棉铃虫核多角体病毒p10基因的序列及转录分析

为了利用棉铃虫核多角体病毒 (HaSNPV) p10基因的启动子构建重组病毒杀虫剂及表达系统 ,应用末端测序法和引物步移法测定了 p10基因的序列 ,并应用Northern杂交和引物延伸实验对该基因进行了深入的转录特性分析。HaSNPV p10基因被定位于基因组DNA的 115 4kb～ 115 6kb处 ,转录方向与多角体基因相反 ,在其上下游分别发现了 p2 6和 p74基因。转录分析结果确定了 p10基因是个极晚期基因 ,其转录从杆状病毒晚期转录保守序列GTAAG的第二个A开始 ,转录产物大小约为 430nt。HaSNPVp10基因最早可检测到的转录是在病毒感染后的 2 0h ,随后其转录产物量迅速放大 ,到感染后 72h达到非常高的水平。转录时相分析同时还检测到一个大小为130 0nt的产物 ,推测该产物为 p2 6和 p10通读的转录产物。对HaSNPVP10蛋白序列的分析表明 ,该蛋白第 6～44位及第 5 1～ 6 5位氨基酸序列处含多个典型的卷曲螺旋七聚体重复结构 ,两片段间相隔 6个氨基酸残基 ,在该蛋白序列的第 2 0～ 34位与第 5 1～ 6 5位存在L -X(2 ) -L -X(10 ) -L的亮氨酸重复。Helicalnet分析表明 ,HaSNPVP10的疏水氨式酸分布为两个集簇区 ,两者互为 180度转角。

非洲猪瘟病毒亲核结构蛋白p10可溶性表达及多克隆抗体制备

利用大肠埃希菌表达非洲猪瘟病毒(ASFV)亲核结构蛋白p10,IPTG诱导可表达可溶性重组蛋白p10,分子量约为30 ku。SDS-PAGE和Western blot鉴定结果表明,成功获得重组蛋白p10,且重组蛋白可与ASF阳性血清发生特异性反应。将纯化后的p10作为抗原免疫新西兰白兔,分离血清并分析其反应特异性。ELISA检测结果表明,使用重组蛋白p10包被时,所得兔抗血清的效价可达1:204800;使用ASFV病毒裂解物包被,所得兔抗血清的效价可达1:400;表明制备的多克隆抗体能同时与原核表达和ASFV全病毒蛋白反应。IFA检测结果进一步印证多克隆抗体能与ASFV发生特异性反应,表明该抗体具有良好的反应活性和特异性。综上所述,重组p10蛋白和多克隆抗体可为后续建立针对ASFV抗原、抗体的检测方法提供重要的生物材料。

重症肌无力患者胸腺组织中P10、Bcl-2和FasmRNA的表达

目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺组织中相关基因片段P10以及凋亡相关基因Bcl- 2和Fas的表达。方法: 利用RT PCR方法定量分析 21例MG患者胸腺及 20例正常胸腺组织中P10、Bcl- 2和FasmRNA的表达水平。结果 :MG胸腺组织中P10、Bcl 2和FasmRNA表达水平明显高于正常胸腺组织(P<0. 05)。结论:P10、Bcl- 2和Fas基因在MG胸腺组织中的高表达与MG的发生发展有关。

两种杆状病毒的限制性消化和p10基因的定位

以5和6种限制性内切酶分别消化昆虫杆状病毒SeNPV和LsNPV DNA,求出它们的基因组平均长133kb和164kb.为了定位这两种杆状病毒的p10基因,构建了含有AcNPVp10基因序列的两个探针载体pAcHP106和pAcEP102.从探针载体回收0.18kb和0.42kb的AcNPV p10基因序列,制备探针,与SeNPV和LsNPV的酶切片段杂交,得到清晰的杂交图谱,准确的定位了这两种病毒的p10基因.

SlNPV p10基因特征的研究

从病毒感染后期的斜纹夜蛾幼虫脂肪体中提取ｍＲＮＡ，反转录合成ｃＤＮＡ探针，并使之与ＳｌＮＰＶ基因组的酶切片段杂交，将ＳｌＮＰＶｐ１０基因定位于ＢａｍＨⅠ３０千碱基片段上．ＳｌＮＰＶｐ１０是目前发现的最长ｐ１０基因；基因的启动子内含有２个ＡＴＴＧＴＡ基序，是目前所发现的ｐ１０基因中唯一含有２个Ａ／ＴＴＴＧＴＡ基序者．ＳｌＮＰＶＰ１０蛋白含有１０个七肽重复单元，可形成１个相对较长的卷曲螺旋．ＳｌＮＰＶｐ１０所在的ＯＲＦ５５２ｐ１０ＯＲＦ９４５基因簇与ＳｐｌｉＮＰＶ的ＯＲＦ５５２ｐ１０ＯＲＦ９４５基因簇各基因座位、方向及对应的氨基酸序列十分相似。

杆状病毒p10基因及蛋白结构与功能的研究进展

ｐ１０蛋白是杆状病毒复制晚期大量表达的一种蛋白质，因其分子量约为１０ｋＤａ而得名。大量表达的ｐ１０蛋白在杆状病毒感染的细胞核和细胞浆中形成纤维状结构。研究表明，ｐ１０蛋白与杆状病毒感染细胞的裂解及多角体释放有关，同时参与多角体囊膜的形成，维持多角体的...

禽呼肠孤病毒分离株P10、P17、δ3蛋白基因的表达及抗血清的制备

禽呼肠孤病毒的感染在我国鸡群中非常普遍，它除了可引起鸡传染性关节炎外，还可能引起矮小综合症和免疫抑制等。从鸡群中分离到的不同毒株ARV的毒力差别较大，抗原性也不尽相同。ARV是一种双股RNA病毒，病毒颗粒中的基因组有10个不同的独立节段组成。

MDRV P10基因的克隆、分析及蛋白质结构预测

参考Gen Bank中番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus,MDRV)S4基因序列,设计合成一对非结构蛋白P10基因的特异性引物,以MDRV-YB株病毒RNA为模板进行RT-PCR扩增,并将目的基因克隆到PGEM-T载体,提取质粒测序.对测序结果进行遗传进化树分析和生物信息学软件预测、分析蛋白质结构和功能.结果表明,MDRV-YB株病毒的P10蛋白基因开放阅读框(ORF)全长为288 bp,编码95个氨基酸.核苷酸比对结果表明,与标准株法国MDRV-89026株同源性为95%,而与ARV-S1133株氨基酸同源性仅为21.9%.运用Prot Param tool软件对番鸭呼肠孤病毒的P10蛋白分析结果表明,该蛋白分子质量为10.7 ku,不稳定系数为52.37,不存在信号肽和糖基化位点,有4个丝氨酸和1个络氨酸的磷酸化位点.此外,MDRV的P10蛋白为疏水性蛋白,但不存在跨膜区,这与禽呼肠孤病毒(Avian reo virus,ARV)的P10蛋白具有较大差异.二级结构分析表明,MDRV-YB株的P10蛋白与ARV-S1133株P10蛋白相比,α-螺旋和无规则卷曲减少,β-折叠则增加.因此,MDRV-YB株的非结构蛋白P10不仅在基因水平上发生了较大的变异,而且在蛋白质性质与结构上也发生了较大的变异,其与该病毒毒力的增强可能存在一定的关系.

禽呼肠病毒P10、P17非结构蛋白基因的克隆及序列分析

根据GenBank上的禽呼肠病毒（ARV）S1基因序列，设计并合成了一对跨越P10和P17非结构蛋白基因的特异性引物，对13个ARV毒株进行RT—PCR扩增、克隆及序列测定。结果显示，13个ARV毒株的P10蛋白基因ORF全长均为297bp，编码98个氨基酸；P17蛋白基因ORF全长为441bp，编码146个氨基酸。这13个ARV毒株P10、P17蛋白基因核苷酸同源性分别在96．6%～100%和95．2％～99．3%之间，推导的氨基酸同源性分别在98．2％～100%和91．9%～99．0%之间。将这13个ARV毒株与Gen Bank上其他正呼肠病毒毒株，包括番鸭株（DRV）和飞狐上分离到的内尔森海湾病毒（Nelson Bay Vir US，NBV）及两个澳洲分离株（ARM—1和SOM-4）进行同源性比较和遗传进化树分析，结果表明，呼肠病毒有地域和种类的差别。

补肾益脑片对加速衰老小鼠P10/Ta小鼠神经细胞衰老相关基因表达的调节

目的研究补肾益脑片抗衰老的分子机制。方法应用DDRT-PCR研究补肾益脑片提取物对SAM(senescence-acceler-ated mouse)P10/Ta小鼠原代培养的神经细胞基因表达的影响。结果发现了10个差异表达片段,分别与下列基因或转录产物同源:小鼠mRNA克隆IMAGE4235872,小鼠RIKENcDNA A730024A03基因mRNA,小鼠血清淀粉样蛋白A3(SAA3),异种核蛋白A0(HNRNP A0),小鼠OVCA1(Dph211)mRNA,蛋白酶体26S亚单位,ATP依赖线粒体RNA螺旋酶,小鼠线粒体核蛋白S31(Mrps31),小鼠CX43 gene,小鼠tRNA-Ile.结论补肾益脑片可能通过影响与衰老相关的基因表达发挥抗衰老作用。

地铁工程用C50P10管片高性能混凝土制备与性能研究

本文结合南京地铁工程盾构掘进法施工 ,配制C5 0P1 0管片用高性能混凝土 ,研究了粉煤灰掺量对蒸养混凝土性能的影响。并提出了当掺入 2 0 %～ 2 5 %的Ⅰ级粉煤灰时 ,其蒸养混凝土具有良好的工作性。

简单芽孢杆菌P10菌株对马铃薯晚疫病菌的防控作用

由致病疫霉引起的马铃薯晚疫病是马铃薯的一种毁灭性病害,且防治困难,利用益生菌实施生物防治成为研究的热点。为了明确多功能简单芽孢杆菌P10菌株对马铃薯晚疫病菌的抑制作用和防病效果,进而为深入研究和科学应用提供依据,以P10菌株活菌体、发酵菌液、无菌滤液为试材,采用对峙培养和打孔法测定了其对晚疫病致病疫霉菌丝的抑制作用,利用离体叶片和盆栽植株攻毒法测定了发酵菌液和无菌滤液的防病效果。结果表明:P10菌株活菌体和发酵菌液均能抑制马铃薯晚疫病致病疫霉菌丝的生长,使菌丝体膨大畸形,相对抑制率分别为66.7%和77.8%。P10菌株发酵菌液和无菌滤液对马铃薯离体叶片晚疫病菌的防效分别为57.2%和49.4%。盆栽试验中,接种疫霉菌孢子囊悬液前12 h喷施P10菌株发酵菌液以及接种病菌前后各喷施1次P10菌株发酵菌液的防效分别为73.9%和71.5%,接种病菌后再喷施P10菌株发酵菌液的治疗效果为54.8%,在接种病菌前喷施1次和接种前后各喷1次P10菌株无菌滤液的防效分别为60.3%和57.9%。简单芽孢杆菌P10菌株对马铃薯晚疫病病菌具有抑制作用,活菌体和发酵菌液的防效优于无菌滤液,预防效果优于治疗效果。

家蚕核多角体病毒p10基因的克隆和分子系统进化分析

根据GenBank中家蚕核多角体病毒13株中p10基因的保守序列，克隆得到了8个不同地区的家蚕核多角体病毒的p10基因，并分别与GenBank中的NPVp10基因进行比对．结果发现p10基因都含有1个213bp的开放阅读框（ORF）共编码70个氨基酸，8株P10蛋白间氨基酸序列相似性为95％～100％，相似性高．与GenBank中Ac-MNPV和BmNPV的P10蛋白相比，8株BmNPVP10蛋白都缺失了3个保守结构域中的C-端结构域，只含有2个保守结构域，即N-端卷曲螺旋和Pro丰富区．

针刺对SAMP10鼠大脑皮层脂筏磷脂组成及胆固醇含量的影响

目的观察针刺对快速老化痴呆鼠SAMP10脂筏磷脂组成及胆固醇含量的影响,并探讨针刺改善痴呆的机制。方法以快速老化痴呆鼠SAMP10和正常老化鼠SAMR1为模型,随机分为R1对照组、P10针刺组、P10非穴组、P10对照组,通过Morris水迷宫隐蔽平台试验检测小鼠的学习记忆能力,采用蔗糖密度梯度超速离心法分离脂筏,液质联用技术（LC/MS）测定脂筏中磷脂组成,比色法测定脂筏胆固醇含量。结果 P10对照组与R1对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,逃避潜伏期明显延长;P10针刺组与P10对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,逃避潜伏期明显缩短;P10针刺组与R1对照组比较,第1~3天有显著性差异（P〈0.05）,第4、5天与R1对照组比无显著性差异（P〉0.05）;P10非穴组与P10对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。SAM鼠大脑皮层脂筏磷脂含有磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰丝氨酸（PS）、磷脂酰肌醇（PI）、磷脂酰甘油（PG）5类磷脂组分;SAMP10脂筏磷脂中PI、PS、PC相对百分比升高,PG、PE相对百分比降低,针刺后PG、PE相对百分比降低,PI、PS、PC相对百分比升高;P10对照组脂筏胆固醇含量比R1对照组少（P〈0.05）;与P10对照组比较,P10针刺组有显著性差异（P〈0.05）,脂筏胆固醇含量增加,并趋向于R1对照组;P10对照组与P10非穴组无显著性差异（P〉0.05）。结论调节脂筏胆固醇含量可能是＂三焦＂针法改善SAMP10鼠痴呆状况的机制之一。

串行闪存M25P10与AVR单片机的接口技术

M25PXX系列串行闪存是ST公司推出的系列存储器产品,具有体积小、规格全、容量大、功耗低和硬件接口简单的特点,非常容易与各种单片机构成存储系统。本文重点介绍此类存储器与单片机的接口,并结合AVR单片机,给出实际电路和软件驱动函数。

家蚕核多角体病毒P10基因启动子结构与功能分析

前文曾报导过家蚕核多角体病毒（ＢｍＮＰＶ）Ｐ１０结构基因和启动子全顺序￣［１］。经突变法消除起始码ＡＴＧ，并分离上游－２３０位－＋１位含完整启动子片段，在此Ｐ１０启动子片段后拼接报导基因（昆虫荧光素酶基因，Ｌｕｃ，Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ）构建成表达质粒ｐＢｍｐ１０－Ｌｕｃ。质粒ｐＢｍｐ１０－ＬｕｃＤＮＡ转染有野生型ＢｍＮＰＶ感染的家蚕Ｂｍ－Ｎ细胞可测出Ｌｕｃ基因的瞬时表达。由启动子５’端（－２３０位）向Ｌｕｃ基因节律缺失删节，获得缺失至－１３５、－１１１、－３８位的各质粒（ｐＢｍｐ１０－１３５Ｌｕｃ、ｐＢｍｐ１０－１１１Ｌｕｃ、ｐＢｍｐ１０－３８Ｌｕｃ）。功能检测证实除ｐＢｍｐ１０－３８Ｌｕｃ外，其它质粒都有Ｌｕｃ基因瞬时表达，说明－３８－－１１１位结构顺序是Ｐ１０启动子功能所必须的。在苜蓿尺蠖核多角体病毒（ＡｃＭＮＰＶ）感染的ＢｍＮＰＶ非敏感细胞Ｓｆ－９中也得到相同的结果，说明ＢｍＮＰＶＰ１０启动子和ＡｃＭＮＰＶＰ１０启动子的调节因子可能是相似的。

BmNPV病毒的P10基因研究进展

家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus,BmNPV)是一种杆状病毒,而P10基因是杆状病毒的一种晚期高效表达基因。为了进一步了解P10基因在家蚕作为外源表达载体中的作用,现对国内外在BmNPV的P10基因方面的研究进行综述,以提高对P10基因的应用。

与RBSDV外壳蛋白P10互作植物因子的筛选与验证

目前,我们对水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)编码的外壳蛋白P10在该病毒侵染过程中的作用了解甚少。本研究利用酵母双杂交技术,以P10为诱饵钓取拟南芥cDNA文库,得到与P10互作的真核翻译起始因子eIF5A-2。通过分别构建猎物和诱饵载体共转化酵母,结果表明P10与AteIF5A-2在酵母中互作。利用农杆菌转染烟草表皮细胞瞬时表达体系发现,P10和AteIF5A-2形成融合荧光蛋白后,荧光主要形成囊泡状的结构。通过荧光共定位实验分析发现,P10与AteIF5A-2能够共定位。本研究结果进一步揭示了水稻黑条矮缩病毒的致病机制。

基于随机森林的AVS-P10开环编码质量优化算法

AVS-P10是我国第一部移动环境下的音频编解码标准。针对AVS-P10开环方式下编码模式选择算法准确率不高导致编码质量不佳的问题,提出基于随机森林的开环编码模式选择算法,通过拟合闭环方式下的编码模式选择结果,以提升开环方式下的编码模式选择准确度。为了降低随机森林计算复杂度并保持高准确度,采用两次特征选择并结合随机森林的特性选择特征。主客观测试结果表明,所提方法将开环方式下的编码模式选择准确率大幅提升;采用所提方法的开环编码质量明显优于AVS-P10开环编码质量,与AVS-P10闭环编码质量相当。

数学学习是活动经验的积累与提升——北师大版五年级上册P10《找质数》的教学体会

数学的基本知识和基本技能只有通过一定的＂数学活动经验＂才能内化与成形,数学的思想方法也是在数学活动之中才能感悟到的。数学的基础知识、基本技能、基本思想及基本活动经验是一个有机的整体,是互相联系、互相促进的,它们就像一棵树,数学活动经验就像树根,在土壤中吸取成长所需的养分;数学思想就像树干,主要是支撑树冠,给树叶输送水分和养分;基础知识及基本技能就像树冠,主要是完成光合作用,为树木提供养分的机构,促进树木成长。“根深”的数学教学才能更好地提高学生的数学素养。下面以《找质数》的教学为例，谈谈我的做法。