非小细胞肺癌组织中P-ACC及COX-2的相关性研究

目的:探讨非小细胞肺癌组织中乙酰辅酶A羧化酶磷酸化后的产物(P-ACC)与环氧合酶-2(COX-2)的表达及其与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期及病理类型的关系,并研究两者的相关性。方法:以62例非小细胞肺癌患者的肺癌组织作为研究组,20例因其他它原因行肺叶切除患者的正常肺组织作为对照组。应用免疫组织化学SP法检测肺癌组织及正常肺组织中P-ACC、COX-2的表达情况。结果:P-ACC、COX-2在非小细胞肺癌和正常肺组织中的阳性表达差异有统计学意义(P<0.05)。在非小细胞肺癌中,P-ACC的阳性表达与肿瘤大小显著相关(P<0.05),而与淋巴结转移、临床分期及病理类型无关;COX-2的阳性表达与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期及病理类型无关。P-ACC与COX-2的阳性表达之间呈显著负相关(r=-2.37,P=0.032)。结论:P-ACC在非小细胞肺癌组织中的阳性表达降低;COX-2在非小细胞肺癌组织中阳性高表达,二者呈显著负相关,提示P-ACC阳性表达降低可能激活COX-2阳性表达,可促进非小细胞肺癌的发生、发展及侵袭转移。

非小细胞肺癌组织P-ACC和NF-κB表达意义及其相关性研究

目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中乙酰辅酶A羧化酶磷酸化后的产物(acetyl-coa carboxylase product of phosphorylation,P-ACC)与核转录因子κB(nuclear factor kappaB,NF-κB)的表达和相关性及其与临床病理因素的关系。方法:以赣州市肿瘤医院(赣州市肿瘤防治研究所)2008-01-01-2010-12-31有完整临床病理资料,病理检查确诊为NSCLC的62例癌组织作为研究组,20例同期因其他原因行肺叶切除患者的正常肺组织作为对照组。免疫组化SP法检测P-ACC和NF-κB的表达情况。结果:P-ACC在正常肺组织中80.0%(16/20)阳性表达,在NSCLC组织中33.9%(21/62)阳性表达,差异有统计学意义,P=0.000 1;NF-κB在正常肺组织中15.0%(3/20)阳性表达,在NSCLC组织中75.8%(47/62)阳性表达,差异有统计学意义,P<0.05。在NSCLC组织中,P-ACC的阳性表达与肿瘤大小显著相关,P=0.033;而与淋巴结转移、临床分期及病理类型无关,P>0.05。NF-κB的阳性表达与肿瘤大小、淋巴结转移及临床分期无关,P>0.05;而与病理类型显著相关,P=0.008。P-ACC与NF-κB的阳性表达之间呈显著负相关,r=-0.409,P<0.001。结论:P-ACC阳性表达降低可能激活NF-κB阳性表达,促进NSCLC的发生、发展及侵袭转移。

荭草素抑制3T3-L1前脂肪细胞分化及其改善胰岛素抵抗的作用研究

目的研究荭草素对3T3-L1前脂肪细胞分化及对脂肪细胞胰岛素抵抗的影响,并探讨其作用机制。方法传统鸡尾酒法诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,MTT法检测荭草素对前脂肪细胞活力的影响,油红O染色法检测脂质积累,酶法检测细胞内甘油三酯(triglyceride,TG)的含量。地塞米松诱导成熟的脂肪细胞,建立胰岛素抵抗模型,荧光标记2-脱氧葡萄糖(2-[N-(7-nitrobenz-2-oxa-1,3-diaxol-4-yl)amino]-2-deoxyglucose,2-NBDG)摄入法观察脂肪细胞对葡萄糖的摄取能力;Western blot检测腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl Co A carboxylase,ACC)的磷酸化水平及葡萄糖转运体4(glucose transporter type 4,GLUT4)的表达水平,免疫荧光法检测GLUT4的向膜转位能力。结果荭草素可浓度依赖性地减少细胞脂滴的积累及细胞内TG的含量,但对细胞活力无明显的影响(P>0.05)。胰岛素抵抗状态下,荭草素明显增加脂肪细胞对2-NBDG的摄取(P<0.05),明显上调AMPK、ACC的磷酸化水平(P<0.05),促进GLUT4的向膜转位及表达。结论荭草素抑制前脂肪细胞的分化,同时,荭草素通过上调AMPK/GLUT4信号途径相关蛋白的表达,促进了细胞对葡萄糖的摄取,达到改善胰岛素抵抗的作用。

AMPK、NF-κB、COX-2及PGE2在非小细胞肺癌中的表达

目的探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、核因子κB(NF-κB)、环氧合酶2(COX-2)及前列腺素E2(PGE2)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其关系。方法采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法检测NSCLC和正常肺组织标本中可以直接反映AMPK激活状态的乙酰辅酶A羧化酶磷酸化后的产物(P-ACC)、NF-κB、COX-2的表达,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot检测NSCLC标本及血液、正常肺组织标本及血液中AMPK、COX-2及PGE2受体的表达。结果免疫组织化学法检测发现,P-ACC在NSCLC中低表达,NF-κB和COX-2在NSCLC中高表达,其阳性率分别为33.9%、75.8%和66.1%,且与正常肺组织中的表达差异有统计学意义;qRT-PCR和Western blot检测发现,在NSCLC标本及血液中,AMPK mRNA表达降低,COX-2和PGE2受体mRNA表达升高。结论在NSCLC中,AMPK低表达,NF-κB、COX-2及PGE2高表达,其相互作用可能在NSCLC的增殖、凋亡耐受、侵袭及转移过程中占据重要位置,其表达情况为临床治疗NSCLC提供新的思路。

桃ACC氧化酶基因的克隆和植物表达载体的构建

以‘玉露’桃叶片基因组ＤＮＡ为模板，用ＡＣＣ氧化酶基因特异寡聚核苷酸为引物进行ＰＣＲ扩增，得到１．３ｋｂ左右的扩增产物，将其克隆到ｐＵＣ１９加Ｔ载体上，组建亚克隆并进行序列测定，结果表明，该基因全长有１２８８个碱基，由４个外显子和３个内含子组成。外显子由９５７碱基组成，编码３１９个氨基酸。该基因与桃、番茄、矮牵牛、康乃馨、苹果ＡＣＣ氧化酶ｃＤＮＡ氨基酸序列同源性分别为９９．３％，８３．０％，７６．８％，７４．０％，７５．０％。ＲＮＡ点杂交表明，该基因在未成熟果实检测不到杂交信号，随着成熟度增加，硬度下降，基因表达增强。将ＡＣＣ氧化酶基因分别正向和反向克隆到植物表达载体ｐＢＩ１２１中，并通过酶切分析，ＰＣＲ和点杂交鉴定重组质粒正确。将重组表达质粒导入根癌农杆菌中，经ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定证实质粒已被导入。

花生根际多功能固氮菌的分离及其耐盐碱特性研究

旨在获得具有固氮、溶磷及分泌IAA的多功能耐盐碱根际促生菌(PGPR),提高盐碱地花生产量。采用平板涂布法对盐碱地花生根际固氮菌进行了分离,结合16S rDNA序列鉴定和乙炔还原法测定固氮酶活。共获得22个固氮菌株,其固氮酶活性为125.82-346.32 nmol C_2H_4/(h·mL)。所有菌株均具有产ACC脱氨酶及溶解难溶性磷源活性。其ACC脱氨酶活性为0.12-1.26U/mg;溶解磷酸三钙量为1.45-53.58 mg/L,溶解磷酸铁量为1.45-8.27 mg/L,溶解磷酸铝量为1.1-22.82 mg/L。其中,10株具有分泌IAA的能力,分泌量在1.36-17.80μg/mL,占供试菌株的55%。对这10株促生菌进行NaCl、pH耐受性测定,结果显示最大pH耐受力为9,最大NaCl耐受力为1.5 mol/L。这10菌株具有较强的耐盐碱性,具有在盐碱地中应用的潜力。

P-选择素单抗抗唾液腺腺样囊性癌细胞裸鼠肺粘附的研究

目的观察P-选择素单克隆抗体(MonoantibodytoP-selectin,PS1)对腺样囊性癌肺高转移细胞肺粘附的抑制作用。方法裸鼠尾静脉注射P-选择素单抗后,经尾静脉注射氚标胸腺嘧啶核苷(3HTdR)标记的ACC-M细胞,分别检测细胞注射后2h、6h、18h的单位重量肺、肝组织每分钟核素脉冲数(CPM)。结果空白对照组单位重量肺组织在2h、6h、18h的CPM值分别是1875.75±11.53、1644.50±27.20和1466.50±125.95;P-选择素单抗组肺组织2h、6h、18h的CPM值分别是941.50±68.47、875.00±47.06和787.25±65.38。相同时间P-选择素单抗组肺组织CPM值明显低于对照组,两组间有显著性差异(P<0.001)。空白对照组单位重量肝组织的CPM值与P-选择素单抗组相比,2h、6h、18h各相同时间两组间无显著性差异(P>0.05)。结论P-选择素单抗静脉应用后,可减少肺组织内ACC-M细胞的粘附数量,但对相同时间肝组织内ACC-M细胞数量无显著影响。

SF-环的内射性

研究了SF-环与P-内射环的关系,构造了SF-环成为P-内射环的一系列条件.证明了SF-环R只要满足其中之一:R的每个极大左理想是有限生成的;特殊右零化子的降链条件;对R的每个极大左理想M,l(M)在R中是本质的,那么R就是P-内射环.在此基础上,利用一定条件下SF-环的P-内射性,发展了SF-环的若干新结果,这些结果部分地拓展了有关文献中的结果.

建筑施工中现浇梁板模板施工工艺研究

现浇梁板模板施工工艺的日渐发展成熟,在现阶段我国城市建筑事业领域的广泛运用,为优化我国城市建筑物在结构部分的稳定性和安全性做出了不容忽视的支持和促进贡献,论文围绕现浇梁板模板施工工艺论题,择取三个具体方面展开了简要的分析论述。

芳烃联合异构化装置对吸附分离的影响

260×10^(4)t/a芳烃联合异构化装置切入进料硫化前,吸附进料中对二甲苯与乙苯的质量浓度差值只有1.0%,物料切入并硫化后,浓度差达到20.0%以上,主要是约19.64%的间二甲苯转化为对二甲苯,结合异构化的反应机理,进一步证明了间二甲苯更容易异构化为对二甲苯的顺序反应机理。吸附进料中对二甲苯的质量浓度直接影响吸附分离系统的能力和效果,在UOP轻解吸剂模拟移动床LD-Parex技术中,在相同的ACCS参数下,对二甲苯与乙苯的浓度差达5.46%以上,产品对二甲苯的纯度才能达到99.80%以上。

绿色水油兼溶的除草剂的设计、合成与生物活性研究

本文选取了芳氧苯氧丙酸酯类除草剂精喹禾灵、氰氟草酯及吡啶类除草剂绿草定为先导化合物,在-研究它们的构效关系、作用机制和吸收传导规律的基础上,将药效基团N,N-二取代乙醇胺或N,N-二取代乙二胺引入其结构中,设计合成了精喹禾灵和氰氟草酯衍生物及绿草定衍生物(C、E两个系列)共30个新颖结构的化合物,以期开发出具有水油兼溶的高活性除草剂分子.结果显示,大多数化合物的盐酸盐水溶性很好,可以直接用水作溶剂进行生物活性测试.生物活性测试表明,C-4和C-9在施用量0.4 g/亩时对稗草的抑制活性达100%,略优于商品化的精喹禾灵;E-6在施用量20 g/亩时对稗草的抑制活性为70%,为绿草定活性的3倍多.

基于AMPK/ACC信号通路研究雷公菌活性成分对羟基苯甲醛对大鼠非酒精性脂肪肝的保护作用

目的探究雷公菌活性成分对羟基苯甲醛(p-hydroxybenzaldehyde,HD)对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠模型的保护作用及其对AMPK/ACC信号通路的影响。方法将48只SD大鼠随机分为正常组、模型组、水飞蓟素(120 mg·kg^(−1))组和HD高、中、低剂量组(200,100,50 mg·kg^(−1))组。除正常组大鼠每天饲喂标准饲料外,其余各组大鼠连续喂养高脂饲料8周以建立模型。记录大鼠体质量、肝脏系数,检测肝功能(ALT、AST)、血脂(TC、TG、HDL-C、LDL-C)、肝脏抗氧化因子(GSH-Px、SOD、MDA)、肝脏炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)等指标的变化。采用HE染色观察肝组织的病理变化,Western blotting检测AMPK/ACC信号通路相关蛋白表达。结果与模型组相比,HD各剂量组和水飞蓟素组大鼠体质量、肝脏系数显著降低。生化指标检测结果显示,中、高剂量组HD可显著降低模型大鼠血清TC、TG、AST、ALT、LDL-C和MDA水平,升高HDL-C含量;ELISA结果表明,中、高剂量HD能明显升高NAFLD大鼠肝组织GSH-Px和SOD活性,降低MDA含量,显著降低肝脏炎性细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的水平。HE结果显示,HD可明显减轻肝组织脂肪变性和炎症细胞浸润。Western blotting结果表明,HD激活AMPK/ACC信号通路,显著增加模型大鼠肝脏p-AMPK和p-ACC蛋白表达。结论HD可能通过促进AMPK/ACC信号通路来改善肝脏氧化应激、炎性反应,减少脂质合成,从而改善NAFLD。