肺癌细胞中p53和P-gp蛋白的表达及关系

肺癌细胞中ｐ５３和Ｐ－ｇｐ蛋白的表达及关系宋士伟郑大伟陈平①天津医科大学基础医学院（天津市３０００７０）抑癌基因ｐ５３的突变与很多恶性肿瘤的发生有关，ｐ５３基因的突变导致了ｐ５３蛋白在肿瘤细胞内的异常表达。肿瘤化学药物治疗过程中耐药的产生常使化疗失败...

P53、P-gp蛋白在卵巢癌组织中的表达及意义

目的探讨P53、P-糖蛋白(P-gp)在卵巢癌组织中的表达与化疗疗效及预后的关系。方法采用SP免疫组化法检测53例卵巢癌组织石蜡标本P53、P-gp的表达情况,并分析其与卵巢癌患者化疗疗效及预后的关系。53例卵巢癌患者中Ⅰ期6例、Ⅱ期14例、Ⅲ期23例、Ⅳ期10例。结果Ⅰ-Ⅱ期组P53、P-gp的阳性率(35.0%、40.0%)分别低于Ⅲ-Ⅳ组P53、P-gp的阳性率(72.7%、78.8%)(P<0.05)。P53、P-gp阳性表达的患者化疗的有效率分别为35.5%和35.3%,而阴性患者化疗的有效率分别为81.8%、89.5%(P<0.05)。P53、P-gp的阴性、阳性表达在Ⅲ-Ⅳ患者的2年及3年生存率之间差异均有显著性(P<0.05)。结论P53、P-gp的表达与卵巢癌组织化疗耐药及预后存在相关性,P53、P-gp蛋白表达可作为卵巢癌化疗耐药和预后的检测指标。

结直肠癌中Survivin和P-gp蛋白表达及其与血清CEA的相关性

目的探讨结直肠癌组织中Survivin和P-gp蛋白表达及其与血清CEA的相关性。方法采用免疫组化SP法检测63例结直肠癌及癌旁黏膜,10例腺瘤组织中Survivin和P-gp蛋白表达,分析两者表达与结直肠癌临床病理特征以及血清CEA值的关系。结果Survivin和P-gp蛋白在结直肠癌组织中阳性率分别为74.6%、76.19%,均显著高于癌旁和腺瘤组织(P<0.01)。Survivin和P-gp蛋白表达与结直肠癌淋巴结转移、远处转移、TNM分期呈正相关(P<0.05),两者表达之间具有正相关性(P<0.05),Survivin蛋白高表达组血清CEA值明显高于低表达组(P<0.05)。结论Survivin和P-gp蛋白在结直肠癌中高表达与肿瘤细胞的侵袭、转移密切相关,两者的表达具有协同作用,联合血清CEA检测有助于对肿瘤监测,为治疗结直肠癌提供分子生物学支持。

一种针对mdr1基因的寡核苷酸-阿霉素偶联物 :对KB-A-1细胞的毒性及其抑制P-gp蛋白表达的效果(英文)

目的 :癌细胞膜上P gp糖蛋白的过量表达是肿瘤多药抗性的主要机制。人体内编码P gp糖蛋白的基因中仅有mdr1涉及多药抗性。本研究中设计了针对mdr1的反义核酸与阿霉素的偶联物 ,并且对其细胞毒性进行了考察。同时对偶联物对人表皮癌细胞株KB A 1内的P gp蛋白的表达也做了分子水平上的研究。方法 :使用MTT法考察偶联物对KB A 1细胞的毒性。用HPLC考察偶联物对细胞内阿霉素的积累量的影响。对于P gp蛋白表达的变化 ,主要是通过RT PCR及WesternBlot方法进行了研究。结果 :偶联物的细胞毒性比寡核苷酸高。在低剂量的偶联物 (0 .5 μmol·L-1)的作用下 ,细胞对阿霉素的敏感性提高。偶联物能有效的提高细胞内阿霉素的积累量。并且从RT PCR及WesternBlot看 ,偶联物处理后的细胞内P gp表达最少。结论 :选用合适的基团 ,对反义核酸进行结构修饰能够较好的增强反义核酸的性能。采用阿霉素作为偶联基团尽管增强了细胞毒性 ,但是在更大程度上增强了其抑制P gp蛋白的效力 ,提高了肿瘤耐药性的逆转倍数 ,具有一定的潜在应用价值。

胃癌组织中p53,p16和P-gp蛋白的表达及其与病理学行为的相关性

[目的]探讨胃癌组织中p53,p16和P-gp蛋白的表达及其与病理学行为的相关性.[方法]利用免疫组织化学方法检测121例胃癌和39例正常胃组织中p53,p16和P-gp蛋白的表达水平.[结果]121例胃癌组织中p53,p16和P-gp蛋白的阳性表达率分别为74.4%,19.8%和47.9%,在39例正常胃组织中分别为0%,76.9%和15.4%;与正常组织比较,胃癌组织中p53,p16和P-gp蛋白阳性表达率差异均具有统计学意义(P<0.001).胃癌病理学行为相关性研究结果显示,胃癌组织中p53,p16和P-gp蛋白的阳性表达率与性别、年龄及肿瘤大小无相关性(P>0.05),而与胃癌病理学分级、浸润程度、淋巴结转移及远处转移具有显著相关性(P<0.05).[结论]p53,p16和P-gp蛋白在胃癌发生、发展过程中起重要作用;p53,p16和P-gp蛋白可作为胃癌诊断及预后判定的指标.

紫杉烷类P糖蛋白抑制剂的虚拟筛选研究

基于COCONUT天然产物数据库,运用计算机辅助药物设计方法对紫杉烷分子进行虚拟筛选,以寻找潜在的P-gp抑制剂。通过同源建模构建人P-gp蛋白三维结构模型、再经Lib-dock对接,从571种紫杉烷中初步筛选得到14种打分高于紫杉醇的候选分子。通过ADMET预测,得到成药性最好的候选分子紫衫烷504。结果显示,该分子与P-gp结合的作用力为氢键和π共轭作用,结合稳定性较好。研究可以为P-gp抑制剂的开发提供理论依据。

急性髓细胞白血病患者DC-CIK治疗对多药耐药基因P-GP蛋白影响

目的:探讨急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者DC-CIK治疗对多药耐药基因P-GP蛋白的影响。方法:选取2018-11-2019-11的AML患者26例,随机平均分成两组,对照组常规进行化疗,研究组抽取外周血对单个核细胞进行分离培养成为诱导培养成DC-CIK细胞之后,再回输至患者体内。针对两组治疗前、治疗后的相关T淋巴细胞水平进行检测、对比。针对研究组治疗前、治疗后使用罗明单外排法检测耐药基因P-GP的泵功能水平。结果:对照组治疗前及治疗后的相关T淋巴细胞水平差异无统计学意义(P>0.05);研究组治疗后的相关T淋巴细胞水平显著高于治疗前、显著高于对照组治疗后(均P<0.05)。研究组治疗前罗明单外排量滞留率为23.3%,治疗后罗明单外排量滞留率为51.6%,治疗后罗明单外排量滞留率显著高于治疗前(χ~2=6.012,P<0.05)。结论:给予AML患者使用DC-CIK细胞治疗,可显著提高患者体内的T淋巴细胞水平,提高患者的自身免疫力,同时还可以降低患者体内细胞的多药耐药基因P-GP蛋白的表达情况。

胃癌组织中P-gp和P53蛋白表达的比较研究

目的 探讨P gp和P 5 3蛋白在胃癌中的表达意义及它们的相关性。方法 应用S P免疫组化方法 ,分析 60例胃癌组织中P gp和P 5 3蛋白的阳性表达情况。结果 60例胃癌组织中P gp和P 5 3蛋白阳性表达分别为 5 8 3 3 % ( 3 5 /60 )和 5 0 .17% ( 3 1/60 )。P gp和P 5 3蛋白共同阳性表达率为 67.74% ( 2 1/3 1)。P gp表达与组织分化程度及TNM临床分期均无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,P 5 3蛋白表达则与胃癌组织的分化程度、临床分期密切相关 ,且差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 P gp与P 5 3蛋白表达有相关性。

人原发性肝细胞癌中锌指蛋白A20、NF-κB p65及多药耐药P-gp蛋白的表达

目的检测锌指蛋白A20、NF-κB p65蛋白及P-gp蛋白在人原发性肝细胞癌和癌旁组织中的表达,比较两者之间的差异,并探讨其与肝细胞癌临床病理学特征的关系。方法收集2009年2月至2010年8月期间于华西医院肝脏及血管外科行手术切除的32例原发性肝细胞癌患者的肝癌组织标本及对应的癌旁组织26例,行免疫组织化学染色,同时收集患者完整的临床病理学资料。结果锌指蛋白A20、NF-κB p65蛋白及P-gp蛋白在原发性肝细胞癌组织中的表达阳性率分别为87.5%(28/32)、81.3%(26/32)及65.6%(21/32),高于癌旁组织中的61.5%(16/26)、34.6%(9/26)及30.8%(8/26),P<0.05。锌指蛋白A20的表达与乙肝表面抗原(HbsAg)表达情况及肝硬变情况有关(P<0.05);NF-κB p65蛋白和P-gp蛋白的表达均与HbsAg表达情况有关(P<0.05)。结论锌指蛋白A20、NF-κB p65蛋白及P-gp蛋白在原发性肝细胞癌组织中均呈高表达,而在癌旁组织中呈低表达;3种蛋白可能对肝脏肿瘤的良恶性判断起指导作用。

雌马酚通过抑制P-gp蛋白增强顺铂抗胃癌细胞增殖

目的体外研究雌马酚和顺铂联合作用对人胃癌细胞增殖和细胞凋亡的影响及其作用机制。方法不同浓度的雌马酚和顺铂单独或联合作用于人胃癌MGC-803细胞。MTS法检测细胞存活率;AnnexinV/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting法检测P-gp蛋白的表达。结果雌马酚与顺铂联合作用组相对于顺铂单独处理组显示更强的抗增殖和促凋亡作用,并且二者联合具有协同抗肿瘤作用。雌马酚能够抑制顺铂引起的P-gp蛋白的增高。结论雌马酚联合顺铂能够协同抑制人胃癌细胞的增殖和促进细胞凋亡,这可能与其抑制P-gp蛋白的表达有关。该研究为改善胃癌细胞对顺铂的敏感性提供新的治疗思路,并需更进一步的研究。[营养学报,2019,41(1):81-84]

局部植入利福平(RFP)缓释剂对P糖蛋白(P-gp)活性及激素性股骨头坏死的影响

目的观察局部植入利福平(rifampicin,RFP)缓释剂对P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)活性及激素性股骨头坏死的影响。方法建立激素性股骨头坏死的动物模型,取32只成年雌性兔,随机平均分为4组:3个对照组(空白/口服给药/肌肉注射)和局部缓释组(试验组)。其中局部缓释组于左侧股骨上段植入RFP缓释剂,右侧相同位置植入空白颗粒作为对照。4周后检测外周血、骨髓内单核细胞P-gp活性,肝内细胞色素P450(cytochrom P450,CYP450)含量,比较骨代谢血清学指标、组织学形态(HE、Masson染色)、股骨头坏死率。结果局部缓释组左侧骨髓内P-gp活性高于右侧(P<0.05)。口服、肌注组外周血P-gp活性和肝细胞色素P4503A含量高于局部缓释组(P<0.05)。HE染色示:局部缓释组左侧股骨头比右侧骨小梁增宽,脂肪细胞减少,骨坏死率降低(P<0.05);口服、肌注组股骨头骨质流失及脂肪化受到抑制。Massons染色示:口服、肌注及局部缓释组左侧股骨头骨质成熟胶原较多,矿化完全。结论局部植入RFP对外周P-gp及肝内CYP450无明显影响,可增强骨内P-gp活性,降低激素性骨坏死发生率。

阿尔兹海默病(AD)小鼠脑内P-糖蛋白(P-gp)的表达与功能分析

目的研究P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)在APP/PS1双转基因阿尔兹海默病(Alzheimer′s disease,AD)模型小鼠脑中的表达与功能情况。方法采用RT-PCR、real-time PCR和Western blot方法分析不同月龄的AD小鼠和野生型(wild type,WT)小鼠脑中P-gp表达的差异;采用尾静脉注射罗丹明123(Rhodamine 123,Rh123),HPLC检测脑及血清中Rh123的含量,计算脑血分配系数,分析不同月龄的AD小鼠和WT小鼠脑中P-gp功能的差异。结果 3月龄时,AD小鼠脑内P-gp的表达与功能均明显低于WT小鼠;6月龄时,AD小鼠与WT小鼠无明显差异;9月龄时,AD小鼠脑内P-gp的表达与功能均明显高于WT小鼠;12月龄时,AD小鼠脑内P-gp的表达高于WT小鼠,功能却低于WT小鼠。结论 AD小鼠脑内P-gp的表达与功能与WT小鼠明显不同,并随月龄而变化。

甲孕酮对K562/AO2细胞及P-gp、Bcl-2耐药蛋白表达的影响

目的探讨甲孕酮对白血病K562/AO2细胞凋亡率及P-gp、Bcl-2耐药蛋白表达的影响。方法以MTT法检测肿瘤细胞增殖的抑制率,流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡、P-gp及Bcl-2表达。结果甲孕酮能够提高K562/AO2细胞的凋亡,能够下调K562/AO2细胞P-gp、Bcl-2的表达。结论甲孕酮能提高K562/AO2细胞化疗敏感性,促进其凋亡,对K562/AO2细胞有一定的逆转耐药作用。

膀胱癌组织中P-GP_(170)蛋白表达与化疗失败关系的研究

目的 :探讨膀胱癌术后膀胱腔内化疗失败原因。方法 :用免疫组织化学方法对膀胱癌手术切除的膀胱癌组织中 MDR1基因产物 P- GP170 糖蛋白含量进行检测。结果 :初发膀胱癌组织中 P- GP170 的阳性表达率明显低于复发膀胱癌组织 ,并且膀胱癌病理分级高者 P- GP170 阳性表达率明显高于病理分级低者。结论 :膀胱癌 MDR1基因产物 P- GP170 的测定有助于术后化疗方案的制定及判断预后 ,膀胱组织中P- GP170

多药耐药性基因1/P糖蛋白(mdr1/P-gp)高表达与类风湿性关节炎患者甲氨蝶呤耐药有关

目的研究类风湿性关节炎(RA)患者甲氨蝶呤(MTX)耐药性与外周血单个核细胞(PBMC)多药耐药性基因1/P糖蛋白(mdr1/P-gp)的表达的相关性。方法根据符合纳入标准的RA患者依据服用MTX后28个关节疾病活动度评分(DAS28)的情况,将RA患者分为MTX敏感组及耐药组,健康人群为正常对照组。采用实时定量PCR检测mdr1 mRNA的表达,流式细胞术检测PBMC的P-gp的水平及功能,比较mdr1/P-gp在各组中的表达情况。结果与正常对照组相比,MTX敏感组及MTX耐药组P-gp表达及功能增强;与MTX敏感组相比,MTX耐药组mdr1 mRNA水平增加,且P-gp表达及功能增强。结论 RA患者mdr1/P-gp高表达与MTX耐药相关。

骨巨细胞瘤P-gp、p27kip1、p53蛋白的表达及其意义

目的 观察骨巨细胞瘤组织中P-gp、p27kip1、p53蛋白的表达情况,探讨其临床病理意义。方法 应用S-P免疫组化方法,对36例骨巨细胞瘤组织中进行了P-gp、p27kip1、p53蛋白检测。结果 36例骨巨细胞瘤P-gp阳性12例(33.3％),其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级阳性率分别为45.5％、26.6％、33.3％;初、复发瘤分别为21.4％、75％,复发瘤明显高于初发瘤,差异有显著性(P<0.01)。p27kip1阳性31例(86.1％),其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级阳性率分别为100％、94.7％、33.3％,差异有显著性(P<0.01);初、复发瘤分别为100％、37.5％,差异有显著性(P<0.005)。p53仅在Ⅲ级复发瘤中有3例阳性(8.3％)。结论 P-gp在骨巨细胞瘤中的过表达可能是肿瘤对化疗不敏感的原因之一,其表达与肿瘤病理分级无关。p27kip1的表达与骨巨细胞瘤的组织学分级、复发及预后差有关,有助于判断肿瘤的生物学行为和预后。p53的异常表达可视为肿瘤恶性的指标之一。

急性白血病患者mdr-1基因与P-gp糖蛋白表达

目的：评价ｍｄｒ１基因与Ｐｇｐ糖蛋白在急性血病（ＡＬ）细胞中表达的相关性及其临床意义。方法：分别应用ＲＴＰＣＲ及流式细胞术（ＦＣＭ）检测３２例ＡＬ患者白血病细胞中的ｍｄｒ１ｍＲＮＡ及Ｐｇｐ糖蛋白表达率及表达水平，同时检测１４例正常人作为对照。结果：临床非耐药组ｍｄｒ１阳性率为２２．２％，Ｐｇｐ阳性率为３３．３％，而临床耐药组两者分别为７８．６％、８５．７％，均与临床治疗结果有极显著的一致性（Ｐ＜０．００５和Ｐ＜０．０１）。ｍｄｒ１＋／Ｐｇｐ＋的１３例患者中，１１例为临床耐药（８４．６％），其中１０例表现为ｍｄｒ１＋／Ｐｇｐ＋结果为中高度表达，临床非耐药的２例患者，ｍｄｒ１＋／Ｐｇｐ＋都是低度表达。相关性检验显示两方法有极显著的一致性。结论：ｍｄｒ１与Ｐｇｐ均可预测ＭＤＲ，同时检测ｍｄｒ１／Ｐｇｐ可提高ＭＤＲ检出符合率。

异功散中人参皂苷类成分在脾虚大鼠模型肠吸收动力学变化及其陈皮的影响

目的基于脾虚大鼠模型探讨异功散中陈皮对人参皂苷类成分肠吸收变化的影响及其影响是否与P-gp蛋白外排作用有关。方法分组设计加入P-gp蛋白激动剂利福平与抑制剂维拉帕米,将36只SD大鼠随机分为空白对照组(6只)与模型组(30只),予以皮下注射利血平建立脾虚模型后将模型组分为异功散组(Y组)、去陈皮异功散组(Y-C组)、异功散利福平组(Y+R组)、去陈皮异功散利福平组(Y-C+R组)、去陈皮异功散维拉帕米组(Y-C+V组),以人参皂苷Rb1、人参皂苷Re及人参皂苷Rg1为指标成分,进行在体单向肠灌流实验,采用HPLC-MS测定指标成分含量并计算肠吸收动力学参数有效渗透系数(P_(eff))与吸收速率常数(K_(a))。结果与Y组相比,Y-C组中人参皂苷Rb1和人参皂苷Re在多个灌流时段的P_(eff)显著降低,Y+R组中人参皂苷Rb1、人参皂苷Re及人参皂苷Rg1的P_(eff)和K_(a)在多个灌流时段降低,表明陈皮促进人参皂苷Rb1和人参皂苷Re肠吸收且该作用与P-gp蛋白活性有关,但未能影响人参皂苷Rg1的肠吸收;与Y-C组相比,Y-C+V组中P-gp蛋白抑制剂维拉帕米使人参皂苷Rb1和人参皂苷Re在多个灌流时段P_(eff)显著升高,而Y-C+R组中P-gp蛋白激动剂利福平使人参皂苷Rb1、人参皂苷Re及人参皂苷Rg1的P_(eff)和K_(a)在多个灌流时段显著降低,说明无陈皮干预下,人参皂苷Rb1、人参皂苷Re及人参皂苷Rg1也可能是P-gp蛋白的底物。结论异功散中陈皮通过发挥抑制P-gp蛋白活性的类维拉帕米作用来促进人参皂苷Rb1和人参皂苷Re肠吸收。

头颈鳞癌p53、Bcl-2及P-gp表达在治疗中的作用

目的检测突变型p53、Bcl-2及P-gp蛋白在头颈鳞癌中的表达,探讨其在治疗中的作用。方法97例头颈鳞癌中口咽癌18例、下咽癌27例、声门上喉癌52例,采用S-P法检测癌组织中p53、Bcl-2及P-gp蛋白表达,并结合治疗结果进行统计分析。结果突变型p53、Bcl-2及P-gp蛋白在头颈鳞癌中的阳性表达率分别为69.07%、46.39%、50.52%。突变型p53蛋白阳性与阴性累计五年生存率分别为38.43%和75.86%。P-gp蛋白阳性与阴性分别为35.23%和63.15%,两者对比有统计学意义(P<0.05)。在单纯手术和术后放疗、化疗两组中,突变型p53蛋白阳性与阴性的五年生存率分别为40.77%和80.00%、25.63%和61.90%,对比均有统计学意义(P<0.05)。术后放疗、化疗组中Bcl-2和P-gp蛋白阳性与阴性的五年生存率分别为23.35%和48.83%、31.43%和60.53%,差别有统计学意义。结论突变型p53、Bcl-2、P-gp蛋白阳性表达是抵抗放疗或化疗的生物学指标,在预测放疗、化疗敏感性方面有一定作用。