性训练和力竭实验筛选出90只,随机分成9组:常氧安静对照组、持续低氧安静组、间歇低氧安静组、低住低练组、高住高练组、高住低练组、低住高练组、高住高练后复氧训练组和高住低练后复氧训练组。采用常压低氧仓以13.6%的氧浓度(相当于海拔3500m的氧浓度)进行低氧训练,根据血乳酸-速度曲线确定大鼠常氧训练的强度为35m/min,低氧训练的强度为30m/min。低氧训练持续时间为6周,每周训练5天。在第4周末进行运动能力测试,第5周末进行力竭测试,在第6周末的最后一次运动后休息48h后处死、取材。采用实时荧光定量PCR、免疫组化、Westernblot等技术测试大鼠骨骼肌一氧化氮合酶(NOS)系统变化,以进一步探讨低氧训练对骨骼肌一氧化氮合酶(NOS)系统的适应机制。结果:高住高练组和常氧安静对照组相比,骨骼肌nNOSmRNA表达升高234%,有非常显著性差异(P<0.01);高住高练组与低住低练组相比,骨骼肌nNOSmRNA表达有非常显著性升高(P<0.01);高住高练后复氧训练1周,大鼠骨骼肌nNOS mRNA表达有非常显著性降低(P<0.01),回到常氧安静对照组水平;高住高练组、高住低练组及低住高练组骨骼肌iNOS mRNA表达分别升高92%、79%和125%,都有显著性差异(P<0.05);高住高练和高住低练后复氧训练1周,大鼠骨骼肌iNOS mRNA表达都有显著性降低(P<0.05),基本回到常氧安静对照组水平甚至还略低。与低住低练组相比,高住高练组骨骼肌eNOS mRNA表达有显著性升高(P<0.05);高住高练后复氧训练1周,大鼠骨骼肌eNOS mRNA有非常显著性下降(P<0.01)。结论:三种低氧训练方式都有助于大鼠骨骼肌毛细血管舒张,但作用机制不同,高住低练主要通过iNOS系统来使血管舒张,而低住高练却是通过HO-1系统来达到血管舒张的目的,高住高练组两种方式都有,因此,其血管舒张的效果也是三种方式中最好的,但复氧训练后此功能迅速降低。各低氧训练组eNOS mRNA水平表达变化不大。

大鼠扣带皮质一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的分布和脑缺血后的变化

采用NADPH－d组织化学方法，观察了NOS阳性神经元在大鼠脑扣带皮质前部24区、32区、25区和后部23区、29区的分布，并夹闭双侧颈总动脉，造成脑缺血2h后，再观察各区NOS阳性神经元的变化。结果为扣带皮质前、后部的5个区均有NOS阳性神经元。其前部的24区NOS阳性神经元较多，后部的23区和29区次之，前部的32区和25区较少。夹闭双侧颈总动脉2h后，再观察的结果为扣带皮质前、后部NOS阳性神经元数量均明显增加（P＜0．01）。

15-HETE对肺动脉内皮细胞一氧化氮合酶苏氨酸495位点(eNOS Thr495)磷酸化的影响

目的:探讨15-羟化二十烷四烯酸(15-HETE)对肺动脉内皮细胞(pu lm anory artery endothelialcells,PAECs)一氧化氮合酶(endothelia n itric oxide synthase,eNOS)活性的影响。方法:通过测定大鼠离体肺动脉环张力,比较去血管内皮、eNOS抑制剂L-NAME对15-HETE收缩肺动脉的影响;通过免疫沉淀和免疫印迹方法测定牛PAECs经2×10-6mol/L 15-HETE作用后,eNOS Thr 495磷酸化情况;用免疫印迹方法测定15-HETE对牛PAECs eNOS总蛋白表达的影响;用G re iss法检测15-HETE及15-脂氧酶(15-LO)抑制剂CDC和NDGA对牛肺动脉内皮细胞一氧化氮(NO)产量的影响。结果:(1)除去肺动脉内皮后,15-HETE收缩血管作用明显增强(P<0.01)。(2)抑制剂L-NAME 10-4mol/L可使15-HETE收缩肺动脉的作用明显增强(P<0.05)。(3)牛PAECs经2×10-6mol/L 15-HETE作用后,eNOS Thr 495位点磷酸化水平增强(P<0.01)。(4)10-6mol/L 15-HETE可抑制亚硝酸盐(NO2-/NO3-)的产生(P<0.05),抑制内源性15-HETE可明显增加NO2-/NO3-的产量,和对照组相比10-5mol/L CDC组P<0.05,10-4mol/L NDGA组P<0.01。结论:肺动脉内皮细胞eNOS/NO通路参与抑制15-HETE收缩大鼠肺动脉,15-HETE抑制肺动脉内皮细胞eNOS活性,使NO产量(NO2-/NO3-)下降。

帕金森病大鼠模型神经元型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的实验研究

目的 观察研究帕金森病 (PD)大鼠模型纹状体神经元型一氧化氮合酶 (n NOS)阳性神经元 ,探讨一氧化氮 (NO)在 PD发病机制中所起作用。方法 应用立体定向技术建立 6 - OHDA毁损的大鼠 PD模型 ,通过多巴胺受体激动剂阿扑吗啡 (APO)测试大鼠旋转行为 ,免疫组化方法观察黑质酪氨酸羟化酶 (TH )阳性神经元和纹状体 n NOS阳性神经元的变化。结果 大鼠 6 - OHDA损毁侧黑质 TH阳性神经元数目较对侧明显减少 ,双侧纹状体 n NOS阳性神经元数目无显著差异。结论 6 - OHDA对 TH阳性神经元有损伤作用 ,而 NOS阳性神经元对其具有抵抗作用。 NO可能参与了

兔脑一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的形态、结构和分布

应用M ADPH-d酶组织化学技术,对兔脑一氧化氮合酶(NO S)阳性神经元的形态、结构和分布进行了研究。结果显示:①NO S阳性神经元呈蓝色,细胞核不着色,突起染色很清晰;神经元胞体大多呈多角形、梭形,还有一些呈圆形或卵圆形等。②NO S阳性神经元几乎分布于家兔的各个脑区,包括大脑皮质、小脑、丘脑下部、中脑和脑桥。小脑分布最集中,而延髓分布较少。以上结果表明,NO S阳性神经元及其催化产生的一氧化氮(NO)与中枢神经系统的诸多功能有关。

诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因表达的调控

一氧化氮（ＮＯ）自由基有多方面的生物学功能。随着研究的深入，发现ＮＯ能与超氧阴离子（Ｏ－２·）反应生成激发态亚硝酸（ＯＮＯＯＨ＊），它与靶分子能产生羟自由基（·ＯＨ）和二氧化氮（ＮＯ２）样反应，在体内原先认为的一些ＮＯ效应，现在知道主要是由于ＯＮＯＯ...

铅对大鼠齿状回神经元型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的影响

目的 通过研究铅对大鼠齿状回nNOS阳性神经元的影响 ,分析铅对学习记忆影响的机制。方法 Wistar大鼠采用饮水加 2 0 0 0 μg/ml醋酸铅 (PbAc)方法染毒 3个月后 ,用Y迷宫测试大鼠神经行为的改变 ;用原子吸收分光光度法测定血液中铅的含量 ,用免疫组化法检测齿状回中nNOS的阳性神经元数目。结果 染铅组大鼠学习记忆能力比对照组明显下降 ;染铅组大鼠血液铅含量较对照组的明显增高 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;染铅组大鼠齿状回nNOS阳性神经元数目比对照组明显减少 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。

大鼠隔区向缰核的一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的投射

刺激隔区产生的镇痛作用是经缰核而实现的。为了提供依据以解释其机制，采用辣根过氧化物酶（HRP）法与还原型辅酶Ⅱ黄递酶（NADPH-d）相结合方法，对大鼠隔区向缰核的NOS阳性神经元的投射进行了研究。结果表明，缰外侧核接受来自斜角带核垂直支（VDB）腹侧部、斜角带核水平支（HDB）及VDB背侧部的NOS阳性神经元的投射；缰内侧核接受少量来自VDB腹侧部NOS阳性神经元的投射。这种隔区与缰核之间的NOS阳性神经元联系可能是其具有针刺镇痛作用的重要形态学基础之一。

一氧化氮合酶（NOS）与心血管疾病

在人体内，一氧化氮合酶（NO synthetase，NOS）催化左旋精氨酸（L—Arg）生成一氧化氮（NO）。这一生化过程，称为左旋精氨酸、一氧化氮通路（L—arginine—NO Pathway）。NOS分为两型、三种，两型即原生型（也称结构型）NOS（constitutive NOS，cNOS）和诱生型NOS（inducible NOS，iNOS），

扬子鳄颈髓一氧化氮合酶(NOS)和乙酰胆碱酯酶(AChE)阳性神经元的分布

本实验分别应用还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸脱氢酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）和乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）方法，对扬子鳄颈髓ＮＯＳ和ＡＣｈＥ阳性神经元的分布进行了研究。结果表明：颈髓前角、中央灰质均含有ＮＯＳ和ＡＣｈＥ阳性神经元，颈髓后角有较为丰富的ＮＯＳ和ＡＣｈＥ阳性纤维和终末以及显色淡的ＮＯＳ阳性神经元。

一氧化氮合酶(NOS)在喉鳞癌中的表达及意义

目的：检测喉鳞状细胞癌组织中一氧化氮合酶（nitricoxidesynthase，NOS）的表达，并分析其表达与喉鳞癌病理特性的关系。方法：应用免疫组织化学技术对42例喉鳞癌，15例喉乳头状瘤，5例声带息肉组织中的iNOS，eNOS表达情况进行对比。结果：喉鳞癌中iNOS的阳性表达率为83．3％（35／42），喉乳头状瘤阳性表达率为40．0％（6／15），二者比较有显著性差异（x2＝9．47，P＜0．05）；eNOS在喉鳞癌组阳性表达为52．4％（22／42），喉乳头状瘤组为6．7％（1／15），二者比较有显著性差异（x2＝9．59，P＜0．05）；iNOS和eNOS的表达与喉鳞癌的临床分期无显著相关性（P＞0．05）。iNOS在低分化癌表达率为86．7％（13／15），在高分化癌为75．0％（12／16），但iNOS强阳性表达在高分化型鳞癌中为12.6％（2／16），在低分化鳞癌中为53．3％（8／15），其差异显著；eNOS在低分化和高分化癌中的表达率分别为73．3％（11／15）和31．3％（5／16），其差异均有显著性（P＜0．05）。结论：NOS在喉鳞癌有较高的表达，可能为肿瘤细胞间的异常介质信号，与喉癌的发生和分化有关，肿瘤组织内有新生血管形成，其血流由一氧化氮（nitricoxide，ON）调节，明确其作用机理，将可能为喉癌的生物治疗提供理论依据。

四逆汤对失血性休克家兔一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的影响

目的:探讨中药四逆汤对失血性休克家兔一氧化氮的影响。方法:采用动物分组对照实验,测量不同状态下动物血浆一氧化氮和一氧化氮合酶(NOS)的变化。结果:与休克前比较,休克组的家兔血浆一氧化氮水平各时段均明显提高(P<0.01),而治疗组仅在治疗后30min家兔一氧化氮及NOS水平明显提高(P<0.01),其他时段与休克前比较,未见显著差异(P<0.01),且休克后1h、4h、8h休克组一氧化氮水平显著高于治疗组(P<0.01)。经药物治疗的失血性休克家兔血浆一氧化氮水平明显降低。

一氧化氮与一氧化氮合酶(NO,NOS)在胎盘和脐带中的存在及其与妊娠的关系

本文概述了近年来有关一氧化氮（ＮＯ）及其合成酶（ＮＯｓｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）在子宫、胎盘、脐带内的存在及与妊娠生理、病理关系的研究进展。用ＮＡＤＰＨｄ酶组化法和免疫组化法、分子生物学技术等方法发现，正常子宫内膜、肌层、血管、神经束、脐动脉、脐静脉、胎盘绒毛血管及合体滋养层细胞均可见ＮＯＳ的表达。认为这些组织内ＮＯＳ产生的ＮＯ对于保持妊娠期子宫静息状态、降低母体血管及胎盘循环的阻力、维持母体正常妊娠状态及胎儿生长发育有重要作用。ＮＯ的产物异常可导致先兆子痫、胎儿宫内生长迟缓等并发症的发生。对子宫、胎盘、脐带内ＮＯ、ＮＯＳ与妊娠关系的研究，将为生育控制和妊娠疾病的研究和治疗提供新的思路和手段。

脑干及下丘脑内一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元向海马的投射

采用还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸脱氢酶（NADPH－d）与辣根过氧化物酶（HRP）相结合方法，追踪脑干及下丘脑内NOS阳性神经元向海马的投射。结果表明：中缝背核有较多的NOS阳性神经元投射到背海马；中缝背核、乳头体上核及蓝斑有NOS阳性神经元投射到腹海马。这些核团向海马发出投射纤维的NOS阳性神经元占其总投射量的1／3左右。

淋巴管和瓣膜的动态观察及其与一氧化氮合酶(NOS)关系的实验研究

目的研究大鼠肠系膜淋巴管运动及其瓣膜的动态特点；探讨ＮＯ对淋巴管的作用及ＮＯ在淋巴管及其支配神经的分布。方法用倒置显微镜和图像处理系统对肠系膜及其瓣膜进行动态观察和检测，并取肠系膜淋巴管、胸中段脊髓、延髓、脊神经节和腹腔神经节行ＮＡＤＰＳ－ｄ组化染色。ＮＡＤＰＨ－ｄ染色的肠乐膜淋巴管作电镜观察。结果淋巴管收缩频率５～１２次，平均为８．７±０．３次。淋巴管运动时瓣膜下游的淋巴管收缩幅度较瓣膜上游的淋巴管收缩幅度大 ２７．６％。施加 Ｌ－Ａｒｇ后淋巴管口径由２.４９±１. ２９象素增加到 ３． ２２± １.１８象素，淋巴管舒张 ３６．１％。淋巴管管径与两瓣膜间距离的相关关系ｒ＝０．２９７，呈低度相关。瓣膜的关闭和开放与淋巴管的收缩和舒张无明显规律，淋巴液的流动不因淋巴管的收缩而单方向流动。肠系膜淋巴管和瓣膜的内皮细胞以及其周围和附壁的神经纤维皆呈ＮＯＳ阳性反应。迷走神经背核、胸中部脊髓侧角、腹腔神经节和脊神经节神经元的胞浆及突起皆为ＮＯＳ阳性反应。电镜下淋巴管内皮细胞胞浆内ＮＯＳ反应产物，为致密颗粒构成的大小和形状不一的块状结构。结论实验结果提示瓣膜的开放和关闭除了机械因素外可能有其他调节因素。ＮＯ可舒张淋巴管，ＮＯ既是?

扬子鳄食管颈段一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元及神经纤维的分布

本实验采用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶 (NADPH- d)方法 ,观察扬子鳄食管颈段 NOS阳性神经元和神经纤维的分布。结果 :食管颈段的粘膜下层和肌层分布着较丰富的 NOS阳性神经纤维 ,一些神经纤维交织成丛状 ,其间散在分布着 NOS阳性神经元胞体。粘膜下一些

大鼠下丘脑一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的分布

观察大鼠下丘脑各核团NOS阳性神经元的分布。采用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶（NADPH－d）法，结果显示，大量NOS阳性神经元见于下丘脑外侧区、视上核（SO）和室旁核（Pa）；出现较多NOS阳性神经元的部位是视前大细胞核，见到少量NOS阳性神经元的部位是室周核、视前内侧区、视前外侧区和下丘脑前区。结论：NOS阳性神经元分布于下丘脑的许多核团。