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大黄通过NRAV调节miR-509-3p/Rab5c轴抑制呼吸道合胞病毒的效果
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作者 王秀丽 陈美汐 +2 位作者 王艳玲 陈新辉 何素焕 《河北医药》 CAS 2024年第19期2949-2953,共5页
目的 通过体外实验评估大黄免煎颗粒对呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制效果,探究大黄对RSV感染过程中关键环节的影响和细胞内信号通路的调节等。方法 通过体外培养A549细胞,使用A549细胞设置空白对照组、感染对照组、-2 h组、0 h组、2 h组、... 目的 通过体外实验评估大黄免煎颗粒对呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制效果,探究大黄对RSV感染过程中关键环节的影响和细胞内信号通路的调节等。方法 通过体外培养A549细胞,使用A549细胞设置空白对照组、感染对照组、-2 h组、0 h组、2 h组、4 h组、6 h组、8 h组在感染RSV的不同时间点加入大黄高剂量溶液,使用定量聚合酶链反应检测细胞内病毒基因(RSV-N)的相对量的表达,使用病毒空斑实验法测定上清病毒滴度,感染RSV 72 h后使用cck8法测定细胞活性;使用A549细胞设置感染对照组、利巴韦林组、大黄高剂量组、大黄中剂量组、大黄低剂量组,感染24 h后使用Western blot检测不同处理组RSV携带的绿色荧光蛋白(RSV-GFP)、Rab相关蛋白(Rab5c)蛋白表达水平,qPCR检测不同处理组抗病毒反应的负调负因子(NRAV)、Rab5c、RSV-N基因的相对量的表达。结果 不同浓度大黄培养A549细胞72 h后存活率比较差异有统计学意义(P<0.01),与5μg/mL比较,500μg/mL差异有统计学意义(P<0.05),不同浓度利巴韦林培养A549细胞72 h后细胞存活率比较差异无统计学意义(F=1.89,P=0.17),选取25、50、100μg/mL分别作为大黄低剂量组、大黄中剂量组、大黄高剂量组,利巴韦林处理浓度为500μmol/L;-2 h组细胞存活率较2 h、4 h、6 h、8 h组升高(均P<0.05),-2 h组细胞病毒滴度、RSV-N基因较2 h、4 h、6 h、8 h组降低(均P<0.05),且-2 h组细胞存活率、病毒滴度及RSV-N基因与0 h组比较无差异(均P>0.05);大黄高剂量组、大黄中剂量组、大黄低剂量组较感染对照组细胞的NRAV、RSV-N、Rab5c基因降低(均P<0.05)。结论 大黄可能通过降低A549细胞的NRAV水平促进miR-509-3p对Rab5c mRNA的靶向降解,降低了Rab5c的表达减缓了细胞内囊泡转运,从而发挥抑制RSV增殖的能力。 展开更多
关键词 大黄 A549细胞 RSV Rab5c nrav miR-509-3p
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长非编码RNA NRAV在泛癌中的表达和功能研究
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作者 黄平平 李若冰 +4 位作者 胡维博 单亚男 许梦阳 周百灵 扈国栋 《德州学院学报》 2024年第2期1-8,共8页
LncRNA NRAV是近年来新发现的lncRNA分子,仅少数研究显示其表达水平与肺癌、胰腺导管腺癌的发展紧密相关,但NRAV在其它癌症中的表达情况和功能尚不清晰。通过生物信息学的方法分析NRAV在不同癌症中的差异表达情况及其与癌症患者生存期... LncRNA NRAV是近年来新发现的lncRNA分子,仅少数研究显示其表达水平与肺癌、胰腺导管腺癌的发展紧密相关,但NRAV在其它癌症中的表达情况和功能尚不清晰。通过生物信息学的方法分析NRAV在不同癌症中的差异表达情况及其与癌症患者生存期的关系,并以肝细胞癌(LIHC)作为重点研究对象,基于转录组数据筛选与NRAV共表达的mRNA并进行GO和KEGG功能富集分析,探究NRAV在LIHC中的调控机制与功能。结果显示,NRAV在7种癌症与癌旁组织中差异表达显著,其表达量与5种癌症患者的总生存期以及4种癌症患者的无病生存期显著相关。另外,筛选出的479个共表达靶基因主要富集在DNA修复、蛋白质结合、细胞周期等通路上。该文为进一步了解NRAV与泛癌尤其是肝细胞癌的发生发展关系提供初步依据。 展开更多
关键词 长非编码RNA nrav 泛癌 肝细胞癌 分子机制
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黄连素下调NRAV和PI3K/AKT通路减轻RSV感染致HEp-2细胞的损伤
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作者 崔玉娟 赵辉 +2 位作者 苏东霞 张莹 胡丹东 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期747-755,共9页
目的探讨长链非编码RNA NRAV(LncRNA NRAV)和PI3K/AKT通路在黄连素(berberine,BE)减轻RSV感染致HEp-2细胞损伤中的机制。方法将HEp-2细胞感染RSV,并用BE、PI3K激活剂740Y-P处理或过表达NRAV。qRT-PCR检测NRAV、RSV-F、NS2表达水平;CCK-... 目的探讨长链非编码RNA NRAV(LncRNA NRAV)和PI3K/AKT通路在黄连素(berberine,BE)减轻RSV感染致HEp-2细胞损伤中的机制。方法将HEp-2细胞感染RSV,并用BE、PI3K激活剂740Y-P处理或过表达NRAV。qRT-PCR检测NRAV、RSV-F、NS2表达水平;CCK-8实验检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞的凋亡率和线粒体膜电位;ATP检测试剂盒检测ATP水平;Western blot检测细胞PI3K、AKT、PINK1、Parkin、Beclin1、p62、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、BNIP3、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达;MitoSOX染色检测细胞线粒体ROS(mtROS);ELISA检测细胞IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α分泌水平。结果过表达NARV细胞凋亡率、RSV活性增加,敲低后结果相反;BE能显著抑制NRAV和PI3K/AKT通路(P<0.05),改善线粒体功能、诱导线粒体自噬,提高细胞的活性、降低凋亡率(P<0.05),并降低NLRP3炎性小体活化水平和IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平(P<0.05)。过表达NRAV或740Y-P处理可逆转BE对RSV感染HEp-2细胞的改善作用。结论BE能够减轻RSV感染所致HEp-2细胞损伤,其机制可能与BE下调NRAV和PI3K/AKT通路,诱导线粒体自噬,进而减轻线粒体损伤和炎症反应有关。 展开更多
关键词 黄连素 RSV LncRNA nrav PI3K/AKT通路 线粒体损伤 HEp-2细胞损伤
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Investigation of the feasibility of NRAV as a biomarker for hepatocellular carcinoma
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作者 JUN LIU WENLI LI +6 位作者 RUYUE LU JIAQING XU CHUNHUI JIANG JUNLIN DUAN LINGZHI ZHANG GUANFU WANG JIAXI CHEN 《Oncology Research》 SCIE 2024年第4期717-726,共10页
The long non-coding RNA,Negative Regulator of Antiviral Response(NRAV)has been identified as a participant in both respiratory virus replication and immune checkpoints,however,its involvement in pan-cancer immune regu... The long non-coding RNA,Negative Regulator of Antiviral Response(NRAV)has been identified as a participant in both respiratory virus replication and immune checkpoints,however,its involvement in pan-cancer immune regulation and prognosis,particularly those of hepatocellular carcinoma(HCC),remains unclear.To address this knowledge gap,we analyzed expression profiles obtained from The Cancer Genome Atlas(TCGA)database,comparing normal and malignant tumor tissues.We found that NRAV expression is significantly upregulated in tumor tissues compared to adjacent nontumor tissues.Kaplan-Meier(K-M)analysis revealed the prognostic power of NRAV,wherein overexpression was significantly linked to reduced overall survival in a diverse range of tumor patients.Furthermore,noteworthy associations were observed between NRAV,immune checkpoints,immune cell infiltration,genes related to autophagy,epithelial-mesenchymal transition(EMT),pyroptosis,tumor mutational burden(TMB),and microsatellite instability(MSI)across different cancer types,including HCC.Moreover,NRAV upregulation expression was associated with multiple pathological stages by clinical observations.Furthermore,our investigation revealed a substantial elevation in the expression of NRAV in both HCC tumor tissues and cells compared to normal tissues and cells.The inhibition of NRAV resulted in the inhibition of cell proliferation,migration,and invasion in HCC cells,while also influencing the expression of CD274(PD-L1)and CD44,along with various biomarkers associated with EMT,autophagy,and pyroptosis.The aforementioned results propose NRAV as a promising prognostic biomarker for HCC. 展开更多
关键词 nrav Hepatocellular carcinoma PROGNOSIS BIOMARKER Pan-cancer
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长链非编码RNA NRAV在肝癌组织和细胞中的表达及其对癌细胞糖酵解的影响
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作者 王田园 江伟 +2 位作者 肖雪莲 郭成 涂康生 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第22期4141-4146,共6页
目的:探究长链非编码RNA抗病毒反应的负调节剂(negative regulator of antiviral response,NRAV)在肝癌组织和细胞中的表达情况及其对肝癌细胞糖酵解和6磷酸果糖2激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphos... 目的:探究长链非编码RNA抗病毒反应的负调节剂(negative regulator of antiviral response,NRAV)在肝癌组织和细胞中的表达情况及其对肝癌细胞糖酵解和6磷酸果糖2激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3)表达的影响。方法:RT-qPCR检测NRAV和PFKFB3 mRNA表达。通过转染shRNA或过表达质粒下调或上调肝癌细胞中NRAV表达,通过检测葡萄糖摄取、乳酸生成和ATP水平评估肝癌细胞糖酵解能力。通过Western blotting检测PFKFB3蛋白水平。结果:NRAV在肝癌组织中表达显著高于癌旁组织。NRAV在肝癌细胞系(Hep3B、PLC/PRF/5、HCCLM3、SK-Hep-1和Huh7)中的表达均显著高于正常肝细胞系(MIHA)。干扰NRAV显著减少肝癌细胞葡萄糖摄取、乳酸生成和ATP水平,而过表达NRAV显著增强肝癌细胞糖酵解。肝癌组织中NRAV与PFKFB3 mRNA表达显著正相关,敲低NRAV显著降低肝癌细胞中PFKFB3表达,而过表达NRAV显著上调PFKFB3表达。结论:NRAV在肝癌组织和细胞中表达上调,其促进肝癌细胞糖酵解并增强PFKFB3表达,提示NRAV是一个潜在的抗肝癌治疗新靶标。 展开更多
关键词 肝癌 抗病毒反应的负调节剂(nrav) 糖酵解 治疗靶标
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黄连素对HSV-1病毒感染HEp-2细胞的活性影响及分子机制 被引量:3
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作者 崔玉娟 胡丹东 +1 位作者 杨颖丽 张继 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期387-393,共7页
目的探讨黄连素(berberine,BE)对HSV-1病毒感染HEp-2细胞活性影响及其相关分子机制。方法构建感染细胞模型,分为对照组、感染组、BE低浓度组(5μmol·L^(-1)-BE)、中浓度组(10μmol·L^(-1)-BE)和高浓度组(15μmol·L^(-1)-... 目的探讨黄连素(berberine,BE)对HSV-1病毒感染HEp-2细胞活性影响及其相关分子机制。方法构建感染细胞模型,分为对照组、感染组、BE低浓度组(5μmol·L^(-1)-BE)、中浓度组(10μmol·L^(-1)-BE)和高浓度组(15μmol·L^(-1)-BE),培养24 h。qRT-PCR测定HSV-1感染相关基因(gD、ICP-4、ICP-8、ICP-27)及LncRNA NRAV、miR-299-3p、RAB5C的mRNA表达水平;CCK-8法与流式细胞术分析检测细胞的活性与凋亡率;Western blot分析PI3K/AKT信号通路和JNK/p38 MAPK信号通路相关蛋白的表达水平。结果BE降低了gD、ICP-4、ICP-8、ICP-27的mRNA表达,提升了细胞活性,抑制了细胞凋亡,通过抑制LncRNA NRAV与RAB5C,促进miR-299-3p的表达,同时抑制了PI3K/AKT信号通路和JNK/p38 MAPK信号通路蛋白PI3K、AKT、JNK、p38的蛋白表达水平。结论BE能提升HSV-1感染后HEp-2细胞的活性,并抑制其凋亡,其机制可能与LncRNA NRAV、RAB5C靶向竞争结合miR-299-3p,抑制PI3K/AKT信号通路和JNK/p38 MAPK信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 黄连素 HSV-1 细胞生物学行为 LncRNA nrav RAB5C miR-299-3p PI3K/AKT信号通路 JNK/p38 MAPK信号通路
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