PIN2蛋白在水稻根尖细胞中定位方法的优化

PIN2蛋白作为生长素外排蛋白,在植物根的向地性生长中起重要作用。免疫定位法是一种可以将蛋白在植物细胞中快速准确定位的方法。本研究利用改良的免疫荧光定位法,对PIN2蛋白在水稻根尖细胞中的定位进行了观察,并与前人的两种方法进行比较。结果表明,与已有的方案比较,改良免疫荧光定位法可使PIN2蛋白在水稻根尖细胞中的位置快速准确地被观察到,且简化了操作步骤,操作方便快速,可广泛应用于植物其他蛋白的定位研究。

PinX1在食管鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨Pin2/TRF1结合蛋白X1(PinX1)与食管癌发生发展及与临床病理特征的关系。方法采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和流式细胞术方法(FCM)检测50例原发性食管癌患者的癌组织及食管切缘正常黏膜(距离癌5 cm以上)中PinX1的表达。结果 PinX1mRNA和蛋白在食管癌组织中表达显著低于食管正常组织(P<0.01)。且在食管癌中的表达与癌细胞分化程度、浸润深度及淋巴结转移呈负相关(P<0.05),但与患者年龄、性别无关(P>0.05)。结论 PinX1作为一种潜在的抑癌基因,其表达下调可能参与了食管鳞状细胞癌的发生和发展,是判定癌分化程度、浸润转移和判定预后的分子标志物。

PinX1基因在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的分析Pin2/TRF1结合蛋白X1(Pin2/TRF1-interacting protein X1,PinX1)基因在非小细胞肺癌组织中表达,探讨PinX1基因在肺癌发生发展中的作用及其临床意义。方法对56例肺癌组织及癌旁正常组织应用半定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测其中的PinX1的mRNA表达水平,应用端粒重复序列扩增(telomeric repeat anplication protocol,TRAP)-酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测其中的端粒酶活性。结果 PinX1在不同病理类型的肺癌组织中表达无显著性差异,与临床分期和预后之间呈显著相关性,与端粒酶活性呈负相关。结论 PinX1的下调可能与肺癌的发生、发展过程中端粒酶激活有关。检测PinX1的表达水平对评价肺癌预后有重要的临床价值。

茉莉酸诱导侧根形成缺陷突变体asa1-1抑制子(soa)的鉴定与遗传分析

外源茉莉酸处理野生型拟南芥能够促进侧根的形成,而在asa1-1突变体中茉莉酸抑制侧根的形成,这与在该突变体背景下茉莉酸显著降低PIN2蛋白水平密切相关。为了进一步研究茉莉酸诱导PIN2蛋白水平下调的分子机制,文章采用正向遗传学的方法筛选asa1-1抑制子soa,期望获得茉莉酸处理后侧根发育恢复的突变体。通过筛选鉴定获得2个突变体:soa563和soa856。这2个突变体在10μmol/L茉莉酸甲酯处理条件下都能够恢复侧根发育,而且茉莉酸处理后PIN2蛋白水平降低的现象在soa563中被完全抑制,在soa856中被部分抑制。这些结果表明这两个突变基因可能影响了茉莉酸调控的PIN2蛋白水平下调途径,并且参于了茉莉酸对侧根发生的调控。对这两个基因的分离和功能研究将为阐明茉莉酸与生长素互作调控侧根发生的分子机制提供新的知识积累。