改良Percoll梯度离心法优化精液宫腔内人工授精疗效观察

目的 观察改良Percoll梯度离心法 (简称改良法 )和常规Percoll梯度离心法 (简称常规法 )优化精液行宫腔内人工授精的疗效。方法 选择适应证患者 12 6例 ,共行宫腔内人工授精 2 0 4周期 ,其中 10 6周期应用常规法 ,98周期应用改良法。结果 改良法处理后精子密度、精子活力及周期妊娠率高于常规法 (P <0 .0 5 )。结论 改良法优化精液行宫腔内人工授精具有较高的周期妊娠率 ,疗效较为满意。

Percoll梯度离心法分离牛X精子及配种试验

用改良Ｐｅｒｃｏｌｌ梯度柱离心分离牛精子，并将分离后富含Ｘ精子的底层精液进行配种实验。结果发现，底层精子活率正常，含Ｆ小体的Ｙ精子仅１０．２％。将其鲜精直接配种母牛１３头；冻精配种８１头。鲜精组产仔率８４．６％，冻精组为７２．８３％，与对照组比较无差异。母犊出生率，鲜精组为８１．８０％，冻精组为７１．１８％，分别比对照组提高３６．３８％与２５．７８％（Ｐ＜０．０１）。结果表明，此分离方法可提供富含Ｘ精子的精液；应用于人工配种。

90%Percoll单层梯度离心法在宫腔内人工授精中的应用

目的 探讨 90 %Percoll单层梯度离心法在宫腔内人工授精 (IUI)中的应用价值。方法 采用 90 %Percoll单层梯度离心法处理精液 ,并将获得的精子悬液为其配偶施行IUI。结果 精液处理后 ,精子密度和活率均显著提高 ,而畸形精子率则呈显著性降低 ,白细胞及细胞碎片等非精子成分明显减少。 2 68对不孕夫妇进行 396个IUI周期 ,其中 64例临床妊娠 ,妊娠率为 2 3 88%,周期妊娠率为 1 7 34 %。结论 90

Percoll密度梯度离心法分离牛、羊精子试验

试验采用Percoll密度梯度离心法对牛、羊精子进行分离,试验结果表明,当温度为4℃、15℃,用250克离心25分钟,分离牛冻精,精子回收在3-7层较密集,占回收精子总数的85.1％-87.4％,8-9层精子占到8.8％-9.14％,从第6层精子活率明显提高,畸形率显著降低,第8层低于10％,第9层无畸形精子,两种温度间差异不显著。通过试验选择出牛冻精在室温条件下适宜的分离条件,离心力250克,离心时间15分钟,取8、9层精液给生产母牛及超排供体牛输精,获得6头犊牛,其中4头母犊、2头公犊。 绵羊鲜精在室温15℃-18℃,250克离心15-20分钟分离条件下,得到清晰且较均匀的分离层,分离精子的回收率、畸形率、活力与分离牛冻精结果类同。母羔率75％(18/24)。用注射器作为分离管,直接从底部取第9层精液,母羔率达76.5％(13/17)。

Percoll密度梯度离心法分离中枢神经系统组织中的单个核细胞

目的建立快速分离小鼠中枢神经系统(CNS)组织中单个核细胞的方法。方法以正常C57BL/6小鼠、实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)和阿尔茨海默病(AD)模型小鼠为研究对象,通过70%~30%Percoll密度梯度离心法,获取小鼠脑组织和脊髓中单个核细胞,利用台盼蓝染色检测细胞存活率后,通过流式细胞术进一步分析细胞的表型特点。结果分离得到的单个核细胞存活率在90%以上;流式细胞术分析结果表明,EAE和AD小鼠中浸润到CNS的淋巴细胞群比例明显升高,且介导炎症反应的Th1和Th17细胞亚群比例明显升高,而具有免疫调节作用的Treg细胞亚群比例明显下降。结论采用70%~30%Percoll密度梯度离心法从小鼠CNS中分离的单个核细胞存活率高,细胞活性不受分离过程的影响,可进一步利用流式细胞术分析细胞的表型特征。此方法操作简单快速,适用于对CNS淋巴细胞等单个核细胞的分析。

Percoll密度梯度离心法对精子分选效果观察

运用简便而有效的方法对精子进行体外优选，是开展现代辅助生殖技术的基础工作之一。通过精子的优选，去掉精浆中的去获能因子，抗精子抗体活性氧化物（ＲＯＳ）、未成熟的精子细胞、白细胞和死亡的细胞，回收高质量的精子，并使之处于获能状况，是受精的基本要求。目前为...

简化Percoll密度梯度离心法快速纯化肝实质细胞

简化Ｐｅｒｃｏｌｌ密度梯度离心法快速纯化肝实质细胞临床生化教研室徐勇，涂植光，康格非中图分类号我们采用胶原酶原位灌流法分离了大鼠肝细胞，经摸索用３５％（Ｖ／Ｖ）缓冲的Ｐｅｒｃｏｌｌ液对获得的肝细胞悬液进行密度梯度离心。在低速离心的条件下（１０００－１...

分离X精子的Percoll密度梯度离心法

Percoll密度梯度离心法 密度梯度离心法是一种分离不同密度(或不同形状、光滑度、软硬度或电荷等)颗粒的方法。它利用不与所分离颗粒起作用的介质配制成连续的或不连续的密度梯度,在分离管中自下而上由浓到稀地依次叠加,需分离的颗粒在这样的分离管中离心后,不同密度的颗粒各自停留在与其相应的密度层中,从而达到分离的目的。密度梯度离心法可用来分离不同的细胞、细胞器或病毒颗粒等,根据各自的分离目的,找出相应的密度梯度介质及其组成、离心速度、离心持续时间和作业温度等适宜参数后。

Percoll梯度离心前后精子功能指标分析

目的 :通过分析Percoll梯度离心法处理前后精子相关功能指标 ,评价该法在精子体外处理中的作用。 方法 :采用多次曝光摄影技术、瑞 姬氏染色法、低渗肿胀实验 ,观察处理前后精子运动速度、顶体完整率和低渗肿胀率的变化。 结果 :2 5例不育病人精液标本经Percoll梯度离心法处理前后 ,精子运动速度 (2 0 .5 6± 8.13μm/s和 2 5 .18± 8.30 μm/s ,P <0 .0 5 )、顶体完整率 (6 1.2 0 %± 2 1.11%和 70 .36 %± 17.70 % ,P <0 .0 1)和低渗肿胀率 (6 8.2 8%±17.33%和 76 .76 %± 17.10 % ,P <0 .0 5 )均有显著差异。 结论 :精液标本经Percoll梯度离心法处理后 ,各项精子功能指标均较处理前有明显改善 ,该法可广泛应用于辅助生殖医学中。

用percoll密度梯度离心法快速分离提纯大鼠再生肝细胞

报导一种分离和纯化大鼠再生肝细胞的新方法——percoll密度梯度离心法。本方法快速稳定,而且便于提纯和体外培养,细胞成活力高。

Percoll梯度离心前后精子功能参数的分析

作者通过Percoll梯度离心技术观察处理前后精子相关功能的指标 ,以评价该技术在精子体外处理中的效果 .方法 采用精子前向运动试验 (PMS)、精子尾部低渗肿胀试验 (HOS)和DNA荧光染色有效精子计数试验 (ESC) ,观察精子处理前后PMS ,HOS和ESC的变化 .结果 32例不育病人精液标本经Percoll梯度离心法处理后 ,精子的PMS ,HOS及ESC等指标均明显高于处理前(P <0 .0 1) .该结果表明 ,体外精液标本经Percoll梯度离心法处理后 ,各项精子功能指标均较处理前有明显提高 .

密度梯度离心法对辅助生殖患者精子DFI的改善作用及精子DFI与AIH妊娠率的相关性研究

目的分析密度梯度离心法对行夫精人工授精(AIH)患者精子DNA碎片率(DFI)的改善作用,以及精子DFI与AIH妊娠率的相关性。方法选取2019年9月至2021年10月在内蒙古自治区妇幼保健院实施AIH治疗患者的320个周期作为研究对象,采用流式细胞法获得密度梯度离心法优选前后的精子DFI,并进行统计学分析。结果AIH周期患者精子DFI异常(≥15%)率为25.94%;精子优选处理后DFI得到了显著改善(P<0.01),经密度梯度离心法处理后DFI≥15%的精液标本占比从25.94%下降到了9.07%,经随访95.24%的妊娠个案来自优选处理后精子DFI<15%的分组。结论密度梯度离心法对精子的DFI有显著改善作用;AIH周期的男性患者处理前精子DFI与该周期妊娠率无显著相关性;优选处理后较低精子DFI对应较高的妊娠率,优选处理后的精子DFI对患者的妊娠结局更有预测价值。

浮游板优化精液与密度梯度离心结合上游法的比较

目的应用浮游板和密度梯度离心结合上游法优化人类精液,明确优化效果并比较两种方法优化后精子参数的差异。方法收集正常精液样本85例和轻中度少弱精子症精液样本59例,每例样本分为原液组、密梯组和浮游组各1 ml进行后续处理。原液组在精液液化后未做任何处理;密梯组精液液化后用密度梯度离心法结合上游法进行处理,浮游组则在精液液化后应用精子浮游板进行处理。比较原液组、密梯组、浮游组3个亚组间的精子浓度、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率;应用流式细胞仪检测精子线粒体膜电位和精子DNA碎片指数,使用单精子活性氧分析仪检测单精子活性氧水平,使用电子显微镜观察精子超微结构并进行组间比较。结果无论是正常精液还是轻中度少弱精子症精液,与原液组比较,密梯组与浮游组的前向运动精子百分率、正常形态精子百分率及精子线粒体膜电位均显著升高(P<0.05),精子DNA碎片指数显著降低(P<0.05);密梯组和浮游组各指标无显著性差异(P>0.05)。正常精液中,浮游组的精子浓度显著高于密梯组(P=0.029),单精子活性氧水平显著低于原液组(P=0.038)。轻中度少弱精子症精液中3亚组间的单精子活性氧水平均无显著性差异(P>0.05)。电子显微镜观察发现正常精液中3个亚组的精子均未见明显异常;轻中度少弱精子症精液中密梯组部分精子可观察到精子细胞膜断裂和线粒体肿胀等异常,而浮游组精子超微结构未见明显异常。结论密度梯度离心结合上游法和浮游板法用于精液的处理和优化,均可有效回收活力、形态和功能更好的精子。精子浮游板法的体外干预小,操作简便,可以获得活性氧更少、损伤更小的精子。

1层和2层梯度离心法分离精子的效果评价

目的:评价1层和2层Percoll密度梯度离心法分离精子的效果。方法:20份精液标本分别行50%1层,90%和45%Percoll2层密度梯度离心分离,处理前后应用SCA(sperm class analyzer)精子质量分析仪分析精子密度、活力和圆形细胞密度。结果:1层法分离后精子回收率为(65.5±12.8)%,明显高于2层法(P<0.01);1层和2层法分离后a级精子百分率明显高于处理前(P<0.05,P<0.01),而1层法分离后a级精子百分率明显低于2层法(P<0.05);1层法分离精子后c级精子百分率明显高于2层法(P<0.05),与处理前相比没有明显差异(P>0.05);2层法分离后a+b级精子百分率明显高于处理前(P<0.05),1层法分离后a+b级精子百分率与处理前相比没有明显差异(P>0.05);1层和2层法分离后圆形细胞密度明显低于处理前(P<0.05,P<0.01),两种方法之间没有差异(P>0.05)。结论:1层法分离后精子回收率较高,精子的活力改变不大;2层法分离后精子回收率较低,精子的活力明显改善;1层和2层法都可以较好地把精子与圆形细胞分开。两种方法各有优势,在精子体外处理中都有着重要的应用价值。

密度梯度离心法分离精子在宫腔内人工授精中的应用

目的:探讨密度梯度离心法应用于宫腔内人工授精的精子分离时精子指标的变化及精子形态对回收率的影响。方法:选择2008年9-10月间所有进行宫腔内夫精人工授精的51份精液,采用密度梯度离心法分离精子,记录精子分离前后的各项指标,计算回收率并作统计分析。结果:(1)精子存活率由(53.63±15.94)%提高至(88.75±9.69)%(P<0.05),平均回收率为(25.84±16.57)%。(2)正常形态精子比例由9%提高至18%(P<0.05),各类畸形精子均显著减少,尤其颈部和尾部畸形的精子减少最为明显。(3)根据处理前精子正常形态的比例分为≤4%、5%～14%、≥15%3组,分离后精子存活率分别为(80.45±14.05)%、(91.32±7.30)%、(90.00±4.33)%(P=0.004),回收率分别为(19.67±10.49)%、(28.51±16.87)%、(41.14±15.02)%(P=0.013)。精子正常形态比例与回收率呈正相关(r=0.456,P=0.001)。结论:密度梯度离心法可以有效回收活力好、形态正常的精子,对于去除颈部和尾部畸形的精子效果更好,精子正常形态与回收率呈正相关。

应用密度梯度离心法分离扩增兔骨髓基质细胞的体会

目的 探讨密度梯度离心法分离培养兔骨髓基质干细胞 (BMSc)的条件 ,为组织工程学选择合适的种子细胞奠定基础。方法 采用密度梯度离心法将兔BMSc自小量骨髓中分离并培养 ,观察其增殖和生长特性 ,绘制生长曲线 ,测定分裂指数和贴壁率。结果 兔BMSc在第 7代前性状稳定 ,生长曲线相似 ;第 4天分裂指数最高为 15 % ;传代后 10h贴壁率高达 90 %。结论 密度梯度离心法是分离兔BMSc的理想方法 ,BMSc能为未来组织工程提供足量种子细胞。