唾液腺腺泡细胞癌中NR4A3基因重排及NOR-1蛋白表达分析

目的:探讨NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达在唾液腺腺泡细胞癌中的表达及在鉴别诊断中的价值。方法:收集2020年5月—2024年1月于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科诊断的唾液腺癌119例,包括腺泡细胞癌(acinic cell carcinoma,AciCC)63例,黏液表皮样癌(mucoepidermoid carcinoma,MEC)31例,分泌性癌(secretory carcinoma,SC)25例。分别使用荧光原位杂交和免疫组织化学染色检测NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达情况,采用SPSS 18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:AciCC主要发生于大唾液腺。与MEC和SC相比,AciCC好发于女性(P=0.006)。NR4A3基因重排在AciCC、MEC和SC中的阳性率分别为76.2%(48/63)、0%(0/10)和0%(0/7),NOR-1蛋白表达在AciCC、MEC和SC中的阳性率分别为92.1%(58/63)、9.7%(3/31)和0%(0/25),差异具有统计学意义(P<0.001)。单独使用NR4A3基因重排诊断AciCC时,灵敏度和特异度分别为76.2%和100%。单独使用NOR-1蛋白表达诊断AciCC时,灵敏度和特异度分别为92.1%和94.6%。联合使用NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达诊断AciCC时,灵敏度和特异度分别为96.8%和94.6%,曲线下面积为0.896,诊断价值最优。结论:AciCC好发于女性,主要发病部位为大唾液腺。NR4A3基因重排仅见于AciCC中,在诊断工作中具有100%的特异性,但敏感性较低。NOR-1蛋白表达检测具有很好的灵敏度和特异度,可作为鉴别AciCC、MEC和SC的初筛和替代方法。联合使用NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达检测具有最优的诊断价值。

NR4A3/NOR1对涎腺腺泡细胞癌诊断价值的Meta分析

目的:分析和评价NR4A3/NOR1对涎腺腺泡细胞癌(AciCC)的诊断价值。方法:对PubMed和Cochrane图书馆、EMbase数据库、中国知网、维普中文科技期刊数据库(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM)及万方数据库进行了全面的文献检索(检索时间为建库至2024年2月1日),选择符合条件的纳入研究。纳入文献的质量评估由两名评审员使用Review Manager 5.3(Cochrane协作组)独立进行。采用Stata/SE15.1和Meta-Disc1.4软件进行Meta分析。计算合并敏感度、合并特异度、合并阳性似然比、合并阴性似然比和合并诊断比值比(DOR);绘制受试者操作特征汇总曲线(SROC),并计算曲线下面积(AUC)。此外,还进行了Meta回归分析,以确定异质性的来源。采用Deeks漏斗图检验评估发表偏倚。采用双变量混合效应模型对纳入的文献进行敏感性分析。通过似然比矩阵图及验前概率、验后概率评价其临床适用性。结果:共纳入AciCC患者488例,对照1220例。Meta分析结果显示,NR4A3/NOR1诊断AciCC的合并敏感度、特异度和DOR分别为0.95(95%CI 0.92~0.97),0.99(95%CI 0.98~1.00)和7.90(95%CI 6.65~9.15),SROC的AUC为0.99。在敏感度(I 2=42.26%)方面观测到轻微的异质性,亚组分析和Meta回归显示异质性与标本来源、病例数的多少有关。Fagan验前概率为29%,+LR=134,阳性验后概率为98%,-LR=0.05,阴性验后概率为2%。结论:NR4A3/NOR1是诊断AciCC的潜在生物标志物,具有高敏感度和特异度,但应用中还需要参考其他临床指标。

Nr4a3对乳腺癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

Nr4a3(nuclear receptor subfamily 4 group a member 3)属于核受体亚家族成员,参与细胞增殖、细胞迁移和细胞凋亡的调控。据报道,Nr4a3在多种肿瘤组织中表达下调。为探索Nr4a3在乳腺癌发生、发展中的作用,本文利用公共数据库分析NR4A3在乳腺癌组织中的表达以及与乳腺癌患者总生存率的关系。在4T1细胞系上敲除Nr4a3基因,通过流式细胞术等检测细胞凋亡、细胞周期;CCK-8与集落形成实验检测细胞活力;细胞划痕与侵袭检测细胞迁移与侵袭能力;通过q-PCR检测细胞周期和凋亡基因的表达水平。结果表明:Nr4a3在乳腺癌组织中表达水平显著下调;与乳腺癌患者的总生存率呈正相关关系;Nr4a3敲除后,细胞增殖增强,细胞凋亡减少及细胞迁移能力和侵袭能力增强。本研究揭示了Nr4a3在乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的潜在作用,可能成为乳腺癌潜在的治疗靶点。

NR4A3和Pan-TRK免疫组化染色在涎腺腺泡细胞癌与分泌性癌鉴别诊断中的应用

目的:探讨NR4A3、Pan-TRK免疫组化染色在涎腺腺泡细胞癌(acinic cell carcinoma,AciCC)、分泌性癌(secretory carcinoma of salivary gland,SCSG)鉴别诊断中的应用价值。方法:收集2010年03月至2021年01月我院病理科存档的22例AciCC、13例SCSG及132例其它涎腺肿瘤,分别进行NR4A3、Pan-TRK免疫组化染色并分析表达情况。结果:NR4A3免疫组化染色显示AciCC(21/22)阳性,其中17例局灶/弥漫强阳,4例中等阳性,1例阴性。13例SCSG及其它132例涎腺肿瘤均(-)。Pan-TRK免疫组化显示13例SCSG均(+)、22例AciCC均(-)。NR4A3在AciCC中敏感性为95.5%,特异性为100%。结论:NR4A3是AciCC一种新标记物,特别与SCSG的鉴别诊断中,联合使用Pan-TRK,可进一步提高诊断的特异性。

益胃饮含药血清对胃癌细胞MFC增殖凋亡及NR4A3/HGF表达的影响

目的：探讨不同浓度益胃饮对体外培养的胃癌细胞MFC的增殖、凋亡及NR4A3蛋白表达的影响。方法：MFC细胞经不同浓度益胃饮含药血清处理后,采用MTT法检测药物对肿瘤细胞的抑制作用,显微镜观察细胞形态学改变;采用流式细胞仪及Annexin V/PI染色的方法检测益胃饮含药血清对MFC胃癌细胞周期及凋亡的影响,并以RT-PCR芯片技术（Mouse TumorM etastasis PCR Array）分析该方对胃癌细胞MFC肿瘤相关基因表达的影响;结果：益胃饮含药血清浓度在4%~12%时,对肿瘤细胞的生长有抑制作用,且呈时间剂量依赖性。流式细胞仪分析结果显示,细胞凋亡百分率随着药物浓度的增加和作用时间的延长而增加,而RT-PCR芯片技术分析结果显示NR4A3表达则随之增强而HGF显著下调。结论：益胃饮含药血清对人胃癌细胞MFC增殖有抑制作用,并能诱导细胞凋亡,其作用机制可能是益胃饮通过促进Nr4 a3表达,下调HGF而达到的。

肺癌中NR4A3和CD133表达的临床意义及相关性

目的探讨NR4A3和CD133蛋白在非小细胞肺癌中的表达,并结合临床病理特征来研究NR4A3的临床意义及与CD133相关性。方法应用免疫组织化学方法检测84例非小细胞肺癌组织及癌旁正常肺组织中NR4A3和CD133的表达。结果 NR4A3在癌旁正常肺组织阳性表达率为90.5%,肺癌组织为19.0%(P<0.05)。NR4A3的表达与肿瘤分化程度及吸烟有关(P<0.05),与患者的性别、年龄、病理类型,淋巴结转移和分期均无关(P>0.05)。NR4A3和CD133在非小细胞肺癌中的表达呈负相关(γ=-0.219,P<0.05)。结论 NR4A3低表达与非小细胞肺癌的发生、发展密切相关,可能参与调节肿瘤干细胞表面抗原CD133表达。

miR-20a通过靶向NR4A3促进前列腺癌细胞增殖

前列腺癌是男性患者中常见的恶性肿瘤,探讨前列腺癌的发病机制和寻找合适的治疗靶标具有重要的临床意义。来源于类固醇核激素受体超家族NR4A3在多种肿瘤的恶性进展中发挥重要作用,但其在前列腺癌中的作用尚未阐明。本课题拟以前列腺癌细胞为研究对象,揭示NR4A3在前列腺癌中的作用;在此基础上,寻找靶向NR4A3的miRNA,为前列腺癌的诊断和治疗提供新靶点。GEPIA网站预测显示,NR4A3在前列腺癌组织中呈低表达。qRT-PCR检测证实,NR4A3在前列腺癌细胞中也呈低表达(P<0.01);CCK8和克隆形成的结果显示,过表达NR4A3可使前列腺癌细胞活力显著下降(P<0.01),集落数量和大小显著减少。生物信息学网站预测,NR4A3可能是miR-20a靶基因。通过qRT-PCR检测发现,miR-20a在前列腺癌细胞中呈高表达(P<0.01),双荧光素酶报告基因结果证实,miR-20a能够与NR4A3的3’-UTR的2个位点靶向结合(P<0.05,P<0.001),且Western印迹结果显示,miR-20a可抑制NR4A3的表达;进一步CCK8检测发现,随着时间的延长miR-20a inhibitor能够使前列腺癌细胞活力显著下降(P<0.05),miR-20a mimic则得到与之相反的结果(P<0.05,P<0.01);而当共转染miR-20a mimic和pcDNA3.1-NR4A3重组质粒时,通过CCK8和克隆形成实验发现,上调NR4A3的表达可部分抵消miR-20a mimic对PC3细胞活力(P<0.05),集落数量和大小的促进作用。综上所述,miR-20a通过靶向NR4A3促进前列腺癌细胞增殖。

右美托咪啶介导NR4A3/Foxp3信号通路改善老年大鼠术后认知功能障碍

目的探究右美托咪啶对老年大鼠术后认知功能障碍的改善作用及可能机制。方法24只SD大鼠随机分为假手术组、术后认知障碍(POCD)模型组以及右美托咪啶组,每组8只,采用七氟烷麻醉和剖腹探查术建立POCD动物模型。Zea-Longa评分法评估各组大鼠术后24h时认知障碍情况;水迷宫检测大鼠学习与记忆能力;HE、TUNEL染色检测大鼠海马损伤情况;流式细胞术检测Tregs/Th17分布;ELISA方法检测大鼠海马组织转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-17A、IL-23和IL-35。实时定量PCR(RT-qPCR)检测NR4A3以及Foxp3mRNA表达;Westernblot检测大鼠海马组织Foxp3与NR4A3的蛋白表达水平。结果右美托咪啶可以改善大鼠术后认知障碍,减轻脑组织损伤,降低神经元细胞凋亡率;右美托咪啶组CD4^(+)IL-17A^(+)Th17比例低于模型组、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg比例高于模型组;右美托咪啶显著逆转了模型组大鼠海马组织IL-17A、IL-23、TGF-β和IL-35水平的变化,同时提升NR4A3与Foxp3mRNA和蛋白表达。结论右美托咪啶通过NR4A3/Foxp3途径调节Tregs/Th17免疫失衡改善老年大鼠术后认知障碍。

淫羊藿苷改善产前应激子鼠抑郁行为机制

为研究淫羊藿苷(icariin,ICA)的抗抑郁作用,采用束缚应激对孕鼠进行刺激,后将雄性子鼠分为CON组、产前应激组(PS)、生理盐水组、ICA-L(40 mg/kg)和ICA-H组(80 mg/kg)。采用糖水偏好实验和强迫游泳实验检测行为学。Western blotting检测海马NR4a2和NR4a3蛋白表达水平。结果显示,PS使子鼠的糖水偏好度下降(P<0.01),不动时间延长(P<0.05),表现出明显的抑郁行为。且海马NR4a2和NR4a3蛋白表达水平降低(P<0.05)。在经过ICA的慢性治疗后,子鼠的抑郁行为得到缓解,主要表现在糖水偏好度增加(ICA-L:P<0.05;ICA-H:P<0.01)和不动时间缩短(ICA-L:P<0.05;ICA-H:P<0.05)以及海马NR4a2(ICA-L:P<0.05)和NR4a3(ICA-H:P<0.05)的蛋白表达水平升高。以上结果提示ICA可通过调节海马NR4a2和NR4a3表达而发挥抗抑郁作用。

涎腺腺泡细胞癌的临床病理学特征及分子遗传学分析

目的 探讨涎腺腺泡细胞癌(AciCC)的临床病理学及分子遗传学特征。方法 收集以往诊断的36例AciCC及3例涎腺分泌性癌(SCSG),根据第四版《WHO(2017)头颈肿瘤分类》重新阅片筛选(25例AciCC,14例SCSG),分析形态学特点,并行免疫组化及FISH检测。结果 25例AciCC发病年龄24~80岁,80%发生于腮腺,肿瘤最大径1.5~6.0 cm。镜下瘤细胞呈实性、微囊状、乳头状等混合性生长,浆液性腺泡细胞及闰管样细胞为主,胞质内可见嗜碱性酶原颗粒,细胞异型性小。免疫组化AciCC示NR4A3(24/25)、Dog-1(23/25)均阳性;25例均未见Pan-TRK、S-100、Mammaglobin表达。其中24例AciCC的Ki-67<5%,FISH检测AciCC(13/25)具有NR4A3基因重排。结论 涎腺AciCC是一种低度恶性肿瘤,其组织学形态与SCSG存在交叉重叠,分子遗传学方面大部分病例具有NR4A3基因重排。