大黄酸调控Rac1/LIMK1/cofilin信号通路抑制卵巢癌细胞运动与侵袭

目的探讨大黄酸对卵巢癌淋巴结高转移SKOV3-PM4细胞运动和侵袭能力的影响,揭示大黄酸调控Rac1/LIMK1/cofilin信号通路与抑制卵巢癌细胞运动侵袭作用的机制。方法划痕实验观察大黄酸对卵巢癌细胞运动的影响,Matrigel-Transwell方法检测细胞侵袭能力,激光共聚焦扫描显微镜和扫描电镜观察大黄酸对卵巢癌细胞形态和细胞骨架超微结构的影响,Western blot分别检测Rac1/LIMK1/cofilin通路上Rac1、LIMK1、PAK1、cofilin蛋白的表达。结果与空白对照组相比,大黄酸能抑制SKOV3-PM4细胞侵袭和迁移能力,浓度为8.8、17.60、26.40μmol·L^(-1)的大黄酸处理24 h后,细胞体外迁移和侵袭能力均明显下降(P<0.05);细胞出现伪足减少,细胞内微丝断裂、分布紊乱,质膜凹凸不平、细胞间的间隙变宽等超微结构改变;Western blot结果表明大黄酸能明显下调Rac1蛋白的表达水平,并呈浓度依赖性。卵巢癌细胞经大黄酸及Rac1抑制剂处理后,磷酸化LIMK1、cofilin、PAK1蛋白水平与空白对照组比较明显下降,且大黄酸联合Rac1抑制剂处理后的磷酸化蛋白下调更为明显(P<0.05);而Rac1激活剂联合大黄酸组比大黄酸组磷酸化蛋白上调明显(P<0.05)。结论大黄酸为潜在的Rac1小分子抑制剂,其作用机制可能是调控Rac1/LIMK1/cofilin信号通路,抑制卵巢癌淋巴结转移细胞运动和侵袭的能力。

Rac1抑制剂上调糖尿病小鼠肾小球nephrin的表达

目的:探讨Rac1抑制剂(NSC33766)对STZ诱导的糖尿病小鼠肾小球内nephrin水平的影响。方法:采用腹腔单剂注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ,150mg/kg)的方法建立小鼠糖尿病模型,检测NSC33766对正常和糖尿病小鼠尿白蛋白排泄率、血清肌酐水平的影响,采用PAS染色观察肾脏组织学的改变,透射电镜观察超微结构的改变;采用免疫组化观察NSC33766对肾组织内足细胞骨架蛋白nephrin表达的影响。结果:NSC33766降低糖尿病小鼠尿白蛋白排泄率;减少肾组织内系膜区细胞外基质的积聚和基底膜的厚度,改善肾小球滤过膜足突融合,上调nephrin表达,未发现NSC33766具有降低血糖的作用。结论:Rac1抑制剂NSC33766可能通过上调肾小球内nephrin水平,改善足细胞骨架的方式,对糖尿病肾脏损伤具有保护作用。

酪氨酸激酶抑制剂抑制骨髓瘤细胞的增殖及Rac1的表达

目的:观察酪氨酸激酶抑制剂STI571对骨髓瘤细胞系RPMI8226细胞增殖、细胞周期以及Rac1 mRNA表达的影响。方法:采用MTT法检测STI571对骨髓瘤细胞增殖的影响;流式细胞仪检测对细胞周期的影响;半定量RT-PCR研究Rac1mRNA水平的变化。结果:STI571明显抑制RPMI8226细胞的增殖,24、48、72 h IC50值分别为(34.52±2.31)μmol/L、(28.46±1.58)μmol/L、(25.74±2.44)μmol/L。25μmol/L STI571处理24 h,G1期细胞由55.8%增加至72.4%,S期细胞由34.8%减至15.6%。半定量RT-PCR显示,Rac1 mRNA水平在25μmol/L STI571处理24 h后明显下降。结论:STI571能抑制RPMI8226细胞的增殖,并可下调其Rac1 mRNA水平。

Rac1抑制剂对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞损伤的影响及其作用机制

目的探讨Rac1抑制剂(NSC23766)对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞损伤的影响及其机制。方法以大鼠肾小球系膜细胞为研究对象,将大鼠肾小球系膜细胞随机分为正常糖组(NG组)、高糖刺激组(HG组)、高糖刺激+NSC23766组(HG+NSC组)、溶剂对照组(HG+DMSO组)和渗透压对照甘露醇组(MG组)。应用CCK-8试剂盒检测不同浓度NSC23766对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞活力的影响,采用流式细胞仪检测各组大鼠肾小球系膜细胞凋亡情况,采用Western blot法检测各组大鼠肾小球系膜细胞磷酸化氨基末端蛋白激酶(p-JNK)、Cleaved caspase-3蛋白表达水平、核因子κB(NF-κB)核转入水平,应用智能激光共聚焦显微镜分析各组细胞NF-κB表达情况。结果与NG组比较,HG组细胞活力降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),p-JNK、Cleaved caspase-3蛋白表达量增加,NF-κB核转入增加(P<0.05);与HG组比较,HG+NSC(10μmol/L)组细胞活力明显增加(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),p-JNK、Cleaved caspase-3蛋白表达量降低,NF-κB核转入减少(P<0.05);与HG+NSC(10μmol/L)组比较,HG+DMSO组细胞活力降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),p-JNK、Cleaved caspase-3、蛋白表达水平增加,NF-κB核转入增加(P<0.05)。Rac1抑制剂(NSC23766)可使高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞活力增加,凋亡率下降,降低p-JNK、Cleaved caspase-3蛋白表达水平和NF-κB核转入量。结论 NSC23766可通过抑制Rac1/JNK/NF-κB信号通路减轻高糖诱导的肾小球系膜细胞损伤。

Rac1在肿瘤耐药中的研究进展

Ras相关C3肉毒毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,Rac1)对于包括癌症在内的各种疾病的发展和进展至关重要,并且已有研究表明Rac1与肿瘤耐药性相关。该综述概述了Rac1在调节耐药性中的作用,以及相关机制和可用的抑制剂,这可能为未来靶向癌症耐药性的治疗提供新的方向和选择。