WNK2通过抑制ERK1/2/ROS/SHP2信号通路延缓肝细胞癌的增殖和侵袭

目的探讨WNK2对肝细胞癌(hepatocellocellua carcinoma,HCC)中ERK1/2/ROS/SHP2信号通路的影响,并探讨其在HCC细胞增殖和迁移中的作用。方法将WNK2-mimic和sh-RNA WNK2以及相应的阴性对照转染HepG2细胞,采用BALB/c裸鼠皮下成瘤实验检测WNK2对肝细胞癌增殖能力的影响;采用Western Blot检测瘤组织中WNK2、p40、gp90、p-SHP2、p-AKT和p-ERK1/2的表达;使用SHP2抑制剂PHPS1进行处理之后,采用Western Blot检测HepG2细胞中WNK2、p40、gp90、p-SHP2、p-AKT和p-ERK1/2的表达;使用细胞划痕实验和Transwell检测HepG2细胞的迁移能力和侵袭能力;采用单克隆增殖实验和CCK-8检测HepG2细胞的增殖能力。结果与sh-NC组相比,sh-RNA WNK2组裸鼠的瘤体体积显著增大(P<0.01);而与NC-mimic组相比,WNK2-mimic组裸鼠的瘤体体积显著减小(P<0.01);Western Blot结果显示,与sh-NC组相比,sh-RNA WNK2组WNK2的表达显著降低(P<0.01),p40、gp90、p-SHP2、p-AKT和p-ERK1/2的表达显著升高(P<0.01);而与NC-mimic组相比,WNK2-mimic组WNK2的表达显著升高(P<0.01),p40、gp90、p-SHP2、p-AKT和p-ERK1/2的表达显著降低(P<0.01);在体外实验当中,相对于sh-NC组,sh-RNA WNK2组中WNK2的表达显著降低(P<0.01),p40、gp90、p-SHP2、p-AKT和p-ERK1/2的表达显著升高(P<0.01);相对于sh-NC+PHPS1组,sh-RNA WNK2+PHPS1组中WNK2的表达显著降低(P<0.01),而p40、gp90、p-SHP2、p-AKT和p-ERK1/2的表达则被逆转并且与sh-NC+PHPS1组不具有显著性差异(P>0.05);细胞划痕实验和Transwell结果显示,相对于sh-NC组,sh-RNA WNK2组HepG2细胞的迁移和侵袭能力显著升高(P<0.01);sh-NC+PHPS1组和sh-RNA WNK2+PHPS1组HepG2细胞的迁移和侵袭能力显著降低并且不具有显著性差异(P>0.05);单克隆增殖实验结果显示,相对于sh-NC组,sh-RNA WNK2组HepG2细胞的增殖能力显著升高(P<0.01),而sh-NC+PHPS1组和sh-RNA WNK2+PHPS1组HepG2细胞的增殖能力显著降低并且不具有显著性差异(P>0.05)。结论WNK2可以抑制ERK1/2/ROS/SHP2信号通路,从而抑制ERK1/2/AKT信号通路,延缓HCC的增殖和迁移。

SHP2在消化系统肿瘤中的研究进展

目前恶性肿瘤已经成为威胁人类身体健康的主要疾病之一,致残率、致死率在逐年上升。Src同源性2的蛋白酪氨酸磷酸酶2(src homology 2 domain-containing protein tyrosine phosphatase 2,SHP2)是蛋白酪氨酸磷酸酶(proteintyrosine phosphatase,PTP)家族中重要的一员,是一种功能广泛的酪氨酸磷酸酶,其在多种实体肿瘤中的表达量升高,在侵袭、转移、增殖、凋亡、耐药性等方面发挥着重要调控作用。已有大量研究表明,SHP2在许多实体瘤的发生和发展中起着非常重要的作用,但现在尚无系统的报道SHP2在消化系统肿瘤中的作用。基于此该文综述了SHP2在7种消化系统中不同肿瘤的生物学功能及临床意义,探讨其在不同癌症发展阶段的作用与机制,并总结与展望SHP2抑制剂的发展,进一步寻找有效的早期诊断和基因治疗的潜在靶点,这对癌症患者生存率的提高具有十分重要的意义。

LHPP通过调控NOX2/SHP2通路活性抑制结直肠癌的增殖、侵袭和转移

目的探讨组氨酸磷酸酶(LHPP)通过氧化应激通路对结直肠癌增殖、侵袭和迁移的影响,并初步阐明其作用机制。方法使用Liposome3000进行细胞转染操作。将质粒OE-NC、OE-LHPP和寡核苷酸片段si-NC、si-LHPP分别转染进SW480细胞中,通过Western Blot检测LHPP、NOX2、p-SHP2的蛋白表达量;将质粒OE-NC、OE-LHPP组转染进SW480细胞中并同时使用NCA刺激,通过Western Blot检测NOX2、p-SHP2、p-PI3K、p-ERK1/2、MMP-9、Cyclin D1的蛋白表达量;将质粒OE-NC、OE-LHPP转染进SW480和SW620细胞中,并同时使用NAC刺激,通过划痕实验检测细胞的迁移距离,Transwell实验检测通过孔的细胞数量,克隆形成实验检测细胞的增殖能力。结果SW480细胞中OE-LHPP组LHPP和NOX2蛋白表达水平明显高于OE-NC组(P<0.05),但p-SHP2蛋白表达水平明显低于OE-NC组(P<0.01);SW480细胞中si-Si-LHPP组LHPP和NOX2蛋白表达水平明显低于OE-NC组(P<0.01),但p-SHP2蛋白表达水平明显高于si-NC组。与OE-NC组相比,SW480细胞中OE-LHPP的NOX2蛋白表达水平明显升高(P<0.01),但p-SHP2、p-PI3K、p-ERK1/2、MMP-9、Cyclin D1蛋白表达水平明显降低(P<0.01),SW480和SW680细胞迁移距离缩短、穿过孔的细胞数量减少和细胞克隆形成数量减少;加入NAC干预后,消除了SW480和SW680细胞中OE-NC组和OE-LHPP组在NOX2、p-SHP2、p-PI3K、p-ERK1/2、MMP-9、Cyclin D1的差异,也消除了细胞划痕、细胞侵袭和细胞增殖的差异。结论LHPP通过促进氧化应激抑制SHP2、PI3K和ERK通路活性进而抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移的影响进而缓解结直肠癌的进展。

低氧调控滋养层细胞内Src/Siglec-6/SHP2信号通路对子痫前期的影响

目的 子痫前期(PE)是一种严重的妊娠期高血压疾病,本研究旨在研究低氧调控滋养层细胞胞浆内的Src/Siglec-6/SHP2信号通路对子痫前期的影响。方法 通过L-NAME给药建立PE小鼠模型(对照组与Siglec-6敲低组小鼠)来研究体内螺旋动脉血管直径的变化并检测小鼠子宫血管组织中Siglec-6、p-Src、p-Shp2、p-ERK1/2蛋白的表达水平。接下来通过体外低氧培养人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo来探究Src/Siglec-6/SHP2对滋养层细胞侵袭增殖的影响。将细胞通过转染分为NC(对照)组和Siglec-6 OE(过表达)组。Src抑制剂塞卡替尼和SHP2抑制剂PHPS1刺激低氧培养的HTR-8/SVneo细胞,Western blot检测Siglec-6、p-Src、p-SHP2、p-ERK1/2、MMP2、P53、P21蛋白的表达水平。Transwell侵袭实验和CCK8测定以探索HTR-8/SVneo中的细胞增殖和侵袭。结果 体内实验检测表明Siglec-6敲低组小鼠螺旋动脉直径减小,且Siglec-6敲低后小鼠体内Siglec-6、p-Src、p-SHP2、p-ERK1/2蛋白的表达水平显著降低。体外低氧HTR-8/SVneo细胞模型结果发现Siglec-6过表达可以通过调控p-Src、p-SHP2,p-ERK1/2、MMP2、P53和P21来促进滋养层细胞的侵袭和增殖。Src和SHP2的抑制消除了Siglec-6过表达介导的Siglec-6、p-Src、p-SHP2,p-ERK1/2的蛋白表达的增加,同时Siglec-6过表达介导滋养层细胞的侵袭和增殖能力被显著抑制。结论 Siglec-6在子痫前期中起重要作用,Siglec-6可以通过Src/SHP2信号通路促进滋养层细胞的侵袭和增殖来缓解子痫前期。

巨噬细胞来源SHP2通过PI3K/PTEN通路促进氧化应激和血管生成对子宫内膜异位症凋亡表型的影响

目的研究巨噬细胞来源含Scr同源区2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP2)通过磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)通路促进氧化应激和血管生成对子宫内膜异位症凋亡表型的影响。方法收集2019年1月至2022年12月50例子宫内膜异位症异位子宫内膜组织和50例正常子宫内膜组织。选取健康雌性C57BL/6小鼠12只,采用子宫组织自体移植腹膜壁的方法建立小鼠子宫内膜异位症模型,将小鼠随机分为SHP2-NC组和SHP2-shRNA组,每组6只,利用慢病毒感染的方法构建稳定敲低SHP2基因的RAW264.7细胞,经小鼠尾静脉注射。使用HE染色、Western blot、TUNEL染色、CCK-8、成管实验分别检测子宫内膜组织的病理改变、CD68+巨噬细胞相关蛋白表达情况、内膜细胞凋亡、内膜细胞增殖活性以及内皮细胞血管生成情况。结果相较于正常子宫内膜组织,异位子宫内膜组织CD68+巨噬细胞SHP2表达水平升高(P<0.05)。而在SHP2-shRNA组子宫内膜异常病变区域间质细胞出现,但腺体和血管形成减少,同时SHP2、NADPH氧化酶2(NOX2)、NADPH氧化酶4(NOX4)、环氧化酶2(COX2)、血管内皮生长因子(VEGF)和Bcl-2表达水平低于SHP2-NC组,而p53、Caspase-3、Bax表达水平高于SHP2-NC组(P<0.05)。与SHP2-NC组比较,SHP2-shRNA组内膜细胞凋亡数目增加,细胞增殖活性降低,内皮细胞血管生成数量减少(P<0.05)。与SHP2-NC干预比较,SHP2-shRNA干预使p-PI3K、NOX4、COX2和VEGF表达水平降低,而PTEN和p53表达水平升高(P<0.05)。在LY294002干预后,p-PI3K、NOX4、COX2和VEGF表达水平较干预前下降,而PTEN和p53表达水平较干预前上升(P<0.05)。在740 Y-P干预后,p-PI3K、NOX4、COX2和VEGF表达水平较干预前上升,而PTEN和p53表达水平较干预前下降(P<0.05)。结论SHP2通过促进PI3K/PTEN通路活性来增强氧化应激和内皮细胞血管新生,同时抑制子宫内膜细胞凋亡。

吡嗪类SHP2抑制剂的设计、合成及生物活性评价

SHP2是一个肿瘤治疗的潜在靶点。本文以TNO155为先导化合物,采用基于片段的药物设计策略,设计并合成三个系列共11个新型吡嗪类SHP2变构抑制剂,其结构均经1H-NMR和ESI-MS谱确证。采用荧光分析方法,通过替代底物DiFMUP的去磷酸化程度对目标化合物开展体外活性评价。结果表明,目标化合物对SHP2蛋白显示不同程度的抑制活性。其中2个化合物C-2和C-3的活性较为突出,值得进一步研究。

SHP2过表达抑制人肝星状细胞LX-2凋亡

目的探讨含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP2)过表达对人肝星状细胞LX-2凋亡的影响。方法将表达绿色荧光蛋白(GFP)的空病毒Ad-GFP、表达野生型SHP2及GFP的腺病毒Ad-SHP2转染LX-2细胞。实验分为3组:(1)Control组,以DMEM代替腺病毒转染LX-2细胞;(2)Ad-GFP组,转染空病毒Ad-GFP;(3)Ad-SHP2组,转染重组腺病毒Ad-SHP2。Western blotting检测3组LX-2细胞的SHP2、Bax、Bcl-2蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测3组LX-2细胞的SHP2 mRNA表达;TUNEL及膜联蛋白-V/碘化丙啶双标记流式细胞术检测3组LX-2细胞凋亡情况。结果Ad-SHP2组LX-2细胞的SHP2蛋白及mRNA相对表达量高于Control组及Ad-GFP组(P<0.05);Ad-GFP组与Control组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。TUNEL及膜联蛋白-V/碘化丙啶双标记流式细胞术检测结果显示,与Control组LX-2细胞凋亡率(3.08±0.73)%、(9.44±0.80)%及Ad-GFP组(3.25±0.85)%、(8.89±1.98)%比较,Ad-SHP2组(1.52±0.26)%、(2.44±0.93)%降低(P<0.05);Ad-GFP组与Control组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3组LX-2细胞的Bax及Bcl-2蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05);Ad-SHP2组LX-2细胞的Bax蛋白相对表达量(1.55±0.21)低于Control组(1.99±0.15)及Ad-GFP组(2.00±0.16)(P<0.05);而Bcl-2蛋白相对表达量(2.13±0.25)则高于Control组(1.71±0.15)及Ad-GFP组(1.52±0.14)(P<0.05);但Ad-GFP组与Control组Bax及Bcl-2蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论SHP2过表达通过升高Bcl-2/Bax抑制体外人肝星状细胞LX-2凋亡。

SHP2对小鼠腹主动脉瘤的作用及相关分子机制

目的:探究含Src同源2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP2)对小鼠腹主动脉瘤的作用及相关分子机制。方法:灌注血管紧张素Ⅱ和使用高脂饲料饲养构建小鼠腹主动脉瘤模型,将其分为对照组、模型组与抑制剂组(注射SHP2抑制剂PHPS1),Masson和EVG染色检查小鼠腹主动脉病理变化。免疫印迹检测相关蛋白烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18、基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP9的表达水平。免疫荧光染色检测腹主动脉壁中MMP9和巨噬细胞F4/80的表达情况。结果:与模型组相比,抑制剂组的腹主动脉直径的扩张和动脉壁弹力纤维损坏加剧,巨噬细胞数量增多;抑制剂组小鼠腹主动脉组织中的相关蛋白NOX2、TXNIP、NLRP3、IL-1β、IL-18、MMP2、MMP9的蛋白表达水平增加,SHP2的蛋白表达水平显著降低。结论:SHP2可通过抑制巨噬细胞中的NLRP3信号通路和MMP2、MMP9的表达以减弱小鼠腹主动脉瘤的发展。

抑制SHP2和FGFR2调控RAS/ERK及PI3K/AKT通路治疗FGFR2融合胃癌

目的:探究共抑制成纤维细胞生长因子受体2(fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2)和Src同源2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2(Src homology region 2-containing protein tyrosine phosphatase 2,SHP2)在FGFR2融合胃癌中的应用前景与作用机制。方法:构建过表达TACC2-FGFR2融合基因与对照慢病毒载体的人胃癌细胞系MKN45ACC2T-FGFR2、MKN45NC、NUGC4TACC2-FGFR2、NUGC4NC,分别用FGFR2抑制剂AZD4547、SHP2抑制剂SHP099或联药进行处理,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕实验检测肿瘤细胞的增殖、迁移能力。以不同处理方式作用于MKN45TACC2-FGFR2、MKN45NC1 h或48 h后,采用Western blot法检测FGFR2、SHP2以及下游RAS/ERK、PI3K/AKT信号通路变化。结果:在MKN45TACC2-FGFR2与NUGC4TACC2-FGFR2中联用AZD4547与SHP099可以比单药更显著地抑制肿瘤细胞的增殖与迁移。药物处理1 h后,相较于AZD4547单药,联药在MKN45TACC2-FGFR2中进一步抑制了RAS/ERK、PI3K/AKT信号通路。药物处理48 h与1 h相比,AZD4547单药组中磷酸化FGFR与磷酸化SHP2出现了反馈性激活,且始终不能抑制RAS/ERK通路,但联药组可以持续地抑制上游的FGFR2、SHP2信号以及下游的RAS/ERK、PI3K/AKT通路。结论:共抑制FGFR2和SHP2可以通过下调RAS/ERK及PI3K/AKT通路有效抑制FGFR2融合胃癌,为FG-FR2融合突变胃癌患者带来新的治疗模式。

SHP2在非小细胞肺癌中的表达及意义

背景与目的以往研究表明,异常的酪氨酸磷酸化与癌的发生密切相关,本研究旨在采用组织芯片技术结合免疫组化方法来研究蛋白酪氨酸磷酸酶SHP2在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及意义。方法80例NSCLC石蜡标本制成组织芯片,采用链菌素亲生物素-过氧化物酶法(SP)进行免疫组化检测。结果SHP2在NSCLC中的表达率为70.00%(56/80),其中鳞癌为72.5%(29/40),腺癌为67.50%(27/40);有无淋巴结转移的患者SHP2的阳性表达率分别为73.61%(53/72)和37.50%(3/8)(P<0.05);SHP2的表达与患者性别、年龄、肿块大小、病理类型、分化程度、临床分期间无统计学差异(P<0.05)。结论SHP2在NSCLC中有较高的表达率,且与淋巴结转移密切相关,提示肺癌的发生、发展可能与SHP2有关,SHP2可能是肺癌新的标志物及治疗靶点。

黄芪皂苷对化疗贫血小鼠骨髓细胞c-Kit、SHP2、c-MPL等细胞因子的影响

目的:探讨黄芪皂苷对化疗贫血小鼠骨髓细胞INF-α、TGF-β、INF-γ和c-kit、SHP2、c-MPL细胞因子的影响。方法:从环磷酰胺所致的化疗贫血小鼠中,获取单个骨髓细胞,采用体外细胞培养方式培养小鼠骨髓细胞至第四代,并分成4组,分别为空白组、模型组、皂苷组和EPO组。采用ELISA法,观察黄芪皂苷对小鼠骨髓细胞中INF-α、TGF-β、INF-γ的影响;RT-PCR法观察黄芪皂苷对小鼠骨髓细胞中c-kit、SHP2、c-MPL的m RNA达的影响。结果:黄芪皂苷可以降低小鼠骨髓细胞中INF-α、INF-γ(P<0.05)的含量,提高TGF-β(P<0.05)的含量;还可以提高小鼠骨髓细胞中c-kit(P<0.05)的m RNA水平,降低SHP2(P<0.05)的m RNA水平,而对c-MPL(P>0.05)作用不明显。结论:黄芪皂苷能够改善TNF-α,TGF-β,INF-γ三种负性调节因子的水平,调节造血细胞的功能;上调c-kit,下调SHP2的基因水平,激活造血细胞的造血功能。

杜仲叶通过Shp2激活Erk1/2促进BMSCs增殖的研究

目的研究杜仲叶提取物对大鼠BMSCs的增殖作用及其分子机制。方法使用密度梯度离心和贴壁培养法从SD大鼠股骨骨髓中获取BMSCs,通过流式细胞仪检测细胞表面抗原;分别用0,5,20,60,100 mg/ml的杜仲叶提取物和20mg/ml杜仲叶提取物+10μmol/L Shp2抑制剂NSC87887处理BMSCs,2 d后BrdU检测细胞增殖情况;用无血清无酚红培养基饥饿大鼠BMSCs 6 h后,一组分别加入0,5,20,60,100 mg/ml的杜仲叶提取物处理15 min,另一组用10μmol/LShp2抑制剂处理预处理2 h后加入20 mg/ml杜仲叶提取物处理15 min,Western blot检测p-Shp2(Tyr580)和Erk1/2磷酸化水平的变化。结果流式细胞仪细胞表面抗原检测显示CD29、CD90呈阳性,CD34、CD45呈阴性;BrdU结果显示杜仲叶提取物促进BMSCs增殖,并具有浓度依赖性,NSC87887可以抑制其促进作用;杜仲叶提取物可以诱导BMSCs的p-Shp2(Tyr580)和Erk1/2磷酸化水平升高,而对诱导Erk1/2磷酸化的促进作用是通过激活Shp2来完成的。结论杜仲叶提取物通过Shp2/Erk途径促进大鼠BMSCs增殖。

绿原酸通过Shp2激活Erk1/2促进大鼠成骨细胞增殖的实验研究

目的研究从杜仲叶中提取的绿原酸对大鼠成骨细胞的促增殖作用。方法MTT法检测分别用0、0．1、1、10μmol/L4种不同浓度梯度的绿原酸和0．1μmol/L绿原酸＋10μmol/LShp2抑制剂NSC87887处理大鼠成骨细胞增殖情况；用无血清无酚红DMEM培养基培养的饥饿大鼠成骨细胞用上述药物处理后，用Western blot检测其p-Shp2（Tyr580）、Shp2、P-Erk和Erk蛋白表达。结果MTT法结果显示绿原酸（0-1μmol/L）促进大鼠成骨细胞的增殖，呈浓度依赖性；Western blot结果显示绿原酸可以诱导大鼠成骨细胞的p-Shp2（Tyr580）和Erk磷酸化水平升高，而NSC87887可以抑制其促进作用。结论绿原酸能够促进大鼠成骨细胞的增值，并且是通过Shp2/Erk途径实现的。

SHP2介导IL-6促进乳腺癌细胞侵袭作用机制的研究

目的:探讨非受体型酪氨酸磷酸酶SHP2介导白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)促进人乳腺癌细胞侵袭的作用,以及相应的分子机制。方法:利用外源性重组IL-6处理人乳腺癌细胞T47D,采用表达IL-6的慢病毒感染T47D细胞使其内源性表达IL-6,观察细胞的形态学改变情况,分析细胞迁移和侵袭能力的变化。采用小RNA干扰的方法下调IL-6信号通路中关键分子SHP2的表达,观察其表达下降对IL-6促进乳腺癌细胞侵袭能力的影响,同时采用Western blot方法检测Erk1/2磷酸化变化。结果:上调IL-6在乳腺癌细胞中的表达显著促进乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力,且细胞发生由上皮形态向类成纤维细胞形态的变化,同时伴随着上皮标志性蛋白E-cadherin表达下调和间质标志Vimentin表达上调。下调SHP2的表达明显抑制IL-6诱导乳腺癌细胞的上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)和侵袭能力,同时伴随着细胞内Erk1/2磷酸化水平的下降。结论:SHP2通过介导IL-6诱导的EMT促进乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力。

SHP2抑制剂NSC-87877对炎性疼痛的抑制作用及其机制

目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP2(src homology-2 domain-containing phosphatase 2)的抑制剂NSC-87877对炎性疼痛的影响及其机制;方法小鼠左后足底皮下注射完全佛氏佐剂(Complete Freund's Adjuvant;CFA)建立疼痛模型;鞘内给予NSC-87877前后,测定缩足阈值;随后分离左侧L4-L5节段脊髓背角,免疫印迹法检测N-methyl-D-aspartate(NM-DA)型谷氨酸受体的表达;结果 SHP2广泛分布于脊髓背角;且SHP2抑制剂NSC-87877(3μg)能够抑制CFA诱发的痛觉超敏,而对正常动物的痛行为无作用。虽然NSC-87877不影响NMDA受体NR2B和NR2A亚基的总蛋白含量,但却能够特异性降低CFA组动物NR2B的突触表达水平;结论 SHP2抑制剂NSC-87877通过逆转NR2B的突触表达亢进,对炎性疼痛产生明显的抑制作用。

蛋白酪氨酸磷酸酶Shp2与肿瘤

Shp2(SH2 domain-containing protein-tyrosine phosphatase-2)分子由PTPN11基因编码,是一个在体内广泛存在的非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶,既可以通过磷酸酶的催化活性来正向调控下游信号转导通路,也可以作为磷酸酶非依赖性的接头蛋白发挥正向调控作用,在特定的条件下亦可发挥负向调控作用,从而广泛参与细胞的分化、迁移等生物学功能的调控及相关的信号转导过程。PTPN11突变被认为是青少年粒单细胞白血病(juvenile myelomonocytic leukemia,JMML)的高危因素,同时,因其在不同类型白血病中均存在着Shp2的异常活化和突变而被认为是白血病的原癌基因;在前列腺癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌和神经胶质瘤中,Shp2也被报道呈过度活化状态;在肺癌中Shp2作为癌基因通过调控多种机制促进肿瘤的发生、发展。但在肝癌发生过程中,Shp2却在特定环境的影响下发挥抑癌基因的作用。总之,作为重要的节点分子,Shp2在肿瘤发生、发展的过程中发挥着重要的调控作用,是潜在的治疗靶点。

SHP2在吸烟肺癌患者肿瘤组织中的表达及意义

背景与目的蛋白质的磷酸化和去磷酸化是肺癌发生的重要机制,而吸烟是导致肺癌发生发展的重要危险因素,本研究旨在探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP2在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)和小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)肿瘤组织中的表达及其临床意义,并初步探讨不同的吸烟指数与SHP2表达水平的关系及可能机制。方法采用免疫组织化学技术(Invision法)和荧光原位杂交技术(FISH法)检测53例肺癌组织中SHP2的表达和SHP2mRNA的扩增情况。结果 SHP2在15例正常支气管上皮内弱阳性率为80%(亦为总阳性率);在48例NSCLC中弱阳性率为35.4%,中度阳性率为43.8%,强阳性率为6.2%(总阳性率为85.4%);在5例SCLC中弱阳性率为0%,中度阳性率为80%,强阳性率为20%(总阳性率为100%)。SHP2在27例非吸烟NSCLC患者肿瘤组织中的弱阳性率为40.7%,中度阳性率为37.4%,强阳性率为3.7%(总阳性率为81.5%);SHP2在吸烟指数≥400的21例NSCLC患者肿瘤组织中弱阳性率为23.8%,中度阳性率为71.4%,强阳性率为4.7%(总阳性率为100%)。等级计数资料秩和检验结果表明,肺癌组织中SHP2表达的阳性率显著高于正常支气管上皮(P<0.05),SCLC中SHP2的阳性率高于NSCLC(P<0.05),吸烟指数≥400的NSCLC癌组织中SHP2阳性率高于非吸烟患者(P<0.05)。结论吸烟NSCLC患者肿瘤组织中SHP2的高表达可能与吸烟相关;SHP2可能在肺癌发生发展中起一定的作用;SHP2可能为肺癌治疗的药物研发提供新思路。

Shp2在肺腺癌细胞A549中的抑癌作用及机制研究

目的:探索Shp2在肺腺癌细胞A549中的抑癌作用及机制。方法:应用CCK-8及Ed U实验检测Shp2特异性抑制剂Phps-1抑制Shp2活性对A549细胞活力、增殖及对顺铂(DDP)耐药情况的影响,Annexin VFITC/PI双染法检测细胞凋亡率,Western blot法检测caspase-3的17 kD片段(caspase-3-17p)、Bcl-2、Bax、p-STAT3/STAT3及p-ERK/ERK的蛋白水平。结果:Phps-1浓度为20μmol/L、作用24 h对A549细胞活力的促进作用显著,与对照组比较具有显著性统计学差异(P<0.05)。Phps-1 20μmol/L组的细胞增殖率为0.455±0.085,对照组为0.307±0.012。DDP 8 mg/L组及Phps-1 20μmol/L联合DDP 8 mg/L组的细胞凋亡率分别为13.01%±2.62%和3.67%±0.93%(P<0.05)。抑制Shp2活性能够下调DDP诱导的促凋亡蛋白caspase-3-17p及Bax的蛋白水平,并上调p-STAT3及下调p-ERK蛋白水平。结论:Shp2在肺腺癌细胞A549中具有抑癌作用,抑制STAT3信号通路激活可能是Shp2发挥抑癌作用的重要分子机制。

蛋白酪氨酸磷酸酶Shp2与接头蛋白Gab2在子宫内膜癌中的表达及意义

目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶Shp2与接头蛋白Gab2在子宫内膜癌中的表达、两者的相关性及其与预后的关系。方法采用免疫组化SP法,检测50例子宫内膜癌(癌组)、50例子宫内膜不典型增生(癌前病变组)及30例正常增殖期子宫内膜(正常组)中Shp2蛋白和Gab2蛋白的表达水平,分析其表达与子宫内膜癌临床病理参数的关系,及二者的相关性。结果正常组、癌前病变组和癌组的子宫内膜组织中,Shp2蛋白的阳性表达率分别为0、12.00%、64.00%,Gab2蛋白的阳性表达率分别为3.33%、38.00%、58.00%,且组间比较均有统计学意义(P<0.05);Shp2蛋白及Gab2蛋白的阳性表达率在肌层浸润深度及有无淋巴结转移组中比较,差异均有统计学意义(P<0.05);多因素生存分析显示:Shp2蛋白阳性表达者的总生存率明显下降,Gab2蛋白阳性表达者总生存率也明显下降;子宫内膜癌中Shp2蛋白的表达与Gab2蛋白的表达呈正相关(r=0.368,P<0.05)。结论 Shp2蛋白及Gab2蛋白的表达可能参与了子宫内膜癌的发生、发展、浸润等过程,有可能作为判断子宫内膜癌预后的新指标。

SHP2与乳腺癌侵袭转移相关性的研究进展

含Src同源区2蛋白质酪氨酸磷酸酶(Src homology 2 domain containing protein tyrosine phosphatases,SHP2)是一种跨膜型蛋白酪氨酸磷酸酶,通过调节细胞内蛋白质的酪氨酸磷酸化水平,在细胞信号转导通路及控制细胞活性中发挥重要的作用。其活化状态与乳腺癌发生发展过程中的Ras/ERK,PI3K/Akt/mTOR等信号通路、激素水平、侵袭转移、肿瘤干细胞的生物学行为等密切相关。SHP2基因的敲除或抑制SHP2蛋白表达,可不同程度阻断与乳腺癌侵袭、转移相关的信号通路,从而抑制肿瘤生长,甚至不可逆地使肿瘤丧失重新获得干细胞特性的能力。因此,SHP2很可能为抗肿瘤药物的研发提供一个新的靶点。本文就SHP2与乳腺癌侵袭转移的相关研究进展进行综述。