当归多糖对衰老模型小鼠抗氧化作用及p16蛋白表达水平的影响

目的:观察当归多糖对衰老模型小鼠脑组织p16蛋白表达及不同组织中单胺氧化酶(MAO)、过氧化氢酶(CAT)活性的影响,探讨当归多糖治疗衰老的作用机制。方法:将昆明种小鼠60只随机分为空白对照组、模型对照组、脑复康组和当归多糖高、中、低剂量组,每组10只;腹腔联合注射D-半乳糖和亚硝酸钠(NaNO2)建立衰老小鼠模型;脑复康组灌胃脑复康(200μg/g),当归多糖低、中、高剂量组灌胃当归多糖(依次为100,200,400μg/g),空白对照组和模型对照组灌胃等体积的生理盐水,连续8周;眼球采血处死小鼠,采用ELISA法检测脑组织p16蛋白的含量,比色分析法测定脑、肝、肾组织MAO活性及肝、肾组织CAT活性。结果:与空白对照组对比,模型对照组小鼠p16蛋白的表达升高,MAO活性升高,CAT活性降低,差别有统计学意义(P<0.01);当归多糖各剂量组小鼠脑组织p16蛋白表达减少、MAO活性降低,肝组织CAT活性升高,肾组织MAO活性降低、CAT活性升高,与模型对照组对比,差别有统计学意义(P<0.01或P<0.05);而与脑复康组对比,当归多糖各剂量组的上述指标均无统计学意义(P>0.05)。结论:当归多糖可以降低衰老小鼠脑组织p16蛋白的表达,降低脑及肾组织MAO的活性,增强肝组织和肾组织CAT的活性,其机制可能是通过抑制衰老细胞的增殖而起到延缓衰老的作用。

儿童急性淋巴细胞白血病p16蛋白表达及DNA含量的临床研究

目的:探讨儿童急性淋巴细胞白血病p16蛋白表达及DNA含量的临床意义。方法:急性淋巴细胞白血病患儿58例作为观察组,健康儿童58例作为对照组,采用SP免疫组化法检测骨髓液中p16蛋白的表达水平;流式细胞术检测骨髓中白血病细胞DNA的含量,比较两组研究对象的差异。结果:观察组患儿p16阳性表达率为37.93%,明显低于对照组的100.00%(P<0.05);观察组患儿p16阳性表达率与年龄、性别无明显关系(P>0.05),但肝肿大<4 cm患儿的p16阳性表达率明显高于≥4 cm的患儿(P<0.05),高白细胞计数与高危急性淋巴细胞白血病(HR-ALL)患儿的p16阳性表达率明显高于低白细胞计数与标危急性淋巴细胞白血病(SR-ALL)患儿(P<0.05)。在观察组p16蛋白阴性表达患儿中DNA异倍体发生率(66.67%)明显高于阳性表达患儿中DNA异倍体发生率(40.90%,P<0.05)。结论:p16蛋白在急性淋巴细胞白血病患儿的发病过程中起到重要作用,p16蛋白缺失可能与急性淋巴细胞白血病复发相关,临床高危因素与p16阴性表达者DNA异倍体发生率升高具有相关性。

p16蛋白表达与喉癌临床病理关系的研究

目的探讨p16蛋白表达与喉鳞状细胞癌的临床病理关系。方法应用免疫组化SP法检测60例喉鳞癌组织中p16的蛋白表达情况。结果p16蛋白在喉鳞癌组织中的阳性表达率明显低于正常喉黏膜组织(P<0.05)。随着临床分期的进展及组织学分化程度的降低,p16蛋白表达进一步降低。有颈淋巴结转移的喉癌组织p16蛋白阳性表达低于无转移的喉癌组织。结论检测p16蛋白表达状况对喉癌的早期诊断和预后评估有临床参考价值。

P16蛋白表达与胃癌浸润转移关系的研究

采用链霉素抗生素蛋白—过氧化物酶连接法（Ｓ—Ｐ法），研究不同浸润深度胃癌及淋巴结转移性胃癌组织中Ｐ１６蛋白的表达。结果显示，Ｐ１６蛋白阳性表达率，浸润浅肌层胃癌为４８．００％，浸润深肌层及全层胃癌为４７．２２％，差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５）；３０例原发及淋巴结转移性胃癌的配对标本中，原发癌Ｐ１６蛋白表达阳性率为４６．６７％，转移癌为１６．６７％，差异有显著性意义（Ｐ＜０．０５）。结果提示：Ｐ１６蛋白表达缺失可能与胃癌转移有关。

胃癌及癌前病变中P16蛋白表达的研究

采用链霉菌抗生物素蛋白—过氧化物酶连接法（Ｓ－Ｐ法），研究Ｐ１６蛋白在胃癌和癌前病变（不典型增生、慢性萎缩性胃炎及慢性消化性胃溃疡）中的表达。结果显示，Ｐ１６蛋白阳性表达：胃癌４７．５４％（５８／１２２），癌前病变９０．００％（７２／８０），正常胃粘膜９６．２５％（７７／８０），高分化腺癌３７．９３％（１１／２９），低分化腺癌５１．２２％（２１／４１），未分化癌５７．６９％（１５／２６），印戒细胞癌６２．５０％（１０／１６），粘液腺癌１０．００％（１／１０）。经统计学处理，胃癌组与正常对照组及癌前病变组间的差异均有显著性意义（Ｐ＜０．０５）；粘液腺癌与低分化腺癌、未分化腺癌及印戒细胞癌之间的差异也均有显著性意义（Ｐ＜０．０５）。

补肾活血方对老年大鼠心脏自由基代谢及p16蛋白表达的影响

目的观察补肾活血方对老年大鼠心脏自由基代谢和p16蛋白表达的影响,探讨其对衰老大鼠心脏的保护作用机制。方法 100只大鼠随机分为青年对照组、老年对照组和补肾活血方高、中、低剂量组,每组20只。各给药组给予相应药物灌胃,每日1次,连续16周。末次给药后1 h,将大鼠麻醉后取血清和心脏。测定血清和心肌组织一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量和过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性;免疫组化检测心肌组织β-半乳糖苷酶和p16蛋白表达。结果与老年对照组比较,补肾活血方高剂量组大鼠血清NO含量和CAT、SOD活性显著升高(P<0.05),补肾活血方各剂量组MDA含量显著降低(P<0.01);补肾活血方高剂量组大鼠心肌组织NO含量和SOD活性显著升高,MDA含量显著降低(P<0.05),补肾活血方各剂量组CAT活性显著升高(P<0.05,P<0.01);补肾活血方各剂量组心肌组织β-半乳糖苷酶和p16蛋白表达降低。结论补肾活血方通过抗氧化损伤和抑制抑癌基因p16表达,发挥抑制老年大鼠心肌老化的作用。

肺腺癌组织P16蛋白表达与其预后关系的研究

P16基因又称MTS1（multiple tumor suppressor 1）或CDKN2基因,定位于人染色体9p21,编码16000的蛋白产物,是1994年4月美国盐湖城的Kamb与圣地亚哥的Noborl首先报道的一种新型抑癌基因,是至今为止发现的第一个直接控制细胞增殖周期的细胞固有蛋白,是在细胞周期中起重要作用的CDK4（cyclin-dependent kinase 4）抑制物,它的缺失可增加CDK4的活性,导致Rb蛋白磷酸化,促进细胞从G1期向S期转变和细胞增殖与NSCLC和其它肿瘤发生、发展密切相关。因此。

P16蛋白表达与胃癌临床病理学特征的关系

目的 :研究P1 6蛋白在胃癌中的表达 ,探讨P1 6基因在胃癌发展中的作用。方法 :采用链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶连接法 (SP法 ) ,检测 46例胃癌组织中P1 6蛋白的表达。结果 :P1 6基因在胃癌中的阳性表达率为 1 7.4% ,且为胞浆表达。P1 6基因表达缺失多见于伴有淋巴结转移和恶性程度高的胃癌。结论 :P1 6基因可能在胃癌发展中起一定作用 ,P1 6基因表达可作为胃癌预后判断指标。

鼻咽癌及癌前病变组织中CDK4和p16蛋白表达的研究

目的：观察CDK4和p16蛋白在鼻咽癌组织中的表达状态，探讨其与鼻咽癌的发生、发展关系。方法：应用S—P免疫组化法检测CDK4和p16蛋白在80例鼻咽癌、30例鼻咽粘膜慢性炎组织中的表达。结果：80例鼻咽癌中CDK4和p16蛋白表达率分别为78．75％和20．00％。CDK4蛋白表达率在鼻咽癌与中～重度异型性增生／化生粘膜之间差异无显著性，二者分别与鼻咽粘膜慢性炎组织比较差异均有显著性（P<0．01)。角化性鳞癌p16蛋白的表达率明显高于分化型非角化性癌和未分化癌(P<0．01)。37例淋巴结转移阳性组中p16蛋白表达率低于23例阴性组（P<0．01)，而CDK4蛋白表达率高于阴性组（P<0．05)。结论：CDK4蛋白的过度表达与p16蛋白的低表达可能涉及鼻咽癌的发生、发展过程，CDK4基因的扩增或过表达可能是鼻咽粘膜上皮细胞癌变的早期事件。p16蛋白的表达缺失与鼻咽癌的转移、组织学分型有关。CDK4蛋白的过度表达与鼻咽癌的转移有关。

肺癌的发生与P16蛋白表达的关系

P16抑癌基因是一种肿瘤抑制因子，其所编码的蛋白是周期素依赖激酶抑制蛋白的一种，在细胞周期进程中起负调控作用。P16蛋白缺失或异常可导致周期依赖激酶4（CDK4）活性上升，引起细胞增殖失控，导致Rb蛋白磷酸化，促进细胞从G1期向S期转变和细胞增殖。

柴达木枸杞多糖对UVB诱导HaCaT细胞增殖活性及p16蛋白表达的影响

目的观察柴达木枸杞多糖对中波紫外线(UVB)辐射引起的HaCaT细胞活性及对p16蛋白表达水平的影响,以探讨其抗光老化作用与机制。方法将HaCaT细胞随机分为三组,对照组、UVB组、UVB+枸杞多糖组,以MTS法检测各组细胞增殖活性,以Western blot法检测细胞p16蛋白的表达水平。结果 UVB照射HaCaT细胞后细胞增殖活性下降,p16蛋白表达水平增高(P<0.05)。与UVB照射组相比,枸杞多糖干预后照射组细胞活性上升,p16蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论柴达木枸杞多糖有抗光老化作用,其机制可能是通过抑制UVB引起的HaCaT细胞增殖活性下降以及p16蛋白表达增加实现。

p16蛋白表达及HPV检测在宫颈上皮内瘤变中的诊断意义

目的探讨p16和HPV检测在评估宫颈低度鳞状上皮内瘤变和高度鳞状上皮内瘤变分型中的价值。方法对宫颈低度鳞状上皮内瘤变和高度鳞状上皮内瘤变患者同时采用第2代杂交捕获(HC2)试验系统检测高危型HPV感染及检测p16蛋白的表达,比较宫颈低度鳞状上皮内瘤变和高度鳞状上皮内瘤变HPV-DNA负荷量和p16蛋白表达的差异。结果宫颈低度鳞状上皮内瘤变中p16表达率为36.67%(11/30),高度鳞状上皮内瘤变中表达率为100%(40/40),二者比较差异有显著性(P<0.01)。30例低度鳞状上皮内瘤变中HC2检测阳性率为63.33%(19/30),高度鳞状上皮内瘤变中为97.5%(39/40),二者比较差异有显著性(P<0.01)。HPV感染与p16表达呈正相关。结论宫颈上皮内瘤变中p16的强阳性染色和全层染色支持高度鳞状上皮内瘤变的诊断,高度鳞状上皮内瘤变与高危型HPV感染有关,对于宫颈高度上皮内瘤变的诊断,最好HPV与p16联合应用,以提高其病理诊断准确性。

急性淋巴细胞白血病复发与p16蛋白表达缺失之间关系的临床研究

目的探讨急性淋巴细胞白血病的复发与患者体内p16蛋白表达缺失值之间的关系及其临床意义。方法收集2004年4月至2010年8月在沈阳市第四人民医院血液科门诊就诊、住院的急性淋巴细胞白血病(ALL)患者40例;同期单纯性贫血患者40例(作为对照组)的临床资料,分别采集他们的少许骨髓样本,分离骨髓液中的淋巴细胞,应用APAAP法、免疫组化检测方法,来检测受检淋巴细胞内的棕色颗粒的多少,以确定其p16蛋白表达是否缺失。结果对照组和ALL不同病期患者p16蛋白表达(缺失)值不同,确诊为单纯贫血的患者p16蛋白表达值,均为阳性表达;急性淋巴细胞白血病(ALL)不同病期患者组的p16蛋白表达值,均为阴性表达;动态检测15例ALL患者的p16蛋白缺失值,发现ALL复发期的人体骨髓p16蛋白表达缺失值显著低于ALL完全缓解期的该值。结论 p16蛋白表达缺失在ALL复发机制中起着重要作用,动态检测完全缓解后患者的p16蛋白表达缺失值,能对预测、确诊其ALL是否出现早期复发提供依据。

P16蛋白表达与胃癌浸润转移的关系

目的 :研究抑癌基因P1 6在胃癌中的表达 ,探讨P1 6蛋白在胃癌浸润转移中的作用。方法 :采用链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶连接法 (SP法 ) ,检测 46例胃癌组织中P1 6蛋白的表达。结果 :P1 6表达与性别、年龄、浸润深度无显著意义 (P >0 .0 5) ;伴淋巴结转移胃癌P1 6蛋白表达阳性率为 6.9% ,无淋巴结转移胃癌为 35.3% ,差异有显著意义 (P <0 .0 5)。结论 :P1 6蛋白表达缺失可能与胃癌转移有关。

子宫颈病变中P16蛋白表达及其与HPV16／18感染的关联性评价

宫颈癌严重威胁女性健康，该类疾病患者越来越多。普遍认为高危型人类乳头状瘤病毒（HPV16/18）与宫颈癌变持续感染关系密切，而P16的基因产物作为细胞周期依赖性激酶抑制物参与HPV感染过程。我们研究了P16蛋白在子宫颈鳞癌以及子宫颈上皮内肿瘤中的表达情况以及其与HPV16/18感染之间的关系，现将研究结果阐述如下。

胰腺癌中p16基因甲基化改变及其蛋白表达分析

目的探讨胰腺癌与癌旁组织中p16基因启动子区异常甲基化的改变及其蛋白表达的特点,以及其与胰腺癌发生发展的关系。方法分别采用免疫组化SP法及甲基化特异PCR(MSP)检测46例人胰腺癌和癌旁组织中p16基因表达及其甲基化的水平,并结合临床资料进行分析。结果胰腺癌中p16蛋白表达率为41.3%(19/46),而癌旁组织表达率为95.7%(44/46),两者有差异显著性(P<0.01)。p16蛋白阳性的19例胰腺癌标本中均未检出基因甲基化;p16蛋白缺失的27例标本中有18例检出基因甲基化,甲基化率为39.1%。p16基因甲基化与蛋白缺失有明显关系(P<0.05)。p16基因表达及其启动子区甲基化的发生率与胰腺癌的大小,患者性别?年龄的差异无显著意义(P>0.05),但与组织分化程度?淋巴结转移?PTNM分期有显著意义(P<0.05)。结论p16基因启动子的异常甲基化可影响p16蛋白的表达,它们与胰腺癌的发生发展有关;p16甲基化和蛋白表达可能成为胰腺癌诊断及预后的候选标志物之一。

不同类型胃息肉及胃癌中环氧化酶-2和P16蛋白的表达及相关性

目的:研究不同类型胃息肉及胃癌中COX-2(环氧化酶-2)和P16蛋白的表达,探讨COX-2、P16蛋白在胃癌发生、发展中的作用及其相互关系.方法:采用S-P免疫组织化学方法检测10例正常胃黏膜,30例非肿瘤性胃息肉(炎性及增生性胃息肉),20例肿瘤性胃息肉(腺瘤性胃息肉)和40例胃癌组织中,COX-2和P16蛋白的表达情况.结果:COX-2表达,在正常胃黏膜、非肿瘤性胃息肉、肿瘤性胃息肉及胃癌中分别为10%,13.33%,45%,75%,胃癌组阳性率与其他三组差异有显著性(P<0.05);P16蛋白表达,在正常胃黏膜、非肿瘤性胃息肉、肿瘤性胃息肉及胃癌中分别为90%,86.67%,60%,32.5%,胃癌组阳性率与其他三组差异有显著性(P<0.05).COX-2、P16蛋白表达与胃癌分化程度、淋巴结转移、呈一定相关性.COX-2与P16蛋白的表达呈负性相关(P<0.05).结论:COX-2、P16蛋白在胃癌发生、发展中起一定作用,可作为判定胃癌生物学行为的有用指标.

胆管癌Cyclin D1、p16蛋白表达的定量分析及临床意义

我们应用流式细胞技术对胆管癌及正常胆管组织中Cyclin D1、p16的蛋白表达进行定量分析。探讨它们在胆管癌发生、发展、浸润转移等生物学行为方面的作用以及它们之间的关系，试图提高胆管癌的临床诊治水平。