P2X7受体抑制剂腹腔注射对红藻氨酸诱导小鼠癫痫发作及海马损伤的影响

目的观察P2X7受体(P2X7R)抑制剂对红藻氨酸诱导小鼠癫痫发作及海马损伤的影响。方法雄性C57BL/6小鼠96只,随机分为正常组36只、模型组36只、P2X7R抑制剂组24只。P2X7R抑制剂组于造模前30 min腹腔注射P2X7R特异性抑制剂A438079,模型组、正常组在同时点注射等量生理盐水。模型组、P2X7R抑制剂组腹腔注射红藻氨酸建立癫痫模型,正常组腹腔注射等量生理盐水。采用脑电图观察小鼠癫痫发作情况,Western blotting法检测小鼠海马组织P2X7R蛋白,尼氏染色观察小鼠海马CA1区损伤情况。采用旷场实验观察正常组、模型组小鼠焦虑样行为,若模型组存在焦虑样行为,则进一步将模型组分为焦虑对照亚组及P2X7R抑制亚组,P2X7R抑制亚组每天腹腔注射A438079,焦虑对照亚组每天腹腔注射等量生理盐水,持续14 d后再次进行旷场实验。采用水迷宫实验观察小鼠认知功能,若模型组存在认知功能损害,则进一步将模型组分为认知功能对照亚组及P2X7R抑制亚组,处理方式同上,持续14 d后再次进行水迷宫实验。结果脑电图记录结果显示,正常组未出现癫痫脑电图波形;模型组出现癫痫持续状态,脑电图表现出强放电功率及高振幅;P2X7R抑制剂组出现癫痫发作,但脑电图放电功率及振幅均较模型组减轻;脑电图总功率及平均振幅模型组>P2X7R抑制剂组>正常组(P均<0.05)。模型组海马组织P2X7R蛋白表达高于正常组,P2X7R抑制剂组海马组织P2X7R蛋白表达低于模型组(P均<0.05)。尼氏染色结果显示,对照组海马CA1区结构完整,存活神经细胞数多,尼氏体较大且较多;模型组海马CA1区结构完整性被破坏,神经细胞数量少,尼氏体数量减少;P2X7R抑制剂组海马CA1区结构、神经细胞及尼氏体数量均较模型组有所改善。旷场实验结果显示,模型组进入中心区域次数及中心区域停留时间均少于正常组,焦虑对照亚组进入中心区域次数及中心区域停留时间均少于P2X7R抑制亚组(P均<0.05)。水迷宫实验结果显示,模型组、正常组穿越平台次数及目标象限停留时间比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论P2X7R抑制剂可减轻红藻氨酸诱导小鼠癫痫发作的强度和频率,改善癫痫所致海马损伤,且可缓解癫痫小鼠的焦虑样行为。

P2X7受体在心血管疾病中的研究进展

P2X7受体,作为嘌呤受体P2X家族的一员,主要在免疫细胞、心肌平滑肌细胞和内皮细胞中表达。其天然配体ATP在组织缺氧或炎症状态下释放量显著增加。P2X7受体与ATP结合后可激活核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)依赖炎症小体,从而加剧炎症反应。近期研究揭示了P2X7受体在动脉粥样硬化、高血压、心肌梗死和肺动脉高压等心血管疾病中的病理作用。本文旨在综述P2X7受体的分子结构、分布、功能特性,及其在心血管疾病中的研究进展。

冬凌草甲素对海马CA1星形胶质细胞P2X7受体电流的影响

目的:探索冬凌草甲素是否对海马CA1星形胶质细胞P2X7受体电流有影响。方法:采用Autodock软件对冬凌草甲素与P2X7蛋白进行分子对接;采用全细胞膜片钳记录冬凌草甲素对海马CA1星形胶质细胞P2X7受体激动剂Bz-ATP激发电流的影响。结果:冬凌草甲素与P2X7蛋白的结合能为-5.86 kcal/mol,可与P2X7蛋白的Lys592残基形成氢键,与Tyr550残基形成疏水作用;Bz-ATP能激发海马CA1区星形胶质细胞的电流反应,且1000μmol/L Bz-ATP激发的电流反应较强;10μmol/L冬凌草甲素溶液孵育1 h后,海马CA1区星形胶质细胞对谷氨酸能受体激动剂NMDA和AMPA溶液的电流反应无明显变化;对Bz-ATP的电流反应降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:冬凌草甲素可与P2X7蛋白对接形成稳定的复合物,具有较好的亲和力;冬凌草甲素可抑制海马CA1星形胶质细胞P2X7受体电流。

P2X7受体在癌痛中作用的研究进展

P2X7受体是一种ATP门控离子通道,在肿瘤条件下,P2X7受体的激活触发了促炎细胞因子的释放,刺激了伤害性神经元的兴奋,从而加剧了疼痛的传递。在临床前癌疼痛模型中,具有作为癌疼痛管理的新治疗靶点的潜力。

P2X7受体在肿瘤发生发展中的作用研究进展

P2X7受体(P2X7 Purinergic Receptor,P2X7R)是一种非选择性三聚体阳离子通道,受胞外ATP激活而开放。其具有对三磷酸腺苷(Adenosine Triphosphate,ATP)亲和力较低、不易脱敏及大孔开放等特征。P2X7R广泛表达于肿瘤细胞和免疫细胞中,被认为与肿瘤密切相关,是潜在的抗肿瘤药物靶点。多数观点认为P2X7R在肿瘤中的表达上调,其抑制剂可以抑制肿瘤发生发展,但由于P2X7R对肿瘤微环境(Tumor Microenvironment,TME)尤其是TME中的免疫细胞会产生复杂影响,导致P2X7R抑制剂临床研究进展缓慢。本文主要从P2X7R对肿瘤以及TME产生的影响入手,总结了近年来的研究进展。

不同诱导因子对人外周血单个核细胞P2X7受体表达的作用(英文)

ATP激活P2X7受体可产生一系列的白细胞功能反应,因此P2X7受体的表达调控引起我们的兴趣。然而P2X7受体在正常人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)、单核细胞中的表达调控机制尚未阐明。本文用半定量RT-PCR方法检测多种细胞因子、细菌抗原、丝裂原对P2X7受体表达的诱导作用,探索P2X7受体的诱导表达模式。结果表明,单个核细胞和单核细胞可检出P2X7受体的表达;白细胞介素2、4、6(interleukin-2、-4、-6,IL-2、IL-4、IL- 6)、肿瘤坏死因子α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)等细胞因子和金黄色葡萄球菌Cowan Ⅰ株(Staphylococcus aureus Cowan strain I,SAC)、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)能上调PBMC的P2X7受体表达,而γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimu- lating factor,M-CSF)和植物血凝素(phytohemagglutinin-M,PHA-M)等则没有作用;LPS和M-CSF可以提高单核细胞的P2X7受体表达,IFN-γ、TNF-α、GM-CSF作用较弱,但是这些因子的预处理并不能增强LPS对P2X7受体表达的诱导。炎症因子促进P2X7受体的表达,提示P2X7受体可能在对抗细菌感染的免疫反应中起一定作用,这有待于进一步研究。

P2X7受体与基因转录的关系

核酸受体P2X7在一些炎症、骨和神经细胞中表达，被组织损伤、炎症和感染部位释放的ATP激活后引起许多细胞反应如钙离子内流、MAPK活化、炎症介质释放和凋亡，是炎症和神经系统疾病的一个有希望的治疗靶点和潜在的生物标志物。

高压氧预适应的小鼠缺血脑保护作用及对P2X7受体表达的影响

目的研究高压氧预适应(hyperbaric oxygen preconditioning,HBOP)对小鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebralartery occlusion,MCAO)的保护作用及对其脑内P2X7受体(P2X7R)表达的影响。方法将72只雄性C57BL/6小鼠分为:假手术组(sham)、高压氧预适应假手术组(HBOP+sham)、单纯MCAO组(MCAO)、高压氧预适应MCAO组(HBOP+MCAO)。通过线栓法建立小鼠MCAO模型,术后24 h采用Longa法对小鼠进行神经功能学评分,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法判断脑梗死情况,TUNEL法观察神经细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法观察P2X7受体mRNA的表达。结果 MCAO建模后24 h,HBOP+MCAO组神经功能学评分明显低于MCAO组(2.33±0.44 vs 2.89±0.59,P<0.05);HBOP+MCAO组脑梗死范围明显小于MCAO组[(44.08±8.46)%vs(63.00±5.25)%,P<0.05];HBOP+MCAO组凋亡阳性细胞数和P2X7R mRNA表达水平也明显低于MCAO组(P<0.05,P<0.01)。结论高压氧预适应可以减轻实验性MCAO小鼠的神经功能学损害,缩小梗死灶体积,减少细胞凋亡,具有明确的脑保护作用,其保护作用可能与延缓MCAO后P2X7R的表达升高有关。

原发性干燥综合征外周血单个核细胞P2X7受体表达及其与焦虑、抑郁的相关性

目的探讨原发性干燥综合征(primary Sjgren’s syndrome,pSS)患者外周血单个核细胞(PBMC)表面P2X7受体表达情况及其与焦虑、抑郁的相关性。方法用汉密尔顿焦虑、抑郁量表对31例pSS患者(pSS组)进行心理评估,分离其PBMC,在有或无ATP刺激后用流式细胞术检测CD14+PBMC及CD14-PBMC表面P2X7受体的表达水平,并用酶联免疫吸附试验测定ATP刺激前后白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6水平。另外,分别设有19例类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者(RA组)及18例单纯焦虑、抑郁障碍患者(焦虑抑郁组)作为阳性对照,20例健康人(健康组)为阴性对照。结果所有4组受试者PBMC表面均有P2X7受体表达。ATP刺激较未刺激,CD14+PBMC(单核细胞)表面P2X7受体表达仅在pSS组[(5.6%3±2.48%)vs.(3.98%±1.68%),t=3.647,P=0.001]显著增高,而在CD14-PBMC(主要为淋巴细胞)表面其表达在pSS组[(16.92%±9.25%)vs.(10.06%±4.35%),t=4.908,P<0.001]及焦虑抑郁组[(12.68%±8.15%)vs.(8.07%±5.05%),t=3.412,P=0.003]均显著增高。ATP刺激后,pSS组CD14+PBMC表面P2X7受体表达显著高于RA组[(5.63%±2.48%)vs.(4.15%±2.20%),P=0.044]、焦虑、抑郁组[(5.63%±2.48%)vs.(3.35%±1.80%),P=0.004]及健康组[(5.63%±2.48%)vs.(3.25%±2.05%),P=0.002]。ATP刺激后,pSS患者PBMC上清中IL-1β水平与刺激后外周血CD14+PBMC表面P2X7受体表达呈显著正相关(r=0.447,P=0.025)。pSS组存在焦虑的患者占45.2%(1431),存在抑郁的患者占32.3%(1031)。ATP刺激后,CD14-PBMC表面P2X7受体表达与pSS组、焦虑抑郁组焦虑评分(r=0.344,P=0.030)及抑郁评分(r=0.319,P=0.045)呈显著正相关。结论 pSS患者PBMC表面P2X7受体高表达,可能与pSS的发病机制及其合并焦虑、抑郁相关。

P2X7受体蛋白在胰腺癌中的表达及其对侵袭迁移影响的实验研究

目的:探讨P2X7受体蛋白在胰腺癌中的表达及其与临床病理之间的关系,探讨P2X7受体蛋白表达对胰腺癌侵袭迁移的影响及机制。方法:免疫组织化学法分析人胰腺癌组织及癌旁组织中P2X7受体蛋白的表达情况,分析其与胰腺癌临床病理特点之间的关系;选取胰腺癌细胞系PANC-1细胞,分别经P2X7受体激动剂Bz ATP(200μmol/L)及抑制剂A740003(20μmol/L)处理后,Transwell实验、细胞划痕实验检测PANC-1的侵袭迁移能力变化,Western blot实验检测侵袭及迁移相关蛋白MMP2、MMP9的表达变化。结果:P2X7受体蛋白在胰腺癌组织中高表达,在癌旁组织中低表达;且P2X7受体蛋白表达水平与胰腺癌的临床肿瘤分化程度及淋巴结转移呈显著性相关(P<0.05)。P2X7受体蛋白可通过上调MMP2、MMP9蛋白的表达促进胰腺癌细胞的侵袭迁移。结论:P2X7受体蛋白在胰腺癌中高表达并参与调控胰腺癌的侵袭及迁移,可能成为胰腺癌治疗的潜在分子靶点。

P2X7受体与肿瘤发生发展关系的研究进展

P2X7受体作为嘌呤类受体家族中的一个重要成员,能够被细胞外ATP激活,从而参与细胞信号转导、细胞因子的分泌,介导细胞的生长与凋亡等细胞生物学功能的调控。近些年研究表明,P2X7受体的异常表达与多种肿瘤的发生发展密切相关,有望成为肿瘤靶向治疗的新型生物学标志物。本文结合国内外最新报导,对P2X7受体在肿瘤中的异常表达及相关致癌机制研究作一综述。

P2X7受体与炎性细胞因子

P2X7受体是嘌呤受体中功能独特的一个亚型,为ATP控制的离子通道,在单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞中高表达,被ATP激活后导致K+外流和Ca2+内流、非选择性膜孔形成,启动一系列信号途径如炎症小体NALP3的活化,丝裂原蛋白激酶途径激活NF-κB增强炎性细胞因子转录,ROS和氮介质的产生,介导IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α、MIP-2、CCL2、HMGB1等多种炎性细胞因子的释放,参与炎症的发生发展,与真菌感染及阿尔茨海默病、类风湿性关节炎、哮喘等炎症性疾病密切相关。

高压氧和低压缺氧预处理对大鼠脊髓损伤后P2X7受体表达的影响

目的探讨高压氧和低压缺氧预处理对成年大鼠脊髓损伤后不同时期P2X7受体的表达,进一步阐明高压氧和低压缺氧预处理对脊髓损伤神经保护的机制。方法雌性成年SD大鼠60只,随机平均分为高压氧预处理组(HBOP)、低压缺氧预处理(HHP)组和对照组组。采用改良Allen法制作模型,分别于伤后12h、1d、3d和7d取出损伤段脊髓,用RT-PCR和Western blotting方法检测其中P2X7受体mRNA和蛋白的表达。运动功能评分按文献报告的方法进行测定。结果HHP组和HBOP组在1～7d各时间段运动功能评分均高于对照组(P<0.05)。HHP组在伤后12h、1d和3dP2X7受体表达明显降低,HBOP组在伤后12h、1d和3d表达明显增加,12h最为明显,均与其他各组有显著性差异(P<0.05);各组伤后7d无显著性差异(P>0.05)。结论HHP和HBOP均对脊髓损伤有明显的保护作用,但HHP是通过抑制P2X7受体的表达来实现对中枢神经系统的保护作用,而HBOP对中枢神经系统的保护作用则不是通过该途径。

P2X7受体介导异丙酚对缺氧海马突触前膜谷氨酸Ca^(2+)依赖性释放的抑制作用

目的观察嘌呤P2X7受体激动剂和拮抗剂以及异丙酚对大鼠缺氧海马突触前膜谷氨酸释放的影响及P2X7受体是否介导异丙酚的作用。方法选用SD♂大鼠,制备突触体,置入无糖并充以95%N2/5%CO2的人工脑脊液(aCSF)中进行缺氧实验。向无糖aCSF中加入P2X7受体特异性拮抗剂BBG(终浓度1μmol·L-1)或P2X7受体特异性激动剂BZATP(终浓度100μmol·L-1)。于缺氧前、缺氧20min及40min时测定孵育液中谷氨酸浓度,谷氨酸Ca2+非依赖性释放试验中将Ca2+、DHK(谷氨酸转运体抑制剂)从aCSF中去除。观察异丙酚对谷氨酸Ca2+依赖性释放的影响时,分别向无糖aCSF中加入1～100μmol·L-1的异丙酚,然后进行缺氧40min,测定孵育液中谷氨酸浓度并计算异丙酚的半效抑制浓度(IC50)。观察P2X7受体在异丙酚抑制效应中的作用时,施加异丙酚(2倍IC50水平)、异丙酚和BBG(终浓度1μmol·L-1)或异丙酚和BZATP(终浓度100μmol·L-1)。缺氧40min后测定孵育液中谷氨酸浓度。结果缺氧不同时点海马突触体谷氨酸Ca2+依赖性释放增加(P<0.01),BBG可完全抑制谷氨酸释放(P<0.01),BZATP则进一步使谷氨酸释放增加(P<0.01)。谷氨酸Ca2+非依赖性释放在缺氧各时点无变化。异丙酚可浓度依赖性的抑制谷氨酸Ca2+依赖性释放,IC50为(27.4±5.2)μmol·L-1。55μmol·L-1(2倍IC50)异丙酚与BBG或与BZATP共同作用下的谷氨酸Ca2+依赖性释放水平与单独应用异丙酚比较差异无显著性(P>0.05)。结论缺氧状态下,P2X7受体介导海马突触前膜谷氨酸Ca2+依赖性释放,异丙酚通过抑制P2X7受体而呈浓度依赖性的抑制谷氨酸Ca2+依赖性释放。

嘌呤P2X7受体介导对氯苯丙酸致大鼠前额皮质蛋白激酶的变化

目的探讨脑内5-羟色胺(5-HT)含量下降后大鼠前额皮质受体后信号P38 MAPK、PKC和Ca MKⅡ蛋白和基因表达的变化及P2X7受体在其中的作用。方法大鼠分为正常组、对照组、对氯苯丙氨酸(PCPA)组、P2X7受体拮抗剂及激动剂干预组。腹腔注射PCPA使脑内5-HT合成下降,脑室注射P2X7受体拮抗剂和激动剂,采用免疫组织化学、Western blot和实时荧光定量PCR检测前额皮质P38 MAPK、PKC和Ca MKⅡ蛋白和m RNA的表达。结果与对照组比较,PCPA组的P38 MAPK蛋白和m RNA表达增加,而PKC和Ca MKⅡ的蛋白和m RNA表达水平下降。与PCPA组比较,P2X7受体拮抗剂能使P38 MAPK蛋白和基因m RNA表达下降,PKC和Ca MKⅡ的蛋白表达水平升高及m RNA表达水平上升;而P2X7受体激动剂引起P38 MAPK蛋白和m RNA表达水平升高,PKC和Ca MKⅡ的蛋白表达下降和基因m RNA表达水平下降。结论P2X7受体介导了脑内5-HT下降所致的前额皮质受体后信号P38 MAPK、PKC和Ca MKⅡ蛋白和基因表达的变化。

P2X7受体在OPCs缺氧缺血性损伤中作用的初步研究

目的了解P2X7受体在离体培养的少突胶质前体细胞(OPCs)缺氧缺血性损伤中的作用。方法建立离体OPCs培养模型,通过乳酸脱氢酶(LDH)释放百分比评估细胞死亡;Western blot分析缺氧缺血前后OPCs P2X7受体表达变化。结果 (1)缺氧缺糖(OGD)后2 h,近40%OPCs死亡。OGD前预先给予P2X7受体拮抗剂BBG起到部分保护作用;OGD条件下,P2X7受体激动剂BzATP加重OPCs缺氧缺血性损伤,并且这种增强的毒性作用不能被BBG拮抗。(2)Western blot显示,OGD后2 h,P2X7受体蛋白表达迅速下调。结论 P2X7受体可能参与了OPCs缺氧缺血性损伤过程。

P2X7受体在炎症反应中的调节作用

P2X7受体是对二价阳离子有较强选择性的ATP门控的离子通道,参与细胞信号转导,介导细胞毒性作用,活化并诱导宿主细胞凋亡。近几年研究表明,P2X7受体参与炎症反应中细胞因子的释放,特别是P2X7受体活化可促进单核细胞的血管内皮生长因子的释放,该释放依赖钙离子内流与活性氧的产生。本文综述了P2X7受体与炎症细胞及血管内皮生长因子分子机制的相关研究。

鞘内注射P2X7受体拮抗剂BBG对大鼠行为学和脊髓PLA2表达的影响

目的：探讨鞘内注射P2X7受体拮抗剂考马斯亮蓝（BBG）在福尔马林模型大鼠中的镇痛作用及对脊髓磷脂酶A2（PLA2）表达的影响。方法：雄性Wistar大鼠鞘内置管成功后鞘内注射P2X7受体拮抗剂考马斯亮蓝（BBG）后所有的大鼠左侧后肢爪掌背侧皮下注射福尔马林（5%,50μl）,观察大鼠在第一相（0~10 min）和第二相（10～60 min）的疼痛行为学比,变化（自发缩足次数）。免疫组织化学方法检测脊髓背角PLA2蛋白的表达与变化。结果：各组间大鼠第一相相比自发缩足次数没有明显的差异;第二相与对照组相比鞘内1μg、5μg及腹腔10μg BBG注射组相比,鞘内10μg BBG注射组大鼠的疼痛行为学明显减少（自发缩足次数,P〈0.05）。与此同时,鞘内10μg BBG注射组大鼠脊髓背角浅层内PLA_2免疫阳性产物的表达与其它组比较明显减少（P〈0.05）。结论：鞘内注射10μg BBG可减轻福尔马林诱导的炎性痛觉过敏,可能是通过抑制脊髓背角浅层PLA2的表达而发挥作用。

P2X7受体在宫颈癌组织中的表达及其与病理相关参数的关系研究

目的:探讨配体门控离子通道受体(P2X7)在宫颈癌组织中的表达及其与病理相关参数的关系。方法:收集2013年1月至2015年6月门诊因宫颈病变行宫颈活检、LEEP手术治疗的90例CIN患者(CIN组)以及73例宫颈癌患者(宫颈癌组)和112例子宫肌瘤全子宫切除术患者(正常子宫组)的宫颈组织石蜡标本。采用免疫组织化学法检测3组研究对象宫颈组织中P2X7受体表达差异,分析P2X7受体在宫颈癌组织中表达与其分期间的关系,探讨P2X7受体的表达强度与宫颈病变患者高危型HPV阳性CT值间关系及其与病理相关参数的关系。结果:宫颈癌组宫颈组织中P2X7受体阴性表达率90.41%最高,CIN组73.33%次之,子宫肌瘤全子宫切除术组4.46%最低,3组之间两两相较有统计学意义(P<0.05);P2X7受体在宫颈癌组织中表达阴性率Ⅱ期高于I期(P<0.05);随着P2X7受体表达强度增加,宫颈病变患者高危型HPV阳性CT值随之升高,不同强度之间两两相较有统计学意义(P<0.05),P2X7受体阴性表达患者宫颈癌病灶大小≥4cm所占百分比较阳性表达组明显高(P<0.05)。结论:P2X7受体在宫颈癌组织中阴性表达率较正常宫颈组织明显高,其在宫颈癌组织中表达与宫颈癌病理分期、高危型HPV阳性CT值及病理相关参数存在一定关联,对指导本病诊治提供重要参考价值。

结肠扩张刺激对肠易激综合征大鼠DCN核团及骶髓后角中P2X4及P2X7受体表达的影响

目的观察肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)致内脏高敏感化大鼠在结肠扩张刺激时大鼠腹直肌肌电变化,并观察骶髓后联合核(dorsal commissural nucleus,DCN)和脊髓后角中P2X4和P2X7受体表达的变化情况,为探讨IBS内脏敏化的神经机制提供理论依据。方法以旋毛虫感染大鼠建立IBS大鼠模型,并以正常大鼠作为对照,实验共分4组:正常大鼠无刺激组,正常大鼠结肠扩张刺激组,IBS大鼠无刺激组,IBS大鼠结肠扩张刺激组。采用免疫组织荧光化学方法,将P2X4和P2X7受体分别标记,观察其在骶髓后角及DCN核团上的表达变化,并同步测定大鼠腹直肌肌电变化。结果 IBS结肠刺激组大鼠腹直肌肌电变化、大鼠骶髓后角及DCN核团中的P2X4和P2X7受体表达较正常大鼠对照组及IBS未刺激组均显著增强。结论 P2X4和P2X7受体可能是IBS致内脏敏感性增高的重要因素。