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基于PacBio Iso-Seq构建低温胁迫后中华蜜蜂工蜂全长转录组
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作者 姚丹 周文才 +4 位作者 詹洪平 于瀛龙 贺兴江 万炜 韦小平 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期611-621,共11页
【目的】中华蜜蜂Apis cerana cerana是东方蜜蜂Apis cerana在中国地区分布最广泛的亚种,在地理适应和生态多样性方面有显著优势。中华蜜蜂的低温适应性优于西方蜜蜂A.mellifera,可用于高海拔高山地区和冬季蜜源的采集,该性能在生产方... 【目的】中华蜜蜂Apis cerana cerana是东方蜜蜂Apis cerana在中国地区分布最广泛的亚种,在地理适应和生态多样性方面有显著优势。中华蜜蜂的低温适应性优于西方蜜蜂A.mellifera,可用于高海拔高山地区和冬季蜜源的采集,该性能在生产方面有重要作用,探究中华蜜蜂低温耐受性可有助于优良品系的筛选,为农业经济创造更大价值。【方法】收集分别在常温(25.0±0.2)℃(对照)和低温(4.0±0.2)℃下处理6 h时的中华蜜蜂3,10和21日龄工蜂6组样本,进行转录组二代测序(Illumina RNA-Seq)和全长转录组三代测序(PacBio Iso-Seq),利用二代测序数据对三代测序数据进行校正,基于高质量的测序数据对比NR,NT,Pfam,KOG/COG,Swiss-Prot,KEGG和GO数据库,对新转录本和新基因进行功能注释。【结果】中华蜜蜂工蜂6组样本全长转录组测序分别获得71.17,42.76,58.82,53.45,40.33和42.79 Gb读段,平均N50达到205895 bp,质控后得到164194条一致性序列;通过比对到东方蜜蜂参考基因组可获得21519条新转录本,与中华蜜蜂物质代谢、神经系统和信号转导等密切相关,且不同日龄中华蜜蜂受低温胁迫后,物质代谢、细胞发育、寿命及神经发育等受到影响,同时还鉴定到28647条长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA),其中lincRNA和sense_intronic两种类型LncRNA的占比最多,分别为35%和45%。【结论】本研究利用矫正后的中华蜜蜂工蜂PacBio Iso-Seq转录组数据鉴定到大量未注释的新基因和新转录本,并对其进行了功能注释,分析了LncRNA的数量和类型,研究结果完善了东方蜜蜂参考基因组,为中华蜜蜂抗寒机制的探究提供了良好的数据背景。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 低温 转录组 参考基因组 发育阶段 pacbio测序
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基于PacBio三代测序的高质量汶上芦花鸡基因组的组装 被引量:1
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作者 薛倩 邢伟杰 +6 位作者 李国辉 周成浩 张会永 殷建玫 蒋一秀 朱云芬 韩威 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期3869-3881,共13页
【目的】汶上芦花鸡为中国唯一的芦花羽地方鸡品种资源,芦花基因可伴性遗传,芦花羽性状可用于雏鸡的自别雌雄。试验旨在丰富家鸡基因组信息,获取汶上芦花鸡全基因组序列,为鸡伴性芦花羽分子机制研究提供材料。【方法】以汶上芦花鸡为试... 【目的】汶上芦花鸡为中国唯一的芦花羽地方鸡品种资源,芦花基因可伴性遗传,芦花羽性状可用于雏鸡的自别雌雄。试验旨在丰富家鸡基因组信息,获取汶上芦花鸡全基因组序列,为鸡伴性芦花羽分子机制研究提供材料。【方法】以汶上芦花鸡为试验动物,基于BGI MGISEQ构建小片段文库进行基因组特征评估,利用PacBio三代测序技术、Hi-C技术组装及构建汶上芦花鸡全基因组信息数据库,利用生物信息学方法对获得的基因组序列进行组装和功能注释。【结果】试验共获得BGI二代测序数据量59.70 Gb;获得PacBio三代测序数据量31.13 Gb,reads平均长度为15362 bp;获得Hi-C数据量95.37 Gb;拼接和初步组装得到基因组大小为1.12 Gb,经Hi-C辅助组装后,共有1.07 Gb的序列挂载到41条染色体上,挂载率95.62%,基因组contigs N50为9.61 Mb,scaffold N50为91.29 Mb,BUSCO评估为98.50%,基因组连续性和完整度良好;预测基因组有22.57%的重复序列,有426个tRNAs、56个rRNAs、260个miRNAs和308个snRNAs;共预测得到蛋白编码基因17338个,其中96.00%的基因在数据库中得到了功能注释;组装获得汶上芦花鸡Z染色体长度约88.23 Mb,预测并注释到蛋白编码基因742个,这些基因显著富集于氨基酸、脂肪等代谢相关通路,在汶上芦花鸡Z染色体上准确定位了TYRP 1、CDKN 2 A、SLC 45 A 2等羽色相关基因。【结论】研究获得了汶上芦花鸡高质量染色体水平基因组,丰富了家鸡基因组遗传信息,准确定位了Z染色体上一些羽色相关基因。研究结果可为从全基因组水平挖掘汶上芦花鸡优异性状调控机制奠定基础。 展开更多
关键词 汶上芦花鸡 基因组组装 pacbio三代测序技术 基因组注释 Z染色体 伴性芦花羽
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基于PacBio平台的黄颡鱼全长转录组测序及分析 被引量:1
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作者 王家琪 熊阳 +2 位作者 韩庆庆 皇培培 梅洁 《湖北农业科学》 2023年第4期194-201,共8页
为进一步丰富黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)信息数据库,采用PacBio测序平台对黄颡鱼的肝脏、肾、背部肌肉、脑、脾、心脏、皮肤、血液、鳃、性腺等组织进行全长转录组混样测序。共获得685574个全长非嵌合(Full-length non-chimeric r... 为进一步丰富黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)信息数据库,采用PacBio测序平台对黄颡鱼的肝脏、肾、背部肌肉、脑、脾、心脏、皮肤、血液、鳃、性腺等组织进行全长转录组混样测序。共获得685574个全长非嵌合(Full-length non-chimeric read,FLNC)序列,通过与黄颡鱼基因组比对分析,共获得72509个非冗余isoforms,平均长度为2918 bp。共鉴定到3169个LncRNA、45872个可变剪接事件、4881个基因存在可变多聚腺苷酸化位点和304个融合基因。将12492个新基因与NR、GO、KEGG、KOG和Swwassprot 5个公共数据库进行比对,成功注释了7233个isoforms。GO分析发现,新基因主要集中于细胞过程(Cellular process)、细胞组分(Cell)和结合功能(Binding)。KEGG pathway分析显示,新基因主要在信号转导(Signal transduction)和免疫系统(Immune system)信号通路中得到富集,此外,涉及黄颡鱼生殖与繁殖相关的内分泌系统代谢途径包括催产素信号通路、雌二醇信号通路、孕酮介导的卵母细胞成熟、促性腺激素释放激素信号通路和卵巢类固醇合成。 展开更多
关键词 黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco) pacbio 全长转录组 可变剪接 信号通路
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基于PacBio三代测序的茯茶加工过程真菌群落分析 被引量:1
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作者 白亚妮 冯璞阳 +2 位作者 秦涛 冯志珍 陈卫锋 《中国茶叶加工》 2023年第1期63-68,共6页
茯茶是陕西省地理标志产品,具有重要商业价值。目前茯茶生产过程中的真菌群落组成变化情况尚不清楚。为了解茯茶生产过程中真菌群落变化情况,为生产过程的微生物安全控制提供数据支撑,文章以茯茶生产过程中主要阶段的制品样品为研究对象... 茯茶是陕西省地理标志产品,具有重要商业价值。目前茯茶生产过程中的真菌群落组成变化情况尚不清楚。为了解茯茶生产过程中真菌群落变化情况,为生产过程的微生物安全控制提供数据支撑,文章以茯茶生产过程中主要阶段的制品样品为研究对象,采用PacBio三代测序技术分析原毛茶、渥堆期、发花期、干燥期和陈化期真菌群落多样性及组成。结果表明样品测序获得的序列数范围从12771到13110,获得序列的平均长度分别为554 bp。样品香农指数随着序列数的增加趋于平稳,覆盖率均达到1,测序结果反映了实际的群落组成,且测序深度已经基本覆盖到样品中的所有物种。从茯茶原毛茶到渥堆期,再到发花期,真菌群落多样性不断减少,干燥期和陈化期群落多样性和组成与发花期基本相似,原毛茶时期表征真菌群落多样性的香农指数高达1.99,渥堆期降为1.06,而发花期、干燥期和陈化期分别为0.15、0.11和0.21。在群落组成方面,原毛茶比发酵茯茶含有相对丰度较高的节担菌纲种群(Wallemiomycetes),相对丰度约为27.3%。在渥堆期,银耳纲(Tremellomycetes)、伞菌纲(Agaricomycetes)和锤舌菌纲(Leotiomycetes)相比其他时期丰度增加。在随后的生产过程中,包括发花期、干燥期、陈化期,主要优势菌种是冠突散囊菌(Eurotiomycetes)中的曲霉属(Aspergillus),相对丰度达到98%以上,是这三个时期的生物标记种群。以上研究结果为茯茶标准化生产中微生物控制提供了数据基础。 展开更多
关键词 茯茶 加工时期 pacbio测序技术 真菌群落 散囊菌
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三代测序PacBio在转录组研究中的应用 被引量:9
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作者 钟伟民 张兴坦 +2 位作者 赵茜 马东娜 唐海宝 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2018年第5期524-529,共6页
本文介绍了PacBio测序在转录组学研究中的一些应用及PacBio测序数据分析常用的方法流程,根据PacBio测序的发展综述了PacBio测序经常遇到的一些问题及相应解决方案,并就PacBio测序技术所面临的挑战和未来的发展进行讨论.
关键词 pacbio测序 pacbio应用 pacbio流程
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基于纯培养方法和PacBio三代测序技术研究蒙古国传统酸马奶中乳酸菌多样性 被引量:21
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作者 刘文俊 多拉娜 +3 位作者 刘亚华 任冬艳 张和平 孟和毕力格 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第4期27-37,共11页
通过纯培养方法结合PacBio三代测序技术对采自蒙古国的12份传统酸马奶中的乳酸菌多样性进行研究。应用传统的纯培养技术从12份传统酸马奶样品中分离出62株乳酸菌,通过16S rRNA基因序列分析和系统进化关系研究,62株乳酸菌被鉴定为5个属,... 通过纯培养方法结合PacBio三代测序技术对采自蒙古国的12份传统酸马奶中的乳酸菌多样性进行研究。应用传统的纯培养技术从12份传统酸马奶样品中分离出62株乳酸菌,通过16S rRNA基因序列分析和系统进化关系研究,62株乳酸菌被鉴定为5个属,6个种,分别是:25株瑞士乳杆菌、20株植物乳杆菌、7株产马乳酒乳杆菌、5株屎肠球菌、3株嗜热链球菌和2株粪肠球菌。采用PacBio SMRT测序技术研究其中8份样品中乳酸菌的多样性,宏基因组测序得到的优势菌为乳酸菌,同时也检测到一些痕量的其它种属细菌。共检测到5个乳酸菌的属,分别是:乳杆菌属、乳球菌属、链球菌属、明串珠菌属和肠球菌属,20个乳酸菌的种,即:瑞士乳杆菌、乳酸乳球菌、副乳链球菌、棉子糖乳球菌、肠膜阴串珠球菌和产马乳酒乳杆菌。宏基因组测序相对含量表明:蒙古国酸马奶样品中乳酸菌优势属为乳杆菌属(95.56%),优势种为瑞士乳杆菌(94.64%),纯培养方法和宏基因组三代测序方法都表明瑞士乳杆菌为蒙古国传统酸马奶中的优势菌种。宏基因组测序技术除检测到纯培养获得的菌株外,还获得14个低丰度乳酸菌,如棉籽糖乳球菌、肠膜明串珠球菌和开菲尔乳杆菌等,这些菌在酸马奶中含量较少。通过PacBio SMRT测序技术可以全面了解酸马奶中乳酸菌的多样性,为通过纯培养方法获得低丰度乳酸菌提供指导。 展开更多
关键词 酸马奶 乳酸菌 pacbio SMRT测序技术 生物多样性
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基于PacBio SMRT技术的婴幼儿配方奶粉微生物安全性评价 被引量:3
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作者 边燕飞 席晓霞 +3 位作者 郑艺 侯强川 孙天松 孙志宏 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第10期212-220,共9页
目的:婴幼儿配方奶粉中的大量细菌已被灭活,然而灭活微生物仍影响产品品质和货架期。现行纯培养技术只能对食品基质中活菌进行检测,无法全面评估污染微生物组成,而基于宏基因组学策略能够对婴幼儿配方奶粉加工过程中污染微生物进行全面... 目的:婴幼儿配方奶粉中的大量细菌已被灭活,然而灭活微生物仍影响产品品质和货架期。现行纯培养技术只能对食品基质中活菌进行检测,无法全面评估污染微生物组成,而基于宏基因组学策略能够对婴幼儿配方奶粉加工过程中污染微生物进行全面客观的评价。方法:采集6份婴幼儿配方奶粉,使用细菌纯培养、单分子实时测序技术(PacBio SMRT)和微滴式数字PCR(ddPCR)联用技术对其污染微生物组成进行评价。结果:采用纯培养技术在样品中均未检测到大肠菌群、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、阪崎肠杆菌和芽孢。使用PacBio SMRT测序技术,在婴幼儿配方奶粉中共鉴定出14个细菌门、138个细菌属和255个细菌种。其中6份样品均存在过嗜冷菌蜡样芽孢杆菌,其平均相对含量高达23.54%,这一灭活的细菌也会影响产品货架期。此外,在IF3、IF4、IF5和IF6样品中,检测到相对含量较低的致病菌大肠杆菌,其相对含量分别为0.06%,0.01%,0.15%和0.05%。采用ddPCR技术对SMRT测序方法检测到的致病菌蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌进行定量分析,发现每克奶粉样品中蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌的平均拷贝数取对数后分别为5.45和4.89。结论:在6份婴幼儿配方奶粉中均未检出致病菌,符合食品安全国家标准,然而奶粉中被灭活的蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌可能增加产品腐败的风险,影响产品的货架期。本研究结合多个技术全面评价婴幼儿配方奶粉的微生物污染情况,初步建立婴幼儿配方奶粉的微生物检测技术。 展开更多
关键词 婴幼儿配方奶粉 污染微生物 纯培养 ddPCR pacbio SMRT测序
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自然发酵酸马奶对人体肠道菌群的影响——基于PacBio SMRT测序技术 被引量:6
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作者 温永平 侯强川 张和平 《中国乳品工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期4-7,共4页
采用PacBio SMRT测序技术研究了内蒙古锡林郭勒盟地区一名健康志愿者在连续饮用酸马奶60 d前后肠道菌群的变化。结果表明,连续饮用酸马奶可以增加志愿者肠道菌群的丰度和多样性,使志愿者肠道菌群更加趋于健康化。此外,志愿者肠道中存在... 采用PacBio SMRT测序技术研究了内蒙古锡林郭勒盟地区一名健康志愿者在连续饮用酸马奶60 d前后肠道菌群的变化。结果表明,连续饮用酸马奶可以增加志愿者肠道菌群的丰度和多样性,使志愿者肠道菌群更加趋于健康化。此外,志愿者肠道中存在大量的"肠道核心微生物群",饮用酸马奶会使志愿者肠道中硬壁菌门的相对含量升高。在种的水平上,饮用酸马奶可以促进部分有益生菌如柔嫩梭菌群、多形拟杆菌的生长,这可能是酸马奶具有众多益生作用的原因之一。 展开更多
关键词 酸马奶 肠道菌群 pacbioSMRT测序技术
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基于PacBio三代测序的香瓜茄(人参果)基因组的组装 被引量:2
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作者 司诚 钟启文 杨世鹏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期180-190,共11页
香瓜茄又名人参果,具有抗氧化、抗肿瘤、抗糖尿病等多种生物活性。为丰富茄科作物基因组信息及进化发育历程,获取香瓜茄全基因组序列信息,同时为香瓜茄相关分子研究奠定基础。以香瓜茄植物组织为试验材料,基于Illumina HiSeq构建小片段... 香瓜茄又名人参果,具有抗氧化、抗肿瘤、抗糖尿病等多种生物活性。为丰富茄科作物基因组信息及进化发育历程,获取香瓜茄全基因组序列信息,同时为香瓜茄相关分子研究奠定基础。以香瓜茄植物组织为试验材料,基于Illumina HiSeq构建小片段文库进行基因组特征评估,利用PacBio三代测序技术、Hi-C技术构建及组装香瓜茄全基因组数据库。利用生物信息学方法对获得的基因组序列进行组装、功能注释以及进化分析研究。结果表明,获得54.11 Gb Illumina HiSeq数据;获得55.08 Gb PacBio数据,reads平均长度为14 179 bp;获得Hi-C数据量约143 Gb;拼接得到该基因组contig序列总长为1.16 Gb,Hi-C纠错后contig N50为22.63 Mb;Hi-C挂载染色体,共有1.12 Gb长度的序列可以挂载到12条染色体上,占比97.16%;其中,能够确定顺序和方向的序列长度为1.08 Gb,占定位染色体序列总长度的96.11%,得到基因组大小1.25 Gb;预测有64.22%的重复序列,41 571个基因,99.06%的基因可以注释到NR、GO、KEGG等数据库中;预测得到4 360个tRNA、5 677个rRNA、154个miRNA;得到449个假基因。香瓜茄与马铃薯的进化时间大约在12.82 MYA。 展开更多
关键词 香瓜茄 基因组 pacbio三代测序技术 基因注释
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PacBio测序分析开菲尔发酵过程中细菌演替 被引量:1
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作者 史大伟 邢军 +4 位作者 马龙 李安 于红 古丽加马力·艾萨 张瑞 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2021年第2期19-23,共5页
利用PacBio SMRT测序技术,对采集自新疆喀什地区牧民家中的开菲尔进行0~96 h发酵过程中细菌群落的结构演替进行分析。研究结果如下:在整个发酵过程中芽孢杆菌(Bacillus)、肠杆菌属(Enterobacter)和气单胞菌属(Aeromonas)是开菲尔发酵过... 利用PacBio SMRT测序技术,对采集自新疆喀什地区牧民家中的开菲尔进行0~96 h发酵过程中细菌群落的结构演替进行分析。研究结果如下:在整个发酵过程中芽孢杆菌(Bacillus)、肠杆菌属(Enterobacter)和气单胞菌属(Aeromonas)是开菲尔发酵过程中的优势菌属。在发酵过程中鉴定到种约有6种。在整个发酵过程中,开菲尔中的细菌多样性呈现降低趋势,pH值与发酵过程中的大多数物种呈正相关关系;乳酸含量与发酵过程中的大多数物种呈负相关关系。 展开更多
关键词 开菲尔 微生物多样性 pacbio测序 菌群演替
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基于PacBio测序数据的蜜蜂球囊菌转录因子、融合基因及RNA编辑事件的鉴定 被引量:1
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作者 许雅静 吴鹰 +9 位作者 余岢骏 孙明会 刘佳美 郭意龙 徐细建 鲍佳益 康育欣 陈大福 郭睿 付中民 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期63-72,共10页
【目的】本研究旨在利用已获得的PacBio单分子实时(single molecule real-time,SMRT)测序数据对蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis菌丝(AaM)和孢子(AaS)中的转录因子(TF)、融合基因和RNA编辑事件进行鉴定和分析,以期丰富蜜蜂球囊菌的相关信息... 【目的】本研究旨在利用已获得的PacBio单分子实时(single molecule real-time,SMRT)测序数据对蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis菌丝(AaM)和孢子(AaS)中的转录因子(TF)、融合基因和RNA编辑事件进行鉴定和分析,以期丰富蜜蜂球囊菌的相关信息,并为进一步探究它们的功能提供理论依据。【方法】利用BLASTx工具将AaM和AaS的全长转录本序列比对到Nr,Swiss-Prot和KEGG数据库以获得一致性最高的蛋白序列,再利用hmmscan软件将上述蛋白序列比对到Plant TFdb数据库以获得TF的分类及注释信息。采用TOFU软件中的fusion_finder.py程序进行融合基因的预测,进而分析融合基因的序列和位置信息。使用SAMtools预测AaM和AaS中的RNA编辑事件,再利用ANNOVAR软件对RNA编辑事件进行注释,进而采用相关生物信息学软件对RNA编辑位点基因进行GO功能和KEGG通路注释。【结果】在AaS中共鉴定到17个TF家族的213个TF,其中C2H2家族包含的TF成员最多。在AaM和AaS中分别鉴定到921和510个融合基因,二者共有的融合基因为510个,特有的融合基因分别为411和0个。在AaM和AaS中分别鉴定到547和191次RNA编辑事件,其中AaM中同义单核苷酸突变的数量最多,AaS中非同义单核苷酸突变的数量最多。此外,在AaM中鉴定到12种碱基替换类型,其中发生C->T的RNA编辑事件数量最多,达到158次;在AaS中鉴定到9种碱基替换类型,其中发生C->T和G->T的RNA编辑事件数量最多,均有42次。AaM和AaS中RNA编辑位点基因分别涉及19和24个GO功能条目;此外还能注释到11和20条KEGG通路。【结论】蜜蜂球囊菌的菌丝和孢子中含有丰富的TF、融合基因和RNA编辑位点;转录因子C2H2家族与蜜蜂球囊菌菌丝和孢子的生长发育和细胞活动具有潜在关联;RNA编辑事件的碱基替换类型在蜜蜂球囊菌和其他物种中具有物种特异性;RNA编辑可能在蜜蜂球囊菌菌丝和孢子的生长和代谢中发挥作用。 展开更多
关键词 蜜蜂球囊菌 pacbio测序 RNA编辑 转录因子 融合基因
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扬子鳃蛭线粒体基因组全序列测定及其系统学地位——基于Pacbio和Illumina技术
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作者 谷生丽 刘谏君 +2 位作者 孙恩涛 湛孝东 聂刘旺 《吉首大学学报(自然科学版)》 CAS 2020年第3期28-35,共8页
利用Illumina和Pacbio测序技术对扬子鳃蛭(Ozobranchus jantseanus)线粒体基因组全序列进行测序及注释,并与NCBI数据库中蛭纲(Hirudinea)其他物种的线粒体全序列的排列方式和系统进化关系进行了比较,以确定其系统学地位.结果显示:获得... 利用Illumina和Pacbio测序技术对扬子鳃蛭(Ozobranchus jantseanus)线粒体基因组全序列进行测序及注释,并与NCBI数据库中蛭纲(Hirudinea)其他物种的线粒体全序列的排列方式和系统进化关系进行了比较,以确定其系统学地位.结果显示:获得的线粒体基因组序列长度为14868 bp,蛋白编码基因存在2种起始密码子,分别为ATG和ATT;终止密码子共有4种,分别为TAA,TAG,TA和T;蛭纲10个物种的线粒体基因组全序列基因排序可分为2种类型,其差异表现在tRNAs的互换和长非编码区的长度的不同;扬子鳃蛭所属的吻蛭目(Rhynchobdellida)均为b型,绝大部分无吻蛭目(Arhynchobdellida)的排列方式为a型.基于蛭纲物种的13个蛋白编码基因(PCGs)的Neighbor-Joining(NJ)树进化分析显示,扬子鳃蛭与其他吻蛭目物种聚类. 展开更多
关键词 扬子鳃蛭 线粒体基因组全序列 蛭纲 pacbio和Illumina测序
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Novel structural annotation and functional expression analysis of GTP_EFTU conserved genes in pepper based on the PacBio sequencing data 被引量:2
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作者 Bingqian Tang Lingling Xie +11 位作者 Xuefeng Li Huiping Yang Yi Liu Xiang Cheng Chenliang Liang Juan Chen Shudong Zhou Duanhua Wang Jingyuan Zheng Xiongze Dai Xuexiao Zou Feng Liu 《Horticultural Plant Journal》 SCIE CSCD 2021年第5期443-456,共14页
Genes containing GTP_EFTU domain mainly express elongation factors(EF),Small GTPases,and GTP-binding proteins,which are closely related to protein synthesis,extension and ATP synthesis.In this study,we identified 39 g... Genes containing GTP_EFTU domain mainly express elongation factors(EF),Small GTPases,and GTP-binding proteins,which are closely related to protein synthesis,extension and ATP synthesis.In this study,we identified 39 genes containing GTP_EFTU domains from peppers.The evolutionary trees constructed from capsicum,Arabidopsis,rice,and tomato are mainly divided into 7 subfamilies.Using PacBio(Pacific Biosciences)sequencing and assembly data,we extracted these 39 gene sequences,fromwhich 25 genes had alternative splicing.Particularly,the Capana08g000545 had 16 alternative splicing processes.Accordingly,we performed promoter sequence analysis,subcellular location prediction,the expression analysis of different tissues and periods,and also the GO(Gene ontology)analysis of co-expressed genes.Lastly we did the qRTPCR analysis in 5 stages of pepper fruit development.These analyses revealed important structural and functional information for the identified 39 genes that contain GTP_EFTU domains,providing important references for further follow-up experiments to verify the genes function on plants or their unique roles in peppers. 展开更多
关键词 CAPSICUM GTP_EFTU pacbio Phylogenetic analysis Expression analysis GO analysis
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基于PacBio测序的对叶百部叶绿体基因组结构及系统发育分析
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作者 连艳 黄凤 +4 位作者 朱文涛 刘晓芬 吴昊 蒋桂华 尹显梅 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第14期123-132,共10页
目的:获得对叶百部Stemona tuberosa高质量叶绿体基因组信息,明确其结构、序列特征,同时确定对叶百部的系统发育地位。方法:采用Illumina NovaSeq 6000和PacBio RSⅡ平台对对叶百部分别进行建库测序,利用生物信息软件将2个测序平台的数... 目的:获得对叶百部Stemona tuberosa高质量叶绿体基因组信息,明确其结构、序列特征,同时确定对叶百部的系统发育地位。方法:采用Illumina NovaSeq 6000和PacBio RSⅡ平台对对叶百部分别进行建库测序,利用生物信息软件将2个测序平台的数据进行混合组装和碱基校正,最终获得高质量叶绿体基因组,随后对其序列特征、重复序列、基因多样性和系统发育进行分析。结果:对叶百部叶绿体基因组大小为154379 bp,叶绿体基因组结构为典型环状四段式,1对27074 bp的反向重复区(IR),1个大小为17924 bp的小单拷贝区(SSC)和1个82307 bp的大单拷贝区(LSC),平均鸟嘌呤和肥嘧啶所占的比率(GC)含量为37.86%;共注释得到121个基因,包括30个tRNA基因,4个rRNA基因和87蛋白编码基因,其中6个tRNA基因和12个蛋白质编码基因中存在内含子;对叶百部叶绿体基因组中共发现49个长重复序列和59个单核苷酸简单重复序列(SSR);4个百部属的叶绿体基因组比较分析表明ycf1和ndhF基因具有高度多样性;基于叶绿体基因组构建的系统发育树与对叶百部目前的分类地位一致。结论:成功组装了对叶百部叶绿体高质量基因组,获得了包括对叶百部在内的4种百部属植物叶绿体基因组的结构及序列特征信息,为百部属药用植物的鉴定、进化和系统发育研究奠定基础。 展开更多
关键词 对叶百部 叶绿体基因组 pacbio测序 系统发育
原文传递
利用三代测序技术鉴定c.586T>C突变导致的Bel亚型
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作者 崔文燕 刘金华 付威义 《临床输血与检验》 CAS 2024年第2期262-266,共5页
目的利用PacBio三代测序技术鉴定c.586T>C突变导致的Bel亚型,并分析Bel亚型家系的血型血清学特点。方法ABO血型表型检测使用血清学方法,对ABO正反定型不符的家系标本进行ABO基因第6、7号外显子Sanger测序。利用PacBio三代技术对先证... 目的利用PacBio三代测序技术鉴定c.586T>C突变导致的Bel亚型,并分析Bel亚型家系的血型血清学特点。方法ABO血型表型检测使用血清学方法,对ABO正反定型不符的家系标本进行ABO基因第6、7号外显子Sanger测序。利用PacBio三代技术对先证者及其子女的3例样本进行ABO基因全长单体型分析。结果先证者血清学表型为Bel亚型,测序技术鉴定ABO基因序列第7外显子存在c.586T>C位点突变,三代测序单体型鉴定先证者ABO基因型为ABO^(*)BEL(c.586T>C)/O01.02,其长子和长女基因型为:ABO^(*)A1.02/BEL(c.586T>C)、ABO^(*)B.01/BEL(c.586T>C)。结论c.586T>C位点突变是导致本例Bel的分子基础,PacBio三代测序技术能够精准鉴定ABO亚型单体型。 展开更多
关键词 Bel亚型 血型血清学 分子机制 单体型鉴定 pacbio三代测序技术
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An Improved Chromosome-Level Genome Assembly and Annotation of Belted Beard Grunt(Hapalogenys analis)
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作者 GAO Tianxiang WANG Yiting +3 位作者 SHI Huilai PING Hongling LIU Qi ZHANG Yang 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS CSCD 2024年第4期1026-1034,共9页
Hapalogenys analis(order Lobotiformes)is an economically and ecologically significant fish species.It is a typical sedentary rocky reef fish and is primarily found in the northern Pacific Ocean.Here,we used Hi-C and P... Hapalogenys analis(order Lobotiformes)is an economically and ecologically significant fish species.It is a typical sedentary rocky reef fish and is primarily found in the northern Pacific Ocean.Here,we used Hi-C and PacBio sequencing technique to assemble a high-quality,chromosome-level genome for this species.The 539 Mb genome had a contig N50 with a size of 3.43 Mb,while 755 contigs clustered into 24 chromosomal groups with an anchoring rate of 99.02%.Of the total genomic sequence,132.74Mb(24.39%)were annotated as repeat elements.A total of 21360 protein-coding genes were identified,of which 20787 genes(97.32%)were successfully annotated to public databases.The BUSCO evaluation indicated that 96.90%of the total orthologous genes were matched.The phylogenetic tree representing H.analis and 14 other bony fish species indicated that the H.analis genome contained 364 expanded gene families related to olfactory receptor activity,compared with the common ancestor of H.analis and Sciaenidae.Comparative genomic analysis further identified 3584 contracted gene families.Branch-site modeling identified 277 genes experiencing positive selection,which may facilitate the adaptation to rocky reef environments.The genome reported here is helpful for ecological and evolutionary studies of H.analis. 展开更多
关键词 Hapalogenys analis de novo assembly pacbio comparative genomics
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Adjuvant postbiotic administration improves dental caries prognosis by restoring the oral microbiota
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作者 Qing Liu Teng Ma +7 位作者 Cuijiao Feng Yalin Li Hao Jin Xuan Shi Lai-Yu Kwok Yan Shi Tingtao Chen Heping Zhang 《Food Science and Human Wellness》 SCIE CAS CSCD 2024年第5期2690-2702,共13页
Conventional filling therapy fails to fundamentally reduce oral cariogenic bacteria.Thus,oral microbiota follow-up intervention after filling would be necessary for improving dental caries prognosis.We recruited 9 car... Conventional filling therapy fails to fundamentally reduce oral cariogenic bacteria.Thus,oral microbiota follow-up intervention after filling would be necessary for improving dental caries prognosis.We recruited 9 caries-free individuals,and 89 dental caries subjects(5 dropouts).Eighty-nine patients were randomized into three groups:caries(n=8;no treatment),control(n=40;filling),and postbiotics(n=41;filling and 14-day Probio-Eco®intervention).Salivary samples were collected at 0 day(after filling)and 14 days.Our results showed that the diversity of dental caries oral microbiota was significantly increased compared with healthy subjects,and filling could restore a healthier oral microbiota partially and temporarily.Thepostbiotics intervention keeps a low alpha-diversity.Co-occurrence network analysis showed that a more stable oral microbiota structure after postbiotics intervention.Taxonomic and functional annotation of the microbiota revealed that postbiotics co-treatment significantly:increased the relative abundance of Pseudomonas and P.reactans,decreased the relative abundance of Prevotella shahii,and enriched the energy metabolism-related pathways.BugBase-predicted phenotypes inferred to an oral microbiota with decreased potential pathogenic bacteria and increased oxidative stress-tolerant bacteria after postbiotics intervention.Collectively,it suggested that postbiotics co-treatment could be a promising strategy that restores the oral microecological balance for dental caries. 展开更多
关键词 Postbiotics Oral microbiota Salivary microbiota Dental caries Pacific Biosciences(pacbio)single molecule real-time(SMRT)sequencing Dental filling
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基于PacBio SMRT测序技术评估妊娠期糖尿病人的肠道菌群 被引量:10
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作者 舒明月 付爱思 +5 位作者 张洁 陈佳 郭静 丁琼 徐焱成 刘天罡 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1823-1839,共17页
【目的】肠道菌群是位于人体肠道内的微生物菌群,其组成与人类多种疾病相关。例如,已有研究表明肠道菌群的变化与妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)的发病密切相关。因此本研究基于PacBio SMRT测序技术评估及比较了不同... 【目的】肠道菌群是位于人体肠道内的微生物菌群,其组成与人类多种疾病相关。例如,已有研究表明肠道菌群的变化与妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)的发病密切相关。因此本研究基于PacBio SMRT测序技术评估及比较了不同民族(汉族和蒙族)及是否患GDM的孕妇的肠道菌群。【方法】本研究利用PacBio SMRT测序技术对97例患有GDM及健康的汉族和蒙族孕妇粪便样本进行了全长16S rRNA测序及分析。【结果】总体来说,处于相同孕期的4组孕妇肠道菌群的组成相似,不同核心菌群展现出不同强弱的相关性。本研究在种的水平上共鉴定到了44个种。在汉族人中,患有妊娠期糖尿病的孕妇肠道菌群中Akkermansia muciniphila菌的相对丰度要显著低于健康孕妇;而在蒙族人中,健康孕妇与GDM孕妇间差异并不明显。在健康对照中发现汉族孕妇肠道菌群中Bacteroides uniformis菌的相对丰度显著高于蒙族孕妇;但在患有GDM组中未找到不同民族分组间的差异。另外,功能预测结果发现四组样本菌群功能组成高度相似,大多数功能基因都与能量代谢有关。汉族GDM患者与健康对照组间没有发现显著差异,但在蒙族GDM患者中发现无机离子运输等功能相对丰度显著高于与蒙族正常孕妇。【结论】在相同的孕期,妊娠期孕妇的核心肠道菌群结构与功能是相对稳定的,而民族差异也不会对妊娠期菌群产生显著性影响。但在四组间可以检测到一些低丰度的差异菌群,如Akkermansia muciniphila,其丰度的变化可能导致了肠道中一些与肠道营养吸收等有关的代谢发生变化,而这些变化可能与妊娠期糖尿病的发生密切相关。本研究将有助于探究肠道菌群在GDM发病机制中的作用。 展开更多
关键词 pacbio SMRT测序技术 妊娠期糖尿病 肠道菌群 微生物多样性 16S RRNA
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DNA聚合酶对PacBio SMRT测序结果影响的评价 被引量:3
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作者 王彦杰 徐海燕 +3 位作者 侯强川 马慧敏 张和平 孙志宏 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2018年第1期93-99,共7页
目的评估不同DNA聚合酶是否会对以16SrRNA全长为测序靶点的肠道微生物多样性研究结果产生影响。方法用美国太平洋公司的三代测序仪(PacBio single molecule real-time sequencing technology)对3份分别采用KAPA HiFi^(TM) HotStart DNA... 目的评估不同DNA聚合酶是否会对以16SrRNA全长为测序靶点的肠道微生物多样性研究结果产生影响。方法用美国太平洋公司的三代测序仪(PacBio single molecule real-time sequencing technology)对3份分别采用KAPA HiFi^(TM) HotStart DNA聚合酶和PCRBIO HotStart DNA聚合酶扩增的军犬粪便样品进行精确至"种"水平的测序分析。结果经配对Mann-Whitney U检验显示,不同DNA聚合酶扩增的同一样品在门、属和种水平上差异无统计学意义(P>0.05),然而在某些相对含量较少的操作分类单元(OTU)上,其扩增效率存在差异。经基于非加权UniFrac距离的非加权组平均法聚类分析和基于加权UniFrac距离的非参数多元方差分析发现不同DNA聚合酶扩增的同一样品其多样性差异无统计学意义(P>0.05)。结论 KAPA HiFi^(TM) HotStart DNA聚合酶和PCRBIO HotStart DNA聚合酶虽对模板DNA扩增存在一定的偏好性,但该偏好性不影响PacBio SMRT测序结果。 展开更多
关键词 DNA聚合酶 pacbio SMRT测序技术 肠道微生物
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PacBio Sequencing Reveals Transposable Elements as a Key Contributor to Genomic Plasticity and Virulence Variation in Magnaporthe oryzae 被引量:6
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作者 Jiandong Bao Meilian Chen +13 位作者 Zhenhui Zhong Wei Tang Lianyu Lin Xingtan Zhang Haolang Jiang Deyu Zhang Chenyong Miao Haibao Tang Jisen Zhang Guodong Lu Ray Ming Justice Norvienyeku Baohua Wang Zonghua Wang 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2017年第11期1465-1468,共4页
Dear Editor :The sustainable cultivation of rice, which serves as staple food crop for more than half of the world's population, is under serious threat due to the huge yield losses inflicted by rice blast disease c... Dear Editor :The sustainable cultivation of rice, which serves as staple food crop for more than half of the world's population, is under serious threat due to the huge yield losses inflicted by rice blast disease caused by the globally destructive fungus Magnaporthe oryzae (Pyricularia oryzae) (Dean et al., 2012; Nalley et al., 2016; Deng et al., 2017). This filamentous ascomycete fungus is also capable of causing blast infection on other economically important cereal crops, including wheat, millet, and barley, making it the world's most important plant pathogenic fungus (Zhong et al., 2016). 展开更多
关键词 pacbio Sequencing Reveals Transposable Elements a Key Contributor to Genomic Plasticity a Virulence Variation Magnaporthe oryzae
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