白藜芦醇通过下调PRMT5表达抑制肝胆管癌SMMC-7721细胞的增殖、侵袭和细胞周期

目的:探究白藜芦醇(Res)通过调控PRMT5表达对肝胆管癌SMMC-7721细胞增殖、侵袭、细胞周期的影响及其机制。方法:常规培养正常肝细胞LO2和SMMC-7721细胞,用0、20、40、80μmol/L的Res进行处理,用qPCR法、MTT法、Transwell实验、流式细胞术和WB法分别检测Res处理后PRMT5 mRNA在LO2和SMMC-7721细胞中的表达,Res对SMMC-7721细胞增殖能力、侵袭能力、细胞周期和凋亡,以及PRMT5、cyclin D1和cyclin E1蛋白表达的影响。结果:PRMT5在SMMC-7721细胞中呈高表达(P<0.01);20、40、80μmol/L Res均能明显抑制PRMT5 mRNA和蛋白在SMMC-7721细胞中的表达(均P<0.01),抑制SMMC-7721细胞的增殖能力(P<0.01)和侵袭能力(P<0.05),阻滞SMMC-7721细胞周期于G0/G1期并促进其凋亡(P<0.01),明显抑制SMMC-7721细胞中周期蛋白cyclin D1、cyclin E1蛋白的表达(P<0.01)。结论:PRMT5在SMMC7721细胞中呈高表达,Res可有效抑制SMMC-7721细胞的增殖和侵袭能力并诱导其凋亡,其机制可能与抑制PRMT5表达相关。

当归、红芪提取物对人肝癌SMMC-7721细胞辐射增敏作用

目的:探讨当归、红芪提取物对直线加速器(X射线)辐射后人肝癌细胞SMMC-7721的增敏作用。方法:96孔板培养人肝癌细胞SMMC-7721,设9个组,对照组(N)即正常对照组,纯辐射组(F)给以源皮距100cm 4Gy的X射线,另设3个纯药物组(DH),设高(H:8mg/mL)、中(M:6mg/mL)、低(L:4mg/mL)三个药物浓度梯度,3个辐射加药组(F+DH)和1个空白组(只有培养液无细胞)。每组设6个复孔。采用MTT法计算当归、红芪提取物对人肝癌SMMC-7721细胞辐射前后增殖活性的影响。流式细胞术检测不同组细胞的周期情况,透射电镜及倒置显微镜分别观察各组细胞结构变化,用蛋白印记法检测不同组细胞中p21蛋白表达情况。结果:MTT法证明当归、红芪提取物具有抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖作用,对于辐射后的肝癌细胞具有很好的周期抑制作用。不同剂量当归、红芪提取物作用于细胞24h后,抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖呈剂量依赖关系,药物浓度越高,抑制作用越显著。SMMC-7721细胞经辐射后,细胞的抑制率为37.58%,辐射后加不同浓度当归、红芪提取物(4mg/mL、6mg/mL、8mg/mL),联合作用对细胞的抑制率升高,分别为45.27%、51.86%、59.34%,且呈药物浓度依赖关系,差异具有统计学意义(P<0.01)。辐射组肝癌细胞较正常组细胞G0/G1期细胞数明显增多,由44.70%升至71.60%(P<0.01),S期细胞减少,高浓度药物也可以使G0/G1期细胞比例有所升高(P<0.01)。辐射加药组细胞G0/G1期阻滞最为明显,并呈药物浓度梯度关系。高浓度药物组、辐射组细胞p21蛋白表达较正常组升高,辐射组+高浓度药物组细胞p21蛋白表达较辐射组明显升高。结论:当归、红芪提取物对于人肝癌SMMC-7721细胞具有很好的抑制作用,对经X线辐射后的细胞具有很好的增敏作用。

圣草次苷抑制肝细胞癌SMMC-7721细胞的增殖和迁移:基于激活ROS/MAPKs信号轴

目的探讨圣草次苷通过ROS/MAPKs信号轴调控肝癌SMMC-7721细胞增殖和迁移的作用机制。方法分别用0、25、50、100、150、200、250、300μg/mL圣草次苷处理肝癌SMMC-7721细胞系24 h后,CCK-8法检测细胞活性;不同浓度的圣草次苷(100、200、300μg/mL)处理细胞后,运用划痕实验分别在24、48、72 h检测划痕愈合率,Transwell实验检测细胞迁移率,克隆形成实验检测细胞增殖能力,DAPI染色观察细胞核形态变化,Western blot检测侵袭蛋白E-cadherin、N-cadherin、MMP-2、MMP-9、凋亡因子PARP和Pro-caspase 3以及MAPKs通路p-JNK、p-P38、p-ERK信号分子;用(分别为2、5、10μmol/L)ERK抑制剂U0126、JNK抑制剂SB203580和P38抑制剂SP600125预先处理细胞2 h,再用200μg/mL圣草次苷处理细胞24 h,Western blot检测凋亡蛋白PARP的切割情况;分别用N-乙酰-半胱氨酸(NAC)(30μmol/L)或圣草次苷(100、200、300μg/mL)单独或共处理细胞后,通过DCFH-DA荧光探针法分别在15、30、60 min检测内源性活性氧(ROS)水平。结果圣草次苷在50μg/mL范围内,对细胞活力基本无影响(P>0.05);圣草次苷能够显著抑制SMMC-7721细胞的划痕愈合(P<0.01),细胞迁移(P<0.01)和克隆形成(P<0.01),在300μg/mL浓度时作用最显著;圣草次苷明显减少侵袭蛋白N-cadherin、MMP-2、MMP-9的蛋白表达量(P<0.01),上调E-cadherin的蛋白表达量(P<0.05);圣草次苷诱导SMMC-7721细胞发生显著的凋亡形态学变化,Pro-caspase 3表达降低,PARP切割增多(P<0.01);圣草次苷在300μg/mL刺激30 min时ROS表达水平较高,NAC(30μmol/L)处理后,细胞内ROS表达水平下降明显;圣草次苷能够显著诱导MAPKs信号途径JNK、P38和ERK的磷酸化(P<0.01),U0126和SB203580能够增强圣草次苷诱导的PAPR切割,而SP600125逆转圣草次苷诱导的PARP切割。结论圣草次苷通过促进细胞内ROS的合成,诱导MAPKs信号通路的活化,调控肝癌细胞系SMMC-7721的增殖、迁移和凋亡。

刺梨三萜对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响

目的:观察刺梨三萜(Rosa roxburghii Tratt triterpene,RRTT)对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的影响,研究其可能的作用机制。方法:采用形态学观察和MTT法分析RRTT对SMMC-7721细胞增殖的影响;通过NBT还原实验和细胞培养上清液中甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)含量的测定分析RRTT对SMMC-7721分化的影响;采用AO/EB染色法和FCM检测RRTT对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响;RT-PCR检测Bad mRNA的表达。结果:RRTT对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性。与阴性对照组比,随RRTT剂量的增加,NBT阳性细胞比率增加,AFP含量逐渐降低。RRTT对SMMC-7721细胞凋亡和增殖周期均无明显影响。RRTT作用后,Bad mRNA的表达下调。结论:RRTT具有体外抗SMMC-7721作用,其机制可能通过下调Bad mRNA的表达而诱导细胞分化,而与抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡无关。

半枝莲提取物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbata D.Don extract,SBE)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2,Survivin和Caspase-3表达的影响。方法体外培养SMMC-7721细胞,以2.5,5和10 mg.L-1SBE处理48 h,并以2.5 mg.L-1顺铂(DDP)作为阳性对照。用MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,二步法免疫组化检测Bcl-2,Survivin和Caspase-3蛋白表达。结果与正常对照组相比,SBE各浓度组细胞抑制率显著升高(P(0.001),细胞凋亡率明显上升(P(0.01),Caspase-3蛋白表达显著上升(P<0.01或P<0.05),Bcl-2和Survivin蛋白表达明显下降(P<0.01或P<0.05)。结论SBE具有诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用,其分子机制可能与上调Caspase-3蛋白表达以及下调Bcl-2和Survivin蛋白表达有关。

Survivin反义核酸对SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响

Surv iv in是凋亡抑制蛋白(IAP)家族的一个成员,具有强大的抗细胞凋亡功能,在几乎所有肿瘤组织中特异性表达,而在正常成年终末分化组织中低表达甚至不表达。本研究针对Surv iv in mRNA序列设计了反义寡核甘酸,RT-PCR检测表明,该序列反义寡核苷酸可明显降低细胞中surv iv in基因的mRNA含量;W estern印迹显示Surv iv in蛋白水平也被降低。M TT比色实验法检测结果说明人Surv iv in反义寡核苷酸抑制SMM C-7721细胞增殖,抑制率为43%,远高于无义寡核苷酸组和空白对照组。反义寡核苷酸还显著增强SMM C-7721细胞对于抗肿瘤药高三尖杉酯碱的敏感性,TUNEL法检测结果显示,在较低高三尖杉酯碱浓度下,反义寡核苷酸转染细胞的凋亡率明显高于其它对照组。本研究结果提示,surv iv in表达的靶向抑制有望应用于肿瘤的辅助治疗之中。

苦参素注射液联合顺铂对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡相关基因c-myc、bcl-2和bax表达的影响

目的探讨苦参素注射液(MI)联合顺铂(DDP)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡相关基因c-myc、bcl-2和bax表达的影响。方法分别采用MI、顺铂及MI联合顺铂干预SMMC-7721细胞。TUNEL法检测细胞凋亡率,半定量RT-PCR法检测c-myc、bcl-2和bax mRNA表达,二步法免疫组化检测c-myc、bcl-2和bax蛋白表达。结果苦参素组、顺铂组和联合用药组细胞凋亡率显著上升,与对照组(不干预)比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),联合用药具有单纯相加或协同作用;联合用药组的细胞凋亡率显著增加,bax mRNA和蛋白表达显著升高,c-myc、bcl-2 mRNA和蛋白表达显著减少,与DDP单药组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论苦参素注射液联合顺铂具有单纯相加或协同诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡作用,其机制可能与bax基因表达上调和c-myc、bcl-2基因表达下调有关。

白毛藤提取物对肝癌SMMC-7721细胞增殖及c-myc基因表达的抑制作用

目的观察白毛藤水提液对人肝癌SMMC-7721细胞增殖及c-myc基因mRNA表达水平的影响,探讨中药白毛藤的抗癌作用机制。方法用不同浓度白毛藤水提取物处理肝癌SMMC-7721细胞,观察细胞形态变化,用台盼兰染色并作细胞计数,cck-8试剂盒检测不同药物浓度组的细胞增殖抑制情况。RT-PCR检测c-myc基因mRNA表达水平。结果倒置显微镜下可见给药组细胞数目明显减少,且随药物浓度增加其抑制效果增强。WST-8法显示,在药物浓度为2,4,8,16 mg/ml时,细胞增殖明显受到剂量依赖性抑制,其抑制率分别为24.37%,50.07%,66.14%,83.23%。细胞中c-myc基因mRNA表达水平降低,并与药物浓度呈明显的量效关系。结论白毛藤可显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,下调c-myc基因mRNA表达,这可能是白毛藤的抗癌作用的部分机制。

苦参素注射液联合顺铂对肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制作用及其机制

目的探讨苦参素注射液(matrine injection,MI)联合顺铂(cisplatin,DDP)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制作用及其机制。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞抑制率,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期分布,半定量RT-PCR法检测c-myc mRNA表达,二步法免疫组化检测c-Myc、P27和CyclinD1蛋白表达。结果 MI、DDP单独应用均对人肝癌SMMC-7721细胞有抑制作用(P<0.01或P<0.05),联合用药具有协同效应。与单药组相比,联合用药组的细胞抑制率显著上升(P<0.05或P<0.01),G0/G1期细胞比例显著升高(P<0.05),S期细胞比例明显减少(P<0.05),P27表达显著上升(P<0.05),c-myc mRNA和蛋白、CyclinD1表达显著降低(P<0.05)。结论 MI联合DDP具有明显的协同抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖的作用,使细胞周期阻滞于G0/G1期,其机制可能与上调P27、下调c-myc基因和CyclinD1表达有关。

熊果酸诱导人肝癌SMMC-7721细胞株凋亡机制的研究

目的:研究熊果酸(ursolic acid,UA)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法:MTT法测定UA对SMMC-7721细胞的生长抑制作用;Wright-Giemasa染色和Hoechst33258荧光染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;RT-PCR检测细胞凋亡相关基因p53和Fas的表达。结果:UA对SMMC-7721细胞生长有明显的生长抑制作用,呈明显的时间-效应关系和浓度-效应关系,24 h的半数抑制浓度(IC50)为45.72μmol/L。Wright-Giemasa染色、Hoechst荧光染色证实了UA可以通过凋亡途径诱导SMMC-7721细胞发生死亡。流式细胞仪结果进一步证实了UA可以诱导SMMC-7721细胞凋亡,而且凋亡率增加呈一定的量效和时效关系。RT-PCR结果显示UA能够上调p53和Fas基因的表达。结论:UA在体外对SMMC-7721细胞具有抗增殖和诱导凋亡的作用。其机制可能与p53和Fas基因的变化有关。

红花多糖对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用

目的:观察红花多糖(Safflower polysaccharide,SPS)对SMMC-7721肝癌细胞增殖的抑制作用。方法:不同浓度SPS处理体外培养的SMMC-7721细胞株,采用MTT法测定SPS对SMMC-7721细胞增殖的影响;倒置显微镜观察细胞形态学变化;吖啶橙(AO)染色荧光显微镜观测以及Annexin-V/PI双染流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果:MTT法检测结果显示SPS对人肝癌SMMC-7721细胞体外增殖具有明显的抑制作用,该抑制作用呈明显的时间和剂量依赖性(P<0.05或P<0.01)。光镜下可见SPS组贴壁细胞数明显减少,细胞变小、变圆,折光性差,贴壁不牢,悬浮细胞增多。AO染色荧光显微镜下观察,24h部分细胞出现胞质浓缩,体积缩小,核固缩,染色增强,荧光更为明亮,形成致密浓缩的绿色荧光等;48h和72h部分细胞可见细胞核固缩为新月状。流式细胞术结果显示细胞凋亡率随药物浓度增加亦呈增长趋势。结论:SPS能显著抑制人肝癌细胞SMMC-7721生长且呈明显的量效和时效关系。SPS可诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡,具有一定的剂量依赖性。

薏苡仁脂肪酸类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及细胞凋亡的影响

目的研究薏苡仁脂肪酸类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721增值的影响及作用机制初探。方法采用MTT法考察不同给药剂量,不同给药时间下薏苡仁脂肪酸类成分对SMMC-7721细胞的增值抑制作用及其与时间、剂量的关系;碘化丙啶PI单染色法检测薏苡仁脂肪酸作用后,SMMC-7721细胞周期DNA水平变化;Annexin V-EGFP/PI双染法研究薏苡仁脂肪酸对SMMC-7721细胞凋亡率的影响。结果不同质量浓度的薏苡仁脂肪酸作用SMMC-7721细胞24、48、72 h后,均呈现出较好的细胞增殖抑制作用,且具有明显的时间-剂量-效应关系,差异有统计学意义(P<0.05);不同质量浓度的薏苡仁脂肪酸处理SMMC-7721细胞22 h后可显著增加肝癌细胞凋亡率,(P<0.001);作用36 h后,可显著降低G2/M期细胞比例,(P<0.001)。结论薏苡仁脂肪酸对人肝癌SMMC-7721细胞具有明显的抑制作用并可诱导其凋亡,其作用是通过抑制G2/M细胞周期实现的。

香加皮提取物杠柳苷抑制SMMC-7721细胞Stat3信号通路诱导细胞凋亡的研究

目的研究香加皮提取物杠柳苷对Stat3信号通路的影响,及其诱导细胞凋亡的分子机制。方法MTT比色法检测人肝癌细胞SMMC-7721增殖活性,流式细胞术分析肿瘤细胞的周期变化和凋亡,Western blot检测细胞内Stat3蛋白表达,RT-PCR检测细胞Mcl-1、Survivin和XIAP mRNA的表达。结果杠柳苷可明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,诱导SMMC-7721细胞凋亡,并使细胞周期停滞在G2/M期。杠柳苷作用后,细胞核内Stat3量降低,而细胞质中的量未见明显改变,细胞内Mcl-1、Survivin和XIAP基因的表达明显降低,并呈时间依赖性。结论香加皮提取物杠柳苷通过抑制Stat3信号转导通路和Mcl-1、Survivin和XIAP mRNA的表达,进而抑制SMMC-7721细胞的增殖,诱导其凋亡。

甘草黄酮诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其对相关蛋白survivin表达的影响

目的:探讨甘草黄酮(GF9)对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用及其机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测GF9对人肝癌细胞SMMC-7721细胞生长的影响,Hoechst染色法和电镜观察GF9诱导细胞凋亡的形态变化,流式细胞仪检测GF9诱导的细胞凋亡率,并通过免疫印迹法检测凋亡相关蛋白survivin和pro-caspase-3表达水平的变化。结果:GF9可抑制SMMC-7721细胞增殖,并呈时间剂量效应;400!mol/LGF9可诱导细胞凋亡,呈时间依赖性;随着GF9作用时间的延长,survivin和pro-caspase-3表达下调。结论:GF9能诱导SMMC-7721细胞凋亡,这可能与GF9能够引起抑制凋亡蛋白survivin的下调有关。

土荆芥挥发油诱导人肝癌SMMC-7721细胞Caspase依赖性凋亡

目的:探讨土荆芥挥发油对人肝癌SMMC-7721细胞和人正常肝LO2细胞的抑制作用及体外抗肿瘤机制。方法:MTT法检测细胞增殖;碘化丙啶(PI)单染流式细胞仪分析细胞周期;显微镜下观察细胞形态变化及凋亡效应;Annexin V-PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:土荆芥挥发油对细胞增殖的抑制作用均呈浓度和时间依赖性(P<0.05),24、48、72 h处理其对SMMC-7721细胞的IC50均小于LO2细胞(P<0.05);土荆芥挥发油阻滞SMMC-7721细胞周期于G0/G1期;形态学观察表明细胞皱缩,粘附性降低;细胞核着橘红色,呈固缩状等晚期凋亡特征;细胞凋亡率呈浓度依赖性升高(P<0.05),加入Caspase抑制剂,土荆芥挥发油100μg/m L组晚期凋亡率显著降低(P<0.01)。结论:土荆芥挥发油能抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长,其机制可能与阻滞细胞周期,诱导细胞发生Caspase依赖性凋亡有关。

p53途径在氯化两面针碱抑制SMMC-7721细胞增殖中的作用

目的研究氯化两面针碱(nitidine chloride,NC)处理后p53通路的分子水平变化,以说明p53途径在NC抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖中的作用。方法应用MTT比色法测定NC对SMMC-7721细胞存活率的影响,细胞克隆集落形成实验测定NC对细胞增殖的抑制作用;实时荧光定量PCR检测不同剂量NC对p53、p21mRNA表达的影响;酶联免疫吸附法测定p53、p21蛋白含量的变化。结果 NC(0.15,0.30,0.60,1.20,2.40,4.80 mg.L-1)浓度依赖性地降低SMMC-7721的存活率,作用48 h时IC50值为(1.03±0.18)mg.L-1;NC可明显抑制细胞集落形成,剂量为0.15,0.30 mg.L-1时,抑制率分别是74.65%、88.48%,剂量为0.60 mg.L-1时,抑制率达到了100%;NC可明显提高癌细胞中p53、p21 mRNA和蛋白的表达,并呈浓度依赖性。结论 p53通路可能在NC诱导的SMMC-7721细胞增殖抑制中起重要作用。

香加皮杠柳苷抑制Stat5信号通路诱导SMMC-7721细胞凋亡的实验研究

目的研究香加皮提取物杠柳苷对Stat5信号通路的影响,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制。方法MTT比色法检测细胞增殖活性,流式细胞术观察肿瘤细胞的周期变化和凋亡,western blot法检测杠柳苷作用前后人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内Stat5蛋白质表达。结果杠柳苷明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,使细胞周期停滞在G2/M期,并能够诱导SMMC-7721细胞凋亡。杠柳苷作用后,细胞核内的Stat5蛋白量降低而胞浆中的量未见明显改变。结论香加皮杠柳苷能够抑制Stat5信号转导通路,进而抑制SMMC-7721细胞的增殖并诱导其凋亡。

消癌解毒方对人肝癌SMMC-7721细胞相关趋化因子蛋白表达的影响

目的观察消癌解毒方对人肝癌SMMC-7721细胞相关趋化因子蛋白表达的影响,探讨消癌解毒方抗肿瘤的作用机制。方法消癌解毒方作用于人肝癌SMMC-7721细胞8 h后采用蛋白芯片技术检测药物作用前后各组相关趋化因子蛋白表达水平,采用Western blot法检测用药后各组单核细胞趋化蛋白3(MCP-3)蛋白的表达。结果与模型组比较,共有9个趋化因子蛋白下调,其中,消癌解毒方4 mg·m L-1组有3个蛋白表达下调,分别是MCP-3、Eotaxin 1、ENA 78;消癌解毒方2 mg·m L-1组有3个蛋白表达下调,分别是MCP-3、CCL28、BLC;顺铂组共有6个蛋白表达下调,分别是CXCL16、ENA 78、Eotaxin 1、XCL1、MIP-3 beta、MPIF 1。Western blot结果显示,与模型组比较,消癌解毒方4 mg·m L-1组、2 mg·m L-1组MCP-3蛋白均出现下调,顺铂组无明显差异。结论消癌解毒方可能是通过影响趋化因子信号通路中的某些蛋白来发挥抗肿瘤的作用。

NF-κB信号传导途径对TNF-α诱导的SMMC-7721细胞凋亡的影响

背景与目的:已证明核因子κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)在免疫细胞激活、抗病毒、多种应激反应和细胞凋亡的调控等许多方面起着重要作用。本实验研究NF-κB信号传导途径对TNF-α诱导的肝癌细胞株SMMC-7721细胞凋亡的影响。方法:采用ELISA和免疫组化检测TNF-α对NF-κB信号传导通路的激活作用,继而用TPCK(n-tosyl-Phe-chloromethylketone)阻断NF-κB的活化,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:①TNF-α能激活NF-κB信号传导通路;②TPCK能抑制TNF-α诱导的NF-κB活化;③TPCK抑制NF-κB活化后,能加强TNF-α诱导的细胞凋亡。结论:SMMC-7721细胞中NF-κB信号传导途径参与了细胞的抗凋亡过程,在SMMC-7721细胞对TNF-α的细胞毒性作用耐受中起重要作用。抑制NF-κB信号传导途径可能在肿瘤治疗中有潜在的应用价值。

2-脱氧-D-葡萄糖与奥沙利铂对人肝癌SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究糖酵解抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)与奥沙利铂(ox-aliplatin,L-OHP)单独及联合应用对人肝癌细胞SMMC-7721增殖及凋亡的影响。方法:将2-DG及L-OHP单药及联合用药作用于人肝癌细胞SMMC-7721,MTT法检测各组细胞的生长抑制率,并计算两药的协同作用q值,流式细胞仪检测各组细胞周期及凋亡情况,caspase-3试剂盒检测caspase-3活性。结果:不同浓度的2-DG和L-OHP均可使肝癌细胞增殖受到抑制,并呈时间、浓度依赖性,两药合用后对细胞的增殖抑制作用明显增强(P<0.05)。2-DG可诱导细胞凋亡,使细胞周期阻滞于G2/M期;与L-OHP合用后细胞凋亡率更高,可阻滞细胞于G2/M期和S期。Caspase-3活性在两药联合应用时明显增强。结论:2-DG能有效抑制SMMC-7721细胞生长增殖,并诱导其凋亡;当其与L-OHP联合应用时能增强L-OHP的抗肿瘤作用,其机制可能与增加caspase-3活性有关。