重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型Re-6株)对散养鸭免疫效果的研究

为评估政府采购重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型Re-6株)对水禽的临床免疫效果,在县级疫苗储备库中,选取6家企业生产的重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型Re-6株)免疫散养鸭,结果显示,试验疫苗免疫安全性良好,能产生明显的免疫反应,除有1家企业疫苗效果较差外,其他5个企业生产的疫苗对鸭免疫效果良好,免疫接种后最早14d即产生合格抗体,免疫有效期最长达151d以上。

H5N1亚型Re-6株禽流感病毒灭活疫苗对散养鸡的免疫效果

为评估H5N1亚型Re-6株禽流感病毒灭活疫苗的临床免疫效果,在县级疫苗储备库中,随机提取7家企业生产的H5N1亚型Re-6株禽流感病毒灭活疫苗免疫农户散养鸡。结果显示,试验疫苗安全性好,均能产生明显的免疫反应,但不同企业的疫苗免疫效果有差异,免疫后最早21 d可产生合格抗体,免疫有效期最长可达142 d以上。

H5亚型禽流感(Re-4+Re-5株)疫苗对不同禽群的免疫效果比较

为了摸清H5亚型禽流感(Re-4+Re-5株)疫苗对不同禽群的免疫效果,以及时发现、分析免疫中存在的问题,发现免疫不合格的及时进行补免,确保山东省不发生疫情,本研究使用H5亚型禽流感(Re-4+Re-5株)灭活疫苗免疫鸡、鸭、鹅等不同家禽,测定其免疫抗体合格率。结果表明,加强免疫H5亚型禽流感(Re-4+Re-5株)灭活疫苗可使鸡群达到100%免疫抗体合格率,但鸭群的免疫抗体合格率不理想。

家禽H5亚型禽流感(Re-6株)疫苗免疫抗体消长规律研究

为了解H5亚型重组禽流感Re-6株灭活疫苗在鸡、鸭免疫后的抗体消长规律,本实验分别选择一个鸡场和鸭场开展了临床免疫实验.实验鸡群于14日龄首免单价疫苗（Re-6株）和H5亚型二价疫苗（Re-6株＋Re-4株）后,在30日龄～200日龄不同时间点采血检测Re-6抗体,结果表明,二价疫苗比单价疫苗免疫后的Re-6免疫抗体产生早、效价高、抗体整齐度好;40日龄二免后20 d,二价疫苗和单价疫苗的Re-6免疫抗体消长规律趋于一致.实验鸭群于17日龄分别采用禽流感（H5＋H9）双价灭活疫苗和单价灭活疫苗（HSN1亚型,Re-6株）进行免疫,免后45日龄～205日龄不同时间点检测Re-6抗体,结果表明,双价疫苗与单价疫苗均可以诱导免疫鸭产生高水平抗体,而且两种疫苗的消长规律相似.此外,45日龄二免Re-6株疫苗的免疫程序要优于70日龄二免的免疫程序.本研究评估Re-6疫苗的防控效果,为家禽H5亚型禽流感免疫防制提供了实验依据.

H5N1亚型重组禽流感病毒灭活疫苗(Re-6株)田间试验效果观察

为验证重组禽流感病毒(H5N1亚型)灭活疫苗(细胞源,Re-6株)对家禽的安全性和免疫效果,通过注射3个鸡群7 580只,注射疫苗后连续2周观察鸡只的精神状态、采食量、粪便及鸡群死亡率,均未发生异常情况,与注射之前无明显差异。对其中2群35日龄凤翔麻鸡疫苗注射前后采血,按照《高致病性禽流感免疫技术规范》(NYT769-2004血凝抑制(HI)试验操作进行HI抗体效价测定。结果显示,第1、2群疫苗免疫后15、21、30、45、60、75 d的免疫抗体合格率分别为18.64%、51.02%、84.21%、91.07%、88.68%、75.00%与24%、100.0%、97.92%、100.0%、95.38%。表明在田间试验条件下,重组禽流感病毒(H5N1亚型)灭活疫苗(细胞源,Re-6株)安全性高、副反应小,免疫效果相对较好。

小麦赤霉病的生物防治研究 Ⅲ .拮抗芽孢杆菌B4、B6菌株的防病机制

枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)B4和B6菌株对小麦赤霉病菌(Fusariumgraminearum)的作用机制主要是通过产生抗生代谢产物抑制病菌的孢子萌发和菌丝生长。抗菌物质无挥发性,主要为脂溶性和水溶物质。通过硫酸铵盐析和SDS-PGE分析,抗菌蛋白是重要的抗菌物质,蛋白组分的分子量范围在20～63kD之间。最适于两菌株产生抗菌物质的条件是:YSP培养基、pH7 0、28℃和充足的氧。产生抗菌活性物质的高峰期,分别是在培养72h(B6菌株)和96h(B4菌株)。抗菌物质在酸性和中性条件下对热稳定,在碱性条件下则不稳定。

对重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)在家禽免疫效果方面的调研

2006-2007年，通过检测免疫注射H5N1重组禽流感病毒灭活疫苗（Re-1株）后3～4周的444个鸡场、66个鸭场和28个鹅场共计16140份血清中H5亚型禽流感血凝抑制抗体水平，比较A、B、c、D、E5个不同厂家的疫苗对鸡、鸭、鹅免疫效果。结果显示：重组禽流感灭活疫苗（H5N1亚型，Re-1株）对鸡的免疫效果明显好于鸭和鹅；不同厂家疫苗质量和免疫效果有差异，其中A厂疫苗质量和免疫效果最好。

沂南县某蛋鸡场新城疫、禽流感H_5亚型(Re-5株)抗体水平的监测

新城疫、禽流感作为危害养禽业的主要传染病,通过其抗体水平监测,分析免疫状态,对鸡群合理饲养,确保养鸡业健康发展。本次检测沂南县某蛋鸡场血样50份,分离血清,通过微量血凝及血凝抑制试验(HI)进行新城疫、禽流感H5亚型(Re-5株)抗体水平监测。试验结果表明,新城疫平均HI抗体效价为9.4 log 2,禽流感H5亚型(Re-5株)平均HI效价为7.64 log 2,说明整场免疫合格,但鸡群需要补种禽流感H5亚型二联油乳剂灭活苗。

费县养鸡场新城疫、禽流感H5亚型(Re-5株)抗体监测

本次检测费县某蛋鸡场血样30份,分离血清,通过微量血凝及血凝抑制试验(HI)进行新城疫、禽流感H5亚型(Re-5株)抗体监测。结果表明,该鸡场新城疫HI抗体效价≥5log2的占87%,新城疫免疫合格;而禽流感抗体效价≥5log2的占67%,禽流感H5亚型免疫失败,鸡场必须补免或重免禽流感H5亚型二联油乳剂灭活苗。

Re-8株H5亚型禽流感灭活疫苗对野鸟源H5N8流感病毒的免疫保护性研究

为评估当前应用的Re-8株种毒相关禽流感灭活疫苗对野鸟源H5N8流感病毒的免疫预防效果,本研究将重组禽流感病毒(AIV)H5亚型Re-8株灭活疫苗(H5N1亚型,Re-8株)和重组AIV(H5+H7)灭活疫苗(H5N1Re-8株+H7N9 H7 Re-1株)分别以0.3 m L/只的剂量接种3周龄SPF鸡,免疫3周时进行HI抗体检测和攻毒试验。结果显示,上述2种疫苗免疫的SPF鸡血清中针对H5亚型Re-8株抗原的HI抗体均在8 log2以上,以105EID50的剂量、鼻腔感染途径攻击野鸟源H5N8病毒BHG/QH/2/16和BHG/Tibet/3/16后,所有免疫组鸡在14 d观察期内均全部健活,不排毒,而对照组鸡在攻毒后4 d内全部发病、死亡、排毒。现地免疫重组AIV H5亚型三价灭活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株)的商品蛋鸡直接进行HI抗体检测和攻毒试验,结果显示,免疫蛋鸡血清中针对Re-8株抗原的HI抗体平均滴度为8.3 log2,以相同攻毒方式和剂量分别攻击2株H5N8病毒后,免疫鸡也获得完全免疫保护,不发病、不死亡、不排毒。本研究结果表明,含有重组AIV H5 Re-8株抗原的灭活疫苗可有效防控野鸟源H5N8流感病毒,为我国及其他国家H5N8亚型禽流感免疫防控提供了科学依据。

重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1型,Re-1株)抗体产生规律试验报告

通过红细胞凝集抑制试验(HI试验),对蛋用雏鸡使用重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1型,Re-1株)和某种禽流感重组二联活疫苗的不同免疫程序的免疫效果进行监测,掌握禽流感HI抗体产生及消长规律,制定适合的种鸡和商品蛋鸡预防高致病性禽流感的免疫程序和免疫规范。

毕英佐:H5流行毒株有变,2019疫苗毒株为Re-11z+Re-12株

一、2.3.4.4d分支成我国H5流感流行毒株2018年OIE的监测数据显示,高致病性禽流感在世界范围内的家禽和野鸟广泛流行。中国流行情况最为复杂,H5N1、H5N2、H5N6、H5N8和H7N9等禽流感亚型均有发生。2018年我国爆发的H5疫情以2.3.4.4d分支的H5N6为主,部分地区有2.3.2.1d分支的H5N1发生。

通海县禽流感H5(Re-8株)免疫情况调查

通海县是蛋鸡养殖大县,高致病性禽流感H5(Re-8株)是2014年以来对通海县养殖业威胁最大的动物疫病之一,2016年3月政府开始免费提供该病疫苗,为掌握H5(Re-株8)免疫情况,县动物疫病预防控制中心开展了此次调查,经调查发现,通海县蛋鸡已普遍进行过H5(Re-8株)的免疫,并已具备一定抗体水平。

猪轮状病毒JL94中国分离株衣壳蛋白基因的分析

根据GenBank发表的猪轮状病毒衣壳蛋白vp4基因、vp6基因和vp7基因保守序列,设计合成3对引物,分别扩增猪轮状病毒中国分离株JL94株的此3段基因并进行序列分析。结果表明,JL94株vp4基因与国外分离株CRW-8株、OSU株、Gottfried株、4F株和4S株的VP4氨基酸同源性分别为97.16％、95％、71.88％、73.45％和70.88％;JL94株vp6与CRW-8株、OSU株、Gottfried株、4F株和4S株的VP6氨基酸同源性分别为96.98％、97.48％、93.20％、97.48％和93％;JL94株vp7基因与CRW-8株、OSU株、Gottfried株、4F株和4S株的VP7氨基酸同源性分别为98％、99.90％、75.40％、84.66％和80％。可见JL94株同CRW-8株、OSU株同源性更高些;vp4和vp7基因在同型间高度保守而不同型间差距较大,vp6基因在同群和非同群间差别不是很明显。同时可以判定JL94属于A群Ⅰ亚群G5P7血清型PRV。研究猪轮状病毒中国分离株JL94株衣壳蛋白基因的特征,为研制高效抗病毒疫苗奠定基础。

AA肉仔鸡禽流感H5N1亚型Re-6株母源抗体跟踪监测报告

笔者跟踪监测了肉仔鸡母源抗体。结果表明,在2 d时母源抗体水平较高,集中在6log2~9log2,平均抗体滴度为7.10,抗体阳性率为100%;在8d时母源抗体水平集中在4log2~7log2,平均抗体滴度为5.70,抗体阳性率为100%;在17d时母源抗体水平主要集中在2log2~5log2,平均抗体滴度为3.19,抗体阳性率为42.31%;在24 d^37 d的3次检测结果,母源抗体水平均为≤2log2,平均抗体滴度分别为0.47、0.13和0,抗体阳性率均为0%;跟踪检测抗体的下降具有明显的线性关系。通过监测数据分析,该场雏鸡14日龄左右是最佳的AIV H5N1 Re-6免疫日龄。

鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活苗(La Sota株+M41株+Re-9株)应用效果研究

鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活苗(La Sota株+M41株+Re-9株)(三联苗(Re-9株))为国内首个采用基因重组H9亚型禽流感疫苗株研制的新支流三联灭活疫苗。为研究疫苗上市后的实际应用效果,使用7日龄AA肉鸡和260日龄产蛋期蛋鸡评价三联苗(Re-9株)有效性。结果显示:肉鸡免疫后14 d即可激发抗体,免疫后21 d,新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、H9亚型禽流感病毒(H9 AIV)的血凝抑制(HI)抗体分别达8.6log2、6.2log2、8.3log2,出栏时仍维持在较高水平;于免疫后14 d抽样进行NDV、H9 AIV攻毒,对照组均100%发病或排毒,免疫鸡均可获得100%保护;在蛋鸡上,免疫三联苗(Re-9株)后28 d,NDV、IBV、H9 AIV的HI抗体效价分别达12.0log2、7.8log2、12.2log2,免疫后6个月仍可以维持在较高水平。结果表明:三联苗(Re-9株)在实际应用中免疫效果较好,本研究将为鸡新城疫、传染性支气管炎、H9亚型禽流感的防控提供有力支撑。

禽流感H5亚型Re-12株免疫抗体监测及分析

为了有效防控禽流感疫情的发生,有关部门对昌平区养殖场鸡群进行了H5亚型禽流感免疫。为了检验免疫效果,笔者对鸡群进行了抗体跟踪监测试验,分别监测免疫后30d、31~60 d、61~120 d的蛋鸡群抗体。检测结果表明,30~120d的3个时间段AIVH5Re-12-HI抗体平均合格率分别为96.87%、91.23%和94.51%,均合格。

不同茯苓菌株胞外代谢产物及抗氧化活性比较

本研究比较8个茯苓菌株胞外代谢产物和体外抗氧化活性的差异,并采用主成分分析(principal componentsanalysis,PCA)法对茯苓菌株进行综合评价。使用广泛靶向代谢组学分析胞外黄酮类和胞外酚类化合物的组成,研究茯苓发挥抗氧化作用的主要成分。结果表明,茯苓GTR1菌株胞外多糖、胞外三萜和胞外甾醇含量最高;茯苓GTR2菌株胞外黄酮和胞外总酚含量最高。体外抗氧化实验结果表明,茯苓F5.78菌株对2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基的清除能力最高,茯苓GTR2菌株的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率最高,茯苓XJ28菌株的羟自由基清除率最高。相关性分析结果表明,茯苓菌株的DPPH自由基清除率、胞外总酚含量与胞外黄酮含量呈极显著正相关(P<0.01)。通过超高效液相色谱-质谱联用仪定性检测出55种黄酮类化合物和33种酚类化合物,不同茯苓菌株之间各组分的相对含量存在差异,其中茯苓FLA、FGD、FGZ、FHB、GTR1、XJ28和F5.78菌株相对含量最高的黄酮类组分是丙二酰大豆黄酮,相对含量最高的酚类组分是3-醛基水杨酸。茯苓GTR2菌株相对含量最高的黄酮类组分是山柰酚-3-O-(6-没食子酰)葡萄糖苷,该组分相对含量与DPPH自由基清除率呈极显著正相关(P<0.01),相对含量最高的酚类组分为α-氰基-4-羟基肉桂酸,该组分与DPPH自由基清除率呈显著正相关(P<0.05)。根据PCA评价,综合得分最高的是GTR2菌株。GTR2菌株胞外活性成分含量较高、抗氧化活性好,可作为茯苓抗氧化产品开发的潜力菌株。

重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗免疫SPF鸡、SPF鸭后抗体消长规律分析

为了解重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-4株)的免疫效果,为临床上制定合理的禽流感疫苗免疫程序提供依据,选取3个企业生产的12批疫苗,免疫SPF鸡、SPF鸭,跟踪至免疫后24周,每3周采血检测Re-6、Re-4 HI抗体效价。结果表明:SPF鸡、SPF鸭分别在免疫后6周和3周Re-4、Re-6抗体即可达到高峰值,随着时间的推移,抗体水平逐渐下降;SPF鸡抗体的高峰值高于SPF鸭;SPF鸡的高抗体水平的维持期长于SPF鸭;3个企业的疫苗均有良好的免疫效果。

广东省猪生殖与呼吸综合征病毒主要结构蛋白基因的变异分析

根据GenBank中猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株(ATCC VR-2332)基因序列分别设计合成了针对PRRSV ORF3、ORF5和ORF6基因的引物,利用RT-PCR从广东省送检的5份病料中均分别扩增得到了大小约787、630和550 bp的片段,将扩增的cDNA片段克隆入pMD 18-T载体并测序.应用DNAStar软件分析,并与国内外已发表毒株和疫苗株(RespPRRS/Repro、RespPRRS MLV)、LV4.2.1株的序列进行比较.结果显示,这5个毒株与CH-1a、HB-1(sh)、BJ-4、ATCC VR-2332、疫苗株等毒株ORF3、ORF5、ORF6的核苷酸同源性分别为87.2%～98.7%、85.4%～96.8%、91.8%～98.9%,推导的氨基酸同源性分别为84.6%～97.6%、84.5%～95.5%、94.8%～98.9%;而与LV4.2.1株的核苷酸同源性分别为56.1%～58.3%、54.4%～57.0%、62.2%～64.4%,推导的氨基酸同源性分别为53.9%～56.7%、54.0%～57.0%、78.0%～80.3%.基因系统发育树表明,广东省流行的PRRSV与HB-1(sh)株的亲缘关系比较近.