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X射线透视引导下不同方式建立兔椎间盘退变模型的结果对比
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作者 丁至立 黄杰 +3 位作者 蒋强 李土胜 刘江 丁宇 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第5期995-1002,共8页
背景:国内外学者认为新西兰大白兔腰椎解剖形态与人类腰椎更为相似,是理想的模型动物。在X射线引导下采用不同方式建立兔椎间盘退变模型目前尚缺乏系统性比较。目的:基于X射线引导采用针刺法、终板注射法以及改良终板注射法建立兔腰椎... 背景:国内外学者认为新西兰大白兔腰椎解剖形态与人类腰椎更为相似,是理想的模型动物。在X射线引导下采用不同方式建立兔椎间盘退变模型目前尚缺乏系统性比较。目的:基于X射线引导采用针刺法、终板注射法以及改良终板注射法建立兔腰椎间盘退变模型,比较3种方法造模的效果。方法:6月龄新西兰大白兔16只随机分为4组,分别为针刺组、终板注射组、改良终板注射组及空白对照组,针刺组对3个连续节段(L2/3、L3/4、L4/5)椎间盘进行针刺造模,终板注射组在3个连续节段终板单点注射50μL无水乙醇,改良终板注射组对3个连续节段椎间盘进行针刺并在相应节段终板4个方位点注射50μL无水乙醇,空白对照组不进行干预。术后2,4,8周进行X射线检查,测量椎间隙高度指数,然后取椎间盘组织进行解剖学观察、病理学检查。结果与结论:①解剖学观察显示,针刺组以纤维环破溃为主要表现,终板注射组主要以髓核退变为主要表现,改良终板注射组以全椎间盘结构紊乱为主要表现;②与空白对照组相比,针刺组术后2周椎间隙高度指数降低最明显,终板注射组术后2,4周椎间隙高度指数降低明显,改良终板注射组术后2,4,8周椎间隙高度指数均显著降低;③病理学检查显示,针刺组纤维环结构出现破损,内层纤维环向内凸入,终板注射组表现为终板裂隙、排列混乱及细胞核丢失,改良终板注射组表现为整体椎间盘结构紊乱,髓核失水皱缩,与破损的纤维环无明显边界。结果表明,针刺法、终板注射法及改良终板注射法均能建立兔椎间盘退变模型,改良终板注射法较单一方法可大幅加快并加重椎间盘退变,可有效缩短实验周期。 展开更多
关键词 组织工程 椎间盘退变 纤维环穿刺法 终板注射法 X射线 新西兰大白兔
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Production of Rabbit Polyclonal Antibody Using hAPOA1 Protein Expressed in Prokaryotic Cells
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作者 Zhiwei XU Jie ZHAO +2 位作者 Weizhong LIU Zhaoting LIU Qi WANG 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2017年第2期41-44,共4页
The open reading frame (ORF) of hAPOA1 was inserted into the prokaryotic expression vector pGEX-4T-1 to construct the recombinant plasmid pGEX- 4T-I-hAPOA1, which was then transformed into Escherichia coil strain BL... The open reading frame (ORF) of hAPOA1 was inserted into the prokaryotic expression vector pGEX-4T-1 to construct the recombinant plasmid pGEX- 4T-I-hAPOA1, which was then transformed into Escherichia coil strain BL21. The expression of target fusion protein was induced with isopropyl β-D-l-thiogalacto- pyranoside (IPTG). The purified fusion protein in inclusion bodies was used to immunize New Zealand white rabbits to prepare hAPOA1 antiserum and the antibody titer was detected with indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ID-EL1SA). ID-ELISA and Western Blot proved that rabbit polyclonal antibody with a high titer of 1 : 40 000 was produced, which may bring considerable economic benefits. 展开更多
关键词 HAPOA1 Prokaryotie expression new zealand white rabbits Fusion expression Polyelon~ antibody
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新西兰白兔BMP 15基因的真核表达载体构建、表达模式及其在卵巢组织的表达
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作者 陈孟娟 刘雨晴 +4 位作者 王智通 温佳乐 许会芬 于光晴 李明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期562-575,共14页
旨在获得新西兰白兔BMP 15基因序列及其组织表达规律,构建其真核表达载体,预测BMP15的生物学功能。本研究选择180日龄性成熟的健康新西兰白兔作为研究对象,采用RT-PCR技术扩增BMP 15基因CDS区序列,利用T4连接方法将目的片段连接至线性化... 旨在获得新西兰白兔BMP 15基因序列及其组织表达规律,构建其真核表达载体,预测BMP15的生物学功能。本研究选择180日龄性成熟的健康新西兰白兔作为研究对象,采用RT-PCR技术扩增BMP 15基因CDS区序列,利用T4连接方法将目的片段连接至线性化的Pmcherry-N1和pCMV-Myc空载体,构建真核表达载体,利用生物信息学分析其编码蛋白的性质及结构。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术与Western blotting技术检测pCMV-Myc-BMP 15过表达情况。接下来,使用qRT-PCR检测BMP 15基因在不同组织中的表达水平。激光共聚焦方法检测BMP 15基因的亚细胞定位。利用免疫荧光技术检测内源BMP15在新西兰白兔卵巢组织定位情况。结果表明:克隆得到新西兰白兔BMP 15基因CDS区序列长1182 bp,PCR及测序结果表明pCMV-Myc-BMP 15和Pmcherry-N1-BMP 15真核表达载体构建成功。生物信息学分析显示,BMP 15基因编码393个氨基酸;BMP15蛋白不稳定系数为55.32,等电点大小为9.69,是一种稳定的碱性蛋白质。BMP15蛋白共有26个磷酸化位点,15个糖基化位点,存在信号肽,不存在跨膜结构域。系统进化树表明,新西兰白兔与猪亲缘关系最近,与鸡的亲缘关系最远。二级结构和三级结构分析结果表明,BMP15蛋白主要由α-螺旋(38.68%)、无规则卷曲(37.4%)、延伸链(15.52%)、β-转角(8.40%)组成,为混合型蛋白。蛋白互作关系预测发现,BMP15蛋白与FSHR、FIGLA、BMPR1B、AMHR2、NOBOX等卵巢生长发育的相关蛋白之间存在相互作用。不同组织表达分析显示,BMP 15基因在卵巢组织中特异性表达;激光共聚焦结果显示,BMP15主要存在于在细胞质中。将pCMV-Myc-BMP 15转染至HEK293T细胞内,BMP15的mRNA水平和蛋白水平均显著上调。卵巢组织免疫荧光检测结果显示,BMP15主要定位在卵巢颗粒细胞的细胞质中。本研究成功构建了BMP15的真核表达载体,对BMP 15基因及其编码的蛋白的理化性质和生物学特性进行了预测分析,在HEK293T细胞内成功过表达,并得到了该基因的亚细胞定位情况、组织表达情况及在卵巢组织的分布情况。为后续开展BMP 15基因在卵巢生长发育中的功能及机制研究提供了理论依据。 展开更多
关键词 新西兰白兔 BMP 15基因 克隆 组织表达 细胞定位
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基于CREB3L1探讨矾冰纳米乳对兔耳增生性瘢痕模型相关蛋白及炎症因子的影响
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作者 沈乐乐 范洪桥 刘丽芳 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1142-1151,共10页
目的观察矾冰纳米乳对兔耳增生性瘢痕组织环腺苷酸应答元件结合蛋白3样1(CREB3L1)及炎症损伤的影响,探讨其预防增生性瘢痕的作用机制。方法将30只新西兰大耳白兔随机分为空白组、模型组、积雪草苷组及矾冰纳米乳低、中、高剂量组(8.15、... 目的观察矾冰纳米乳对兔耳增生性瘢痕组织环腺苷酸应答元件结合蛋白3样1(CREB3L1)及炎症损伤的影响,探讨其预防增生性瘢痕的作用机制。方法将30只新西兰大耳白兔随机分为空白组、模型组、积雪草苷组及矾冰纳米乳低、中、高剂量组(8.15、16.3、32.6 mg·mL^(-1))。采用热力烫伤法进行造模,深Ⅱ度烧伤造模成功后第14天给予相应药物外用,空白组、模型组外用等量生理盐水,每日2次,连续给药至第35天。苏木素-伊红(HE)染色观察兔耳瘢痕组织病理学改变;马松(Masson)染色观察瘢痕组织胶原沉积情况;免疫荧光双标法检测兔耳瘢痕组织CREB3L1/α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)共表达情况;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测瘢痕组织白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)等炎性因子表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测CREB3L1、Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(COL-Ⅲ)、α-SMA mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western Bolt)检测CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA的蛋白表达情况。结果与空白组比较,模型组瘢痕增生指数明显升高(P<0.01);病理学改变包括真皮层增厚,形成致密的网状纤维,伴见炎症细胞浸润;Masson染色可见真皮层增厚,蓝染的胶原纤维大量沉积排列紊乱;免疫荧光双标结果显示,瘢痕组织中CREB3L1阳性表达增加,α-SMA阳性表达增加,IL-6含量明显升高(P<0.01),IL-10含量明显降低(P<0.01),兔耳瘢痕组织中的CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA mRNA相对表达量明显增加(P<0.01),CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA蛋白的表达明显增加(P<0.01)。与模型组比较,矾冰纳米乳中、高剂量组及积雪草苷组治疗后瘢痕增生指数均明显下降(P<0.05,P<0.01),病理改变可见真皮层变薄,炎性细胞均有不同程度减少,蓝染的胶原纤维减少,免疫荧光双染可见瘢痕组织中CREB3L1阳性表达降低,α-SMA阳性表达降低,IL-6含量明显降低(P<0.01),IL-10含量明显升高(P<0.01),矾冰纳米乳中、高剂量组和积雪草苷组均能够明显下调CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA mRNA的表达(均P<0.01),降低CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论矾冰纳米乳能够通过调节CREB3L1及相关纤维化蛋白的表达,降低炎症水平,从而预防增生性瘢痕形成,丰富了中医“既病防变”“治未病”思想的科学内涵。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 矾冰纳米乳 环腺苷酸应答元件结合蛋白3样1(CREB3L1) 炎症 纤维化 新西兰大耳白兔
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新西兰兔下丘脑qPCR内参基因的筛选和验证
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作者 姜幸慧 陈晶 +2 位作者 张洺瑞 邱水玲 甘乾福 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第9期48-55,共8页
为筛选适合新西兰白兔下丘脑的最佳内参基因,试验选定甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、肌动蛋白β(ACTB)、β-2-微球蛋白(B2M)、酪氨酸3-单加氧酶(YWHAZ)、次黄嘌呤磷酸核糖转移酶1(HPRT1)、核糖体蛋白L4(RPL4)和TATA-box结合蛋白(TBP)共7... 为筛选适合新西兰白兔下丘脑的最佳内参基因,试验选定甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、肌动蛋白β(ACTB)、β-2-微球蛋白(B2M)、酪氨酸3-单加氧酶(YWHAZ)、次黄嘌呤磷酸核糖转移酶1(HPRT1)、核糖体蛋白L4(RPL4)和TATA-box结合蛋白(TBP)共7个候选内参基因,利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术对不同年龄、性别及发情状态的新西兰白兔下丘脑组织的基因表达水平进行检测;通过RefFinder在线软件综合ΔCt、GeNorm、NormFinder和BestKeper等4种算法的分析结果来评估内参基因表达的稳定性,并选取在下丘脑表达的功能基因雌激素受体(ER1)、孕激素受体(PGR)和RFamide神经肽VF(NPVF)对候选内参基因稳定性和评价结果的可靠性进行验证。结果:不同年龄的雌性新西兰白兔下丘脑稳定表达的内参基因是YWHAZ和GAPDH;雄性新西兰白兔下丘脑稳定性表达的内参基因YWHAZ和TBP,而不同发情期新西兰白兔适合使用HPRT1和YWHAZ作为内参基因。当使用不同内参基因进行标准化时,目的基因表达水平受到样本不同生理状态而出现明显变化,强调了先行验证内参基因对于qPCR研究基因表达水平的重要性。 展开更多
关键词 新西兰白兔 下丘脑 内参基因 稳定性评价和验证
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基于MAPK信号通路探讨复方芪芎颗粒对IL-1β诱导的兔骨关节炎软骨细胞的作用及其机制
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作者 杨丽莎 陈利锋 +2 位作者 张传成 刘雪晴 谭张奎 《中医药导报》 2024年第8期1-7,共7页
目的:基于MAPK信号通路探讨复方芪芎颗粒对IL-1β诱导的兔骨关节炎软骨细胞的作用及其机制。方法:选取5只清洁级新西兰大白兔,提取兔软骨细胞培养至第2代,通过IL-1β诱导软骨细胞,建立骨关节炎软骨细胞体外模型,将其分为空白对照组、IL-... 目的:基于MAPK信号通路探讨复方芪芎颗粒对IL-1β诱导的兔骨关节炎软骨细胞的作用及其机制。方法:选取5只清洁级新西兰大白兔,提取兔软骨细胞培养至第2代,通过IL-1β诱导软骨细胞,建立骨关节炎软骨细胞体外模型,将其分为空白对照组、IL-1β组、双醋瑞因组、复方芪芎颗粒低浓度组、复方芪芎颗粒中浓度组、复方芪芎颗粒高浓度组。空白对照组不进行任何干预,IL-1β组采用质量浓度为10μg/L的IL-1β处理,双醋瑞因组采用10-5mol/L双醋瑞因处理,复方芪芎颗粒低、中、高浓度组分别采用10 mg/mL、20 mg/mL、30 mg/mL复方芪芎颗粒处理。干预24、48、72 h后,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测各组P38激酶、c-Jun氨基端激酶(JNK)、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、P65激酶、基质金属蛋白酶13(MMP-13)基因表达水平;干预72h后,采用Western blotting法检测各组P38、JNK、ERK、P65、MMP-13蛋白表达水平。结果:干预24、48、72 h后,IL-1β组P38 mRNA、JNK mRNA、ERK mRNA、P65 m RNA、MMP-13 mRNA相对表达量高于空白对照组(P<0.05);双醋瑞因组和复方芪芎颗粒低、中、高浓度组P38 mRNA、JNK mRNA、ERK mRNA、P65 mRNA、MMP-13 mRNA相对表达量均低于IL-1β组(P<0.05);复方芪芎颗粒高浓度组P38 mRNA、JNK mRNA、ERK m RNA、P65 mRNA、MMP-13 mRNA相对表达量低于复方芪芎颗粒低浓度组(P<0.05)。随着药物干预时长的延长,双醋瑞因组和复方芪芎颗粒低、中、高浓度组P38 mRNA、JNK mRNA、ERK mRNA、P65 m RNA、MMP-13 mRNA相对表达量均呈降低趋势(P<0.05)。干预72 h后,IL-1β组P38、JNK、ERK、P65、MMP-13蛋白相对表达量高于空白对照组(P<0.01);双醋瑞因组和复方芪芎颗粒低、中、高浓度组P38、JNK、ERK、P65、MMP-13蛋白相对表达量均低于IL-1β组(P<0.01);复方芪芎颗粒高浓度组P38、JNK、ERK、P65、MMP-13蛋白相对表达量低于复方芪芎颗粒低浓度组(P<0.01)。结论:复方芪芎颗粒对IL-1β诱导的骨关节炎软骨细胞具有保护作用,其机制可能是通过抑制MAPK信号通路实现的,且随着药物浓度的升高和干预时长的延长其对MAPK信号通路的抑制效果更加明显。 展开更多
关键词 骨关节炎 复方芪芎颗粒 白介素-1Β MAPK信号通路 软骨细胞 新西兰大白兔
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Ⅱ型糖尿病兔大脑皮质和海马神经元的神经丝蛋白表达(英文) 被引量:1
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作者 马志健 刘正清 +4 位作者 张秋菊 蔡维君 李明波 刘小丹 陈二云 《中国医学工程》 2002年第6期17-20,共4页
Objective:To investigate the morphological changes of the neuronal neurites in diabetic rabbit brain. Methods: Twenty- four New Zealand White rabbits were divided into 2 groups: control group and type Ⅱ diabetic grou... Objective:To investigate the morphological changes of the neuronal neurites in diabetic rabbit brain. Methods: Twenty- four New Zealand White rabbits were divided into 2 groups: control group and type Ⅱ diabetic group induced by high - carbohydrate and high- fat diet. The levels of blood sugar and insulin were detected at week 0(w0), w4, w8, w13, w18, w23 and w28. Brain tissue was stained by Nissl staining and immunolistochemistry with a specific antibody to neurofilament proteins. Result: In diabetic rabbits, the amount of large pyramidal neuron was significantly reduced, and neuronal neurites became swollen, whorled, disrupted and changed in caliber. In hippocampus CA1 region neurofilament staining was very weak. Conclusion: Neurotoxicity of chronic hyperglycemia might be relevant to vascular chronic complications, which affected the expression of NF and led to neurophysiological and structural changes in the brain of rabbits with type Ⅱ diabetes. 展开更多
关键词 new zealand white rabbits Type Diabetes NEUROFILAMENT Diabetic Encephalopathy
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皮瓣重建兔阴囊诱导精原细胞凋亡与热休克蛋白70表达 被引量:10
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作者 孙广峰 王达利 +2 位作者 李丽 魏在荣 崔红旺 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期606-610,共5页
目的:探讨皮瓣重建阴囊后睾丸表面的温度变化、生精细胞凋亡及热休克蛋白70(HSP70)的表达。方法:以健康育龄期新西兰大白兔为实验动物,雄性24只、雌性12只。将雄兔随机分成实验组12只,对照组12只。采用温度计埋藏法测量实验组阴囊内睾... 目的:探讨皮瓣重建阴囊后睾丸表面的温度变化、生精细胞凋亡及热休克蛋白70(HSP70)的表达。方法:以健康育龄期新西兰大白兔为实验动物,雄性24只、雌性12只。将雄兔随机分成实验组12只,对照组12只。采用温度计埋藏法测量实验组阴囊内睾丸表面的温度,手术切除实验组动物阴囊,建立皮瓣重建阴囊动物模型,对照组未作处理。动物模型建立后第8周末对照组随机取6只动物进行睾丸活检,实验组随机取6只动物测量睾丸表面温度后行睾丸活检。睾丸组织行HE染色、原位末端标记(TUNEL)法检测生精细胞凋亡、免疫组化法结合图象分析仪检测睾丸生精细胞HSP70的表达。模型建立后第8周末,将两组未行睾丸活检的各6只动物分别与雌兔配对喂养观察生育情况。结果:实验组模型建立前睾丸表面温度为(36.0±0.3)℃,模型建立后第8周末睾丸表面温度为(38.1±0.6)℃(P<0.05)。模型建立后第8周末实验组睾丸生精小管中生精细胞的凋亡指数(AI)为(71.85±2.69)%,对照组为(7.73±4.95)%(P<0.05)。对照组HSP70主要在圆形精子细胞中表达,实验组主要表达在精原细胞。配对喂养结果显示,实验组没有生育,对照组生育幼兔(6.0±1.3)只(P<0.05)。结论:皮瓣重建家兔阴囊后睾丸局部温度升高诱导生精细胞凋亡增加,动物丧失生育能力。HSP70参与保护皮瓣重建阴囊诱导的精原细胞凋亡。 展开更多
关键词 皮瓣重建 阴囊 温度 热休克蛋白70 新西兰大白兔 凋亡 生精细胞
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葛根素对兔急性心肌梗死再灌注后无复流的影响 被引量:13
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作者 杨秀秀 陈韵岱 +3 位作者 田峰 骆景光 吕媛 吕树铮 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2010年第1期30-33,共4页
目的:评价葛根素防治兔急性心肌梗死(AMI)再灌注后无复流的作用。方法:新西兰大白兔48只随机分为对照组和葛根素小中大剂量组,每组12只。结扎冠状动脉左回旋支90min,松解120min制备急性心肌梗死再灌注模型。再灌注期间,各组分别静滴生... 目的:评价葛根素防治兔急性心肌梗死(AMI)再灌注后无复流的作用。方法:新西兰大白兔48只随机分为对照组和葛根素小中大剂量组,每组12只。结扎冠状动脉左回旋支90min,松解120min制备急性心肌梗死再灌注模型。再灌注期间,各组分别静滴生理盐水及不同剂量葛根素。再灌注后观察左心室心肌无复流程度、梗死程度及ST段抬高指数。结果:①对照组再灌注后出现了明显的无复流及心肌梗死,无复流程度为(65.6±3.1)%,梗死程度为(92.7±2.2)%。无复流程度在小中大剂量葛根素组分别为(51.1±1.4)%、(41.7±2.7)%、(39.4±2.1)%,梗死程度分别为(81.0±4.3)%、(75.2±4.4)%和(71.9±8.4)%,均小于对照组(P均<0.01)。葛根素中和大剂量组无复流和梗死程度也均小于小剂量组(P均<0.01)。大剂量组无复流程度小于中剂量组(P<0.05)。②再灌注后葛根素小中大剂量组ST段抬高指数分别为0.32±0.04、0.26±0.04和0.24±0.03,均小于对照组的0.59±0.07(P均<0.01)。结论:葛根素可减轻兔AMI再灌注后心肌无复流程度及梗死程度。 展开更多
关键词 无复流 葛根素 急性心肌梗死 新西兰大白兔
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全蝎纯化液对实验性动脉血栓形成t-PA、PAI-1的影响 被引量:25
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作者 赵检英 石雕 +2 位作者 谭茜 徐爱良 彭延古 《中西医结合心脑血管病杂志》 2012年第2期195-196,共2页
目的观察全蝎纯化液对新西兰白兔颈总动脉血栓形成组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原活化物抑制剂(PAI-1)、血小板计数(Pt)的变化。方法将50只健康新西兰白兔随机分成5组:空白组、模型组、全蝎纯化液大剂量组(20mg/kg)、全蝎纯化液... 目的观察全蝎纯化液对新西兰白兔颈总动脉血栓形成组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原活化物抑制剂(PAI-1)、血小板计数(Pt)的变化。方法将50只健康新西兰白兔随机分成5组:空白组、模型组、全蝎纯化液大剂量组(20mg/kg)、全蝎纯化液中剂量组(10mg/kg)和全蝎纯化液小剂量组(5mg/kg)。耳缘静脉注射药物(空白组、模型组注射同等体积的生理盐水)后,采用H2O2损伤新西兰白兔颈总动脉制备血栓模型,造模2h后,采血并取血栓,酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血浆t-PA、PAI-1的含量。结果与空白组比较,模型组t-PA明显降低,PAI-1明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组相比,全蝎纯化液各剂量组能明显抑制PAI-1活性,增加t-PA活性,差异均有统计学意义(P<0.01),而各组的血小板计数差异无统计学意义(P>0.05)。结论全蝎纯化液各剂量组可明显促进血浆t-PA的分泌,抑制血浆PAI-1活性,提示全蝎纯化液抗血栓作用机制可能与其促纤溶作用有关。 展开更多
关键词 全蝎 新西兰白兔 动脉血栓 组织型纤溶酶原激活物 纤溶酶原活化物抑制剂
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体外重建组织工程人角膜内皮在新西兰兔角膜内皮移植中的应用 被引量:9
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作者 樊廷俊 赵君 +4 位作者 王晶 丛日山 杨秀霞 史伟云 王宜强 《国际眼科杂志》 CAS 2009年第12期2278-2282,共5页
目的:验证体外重建组织工程人角膜内皮(TE-HCE)在角膜内皮移植中的作用。方法:以非转染人角膜内皮细胞(HCE细胞)为种子细胞,以去上皮层修饰羊膜为载体支架体外重建的TE-HCE,经CM-DiI标记后对撕除内皮层和后弹力层(DM)的新西兰兔进行了... 目的:验证体外重建组织工程人角膜内皮(TE-HCE)在角膜内皮移植中的作用。方法:以非转染人角膜内皮细胞(HCE细胞)为种子细胞,以去上皮层修饰羊膜为载体支架体外重建的TE-HCE,经CM-DiI标记后对撕除内皮层和后弹力层(DM)的新西兰兔进行了兔穿透性角膜内皮移植。用裂隙灯显微镜观察移植眼角膜的透明度。用荧光显微镜观察种子细胞荧光标记。用茜素红染色和冰冻切片HE染色和扫描电镜观察种子细胞的形态、细胞连接的形成情况、细胞单层的完整性及其与DM结合的紧密程度。用透射电镜方法鉴定种子细胞、DM和角膜的超微结构。结果:TE-HCE可使新西兰兔角膜保持透明39d以上。角膜内皮层移植区的细胞均带有CM-DiI荧光标记。绝大多数种子细胞为六角形,细胞间连接紧密,重建出了完整的角膜内皮层,且内皮层与DM结合紧密。种子细胞重建出了连续的角膜内皮层,种子细胞、DM和角膜的形态结构与正常对照眼的几乎相同。结论:移植后的TE-HCE在种子细胞形态、连续单层状态、细胞连接形成及超微结构上均与对照兔眼的角膜内皮类似,使移植新西兰兔角膜长期保持透明。 展开更多
关键词 人角膜内皮细胞 去上皮层修饰羊膜 组织工程人角膜内皮 新西兰兔 角膜内皮移植
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糖尿病新西兰兔心、肾NOS和抗氧化酶的变化 被引量:5
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作者 唐朝克 梁丽红 +4 位作者 徐刚 尹卫东 杨保堂 文格波 孙明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期714-715,721,共3页
目的 :探讨糖尿病新西兰兔心、肾一氧化氮合酶 (NOS)活力和抗氧化酶活力变化以及它们在糖尿病发病机制中的作用。方法 :采用高脂高糖饲料喂养新西兰兔 ,建立一种新的糖尿病动物模型。观察糖尿病新西兰兔心、肾一氧化氮水平 ,一氧化氮合... 目的 :探讨糖尿病新西兰兔心、肾一氧化氮合酶 (NOS)活力和抗氧化酶活力变化以及它们在糖尿病发病机制中的作用。方法 :采用高脂高糖饲料喂养新西兰兔 ,建立一种新的糖尿病动物模型。观察糖尿病新西兰兔心、肾一氧化氮水平 ,一氧化氮合酶 (NOS)活力及抗氧化酶活力的变化。结果 :糖尿病新西兰兔出现大量蛋白尿(P <0 0 5 ) ;肌酐清除率 (CCr)明显高于对照组 (P <0 0 1) ;心脏组织中NO-2 水平和NOS活力明显低于对照组 (P <0 0 5 ) ,而肾脏组织中NO-2 水平和NOS活力明显高于对照组 (P <0 0 1) ;血糖及胰岛素明显高于对照组 (P <0 0 1) ;超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH -Px)、过氧化氢酶 (catalase)活性都明显低于对照组 (P <0 0 1)。结论 :糖尿病新西兰兔心、肾中的NO-2 水平和NOS活力异常 ,抗氧化酶活力明显降低 ,糖尿病的心。 展开更多
关键词 NOS 抗氧化酶 糖尿病 一氧化氮合酶
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新生家兔空肠上皮细胞的体外分离培养与鉴定 被引量:7
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作者 范斌 余冰 +2 位作者 田刚 张凯 刘汉中 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1570-1578,共9页
本试验旨在建立家兔空肠上皮细胞的体外分离培养方法,为进一步研究外源物质对家兔小肠上皮结构功能的影响及其作用机制提供体外模型。试验以新生新西兰白兔(1~3日龄)空肠为研究对象,利用由链霉蛋白酶E、胶原酶Ⅳ和二硫苏糖醇组成的... 本试验旨在建立家兔空肠上皮细胞的体外分离培养方法,为进一步研究外源物质对家兔小肠上皮结构功能的影响及其作用机制提供体外模型。试验以新生新西兰白兔(1~3日龄)空肠为研究对象,利用由链霉蛋白酶E、胶原酶Ⅳ和二硫苏糖醇组成的混合消化液消化空肠组织,通过2%山梨醇密度梯度离心来富集隐窝细胞团。运用相差消化法和差速贴壁法纯化家兔空肠上皮细胞,并从形态学观察、碱性磷酸酶染色、细胞角蛋白8免疫荧光染色和肠上皮细胞标志物基因表达分析4个方面鉴定家兔空肠上皮细胞。结果表明:应用链霉蛋白酶E、胶原酶Ⅳ和二硫苏糖醇混合消化液可获得大量的细胞团,细胞团12 h贴壁并向周围辐射生长,生长的细胞呈典型的三角形或多角形,5~7 d融合成片,呈单层生长、互不重叠;原代细胞能够进行传代、纯化;经碱性磷酸酶染色和细胞角蛋白8免疫荧光染色均呈阳性;可表达肠上皮细胞标志蛋白(脂肪酸结合蛋白2、肠肽酶、E-钙黏蛋白、紧密连接蛋白-4)的基因。以上结果表明,本试验成功建立了家兔空肠上皮细胞的体外分离培养方法。 展开更多
关键词 新西兰白兔 空肠上皮细胞 原代培养 鉴定
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诱发糖尿病饲料致新西兰兔动脉粥样硬化作用 被引量:9
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作者 尹卫东 杨保堂 +2 位作者 张善春 袁中华 易光辉 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2001年第2期100-103,共4页
用高脂高糖饲料喂养新西兰兔建立一种新的糖尿病并发动脉粥样硬化动物模型。将新西兰兔分为二组 :对照组 (n =7)喂普通饲料 ;实验组 (n =10 )喂含 10 %猪油、36 %白蔗糖混合饲料。共观察 2 4周 ,每 4周取禁食过夜空腹血测血糖、胰岛素... 用高脂高糖饲料喂养新西兰兔建立一种新的糖尿病并发动脉粥样硬化动物模型。将新西兰兔分为二组 :对照组 (n =7)喂普通饲料 ;实验组 (n =10 )喂含 10 %猪油、36 %白蔗糖混合饲料。共观察 2 4周 ,每 4周取禁食过夜空腹血测血糖、胰岛素、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯。结果发现 ,实验组动物发生高血糖和高甘油三酯血症 ,血糖浓度为 6 .36± 0 .92mmol L ,而对照组为 1.76± 0 .2 8mmol L ;实验组血甘油三酯浓度为 1.75± 0 .5 6mmol L ,而对照组为 0 .41± 0 .0 5mmol L ,两组相比 ,差异非常显著 (前者P <0 .0 1,后者P <0 .0 0 0 1)。实验结束时发现 ,实验组兔主动脉均有典型动脉粥样硬化早期病变 ,脂纹病灶面积占主动脉条展开面积的百分比为 8.5 8%±1.35 % ,而对照组仅有 0 .0 8%± 0 .0 6 % ,两组差异非常显著 (P <0 .0 0 1)。实验组动物脂纹病变主要分布于腹主动脉 ,类似于人类的动脉粥样硬化好发部位。此实验结果提示 :不含胆固醇的高脂高糖饮食可诱发高血糖、高甘油三酯血症 ,促发动脉粥样硬化 ,这是首例报告。 展开更多
关键词 致糖尿病饲料 动脉粥样硬化 血脂 血糖
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褪黑素受体激动剂Neu-P11对兔眼组织AQP1表达的影响 被引量:4
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作者 席守民 杨五彪 +3 位作者 马灵筠 于乐 尹卫东 Moshe Laudon 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1329-1330,共2页
水通道蛋白1(aquaporin1,AQP1)在眼内组织分布较广,其与房水的分泌、排出及调节关系密切;褪黑素受体激动剂5-MCA—NAT能降低实验兔眼压;Neu-P11是一种高效的非选择性褪黑素受体激动剂,能激活褪黑素受体,从而起到类似褪黑素的作用;
关键词 水通道蛋白1 表达 眼压 褪黑素受体 Neu—P11 西兰大白兔
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闽西地方肉兔与新西兰兔屠宰和肉质性状研究 被引量:5
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作者 桑雷 王锦祥 +4 位作者 孙世坤 陈冬金 陈岩锋 谢喜平 郑百龙 《福建农业学报》 CAS 北大核心 2018年第9期888-892,共5页
对闽西南黑兔、福建白兔和新西兰兔90日龄屠宰性能和肉质性状进行研究,结果显示:(1)新西兰兔的活重[(2044.79±129.86)g]、全净膛重[(941.89±65.27)g]、半净膛重[(1034.31±65.39)g]显著高于闽西南黑兔[(1568.56±103.... 对闽西南黑兔、福建白兔和新西兰兔90日龄屠宰性能和肉质性状进行研究,结果显示:(1)新西兰兔的活重[(2044.79±129.86)g]、全净膛重[(941.89±65.27)g]、半净膛重[(1034.31±65.39)g]显著高于闽西南黑兔[(1568.56±103.99)、(725.42±88.60)、(784.94±145.07)g]和福建白兔[(1514.43±102.96)、(675.55±54.91)、(763.08±47.82)g,P<0.05],福建白兔全净膛率[(44.59±1.84)%]和腹脂重[(7.54±4.62)g]显著低于新西兰兔[(46.09±2.04)%和(9.48±5.23)g]和闽西南黑兔[(46.27±4.95)%和(8.06±4.19)g,P<0.05],而它们之间半净膛率及腹脂率差异不显著(P>0.05);(2)闽西南黑兔背最长肌和股二头肌肉色比福建白兔和新西兰兔更显红润;(3)屠宰后45min,背最长肌pH值闽西南黑兔(6.42±0.20)显著低于福建白兔(6.49±0.20)和新西兰兔(6.53±0.20,P<0.05),而股二头肌pH值3种供试兔间差异不显著(P>0.05);屠宰后24h,福建白兔背最长肌pH值(5.66±0.09)和股二头肌pH值(5.84±0.15)显著高于闽西南黑兔(5.46±0.31和5.67±0.16)和新西兰兔(5.47±0.27和5.64±0.07,P<0.05),3种供试兔背肌和腿肌均出现酸化现象;(4)闽西南黑兔[(6.61±2.91)%]、福建白兔[(4.03±1.47)%]与新西兰兔[(9.50±3.29)%]的滴水损失相比,新西兰兔滴水损失最大(P<0.05),蒸煮损失则差异不显著(P>0.05);(5)背最长肌粗蛋白含量检测,新西兰兔蛋白含量最高[(24.69±2.57)g·kg-1],闽西南黑兔最低[(22.12±0.96)g·kg-1,P<0.05],粗脂肪检测结果则相反;(6)在肌肉纤维面积和密度方面,福建白兔背最长肌[(0.0014±0.0004)mm2·个-1]和股二头肌纤维面积最小[(0.0017±0.0004)mm2·个-1,P<0.05],新西兰兔和闽西南黑兔差异不显著(P>0.05),而它们肌纤维密度结果则相反。 展开更多
关键词 闽西南黑兔 福建白兔 新西兰兔 屠宰性状 肉质性状
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复方中草药制剂对新西兰兔精液品质的影响 被引量:9
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作者 丁海荣 李青旺 +1 位作者 曹社会 杨智青 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2005年第12期2342-2343,共2页
选取6~7月龄新西兰公兔12只,随机分为试验组和对照组,每组6只,研究以淫羊藿、菟丝子、熟地黄等为主要成分的复方中草药制剂对新西兰公兔精液品质的影响。结果表明:实验组公兔在饲喂该复方中草药制剂8~14和15~21d内的射精量、精子密... 选取6~7月龄新西兰公兔12只,随机分为试验组和对照组,每组6只,研究以淫羊藿、菟丝子、熟地黄等为主要成分的复方中草药制剂对新西兰公兔精液品质的影响。结果表明:实验组公兔在饲喂该复方中草药制剂8~14和15~21d内的射精量、精子密度和活率等指标与对照组公兔精液品质相比差异极显著(P<0.01);停药后10d内,实验组和对照组公兔的射精量差异显著(P<0.05),精子密度和活率差异极显著(P<0.01);但是整个试验过程中精子畸形率两组间差异不显著。说明该复方中草药制剂可以用来改善公兔的精液品质,有利于生产实践中进一步发挥优良公兔的种用价值。 展开更多
关键词 新西兰兔 中草药 饲料添加剂 精液品质
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微卫星标记对WHBE兔封闭群、日本大耳白兔和新西兰兔的遗传分析 被引量:15
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作者 陈民利 蔡月琴 +6 位作者 陶涛 余佳 肖慧 朱亮 徐孝平 王德军 应华忠 《中国比较医学杂志》 CAS 2008年第9期21-27,共7页
目的分析比较大耳白黑眼兔(WHBE兔)封闭群与日本大耳白兔(Jw兔)、新西兰兔(NZW兔)基因组存在的微卫星结构,研究WHBE兔封闭群的微卫星多态性。方法利用21个微卫星位点,通过微卫星分子标记技术对WHBE兔封闭群、Jw兔和NZW兔进行遗... 目的分析比较大耳白黑眼兔(WHBE兔)封闭群与日本大耳白兔(Jw兔)、新西兰兔(NZW兔)基因组存在的微卫星结构,研究WHBE兔封闭群的微卫星多态性。方法利用21个微卫星位点,通过微卫星分子标记技术对WHBE兔封闭群、Jw兔和NZW兔进行遗传多样性检测和对比。结果根据初步结果,在21对微卫星引物中筛选出扩增产物稳定并且具有多态性的11对引物。WHBE兔封闭群在每个位点上的等位基因数为3~8个不等,11个位点的平均有效等位基因数为2.0402个,平均杂合度为0.4810;Jw兔在每个位点上的等位基因数为2~8个不等,11个位点的平均有效等位基因数为3.6077个,平均杂合度为0.5039;NZW兔在每个位点上的等位基因数为3~9个不等,11个位点的平均有效等位基因数为2.6537个,平均杂合度为0.5334。WHBE兔封闭群在11个微卫星位点上的平均多态信息含量(PIC)为0.6005,多位点累积个体识别率达到100%,多位点累积非父排除概率(CPE)在双亲信息都是未知情况下的为0.9613,而在得知任一亲本信息的情况下,CPE值高达0.9973。在11个微卫星座位中,9个位点上出现了WHBE兔封闭群特有等位基因,其中在Sat2、Sat5、Sat7、Sat12、Sat13、Sat16、S0144和INRACCDDV0003八个位点上WHBE兔封闭群的特有等位基因为一个,在sat8位点上为两个。结论WHBE兔8个位点的平均杂合度、平均有效等位基因数均比JW兔及NZW兔低,说明WHBE兔群体的基因纯合度高于其他两个品系,具有更优的遗传稳定性。9个WHBE兔特有的等位基因可作为区分WHBE兔封闭群和其它两个品系实验兔的分子标记。 展开更多
关键词 WHBE兔封闭群 日本大耳白兔 新西兰兔 微卫星DNA 多态性
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新西兰白兔支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定 被引量:12
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作者 范志宇 恽时锋 +2 位作者 薛家宾 徐为中 王芳 《中国比较医学杂志》 CAS 2007年第5期278-282,共5页
目的了解支气管败血波氏杆菌在实验兔群中的感染情况,并对该菌的生物学特性进行研究。方法从江苏南京地区四家实验兔场采集有鼻炎症状的患兔鼻腔分泌物63份进行细菌的分离鉴定,并对分离菌对小鼠的毒性,对断奶幼兔的致病性,对抗生素敏感... 目的了解支气管败血波氏杆菌在实验兔群中的感染情况,并对该菌的生物学特性进行研究。方法从江苏南京地区四家实验兔场采集有鼻炎症状的患兔鼻腔分泌物63份进行细菌的分离鉴定,并对分离菌对小鼠的毒性,对断奶幼兔的致病性,对抗生素敏感性和生长培养特性等进行了研究。结果共分离出支气管败血波氏杆菌19株,分离率为30.16%,分离菌中有15株为强毒,1株为弱毒,3株无毒;对其中5株强毒株的抗生素敏感性试验表明,所有毒株对新霉素、氯霉素、红霉素、妥布霉素高度敏感,而对痢特灵、链霉素、洁霉素均不敏感,对其他抗生素的敏感性则各不相同。结论支气管败血波氏杆菌是引起实验兔鼻炎的重要病原菌,分离率较高,并与季节具有一定的相关性,分离菌对小鼠毒性较高,对幼兔具有一定的致病性,具有特定的生长特性、形态特性和对抗生素的敏感特性。 展开更多
关键词 新西兰白兔 支气管败血波氏杆菌 分离 鉴定 抗生素敏感性 致病性
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可注射性nHA/CS-BMSCs复合物修复兔股骨缺损的实验研究 被引量:5
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作者 刘阳 朱立新 +5 位作者 王庆波 田京 许勇 温永福 孙进 黄智 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2010年第4期421-424,429,共5页
目的评估可注射性纳米羟基磷灰石/壳聚糖材料(nHA/CS)复合骨髓基质干细胞(BMSCs)在促进兔股骨骨缺损修复中的作用。方法 18只成年新西兰大白兔双侧股骨外侧髁均建立骨缺损模型,造模后随机分为3组(1)实验组:18只兔右侧股骨缺损植入nHA/CS... 目的评估可注射性纳米羟基磷灰石/壳聚糖材料(nHA/CS)复合骨髓基质干细胞(BMSCs)在促进兔股骨骨缺损修复中的作用。方法 18只成年新西兰大白兔双侧股骨外侧髁均建立骨缺损模型,造模后随机分为3组(1)实验组:18只兔右侧股骨缺损植入nHA/CS-BMSCs复合材料;(2)对照组:其中16只兔左侧股骨髁缺损植入单纯CS凝胶材料;(3)空白组:2只兔左侧骨缺损旷置,不植入任何材料。于第12周末取材,对缺损修复区组织行大体、影像学、形态计量学观察。实验组和对照组之间进行比较,观察该复合材料对骨缺损的修复效果。结果 18只兔均进入结果分析,X线侧位片及CT检查示实验组修复疗效优于对照组。对缺损修复区CT值测量分析显示实验组新骨形成多于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在促进骨缺损的修复中,nHA/CS-BMSCs复合材料疗效优于单纯CS材料的修复能力,具有确切的骨缺损修复能力,有良好的应用前景。 展开更多
关键词 骨髓基质干细胞 羟基磷灰石/壳聚糖 骨缺损 新西兰白兔
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