prion蛋白和prion病

prion蛋白是动物神经元细胞合成的通过磷酸肌醇系统锚定在细胞外表面的一种糖蛋白,该基因的突变是引起prion病(包括CJD、GSS、库鲁病等)的遗传基础。本文对该基因突变的文献资料进行综述,以引起国内医学界的注意。

Creutzfeldt-Jakob病1例报告

Prion病是指一组可传递的海绵状脑病（transmissible spongiform encephalopathy,TSE）,大量研究表明该病是一种称为朊蛋白（prion protein,PrP）的异构体（proteaseresistant prion protein,PrP-res）在脑内沉积所致。

Prion与神经系统变性病

已知羊瘙痒病(scrapie)与人类震颤病(kuru)和CJD等神经系统慢感染的病原体与典型病毒不同。关于其本质,迄今尚无定论。Prion是从感染scrapie的动物脑中发现的感染性蛋白质成分,其纯化制备为分子量2.7万～3万的蛋白质(PrP27—30),其氨基酸组成和核苷酸序列均已部分确定,已证明人类基因组中有PrP基因,定位于第20号染色体上。推测prion与多种神经系统变性病相关,但目前仅在动物scrapie和人CJD中证实。

利用启动子缺陷型打靶载体敲除牛胎儿成纤维细胞中的Prnp

利用启动子捕获对中靶细胞进行富集是提高体细胞基因打靶效率常用的策略之一。敲除动物的Prnp可使其具有抵抗Prion病感染的能力。采用启动子捕获策略,构建了牛Prnp启动子缺陷型打靶载体BoPrneo,线性化后,再通过电穿孔转染牛胎儿成纤维细胞BFF,用250μg/mL G418进行药物筛选,共得到99个药物抗性细胞克隆。对细胞克隆进行PCR、测序及Southern blotting鉴定,结果表明,其中的4个细胞克隆为中靶细胞,说明牛胎儿成纤维细胞中的Prnp一条等位基因被成功敲除。本研究为牛Prnp的敲除提供了一种简单、安全、有效的方法。

人类PrP合成肽抗原构建及应用

目的 为提高 Prion病诊断率 ,解决 Pr P抗原来源不足 ,人工合成人类 Pr P多肽用于抗体制备。方法 应用固相合成法合成 15个氨基酸残基的人类 Pr P多肽 ,并利用碳二亚胺法将其与牛血清白蛋白偶连制成免疫原 ,应用于动物免疫及多克隆抗体的制备。结果 偶连后 Pr P多肽具有免疫原性 ,并获得了抗 Pr P多克隆抗体。结论 人类 Pr P合成肽抗原的获得和应用 ,可以部分替代天然抗原 ,为进一步单克隆抗体制备 ,以及

一种基于连续PMCA的PrP^Sc体外扩增方法的建立

为建立一种基于蛋白质错误折叠循环扩增(PMCA)的体外稳定扩增方法以观察PrPSc是否能在体外连续传代,我们分别制备了正常仓鼠和羊瘙痒病因子263K感染的发病仓鼠的全脑匀浆,将两种脑匀浆以不同体积比混合后,分别进行144个循环的直接PMCA和每轮48个循环、共8轮的连续PMCA,用Western blot对PrPSc的扩增情况进行检测。结果显示,与常规的直接PMCA方法相比,连续PMCA能更有效地使低浓度的PrPSc扩增到可检出的水平,表明连续PMCA可以支持羊瘙痒因子263K在体外长期稳定的复制。连续PMCA方法是一种体外高效地扩增PrPSc的方法,有潜力成为一种Prion体外培养方法,用于研究Prion错误折叠和复制机制,以及检测脑组织、外周组织和体液样品中的微量PrPSc。

朊蛋白(PrP^C)生理功能的研究进展

朊蛋白是主要分布在神经系统的一种糖蛋白,对其生理功能的研究已逐渐成为Prion病研究领域内的另一 个热点。朊蛋白可以作为受体与配体结合,传递胞内或胞外信号,它还可能具有抗氧化活性和抗细胞凋亡的特性。