青藤Sinomenium acutum(Thunb.)Rehd.et Wils全基因组调查

青藤是一种重要的中药材,具有较高的药用价值。目前,对于青藤的分子生物学研究极为有限,基因资源比较匮乏。全基因组的破译将为其分子生物学研究的深入开展提供坚实的基础,而对青藤进行全基因组调查以明确其基因组特征可以为全基因测序方案的制定提供依据。本研究基于Illumina测序平台测定了青藤基因组,结合生物信息学方法得到基因组大小、杂合率、重复序列等特征,并采用SOAPdenovo软件对基因组进行初步组装。过滤得到168.72 G有效数据,青藤基因组大小估计为829.72 Mb;重复序列比率为51.72%,杂合率为0.48%,GC含量为34.57%;K-mer=35进行初步组装得到contigs N50为162 bp,总长为621 033 264 bp,scaffolds N50为489 bp,总长为780 536 487 bp。鉴于青藤基因组高重复序列的特点,其全基因测序可采用Illumina测序技术和Pac Bio测序技术相结合的策略,并采用Hi-C技术以及其相应的组装软件,以此获得青藤全基因组图谱。

干旱胁迫对锥栗幼苗生理特征的影响

为研究锥栗幼苗响应干旱胁迫的生理反应过程,筛选和培育出拥有抗旱性的品种,本文以两年生锥栗幼苗为试验材料,通过人工模拟干旱胁迫的方法,共设置0 d、5 d、10 d、15 d、20 d共5个干旱时间梯度,测定锥栗幼苗在不同缺水程度下6个指标的变化,探究干旱因子对幼苗生物量及生理指标的影响。结果表明:持续干旱胁迫下,锥栗幼苗的生物量表现出不断下降的趋势,轻度的干旱对生物量抑制不显著或基本没有影响,中度和重度干旱对生物量起到了显著的抑制作用。随着干旱胁迫时间的逐渐延长,叶片丙二醛含量与SOD活性表现出先上升后下降的变化规律,在T3处理(15 d)达到了最高水平,随后出现下降,T4处理(20 d)略微低于正常处理;叶片脯氨酸含量与POD活性表现出逐渐升高的趋势,且提升幅度都较大,在T4处理(20 d)达到了最高值;叶片CAT活性表现出先持续升高的趋势,在T2处理(10 d)时达到最大值,随后大幅度下降且显著低于正常处理。干旱胁迫下锥栗幼苗的各项指标变化不同,初步认为幼苗大约可以耐受20 d左右的干旱逆境,植物本身具有较强的抗旱性。

套作玉米对华中五味子幼苗生长及根际土壤微生物群落的影响

玉米套作如何影响华中五味子(Schisandra sphenanthera Rehd.et Wils)幼苗生长及根际微生物群落结构尚不清楚。本研究通过大田试验将华中五味子与玉米套作,探究套作对华中五味子植株生物量的影响,并使用高通量测序技术对华中五味子根际土壤的细菌、真菌群落结构进行测定。结果表明,套作增加华中五味子生物量(茎长、地径、地上部分干质量、地下部分干质量)。此外,和单作相比,与玉米套作显著改变了华中五味子土壤微生物群落结构,且提高了部分与华中五味子生物量呈正相关根际促生菌如Pseudomonas(假单胞菌)、Gaiella、Kotlabaea等的丰度。且这些与华中五味子呈正相关的细菌、真菌受氮、磷、铝等及部分微量元素调控。本研究将为华中五味子幼苗管理提供候选方案及相关理论依据。

基质配比对厚朴穴盘苗生长的影响初报

采用穴盘育苗方法,研究了基于煤渣灰为主料的不同基质配比处理对厚朴(Magnolia officinalis Rehd.et Wils.)幼苗生长的影响。结果表明,厚朴育苗过程中,100%煤渣灰基质所育厚朴幼苗各生长因子均低于100%商用基质,人工复合基质以20%的葛渣+80%煤渣灰基质处理效果最好,与对照相比,其所育厚朴苗各生长因子无显著差异,可以替代以泥炭为主的商用育苗基质。

大叶栎地理种源生长差异及优良种源选择

对广西南宁的16个大叶栎[Castanopsis fissa(Champ.)Rehd.et Wils.]种源6年生林分的生长性状及遗传变异进行了研究,结果表明,种源间的保存率、树高、胸径、材积、干形存在显著或极显著差异;树高、胸径、材积、干形的种源遗传力均在0.5以上,说明种源间具有良好的选择潜力;树高、胸径、材积之间存在显著或极显著的正向相关关系,树高与干形显著负相关,种源的生长性状与原产地的地理位置及气候条件相关关系不大;运用多性状综合评定法选出了广西苍梧大叶栎、广西平果大叶栎、湖南通道大叶栎为优良种源;3个优良种源的平均树高遗传增益为2.88%,平均胸径遗传增益为12.12%,平均材积遗传增益为28.73%,平均干形遗传增益为5.25%。

厚朴中总鞣质提纯工艺及抗菌活性研究

通过响应面设计优化厚朴(Magnolia officinalis Rehd.et Wils.)中总鞣质的提取工艺,并进一步纯化。结果表明,厚朴中总鞣质的最佳提取工艺为料液比1∶13、提取时间100 min、乙醇浓度80%、超声功率80 W,厚朴总鞣质提取量为0.1810 mg/g,与理论值0.1888 mg/g差距小。利用正交试验考察明胶溶液沉淀法对厚朴总鞣质的最佳纯化工艺为浓缩液比重1.5 mg/mL、明胶溶液浓度4%、明胶溶液添加量8 mL/100 mg,厚朴总鞣质提取量为2.743 mg/g。利用最小抑菌浓度测定法比较总鞣质对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抗菌活性,表明厚朴中总鞣质具有一定的抗菌活性。

寒热胁迫下宜昌楠的生理生化响应

以宜昌楠(Machilus ichangensis Rehd.et Wils)为材料,以20℃为对照,分别测定了宜昌楠在高温(40℃、35℃、30℃)胁迫下和低温(-10℃、-5℃、5℃)胁迫下的电解质渗透率、丙二醛(MDA)含量、脯氨酸(Pro)含量、过氧化物酶(POD)活性等生理生化指标。结果表明,在高温和低温胁迫处理后,宜昌楠叶片的电导率和丙二醛含量增大,游离脯氨酸大量累积,过氧化物酶活性升高,并且随着寒热胁迫强度的增强而继续呈显著上升趋势。

超声法从青风藤根中提取青藤碱

以苯为溶剂采用超声法对青风藤根进行提取 ,超声提取物经活性碳脱色纯化和重结晶即可得产品青藤碱。对所得产品经IR和HPLC法进行了定性和定量分析 ,在最佳提取条件下青藤碱的产率为2 12 % ,含量为 98 73%。该方法从青风藤根中提取分离青藤碱具有操作简便 ,能耗低 。

华中五味子染色体制片优化及核型分析

比较不同预处理和解离方法对华中五味子染色体制片的影响,采用华中五味子的萌发芽、新枝茎尖、幼叶等不同部位进行染色体制片,观察500个细胞,比较不同部位中期细胞和适宜核型分析的中期细胞所占比例,结果显示,0.1%秋水仙素预处理1 h、1 mol/L盐酸常温解离12 min制片所得染色体分散效果最佳。5～15 mm幼叶侧边组织制片最适宜华中五味子核型分析。核型公式为2n=2x=28=26 m＋2sm,核型不对称系数（As.k）为56.30%,属于1B类型,核型对称性程度高,表明华中五味子在进化中处于比较原始类型。

超临界CO2流体萃取-GC-MS分析南北五味子挥发油成分

采用超临界CO2流体萃取南北五味子中的挥发油,采用气相色谱-质谱法鉴定两种挥发油的化学成分,并用面积归一法确定各组分的相对含量。南北五味子的挥发油主要组成均为萜类化合物,分别占到6 2.9 7%和73.05%。南五味子挥发油中相对含量较高的成分有β-雪松烯(7.88%)、2,6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯基)二环[3,1,1]庚-2-烯(6.44%)、δ-榄香烯(6.39%)等;北五味子挥发油中相对含量较高的成分有α-依兰烯(19.09%)、γ-姜黄烯(16.03%)、β-雪松烯(7.71%)等。

基于GIS的全国厚朴质量适宜性研究

目的:通过对厚朴中的厚朴酚、和厚朴酚含量及其比值与产地生态因子之间的相关性考察,进行全国厚朴质量适宜性等级划分,为确定厚朴的优质药材种植区提供科学依据。方法:对全国43个样点的厚朴药材进行质量分析,利用统计方法分析厚朴的酚含量及其比值与影响因子之间的关系;应用地理信息系统进行全国厚朴质量适宜性等级划分。结果:十月降水量、海拔、十一月降水量等12个生态因子是影响厚朴质量的主要生态因子;厚朴酚与和厚朴酚比值具有明显的区域质量特征。结论:湖北和重庆是厚朴的道地产区。

宜昌润楠中酚类成分的研究

通过溶剂提取法和多种色谱方法对宜昌润楠(Machilus ichangensis Rehd.et Wils.)的干燥茎枝进行分离纯化,利用现代波谱技术(MS、1 H NMR、13 C NMR、DEPT、CD)和理化性质进行结构鉴定.从宜昌润楠95%乙醇提取物中分离得到16个酚类化合物,分别鉴定为(2R,3R)-4′-羟基-5,7,3′-三甲氧基黄烷-3-醇(1),(2R,3R)-3-羟基-5,7-二甲氧基-4′,5′-亚甲二氧基黄烷(2),(+)-儿茶素(3),(-)-表儿茶素(4),柚皮素(5),达维荚蒾苷元(6),反式对香豆酸(7),咖啡酸(8),阿魏酸(9),异阿魏酸(10),东莨菪素(11),异东莨菪素(12),胡椒基酸(13),香草酸(14),原儿茶酸(15),丁香酸(16).所有化合物均为首次从该植物中分离得到.

厚朴多糖提取工艺及其体外抗氧化活性

通过Box-Behnken试验优化提取厚朴多糖的工艺;以超氧阴离子自由基、1,1-二苯基-二苦基肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS+·)清除能力,Fe2+螯合力、铁离子还原抗氧化力(ferric reducing antioxidant power,FRAP)为指标,探究厚朴多糖的体外抗氧化活性。结果表明,提取厚朴多糖的最佳工艺条件为p H 7.3、液固比32∶1(m L/g)、提取温度78℃、提取时间139 min,此条件下多糖提取率达3.35%~3.52%。体外抗氧化活性结果表明,厚朴多糖超氧阴离子自由基清除力为(18.72±2.12)μmol·VC/mg,DPPH自由基清除能力达(0.59±0.05)μmol Trolox/mg,ABTS+·清除能力为(0.57±0.04)μmol Trolox/mg,Fe2+螯合力为(0.38±0.02)μmol·EDTA/mg,FRAP值为(2.19±0.31)μmol Trolox/mg。

高效液相色谱法测定南、北五味子中4种木脂素含量

目的:采用高效液相色谱法同时测定17种不同产地的五味子中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素和五味子乙素含量。方法:采用Diamonsil C18(250mm×4.6mm,5μm)柱,甲醇-水(73:27,V/V)作流动相,流速1.0mL/min,检测波长254nm。结果:五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素和五味子乙素含量测定方法的线性关系良好,线性范围为0.01～0.08mg/mL,相关系数R2>0.9990;RSD分别为0.86%、0.37%、0.19%和0.15%。结论:该方法精密度、重现性和分离效果好,分析快速准确,适合于该药材中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素和五味子乙素含量的测定;不同产地的4种木脂素成分均存在一定的差别,北五味子中五味子醇甲、五味子醇乙和五味子乙素的含量稍高,而五味子甲素含量却稍低,南五味子恰与之相反。

不同花期厚朴雌雄蕊和花瓣香气组成成分的分析和比较

采用固相微萃取和GC-MS技术,对初花期、展瓣期、盛花期和盛花末期厚朴(Magnolia officinalis Rehd.etWils.)雌雄蕊和花瓣香气的组成成分及其相对含量进行了分析和比较。结果表明:不同花期厚朴雌雄蕊和花瓣香气的组成成分及其相对含量差异明显。雌雄蕊和花瓣香气分别含有52和37种成分,总计67种;其中,1-甲氧基-3,7-二甲基-2,6-辛二烯、1-香叶基乙醚、D-柠檬烯、莰烯、月桂烯和石竹烯等成分的相对含量均较高。初花期、展瓣期、盛花期和盛花末期雌雄蕊香气分别含有26、26、27和24种成分,花瓣香气则分别含有22、19、16和21种成分;不同花期雌雄蕊和花瓣香气的共有成分为1-甲氧基-3,7-二甲基-2,6-辛二烯、D-柠檬烯和石竹烯。不同花期厚朴雌雄蕊和花瓣香气成分可分为萜烯类、醇类、芳香烃类、醚类、醛酮类、酯类、烷烃类和含氮类8类,共有类型为萜烯类和醇类,其中,萜烯类是主要组成成分。厚朴雌雄蕊和花瓣在不同花期均释放出较多的萜烯类化合物,其相对含量随着花的发育呈先升高后降低的趋势。根据感官分析与GC-MS分析结果综合判断:萜烯类化合物是组成厚朴花香气的重要成分;花瓣是香气释放的主要部位,而雌雄蕊则在香气释放过程中起辅助作用。

5种不同产地厚朴挥发油化学成分的GC-MS分析

[目的]分析比较不同产地厚朴的挥发油成分,为厚朴的应用提供参考。[方法]采用水蒸气蒸馏法提取厚朴挥发油,运用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对挥发油成分进行分离鉴定,并采用面积归一化法确定各成分的相对百分含量。[结果]从5种不同产地厚朴的挥发油中共鉴定出80个化学成分,有18种成分为5个产地共有。[结论]不同产地厚朴挥发油的含量及化学成分组成有较大的差别。

秦岭地区华中五味子天然居群叶、花形态变异研究

为评价秦岭地区华中五味子遗传多样性水平,选取3个华中五味子天然居群进行表型性状变异研究.结果表明,华中五味子除最大花瓣长宽比（LPLW）以外的其余12个表型性状在居群间和居群内均存在极显著差异;变异系数（CV）最大和最小的分别是叶柄长（PtL）28.01%和花瓣数（PN）9.53%;心皮数（CN）的相对极差值（Ri′）高达89.12%;居群间表型分化系数（VST）变异范围0~37.23%,平均值13.01%,表明表型变异主要存在于居群内.根据UPGMA聚类将3个天然居群分成2类,华县和太白县为一类,柞水县为一类.

黧蒴栲种源种子发芽的生理生化特性研究

为了研究黧蒴栲种子发芽的生理生化特性,以7个种源地的黧蒴栲种子为试验材料,研究其千粒重、发芽率和一系列酶活性在种源间的差异,为种源选择与遗传资源保护提供理论依据。结果表明,黧蒴栲种子千粒重、发芽率和一系列酶活性在种源间差异显著,7个种源地种子发芽率最高的为通道县,达92.0%;最低为平果县,仅85.1%;且种子发芽率与种源地年降水量、种子千粒重、抗氧化酶保护活性、多酚氧化酶活性呈显著正相关,种子发芽率与种源地年均温、种子丙二醛含量则呈显著负相关。因此,通过黧蒴栲种子发芽率与各项生理指标间的相关关系,利用种子酶活性可判断种子发芽率。

湖北恩施产厚朴叶形变化与药材质量的关系初探

目的:探索湖北恩施产厚朴叶形变化与药材质量的关系。方法:采用高效液相色谱法测定厚朴酚、和厚朴酚含量,流动相为甲醇-水(78∶22),检测波长为294 nm。结果:叶先端凸尖者、叶片短小者,厚朴叶的酚含量通常较高;在一定年限之内,树皮较厚者,厚朴皮的酚含量较高。结论:湖北恩施产厚朴叶形变化与叶自身酚含量的高低直接相关,与药材质量关联性不强。

超声微波协同水蒸气蒸馏-GC-MS分析南、北五味子挥发油化学成分

采用传统水蒸气蒸馏(steam distillation,SD)和超声微波协同水蒸气蒸馏(ultrasonic-microwave assisted steam distillation,UMASD)两种方法分别提取南五味子和北五味子中的挥发油,用气相色谱-质谱联用技术分析鉴定,比较两种方法对挥发油收率和成分的影响以及不同品种五味子挥发油化学成分的差异。两种方法SD、UMASD提取的南五味子的挥发油收率分别为1.2%、1.4%;北五味子的挥发油收率分别为1.3%、1.8%。根据保留指数和NIST库检索匹配等方法进行定性分析,南五味子共鉴定出化合物种类分别为50、54种;北五味子共鉴定出化合物种类分别为54、55种。结果表明:挥发油中主要含有醇、酯和烃类化合物,且由于产地和前处理方法不同,各种挥发油的含量和成分有一定的差异。两种方法均使用水作为溶剂,具有绿色环保无污染的优点;UMASD法较SD法挥发油收率略有提高;SD法萃取时间需要6 h,UMASD法将萃取时间缩短至1 h。UMASD是一个高效、快速、简单、节能和绿色环保的新型挥发油提取技术。