Molecular epidemiology of piliated pneumococcal isolates at a major tertiary hospital in the Klang Valley,Malaysia

Objective:To characterise a collection of pili-carrying and none pili-carrying pneumococcal isolates of clinical origin for serotypes,antibiotic resistance and genotype.Methods:In total,42 clinical isolates were collected between October 2017 and December 2019.Those isolates were analysed for antimicrobial susceptibility,serotype distribution,detection of pneumococcal virulence and pilus genes.Multilocus sequence typing was performed only for piliated isolates,followed by phylogenetic analysis.Results:The common isolation sites among the pneumococcal isolates were tracheal aspirate(28.6%),blood(26.2%),and sputum(23.8%).Fifty percent isolates were resistant to erythromycin,tetracycline(50.0%)and trimethoprim-sulfamethoxazole(43.0%).The most frequent were serotypes 19F(28.6%),6A/B(23.8%)and 19A(14.3%).Piliated isolates were detected in a small proportion(33.3%);64.3%were multidrug-resistant.ST320 was the prevalent sequence type among the piliated isolates and genetically related to the Pneumococcal Molecular Epidemiology Network clones Taiwan19F-14(CC271).In the phylogenetic analysis,some piliated isolates showed a close association having similar ST320,carrying serotype 19A and both pilus genes indicating their clonal spread.Conclusions:Pneumococcal lineages of piliated isolates have been globally disseminated and pili could have played a role in the spread of antibiotic resistant clones.

肺炎链球菌在复发性阿弗他溃疡中定居部位的变化

目的 :探讨复发性阿弗他溃疡表面细菌的定居状态。方法 :分别对病例组溃疡灶及对照组唇部粘膜进行了细菌学分离对比研究。结果 :病例组溃疡灶以肺炎链球菌为主 ,而对照组唇部粘膜以甲型溶血性链球菌为主。结论 :复发性阿弗他溃疡患者中肺炎链球菌定居部位发生改变。

家兔肺炎双球菌感染性发热模型

本文报道建立肺炎双球菌感染发热家兔动物模型的方法，比较了不同菌量造成不同程度的动物模型，为科研工作选择轻、中、重度感染性发热动物提供方便。此方法造成的发热持续时间长，更接近于临床细菌感染性发热时的疾病状态，是一种简便易行而又稳定的科学手段。

儿童肺炎链球菌脑膜炎预后不良的预测因素

目的:了解儿童肺炎链球菌脑膜炎预后不良的预测因素。方法:收集2008年1月~2018年12月于某院收治的38例肺炎链球菌脑膜炎患儿的临床资料进行分析。结果:相较预后良好组,预后不良组患儿临床特征为惊厥(8/10 vs 8/28,P=0.008),神志不清(9/10 vs 6/28,P=0.000),机械通气史(6/10 vs 0/28,P=0.000),实验室检查表现为高脑脊液蛋白含量(5.13g/L vs 2.19g/L,P=0.000)及血白细胞计数不升(7.7×10~9/L vs 17.1×10~9/L,P=0.005);两组肺炎链球菌对各种抗菌药物的耐药情况无统计学差异,两组治疗方案无统计学差异。结论:肺炎链球菌脑膜炎患儿预后不良的预测因素为惊厥、神志不清、机械通气史,脑脊液蛋白定量>1.5g/L、血白细胞数<10×10~9/L。

肺炎链球菌在复发性阿弗他溃疡中的致病作用

为探讨复发性阿弗他溃疡与细菌的关系，我们分别对病例组溃疡灶及对照组唇部粘膜进行了细菌学分离对比研究，发现病例组溃疡灶以肺炎链球菌为主，而对照组唇部粘膜以甲型溶血性链球菌为主．认为肺炎链球菌与复发性阿弗他溃疡有关，并进一步讨论了肺炎链球菌的致病机制．

肺炎链球菌的耐药性和pbp2b基因扩增产物图谱的相关性

目的 了解肺炎链球菌对青霉素和其它抗生素的耐药情况 ;对 40株青霉素敏感菌株和 30株青霉素不敏感菌株进行pbp2b基因扩增产物RFLP图谱相关性研究。方法 采用肉汤稀释法、E 试验和K B纸片法进行抗生素药物敏感试验 ;通过用特异性引物pF和pR对肺炎链球菌进行PCR扩增 ,并对扩增产物进行限制性内切酶HaeⅢ消化反应。结果 肺炎链球菌对青霉素的不敏感率为9.9%～ 14.6 %;40株青霉素敏感菌株 (MICs≤ 0 .0 94μg ml)中的 39株 ( 97.5 %)为s1、s2和s3三种之一 ,1株为r1;30株青霉素不敏感菌株 (MICs≥ 0 .12 μg ml)中的 2 6株 ( 86 .7%)为r1～r6六种之一 ,其余 4株为s1。结论 青霉素和 β 内酰胺酶类抗生素对北京地区的肺炎链球菌具有活性 ;肺炎链球菌的耐药性和pbp2b基因扩增产物图谱之间有相关性。

老年人肺炎球菌性脑膜炎临床特点分析

目的 了解老年人肺炎球菌脑膜炎的临床特征。方法 分析 31例经细菌学检查明确的 6 0岁以上老年人肺炎球菌脑膜炎患者的临床资料。结果 31例患者中肺炎 12例 ,发热 31例 ,昏迷31例 ,有并发症者 16例 ,脑脊液涂片阳性 31例 ,脑脊液糖 <1mmol/L 16例。结论 有严重基础疾病和并发症的老年患者 ,脑脊液糖 <1mmol/L预后差。

细菌表面蛋白及多糖结构的免疫原性

细菌表面的多糖及其蛋白质参与细胞各种生理和生化过程的调节，其结构与功能十分复杂。迄今大多数细菌表面的多糖与蛋白质的功能尚未认识清楚。多年来，细菌表面结构分子的免疫原性研究一直是微生物学领域研究的重点领域之一。

肺炎球菌表面蛋白A(PspA)的克隆表达及交叉免疫作用

本工作从中国临床最常见的5种荚膜血清型肺炎链球菌(FY01,FY05,FY6B,FY19F,FY23F)克隆获得编码PspA蛋白N端α-螺旋区的基因片段。分别将5种PspA基因片段克隆到表达载体pET-27b(+)上,成功构建重组质粒pET-pspA,转化大肠杆菌BL21(DE3)。经乳糖诱导表达和亲和层析分离,获得高纯度重组蛋白。通过家族专属引物PCR的方法鉴定这5种荚膜血清型肺炎球菌的PspA蛋白所属家族,并进一步根据基因测序结果通过生物信息学方法鉴定了所属支系。FY01 rPspA、FY6B rPspA、FY19F rPspA同属于家族Ⅰ支系1,FY05 rPspA属于家族Ⅰ支系2,FY23F rPspA属于家族Ⅱ支系3。以FY01 rPspA免疫小鼠,在20μg/mL免疫剂量时抗体滴度达到1:210000,显示了重组蛋白较好的免疫原性。Western blotting交叉免疫反应性研究表明,抗FY01 rPspA抗血清与FY01 rPspA、FY6B rPspA和FY19F rPspA反应性较好,而与另外两种重组蛋白几乎无反应,提示PspA交叉免疫作用仅限于本支系内。动物保护实验表明,FY01 rPspA免疫的小鼠对FY6B、FY01两种菌的攻击具有较好的保护作用,对FY05、FY23F的攻击未见明显的保护作用。本研究成果对于研制高效肺炎球菌疫苗具有重要的指导意义。