Sirt6在肾脏病中的研究进展

Sirtuins蛋白家族是进化保守的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸依赖性组蛋白去乙酰化酶家族。Sirt6作为Sirtuins家族的重要一员,广泛分布在肾小球足细胞及肾小管细胞中,通过维持足细胞及线粒体稳态、抑制炎症、纤维化等多种途径发挥肾脏保护作用。本文主要概述Sirt6的结构及其在糖尿病肾脏疾病、急性肾损伤、高血压肾病等肾脏病中的作用及机制,为肾脏疾病的诊治提供新的靶点。

SIRT6在胃癌中的表达及临床意义

目的探讨沉默信息调节因子6(Sirtuin 6,SIRT6)在胃癌组织中的表达及临床意义。方法生物信息学分析SIRT6 mRNA在胃癌中的表达及其与生存、肿瘤突变负荷(TMB)及TIDE评分的关系;收集95例胃癌及癌旁组织标本,免疫组织化学方法检测SIRT6的表达水平,分析其与临床病理特征的关系;Western blot法检测10例新鲜胃癌及癌旁组织中SIRT6的表达情况。结果生物信息学分析显示,SIRT6 mRNA在胃癌中表达高于正常胃组织(P<0.05),Kaplan-Meier生存曲线显示SIRT6高表达组生存时间较短,突变相关分析及TIDE评分显示SIRT6高表达组具有更高的TMB及TIDE评分(P<0.05),且SIRT6 mRNA表达水平与TMB及TIDE评分呈显著正相关(P<0.05)。免疫组织化学结果显示SIRT6在胃癌组织中表达率为85.2%(81/95);SIRT6在胃癌中高表达与高Ki-67增殖指数相关,差异具有统计学意义(P<0.05),SIRT6表达在不同年龄、性别、肿瘤直径及P53等组间差异均无统计学意义(P>0.05);Western blot显示胃癌组织中SIRT6的表达水平高于癌旁组织(9/10),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论SIRT6在胃癌组织中高表达,可能通过影响基因组稳定性及胃癌细胞增殖能力参与胃癌的发生发展。

血清USP10和SIRT6水平与急性肺损伤患者预后的关系研究

目的探讨血清泛素特异性蛋白酶10(USP10)和沉默调节蛋白6(SIRT6)水平与急性肺损伤(ALI)患者预后的关系。方法前瞻性选取2023年1月至2023年11月就诊于康复大学青岛中心医院(青岛市中心医院)重症医学科确诊筛选的ALI患者78例为研究对象,设为ALI组;另外选取同期在同医院体检中心体检肺功能正常的患者70例设为对照组。实时荧光定量PCR检测两组研究对象血清中USP10 mRNA相对表达量,采用酶联免疫吸附试验检测血清SIRT6表达水平。比较两组研究对象以及不同病情ALI患者的血清中USP10 mRNA和SIRT6的表达水平;采用多因素Logistic回归分析ALI患者预后危险因素;采用Pearson相关性分析USP10 mRNA与SIRT6表达的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析USP10 mRNA和SIRT6预测ALI患者预后的价值。结果ALI组患者血清USP10 mRNA和SIRT6的表达水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。重度患者血清USP10 mRNA和SIRT6的表达水平明显低于中度患者,中度患者血清中USP10 mRNA和SIRT6表达水平明显低于轻度患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。死亡患者血清中USP10 mRNA和SIRT6表达水平明显低于存活患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。USP10 mRNA和SIRT6低表达为ALI患者预后的独立危险因素(P<0.05)。USP10 mRNA与SIRT6表达呈正相关性(r=0.373,P<0.05);USP10 mRNA最佳截断值为0.69,预测ALI患者预后的曲线下面积(AUC)为0.805,95%CI:0.738~0.871,敏感度为78.21%,特异度为67.43%;SIRT6最佳截断值为18.69 ng/mL,预测ALI患者预后的AUC为0.871,95%CI:0.817~0.925,敏感度为84.62%,特异度为73.08%;USP10 mRNA与SIRT6联合检测预测ALI患者预后的AUC为0.930,95%CI:0.894~0.967,敏感度为93.59%,特异度为76.92%,优于两者单独检测。结论ALI患者血清中USP10和SIRT6明显降低,与ALI的不良预后密切相关,联合测定血清中USP10和SIRT6可能提升对ALI患者预后的预测价值。

心电图复极参数、血清SIRT6水平在急性心肌梗死患者疗效中的变化及其临床价值

目的:分析心电图复极参数、血清沉默信息调节因子6(SIRT6)水平在急性心肌梗死患者疗程中的变化,并探究其临床价值。方法:选取2021年10月至2023年12月河南中医药大学第三附属医院收治的经PCI治疗的急性心肌梗死患者为研究组(n=136),另选取同期健康体检者为对照组(n=136),根据患者术后半年不同预后疗效情况分为预后不良患者及预后良好患者;对比两组入院时心电图复极参数、血清SIRT6水平;对比不同预后患者入院时及治疗3 d、7 d、14 d时心电图复极参数、血清SIRT6水平;ROC分析治疗14 d时心电图复极参数、血清SIRT6水平对预后不良的预测价值。结果:研究组入院时心电图复极参数均高于对照组,血清SIRT6表达显著低于对照组(P<0.05);预后不良患者入院时、治疗3 d、7 d、14 d时心电图复极参数显著高于预后良好患者,血清SIRT6显著低于预后良好患者(P<0.05);治疗14 d时心电图复极参数、血清SIRT6水平联合预测预后不良的AUC为0.784,最佳敏感度、特异度分别为71.79%、79.59%。结论:心电图复极参数、血清SIRT6水平与患者预后疗效显著相关,临床可通过检测其水平预测患者预后疗效。

SIRT6在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨结直肠癌组织中去乙酰化酶6(SIRT6)的表达及其临床意义。方法采用Western blot和实时荧光定量PCR法分别检测29对结直肠癌及癌旁正常组织中SIRT6mRNA和蛋白的表达水平。免疫组化SP法检测SIRT6蛋白在113例(含前29例)结直肠癌及癌旁正常组织切片中的表达,分析SIRT6的表达与各临床参数之间的相关性。结果结直肠癌组织中SIRT6 mRNA和蛋白水平的表达均明显低于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);SIRT6蛋白在不同的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期结直肠癌组织的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论SIRT6在结直肠癌中的低表达与结直肠肿瘤的发生发展有关,SIRT6可能是结直肠癌的抗癌蛋白之一,可成为结直肠癌诊断和治疗的新靶标。

淫羊藿苷提高SIRT6酶活性及抑制小鼠NF-κB炎症信号通路的实验研究

目的观察淫羊藿苷（Icrrin，ICA）对组蛋白去乙酰化酶SIRT6的激活作用及对老年小鼠体内NF-kB（p65）、SIRT6蛋白表达及NF—kB信号通路下游炎症细胞因子表达的影响。方法以体外酶学实验观察ICA对SIRT6的激活作用并绘制不同剂量浓度激活效率曲线。选取24月龄老年组（N=11）、24月龄＋ICA干预组（N=12）和3月龄青年组小鼠（N=10）的心、肝、肌肉组织，用Westernblot检测NF-kB（p65）和SIRT6蛋白表达水平；采用ELISA法柃测小鼠血清中肿瘤坏死网子α（TNF—α）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）、白细胞介素-2（IL-2）和白细胞介素-6（IL-6）的含量。结果体外酶学实验显尔ICA随着药物浓度的下降，对SIRT6逐渐呈现激活效应，在10。mol／L浓度时达到最大激活效应为142％。小鼠实验显示ICA干预后，心脏、肝脏与肌肉组织中NF—kB（p65）蛋白表达与老年小鼠比较呈现下调趋势，而SIRT6蛋白表达较老年小鼠则呈现上调趋势；与青年小鼠比较，老年小鼠血清中炎症细胞TNF-α、ICAM-1、IL-2、IL-6的含量均明显上调（P〈0．05、P〈0．01）；与老年小鼠比较，ICA干预后小鼠血清中炎症因子TNF-α、ICAM-1、IL-2、IL-6的含量均明显下降（P〈0．05、P〈0．01）。结论ICA对SIRT6的酶活性具有显著的激活效应，且在极低的药物浓度下仍对SIRT6有激活作用；ICA能上调老年小鼠组织中SIRT6蛋白表达，抑制NF—kB（p65）蛋白表达及下调下游炎症细胞因子的产生，提示ICA延缓炎性衰老的作用机制及干预新靶点与NF—kB信号通路和组蛋白去乙酰化酶SIRT6密切相关。

衰老调控因子SIRT6在人参皂苷Rg1延缓造血干/祖细胞衰老中的作用

目的探讨SIRT6在人参皂苷Rg1延缓造血干/祖细胞(HSC/HPC)衰老中的作用。方法三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导Sca-1+HSC/HPC衰老,构建HSC/HPC衰老体外模型,Sca-1+HSC/HPC连续移植3代,构建HSC/HPC衰老体内模型。给予体内外衰老模型Rg1预防和治疗衰老。造血祖细胞混合集落(CFU-Mix)培养,细胞周期分析和衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色,分析Rg1体内外调控Sca-1+HSC/HPC衰老的作用。荧光定量PCR及Western blot检测衰老调控因子SIRT6 mRNA及蛋白的表达。结果与体内外衰老模型组相比,Rg1治疗及预防衰老处理后Sca-1+HSC/HPC G0/G1期细胞比例、SA-β-Gal染色阳性率下降(P<0.05),CFU-Mix数量升高(P<0.05);SIRT6 mRNA及蛋白表达上调(P<0.05);Rg1预防衰老组各指标变化均较Rg1治疗衰老组明显。结论Rg1在体内外均可通过调控SIRT6发挥其延缓Sca-1+HSC/HPC衰老的作用。

抗衰老因子SIRT1和SIRT6抗衰老作用研究新进展

衰老是生物体在遗传因素和内外环境相互作用下出现进行性,不可逆的生理功能下降的生物学过程。早在75年前,McCay和他的同事首先发现热量限制的大鼠比自由饮食的大鼠寿命更长。尽管这一发现已经过去了很久,但对于促使寿限延长的分子机制一直扑朔迷离。最初在酵母中发现的沉默信息调控因子2(Sir2),是一种NAD+依赖性去乙酰转移酶,在对于酵母寿限的调节方面发挥着重要的作用。后来。

SIRT6在AngⅡ诱导的血管内皮功能障碍中的作用研究

目的探索SIRT6在调节血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管内皮细胞凋亡和氧化应激中的潜在作用.方法将人主动脉内皮细胞(HAEC)暴露于最终浓度为100、200和400 nmol/L的AngⅡ,并孵育24 h以诱导血管内皮细胞损伤,通过qPCR测定SIRT6的相对mRNA表达;通过Western印迹测量SIRT6的蛋白质表达;然后分别将SIRT6表达载体及SIRT6 siRNA转染入400 nmol/L AngⅡ处理的HAEC;通过qPCR和Western印迹测定SIRT6的相对mRNA和蛋白质表达;通过MTT测定法测定细胞增殖能力;通过胱天蛋白酶-3活性测定细胞凋亡;通过检测LDH释放来确定细胞损伤;通过DCFH-DA染色法评估活性氧物质的产生.结果qPCR和蛋白印迹分析的结果均显示,暴露于AngⅡ的细胞中SIRT6 mRNA表达和蛋白表达均显著下调.AngⅡ可以显著降低HAEC的活力[(49.67±5.51)%比(100.71±4.03)%,P<0.05],而SIRT6过表达则可显著挽救暴露于AngⅡ的HAEC细胞活力降低[(90.33±8.02)%比(50.00±7.21)%,P<0.05].此外,SIRT6过表达显著降低了AngⅡ诱导的HAEC细胞凋亡(1.65±0.32比3.61±0.39,P<0.05),同时细胞中活性氧的产生量减少(2.17±0.35比4.56±0.72,P<0.05).SIRT6沉默可以显著降低AngⅡ处理细胞的细胞活力[(32.67±2.52)%比(51.33±7.09)%,P<0.05],加剧AngⅡ诱导的细胞凋亡(6.55±0.56比3.66±0.35,P<0.05)和HAECs中活性氧的产生(6.28±0.81比3.93±0.55,P<0.05).结论SIRT6在调节AngⅡ诱导的内皮细胞失调中起着关键的作用,SIRT6可作为治疗与内皮功能障碍相关的高血压的潜在治疗靶点.

温肾潜阳汤调控SIRT6表达治疗高血压肾损害的机制

目的探讨温肾潜阳汤调控SIRT6表达治疗高血压肾损害的机制。方法适应性喂养1 w后收集自发性高血压(SHR)大鼠24 h尿液,检测尿微量白蛋白(m-ALB)含量,以24 h尿液中m-ALB为20~200 mg/L为高血压肾损害模型制备成功标准。将SHR大鼠随机分为模型组、缬沙坦组、温肾潜阳汤组,以WKY大鼠作为对照组,每组8只。缬沙坦组给予缬沙坦按8 mg/(kg·d)灌胃;温肾潜阳汤组给予16 g/(kg·d)温肾潜阳汤煎剂灌胃;对照组、模型组每日灌胃2 ml生理盐水。连续给药8 w。末次给药结束后,称量大鼠体重;用尾动脉血压测量仪检测各组尾动脉血压;检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24 h m-ALB和24 h尿蛋白(U-TP)水平;苏木素-伊红(HE)染色检测各组肾组织病理形态;透射电镜观察各组肾脏超微结构;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血管紧张素(Ang)-Ⅱ、转化生长因子(TGF)-β1、一氧化氮(NO)水平;qRT-PCR检测各组肾组织SIRT6、胶原蛋白(Collagen)Ⅰ、纤维连接蛋白(FN)表达水平。结果对照组肾组织未见增生、肥大和增厚,内皮细胞形态、大小正常,足突排列整齐规则;模型组肾组织增厚,平滑肌细胞肥大和增生,管壁内胶原增加,管腔狭窄,内皮细胞增大且形态不规则,足突融合、消失,系膜基质增多;温肾潜阳汤组和缬沙坦组肾脏细小动脉病变减轻,内皮细胞有轻微肿胀,足突有小部分融合但排列较整齐。与对照组相比,模型组Scr、BUN、m-ALB、U-TP水平,收缩压及舒张压,Ang-Ⅱ、TGF-β1水平和CollagenⅠ、FN表达水平明显升高(P<0.05);体重、NO水平及肾组织SIRT6水平明显降低(P<0.05)。与模型组相比,温肾潜阳汤组、缬沙坦组Scr、BUN、m-ALB、U-TP水平,收缩压及舒张压,Ang-Ⅱ、TGF-β1水平和CollagenⅠ、FN表达水平明显降低(P<0.05),体重、NO水平及肾组织SIRT6水平明显升高(P<0.05)。结论温肾潜阳汤通过调控SIRT6的表达,能够治疗高血压所导致的肾损害。

三丁基过氧化氢体外诱导造血干/祖细胞衰老中的SIRT6/NF-κB信号轴

背景:SIRT6/NF-κB信号轴是细胞衰老的调控通路,但其在造血干/祖细胞(hematopoietic stem and progenitor cell,HSC/HPC)衰老中的作用尚不清楚。目的:探讨SIRT6/NF-κB信号通路在三丁基过氧化氢体外诱导造血干/祖细胞衰老中的作用。方法:免疫磁性分选法分离、纯化小鼠Sca-1+HSC/HPC。用100μmol/L三丁基过氧化氢体外诱导Sca-1+HSC/HPC构建体外衰老模型,通过衰老相关β-半乳糖苷酶细胞化学染色、流式细胞术分析细胞周期、造血祖细胞混合集落培养确定三丁基过氧化氢诱导Sca-1+HSC/HPC衰老的生物学作用。荧光定量PCR及Western blotting检测衰老调控分子SIRT6、NF-κB mRNA及蛋白的表达。结果与结论:与对照组比较,衰老组Sca-1+HSC/HPCβ-半乳糖苷酶染色阳性细胞数、G0/G1期细胞比例增高,形成造血祖细胞混合集落数量减少;SIRT6 mRNA及蛋白表达下调,NF-κB mRNA及蛋白表达上调。结果表明三丁基过氧化氢可能通过调控SIRT6/NF-κB信号通路发挥诱导Sca-1+HSC/HPC衰老作用。

SIRT6-shRNA预处理对缺氧/复氧诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响及其机制

目的探讨通过RNA干扰技术抑制H9C2心肌细胞内的SIRT6基因表达对缺氧/复氧(A/R)诱导的细胞损伤的影响和机制。方法将H9C2心肌细胞随机分为正常对照组(Con组)、A/R组、阴性对照SIRT6-shRNA质粒处理组(NC组)和SIRT6-shRNA质粒处理组(shRNA组)。检测4组H9C2心肌细胞的存活率、凋亡率、Caspase-3活性及SIRT6、核因子(NF)-κBp65、I-κBα表达水平及细胞培养液中白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平并进行比较。结果与Con组相比,A/R组H9C2心肌细胞存活率和细胞浆中I-κBα蛋白表达水平明显降低,凋亡率、细胞SIRT6mRNA和蛋白、细胞核中NF-κBp65蛋白表达水平、细胞培养液中IL-6和TNF-α水平及Caspase-3活性明显升高(P<0.05)。与A/R组比较,shRNA组H9C2心肌细胞存活率、细胞SIRT6 mRNA和蛋白及细胞浆中I-κBα蛋白表达水平明显降低,细胞凋亡率、细胞核中NF-κBp65蛋白、细胞培养液中IL-6和TNF-α水平及Caspase-3活性明显升高(P<0.05)。结论抑制H9C2心肌细胞内SIRT6基因表达能促进炎症因子的分泌,激活NF-κB信号通路,诱导细胞凋亡,加重A/R诱导的心肌细胞损伤。

SIRT6:一个新的哺乳动物抗衰老因子

Sir2是一个在低等动物中被广泛研究的抗衰老蛋白因子。最新研究发现,哺乳动物Sir2的同源蛋白家族Sirtuin(SIRT)中的SIRT6在抗衰老过程中也发挥着重要作用,它的功能缺失将导致碱基切除修复(BER)受阻,而出现细胞对氧化损伤的敏感性增加、皮肤变薄等衰老症状,使人们对哺乳动物的衰老机制有了初步的认识。

Sirt6促进自噬抑制软骨细胞衰老的体外研究

目的:明确Sirt6对软骨细胞衰老的影响,探讨自噬在Sirt6抑制软骨细胞衰老中的作用。方法:体外培养SD大鼠膝关节软骨细胞,通过连续传代致软骨细胞衰老,β-半乳糖苷酶(β-gal)染色检测细胞衰老,Western blot检测Sirt6的蛋白表达变化。原代软骨细胞中借助慢病毒敲低Sirt6或过表达Sirt6,比较各组的最大传代次数及细胞衰老情况,通过q PCR比较二型胶原(Collagen-Ⅱ)、蛋白聚糖(Aggrecan)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及ADAMT-5的m RNA表达来探讨Sirt6对软骨细胞功能的影响。在软骨细胞中过表达Sirt6后通过免疫荧光染色观察细胞中自噬泡的变化,Western blot检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比例来探讨Sirt6对软骨细胞自噬的影响。在过表达Sirt6的同时通过使用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)来验证细胞自噬在Sirt6抑制软骨细胞衰老和功能退变中的作用。结果:连续体外培养软骨细胞,随着细胞传代次数的增加,Sirt6基因的表达量逐渐降低,原代软骨细胞中敲低Sirt6后,软骨细胞提前衰老,P16蛋白的表达量明显升高;软骨细胞中过表达Sirt6可以明显延缓细胞衰老;Sirt6可以促进软骨细胞自噬的发生;使用自噬抑制剂后可以明显抑制Sirt6对软骨细胞的保护作用。结论:提高Sirt6的表达水平可以延缓软骨细胞衰老及退变,且这种作用与Sirt6促进软骨细胞自噬相关。

益肾胶囊含药血清对高糖条件下足细胞SIRT6及自噬相关蛋白表达的影响

目的:观察益肾胶囊含药血清对高糖培养条件下足细胞SIRT6及LC3B、Beclin-1、p62表达的影响。方法:体外培养小鼠肾小球足细胞,分为正常组(5.5 mmol/L葡萄糖+10%正常大鼠血清);高糖组(30 mmol/L葡萄糖+10%正常大鼠血清);益肾胶囊组(30 mmol/L葡萄糖+10%益肾胶囊含药血清);SIRT6抑制剂组(30 mmol/L葡萄糖+10%正常大鼠血清+50μmol/L oss-128167),干预48 h后收集细胞,Western blot、免疫荧光、RT-PCR方法检测SIRT6、LC3B、p62的表达。结果:高糖组SIRT6蛋白、mRNA表达较正常组下降(P<0.05),益肾胶囊组干预后SIRT6蛋白、mRNA表达较高糖组升高(P<0.05),而SIRT6抑制剂组的SIRT6表达较高糖组下降(P<0.05)。高糖组LC3B mRNA表达升高,p62 mRNA表达较正常组下降(P<0.05),益肾胶囊组LC3B mRNA表达较高糖组升高,p62 mRNA表达下降(P<0.05),SIRT6抑制剂组LC3B mRNA表达较高糖组下降(P<0.05),p62 mRNA表达升高(P<0.05)。结论:益肾胶囊可能通过调节SIRT6的表达,促进自噬改善高糖诱导的足细胞损伤。

益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织SIRT6、podocin表达的影响

目的:观察益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织SIRT6、podocin表达的影响。方法:SD健康雄性大鼠40只,随机选择30只大鼠建立DKD模型,实验分为4组:正常组、DKD组、益肾胶囊组、白藜芦醇组,益肾胶囊组每只大鼠灌胃益肾胶囊625 mg·kg^(-1)·d^(-1),白藜芦醇组每只大鼠灌胃白藜芦醇30 mg·kg^(-1)·d^(-1),正常组及DKD组每日给予等量的蒸溜水,灌胃8周。第0、4、8周末测定体重、血糖、24 h尿蛋白定量,第8周末处死大鼠,腹主动脉采血测定血肌酐、尿素氮、总胆固醇和三酰甘油,取大鼠肾组织,行HE染色和Masson染色,光镜检查肾组织病理变化,采用免疫组化检测肾组织中SIRT6、podocin表达的情况。结果:(1)与正常组相比,DKD组大鼠肾小球和肾小管损伤明显,体重明显减低(P<0.05),血糖、24 h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮、总胆固醇和三酰甘油明显升高(P<0.05),免疫组化结果示:肾组织中SIRT6、足细胞podocin蛋白表达明显下调(P<0.05);(2)与DKD组相比,经过益肾胶囊与白藜芦醇治疗后体重明显增加(P<0.05),血糖改变差异无统计学意义(P>0.05),但仍高于正常组,24 h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮、总胆固醇和三酰甘油明显下降(P<0.05),肾组织病理改变明显减轻,免疫组化结果示:肾组织中SIRT6、足细胞podocin蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论:SIRT6在糖尿病肾病的发病机制过程中具有一定的作用,益肾胶囊可能通过上调DKD模型大鼠肾组织SIRT6的表达,改善DKD模型足细胞podocin损伤,进而延缓糖尿病肾病的进展。

SIRT6调控细胞糖代谢对非小细胞肺癌A549细胞放射敏感性的影响

目的探讨沉默信息调节蛋白6(SIRT6)调控细胞糖代谢对非小细胞肺癌A549细胞放射敏感性的影响。方法构建过表达SIRT6的腺病毒载体Ad-SIRT6,采用荧光实时定量PCR(QPCR)检测经不同转染强度(0、25、50、100、200pfu/细胞)Ad-SIRT6转染24 h后的SIRT6 mRNA水平;根据实验设计分为对照组、空载体(Ad-null)组及过表达(Ad-SIRT6)组,Ad-null组和Ad-SIRT6组的病毒浓度均为200 pfu/细胞;采用克隆形成实验检测3组经0、2、4、6、8和10 Gy X线照射后的存活分数(SF),根据多靶单击模型绘制细胞存活曲线并计算增敏比(SER);流式细胞术检测3组经4 Gy X线照射48 h的细胞周期和凋亡情况;采用QPCR检测经4 Gy X线照射48 h各组丙酮酸激2(PKM2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)和己糖激酶(HK)的表达水平;葡萄糖试剂盒检测转染12、24、36、48 h后的培养基葡萄糖消耗水平。结果 QPCR检测显示,在25~200 pfu/细胞的范围内,随转染强度的增加,A549细胞的SIRT6 mRNA水平升高(P<0.001),0、25、50、100、200 pfu/细胞对应的SIRT6mRNA水平依次为1.012±0.016、1.356±0.185、2.243±0.695、4.887±1.169和7.241±1.425,50、100、200 pfu/细胞对应的SIRT6 mRNA水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。后续实验选择过表达效果最强的200 pfu/细胞转染量。克隆形成实验显示,Ad-null组和对照组经0、2、4、6、8、10 Gy X线照射后SF的差异无统计学意义(P>0.05);而Ad-SIRT6组经4~10 Gy X线照射后的SF均低于Ad-null组和对照组(P<0.05)。多靶单击模型拟合细胞存活曲线提示SER为1.76。与对照组和Ad-null组比较,Ad-SIRT6组的G0/G1期细胞比例和凋亡率升高,S期细胞比例及PKM2、LDHA和HK mRNA水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05);Ad-SIRT6组转染12、24、36、48 h的葡萄糖消耗量降低,低于对照组和Ad-null组(P<0.05)。结论SIRT6过表达可抑制A549细胞糖酵解过程中关键酶生成来抑制糖酵解过程,同时具有放射增敏作用,并可导致G0/G1期阻滞和细胞凋亡。

SIRT6在原发性肝癌中的表达变化与抑瘤机制分析

SIRT6是Sirtuin家族的组成部分,是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖的组蛋白去乙酰化酶。SIRT6是肝脏葡萄稳态主调节者,通过对胰岛素/IGF1样信号(IIS)途径的影响,基于多个网络调控机制,实现对葡萄糖代谢的影响,对人体生命维系和控制肿瘤产生作用。本文笔者以SIRT6为出发点,分析其在原发性肝癌中的表达变化与抑瘤机制。

组蛋白去乙酰化酶SIRT6在乳腺癌中的研究进展

SIRT6属于Ⅲ型组蛋白去乙酰化酶,具有去乙酰化酶活性和单ADP核糖基转移酶活性,通过促进基因修复、调控转录、影响代谢、调节炎症等参与许多病理、生理过程,在肿瘤的发生、发展以及化疗耐药性中发挥重要作用。本文将从SIRT6在乳腺癌发生、发展以及耐药性等方面的作用,阐述SIRT6与乳腺癌的关系,进一步了解乳腺癌的病理机制以及治疗现状。

抗衰老酶蛋白SIRT6与炎症反应在慢性疾病中研究进展

抗衰老酶蛋白SIRT6是沉默配型信息调节蛋白家族中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^+)依赖的一种组蛋白,具有抗衰老和调控炎症反应的作用。然而,SIRT6作为炎症反应关键调控蛋白,在调控全身系统慢性疾病及口腔颌骨相关炎症反应方面的具体机制尚不清楚。本文对SIRT6蛋白在慢性炎症反应发生的调控作用进行综述,为SIRT6蛋白是否能作为治疗口腔慢性疾病中炎症反应的靶向分子提供参考。