神经可塑性是大脑在发育过程中产生的能够适应外界环境变化的能力,发生机制是神经元产生突触可塑性,通过突触与大脑其他部位的神经元相互作用,最终实现大脑功能的可塑性变化。神经可塑性是神经发生过程中一种重要的分子基础,对中枢神经...神经可塑性是大脑在发育过程中产生的能够适应外界环境变化的能力,发生机制是神经元产生突触可塑性,通过突触与大脑其他部位的神经元相互作用,最终实现大脑功能的可塑性变化。神经可塑性是神经发生过程中一种重要的分子基础,对中枢神经系统疾病的治疗具有重要意义。Rho/ROCK(Rho GTPase/Rho-associated protein kinase)信号通路是目前研究最为广泛的信号通路之一,它在神经发育和突触可塑性中都发挥了重要作用。本文就Rho/ROCK信号通路在神经可塑性中的作用及相关研究进展进行综述。展开更多
目的:探讨大黄素对脂多糖(LPS)诱导损伤的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)骨架及通透性影响的作用机制。方法:HUECs分为五组:正常对照组、内皮炎症损伤模型组(0.2μg/m L LPS)、大黄素干预组(10μmol/L大黄素+0.2μg/m L LPS)、抑制剂对照...目的:探讨大黄素对脂多糖(LPS)诱导损伤的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)骨架及通透性影响的作用机制。方法:HUECs分为五组:正常对照组、内皮炎症损伤模型组(0.2μg/m L LPS)、大黄素干预组(10μmol/L大黄素+0.2μg/m L LPS)、抑制剂对照组(0.2μg/m L LPS+50μmol/L Y27632)、西药对照组(10-5mol/L缬沙坦+0.2μg/m L LPS)。首先,以内皮细胞生物学功能PCR基因芯片技术筛选可能的基因改变。结合基因芯片结果和文献中各基因功能,拟定观察Rho/ROCK通路相关的和可能涉及调节细胞骨架的基因,如纤连蛋白(FN)、整合素A5(ITGA5)、Ras同源基因家族成员(Rho A)、肌球蛋白轻链磷酸酶(MLCP)、磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸肌醇3-激酶(PI3K)、黏着斑激酶(FAK)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)的m RNA表达水平,进行实时荧光定量PCR验证,同时以Western blotting对ITGA5、Rho A、4,5-二磷酸磷脂酰肌醇(PIP2)和磷酸化的肌球蛋白轻链(PMLC)进行蛋白水平的研究。结果:1LPS组Rho/ROCK通路相关基因(FN、ITGA5、Rho A、MLCP、PI3K、FAK、VEGF、VEGFR2)表达显著升高,ITGA5、Rho A、PIP2、PMLC的蛋白表达亦升高,与正常对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。2与LPS组比较,Y27632组、缬沙坦组的FN、ITGA5、Rho A、PI3K、FAK、VEGF、VEGFR2基因表达下降,MLCP表达上升,差异均有统计学意义(P<0.05);ITGA5、PIP2的蛋白表达下降;缬沙坦组PMLC表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。3与LPS组比较,大黄素组FN、PI3K、FAK表达降低,MLCP表达上升,差异均有统计学意义(P<0.05);PIP2蛋白表达下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:LPS可激活Rho/ROCK信号通路,成功构建HUVECs内皮损伤模型;Y27632和缬沙坦可阻断Rho/ROCK通路,对细胞骨架有较强的保护作用;大黄素可轻度抑制Rho/ROCK通路,同时可能通过调节PI3K、MLCP表达而影响其他通路(如AKT和/或FAK-PI3K信号通路)从而发挥对内皮细胞损伤的干预作用。展开更多
目的:探讨RHO/ROCK信号通路在人精子抗冷冻损伤中的作用,为高效精液冷冻保护剂的研制提供理论依据。方法:选取健康精液25份,每份精液分为新鲜组、对照组与RHO通路抑制剂组(抑制剂组)。检测冷冻前后各组精液精子活力、精子存活率、精子...目的:探讨RHO/ROCK信号通路在人精子抗冷冻损伤中的作用,为高效精液冷冻保护剂的研制提供理论依据。方法:选取健康精液25份,每份精液分为新鲜组、对照组与RHO通路抑制剂组(抑制剂组)。检测冷冻前后各组精液精子活力、精子存活率、精子膜完整率、正常形态精子百分率、精子DNA碎片指数(DFI)、精子顶体酶活性及精子线粒体膜电位变化;免疫荧光染色检测RHOa/ROCK蛋白在精子中的表达。结果:抑制剂组精液冷冻复苏后精子活力[(57.50±6.83)%vs(51.20±7.70)%,P=0.002]、精子存活率[(60.24±5.53)%vs(52.87±5.07)%,P=0.001]、精子膜完整率[(67.10±4.43)%vs(59.78±5.56)%,P=0.001]、正常形态精子百分率[(7.46±1.28)%vs(4.83±1.11)%,P=0.001]、精子DFI[(18.87±4.07)%vs(27.64±6.64)%,P=0.001]、精子线粒体膜电位(63.11±2.97 vs 56.30±4.28,P=0.001)指标均明显优于对照组;抑制剂组冷冻后精子顶体酶活性与对照组差异无统计学意义(98.30±11.33 vs 97.65±9.31,P>0.05)。免疫荧光染色显示RHOa/ROCK蛋白在精子头、颈部广泛表达。结论:RHO/ROCK信号通路在精子冷冻损伤中具有一定作用,抑制其通路活性可明显提高精子抗冷冻损伤的能力。展开更多
文摘神经可塑性是大脑在发育过程中产生的能够适应外界环境变化的能力,发生机制是神经元产生突触可塑性,通过突触与大脑其他部位的神经元相互作用,最终实现大脑功能的可塑性变化。神经可塑性是神经发生过程中一种重要的分子基础,对中枢神经系统疾病的治疗具有重要意义。Rho/ROCK(Rho GTPase/Rho-associated protein kinase)信号通路是目前研究最为广泛的信号通路之一,它在神经发育和突触可塑性中都发挥了重要作用。本文就Rho/ROCK信号通路在神经可塑性中的作用及相关研究进展进行综述。
文摘目的:探讨大黄素对脂多糖(LPS)诱导损伤的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)骨架及通透性影响的作用机制。方法:HUECs分为五组:正常对照组、内皮炎症损伤模型组(0.2μg/m L LPS)、大黄素干预组(10μmol/L大黄素+0.2μg/m L LPS)、抑制剂对照组(0.2μg/m L LPS+50μmol/L Y27632)、西药对照组(10-5mol/L缬沙坦+0.2μg/m L LPS)。首先,以内皮细胞生物学功能PCR基因芯片技术筛选可能的基因改变。结合基因芯片结果和文献中各基因功能,拟定观察Rho/ROCK通路相关的和可能涉及调节细胞骨架的基因,如纤连蛋白(FN)、整合素A5(ITGA5)、Ras同源基因家族成员(Rho A)、肌球蛋白轻链磷酸酶(MLCP)、磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸肌醇3-激酶(PI3K)、黏着斑激酶(FAK)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)的m RNA表达水平,进行实时荧光定量PCR验证,同时以Western blotting对ITGA5、Rho A、4,5-二磷酸磷脂酰肌醇(PIP2)和磷酸化的肌球蛋白轻链(PMLC)进行蛋白水平的研究。结果:1LPS组Rho/ROCK通路相关基因(FN、ITGA5、Rho A、MLCP、PI3K、FAK、VEGF、VEGFR2)表达显著升高,ITGA5、Rho A、PIP2、PMLC的蛋白表达亦升高,与正常对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。2与LPS组比较,Y27632组、缬沙坦组的FN、ITGA5、Rho A、PI3K、FAK、VEGF、VEGFR2基因表达下降,MLCP表达上升,差异均有统计学意义(P<0.05);ITGA5、PIP2的蛋白表达下降;缬沙坦组PMLC表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。3与LPS组比较,大黄素组FN、PI3K、FAK表达降低,MLCP表达上升,差异均有统计学意义(P<0.05);PIP2蛋白表达下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:LPS可激活Rho/ROCK信号通路,成功构建HUVECs内皮损伤模型;Y27632和缬沙坦可阻断Rho/ROCK通路,对细胞骨架有较强的保护作用;大黄素可轻度抑制Rho/ROCK通路,同时可能通过调节PI3K、MLCP表达而影响其他通路(如AKT和/或FAK-PI3K信号通路)从而发挥对内皮细胞损伤的干预作用。
文摘目的:探讨RHO/ROCK信号通路在人精子抗冷冻损伤中的作用,为高效精液冷冻保护剂的研制提供理论依据。方法:选取健康精液25份,每份精液分为新鲜组、对照组与RHO通路抑制剂组(抑制剂组)。检测冷冻前后各组精液精子活力、精子存活率、精子膜完整率、正常形态精子百分率、精子DNA碎片指数(DFI)、精子顶体酶活性及精子线粒体膜电位变化;免疫荧光染色检测RHOa/ROCK蛋白在精子中的表达。结果:抑制剂组精液冷冻复苏后精子活力[(57.50±6.83)%vs(51.20±7.70)%,P=0.002]、精子存活率[(60.24±5.53)%vs(52.87±5.07)%,P=0.001]、精子膜完整率[(67.10±4.43)%vs(59.78±5.56)%,P=0.001]、正常形态精子百分率[(7.46±1.28)%vs(4.83±1.11)%,P=0.001]、精子DFI[(18.87±4.07)%vs(27.64±6.64)%,P=0.001]、精子线粒体膜电位(63.11±2.97 vs 56.30±4.28,P=0.001)指标均明显优于对照组;抑制剂组冷冻后精子顶体酶活性与对照组差异无统计学意义(98.30±11.33 vs 97.65±9.31,P>0.05)。免疫荧光染色显示RHOa/ROCK蛋白在精子头、颈部广泛表达。结论:RHO/ROCK信号通路在精子冷冻损伤中具有一定作用,抑制其通路活性可明显提高精子抗冷冻损伤的能力。
