辣木叶多糖对STZ诱导糖尿病小鼠的降糖效果及其机制

为探讨辣木叶多糖(Moringa oleifera leaf polysaccharide,MOLP)对糖尿病小鼠的降糖效果及其机制,通过建立链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导糖尿病小鼠模型,将实验小鼠设为正常空白组、模型组、MOLP低剂量组(100 mg/kg·bw)、中剂量组(200 mg/kg·bw)、高剂量组(400 mg/kg·bw)和阳性药物组(盐酸二甲双胍200 mg/kg·bw),每组8只,灌胃28 d,测定空腹血糖、血清糖化蛋白、血清胰岛素、肝/肌糖原等生化指标,对肝脏和胰腺中糖代谢关键基因(肝X受体(Liver X Receptor,LXR)、胰腺十二指肠同源异形盒1(Pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1)、葡萄糖激酶(Glucoskinase,GK)、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(Phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)、葡萄糖6磷酸酶(Glucose-6-phosphatase,G6Pase)、葡萄糖转运载体2(Glucose transporter type 2,GLUT2)、胰岛素受体底物1/2(Insulin receptor 1/2,IRS1/2))进行测定,并对各组小鼠肝脏和胰腺组织进行HE染色,观察其组织形态。结果表明:MOLP降糖效果显著,且呈现一定的量效反应关系,MOLP高剂量组(400 mg/kg·bw)的血糖降低水平最为接近阳性药物组,其相关机制为表达显著上调的LXR和PDX-1通过调控其下游基因PEPCK、G6Pase、GK、GLUT2和IRS1/2 mRNA表达,从而改善糖尿病小鼠的糖代谢紊乱,使其损伤的肝脏组织和胰腺组织得到有效改善,血清胰岛素和肝糖原含量增加,最终达到降血糖作用。

高压氧抑制TGF-β1改善STZ糖尿病大鼠周围神经病变

目的研究高压氧治疗(HBOT)对链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠外周神经传导速度和血清、局部转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法STZ糖尿病大鼠造模成功2个月,经电镜证实有神经病变后,随机分为3组:①HBOT组(n=31):用胰岛素控制血糖,每天接受0.15MPa、HBOT1h,连续20d;②糖尿病对照(DM,n=32)组:仅用胰岛素控制血糖;③正常对照(NC,n=20)组:腹腔注射生理盐水的无糖尿病的正常STZ大鼠。分别在疗程10、20d时做肌电图后处死,取股动脉血用EIA法测定血清TGF-β1水平,同时取后肢神经进行苏木精-伊红染色、病理学观察和电镜观察,并用TGF-β1多抗对神经组织做DAB二步法免疫组化染色。结果HBOT10d后,治疗组后肢坐骨神经的传导速度明显高于同期DM组(P<0.05),但低于NC组;HBOT20d后,治疗组后肢胫、腓神经的传导速度明显高于同期DM组(P<0.01);而与NC组间无明显差异(P>0.05);血清TGF-β1水平较DM组明显降低(P<0.05),与NC组间无明显差异。病理观察显示神经组织髓鞘内外的TGF-β1染色明显减少。结论HBOT可改善STZ大鼠糖尿病周围神经病变,其机制可能与抑制TGF-β1生成和其在神经组织表达有关。

舒糖宝对STZ造模2型糖尿病小鼠生化指标的影响

用小白鼠40只,分成4组,每组10只。①组为正常对照组;②、③、④组用链佐霉素作腹腔注射。测定注射前、后小鼠空腹血糖含量。待血糖升高稳定后;④组用舒糖宝口服液灌胃治疗;③组为标准药物对照组,给盐酸二甲双胍灌胃;②组为模型组,与①组均用等体积的生理盐水灌胃。结果:各组注射STZ前的空腹血糖无显著性差异,注射STZ后第7、14天空腹血糖均比注射前有明显升高,比①组(正常组)也明显升高,而注射STZ各组比较无显著差异。治疗第10、20天测定血糖,第10天尚无显著性下降,第20天,③④组显著性下降,接近正常水平,第②组尚在较高水平;甘油三酯(TG)③④组显著低于②组;高密度脂蛋白中胆固醇与总胆固醇的比值,③④组也高于②组;血清NO和SOD含量②组低于③④组和①组,③④组间各指标无显著差异。结论:舒糖宝口服液对STZ引起的2型糖尿病小鼠有明显的治疗作用。

富硒黄芪多糖对STZ诱导的糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

目的:观察富硒黄芪多糖对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响。方法:将50只STZ诱导的SPF级雄性糖尿病大鼠随机分为模型组、吡格列酮组和富硒黄芪多糖低、中、高剂量组,每组10只,正常组10只大鼠不进行造模。富硒黄芪多糖低、中、高剂量组按100、200、400 mg/kg灌胃,正常组及模型组灌胃等体积生理盐水,吡格列酮组按10 mg/kg灌胃吡格列酮。每天灌胃1次,连续干预4周。造模前及造模后第0、2、4周记录各组大鼠一般状况、检测尿微量白蛋白(urinary albumin,UAlb)和血糖。干预结束后,采用苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining)观察各组大鼠肾脏组织形态学变化情况;测定各组大鼠血清肌酐(serum creatinine,SCr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和血尿酸(uric acid,UA)表达水平;荧光定量PCR检测各组大鼠肾组织Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤连蛋白(Fibronectin,FN)mRNA表达水平;免疫组化法(immunocytochemistry,IHC)检测各组大鼠肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达。结果:与模型组比较,富硒黄芪多糖中、高剂量组及吡格列酮组大鼠血糖、24 h UAlb于造模后第2周明显下降(P<0.05),血清SCr、BUN及UA表达降低(P<0.05),富硒黄芪多糖高剂量组及吡格列酮组大鼠肾组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、FN表达均降低(P<0.05),E-cadherin表达升高(P<0.05),富硒黄芪多糖低、中、高剂量组及吡格列酮组大鼠肾组织中α-SMA表达下降(P<0.01),肾小球数量增多,细胞外基质减少;与吡格列酮组比较,黄芪多糖高剂量组大鼠24 h Ualb、血清SCr、BUN、UA水平及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、FN表达水平、E-cadherin和α-SMA蛋白表达变化均不明显(P>0.05),肾小球数量减少,细胞外基质减少。结论:富硒黄芪多糖可降低STZ诱导的糖尿病大鼠血糖,具有抑制糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化的作用。

两色金鸡菊乙酸乙酯提取物对STZ诱导的糖尿病SD大鼠的影响

目的观察两色金鸡菊乙酸乙酯提取物对糖尿病大鼠糖脂代谢及肝脏、肾脏功能的影响。方法高糖高脂喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立2型糖尿病SD大鼠模型,成模大鼠随机分6组(正常组、模型组、两色金鸡菊乙酸乙酯提取物高、中、低3个剂量组0.15、0.3、0.6 g·kg-1、阳性药二甲双胍0.16 g·kg-1组)。正常组和模型组灌胃生理盐水,其余组每天灌胃给药两色金鸡菊提取物,每周测体重及随机血糖,给药4周后处死,收集大鼠血清,检测血脂四项、肝功肾功指标、血清胰岛素及糖化血红蛋白水平。结果两色金鸡菊乙酸乙酯提取物可有效降低糖尿病大鼠的随机血糖和糖化血红蛋白及血清甘油三酯、低密度脂蛋白、血清总蛋白、血肌酐及血尿酸水平,同时能升高糖尿病大鼠血清白蛋白的含量。结论两色金鸡菊乙酸乙酯提取物能降低糖尿病SD大鼠的血糖血脂,保护其肝肾功能。

芍药苷对STZ损伤的INS-1细胞的保护和修复作用

目的研究中药单体芍药苷对INS-1细胞的影响,及对链脲佐菌素(STZ)损伤的胰岛细胞的保护、修复作用,并初步探讨其保护机制。方法 INS-1细胞传代培养后,用四氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖活力,并测定细胞培养液中胰岛素浓度、丙二醛(MDA)浓度、总抗氧化能力(T-AOC)。结果芍药苷可促进INS-1细胞释放胰岛素。STZ损伤后,INS-1细胞活力降低;胰岛素分泌量减少;MDA含量明显升高;T-AOC下降。芍药苷保护组能不同程度改善STZ引起的上述指标的改变。结论芍药苷可促进INS-1细胞释放胰岛素,对STZ损伤的INS-1细胞有显著的保护作用,这种作用可能是通过提高INS-1细胞的抗氧化能力实现的。

STZ糖尿病大鼠心肌短型瘦素受体基因的转录表达及心脏纤维化观察

目的 研究瘦素受体在STZ糖尿病大鼠心肌中转录表达及心脏的纤维化情况。方法 用STZ制备糖尿病大鼠模型 ,在病程 12周时测定大鼠血压和心功能后处死 ,取心肌组织和分离、培养心脏成纤维细胞 ,用RT PCR检测长、短型瘦素受体mRNA转录表达 ,PCR产物测序 ,电镜观察心肌的超微结构。血清瘦素、胰岛素放射免疫测定。结果 STZ糖尿病大鼠和对照鼠心肌均可转录表达短型瘦素受体mRNA ,两组之间无显著差别 ,但糖尿病心肌成纤维细胞短型瘦素受体mRNA表达较高 ,伴心功能减退和显著的心脏纤维化病理改变。结论 糖尿病大鼠心脏成纤维细胞短型瘦素受体表达增加与心脏纤维化并存。

牛蒡子防治STZ糖尿病大鼠早期肾脏病变的实验研究

目的 :研究中药牛蒡子对糖尿病 (DM)大鼠肾脏病变的作用效果。方法 :以 STZ诱导的 DM大鼠为动物模型进行 6周的实验 ,观察了大鼠的一般状况 ,常规生化指标 ,尿微量白蛋白 ,肾脏的病理改变的变化。结果 :牛蒡子能明显改善 STZ大鼠的症状 ,降低尿白蛋白排泄率 ,减少肾重 /体重比值、肾小球 PAS染色阳性基质面积比 ,减轻肾脏病理损害。结论 :牛蒡子对糖尿病大鼠早期肾脏病变有一定的防治作用 ,其作用机制有待进一步研究。

STZ复制实验性2型糖尿病大鼠模型过程及经验总结

目的:建立具有胰岛素抵抗、近似人2型糖尿病临床表现的SD大鼠模型。方法:30只SD大鼠随机分为A组(对照组)6只、B组[小剂量链脲佐菌(STZ)素即STZ组]12只、C组(高脂高糖膳食加小剂量STZ组)12只。B、C组大鼠分别在普通膳食和高脂高糖膳食喂养4周后小剂量STZ(30mg/kg)腹腔注射5d。结果:B组成模率为75%(8/12),C组成模率100%(12/12)。成模大鼠均表现多饮、多尿、毛色枯黄、精神萎靡、形体消瘦等症状,血糖值均高于16.7mmol/L。结论:普通膳食+小剂量STZ(30mg/kg)和高脂高糖膳食+小剂量STZ(30mg/kg)均能建立2型尿病SD大鼠模型,但高脂高糖膳食+小剂量STZ成模率更高。

STZ诱发实验恒河猴糖尿病性视网膜并发症模型的建立

目的 建立糖尿病性视网膜并发症 (DiabeticRetinopathy ,DR)动物模型。方法 本研究选用 4只健康成熟的雄性恒河猴分别以剂量为 6 0mg kg、4 5mg kg静脉一次注射及 30mg kg静脉二次注射 (中间间隔 15d)链脲佐菌素 (Streptozotocin ,STZ)。结果 使用不同剂量的STZ注射恒河猴 ,分别造成了胰岛素依赖性糖尿病 (InsulinDepen dentDiabetesMellitus ,IDDM)及慢性持续性高血糖症 (StateofChronicHyperglycemia,SCH)两种类型的模型 ,从而诱导出不同程度的DR。眼底荧光造影结果显示∶用药后 6 3～ 91d4只实验猴均出现不同程度的视网膜病 ,分别显示早期眼底微血管动脉扩张 ,视网膜出血瘤 ,微血管瘤及新生血管、晚期白内障等。结论 本研究所建立的糖尿病性视网膜并发症模型 ,对于进一步研究糖尿病及其并发症的发病机理 。

STZ糖尿病大鼠视网膜病变模型的再评价

目的本研究旨在对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠视网膜病变糖尿病进行系统性的再评价。方法雄性SD大鼠75只,随机分为空白组(30只)和糖尿病组(45只)。采用一次性大剂量腹腔注射STZ60mg/kg的方法制备糖尿病模型,监测6个月,动态考察大鼠的体重、血糖变化,同时测定大鼠的血液流变学参数。视网膜铺片法观察视网膜形态学变化,免疫组化法考察血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、色素上皮细胞衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)表达的变化,Western blotting法观察内皮细胞紧密连接蛋白(occludin)、细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,缩写ICAM-1)表达量的变化,分光光度法测定醛糖还原酶(aldose reductase,AR)活性的改变。结果与空白组相比,STZ大鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数均增加。视网膜血管基底膜增厚,毛细血管退化,有闭锁现象,静脉扩张明显,周细胞数量明显减少。其视网膜中的VEGF表达增加(IOD/area 0.66±0.28,空白组0.25±0.03),PEDF表达减少(IOD/area0.07±0.06空白0.19±0.04),与血-视网膜屏障相关的occludin蛋白表达下降70%,炎症因子ICAM-1增加2.58倍,AR活性升高3倍。结论 STZ糖尿病大鼠视网膜病变发生在多个位点,借助该模型对糖尿病视网膜病变的研究可以从多层次、多角度进行。

“复肾汤”对STZ诱导糖尿病大鼠肾脏病变的影响

目的 :观察并探讨复肾汤对糖尿病大鼠肾脏病变的影响。方法 :给单侧肾切除后大鼠一次性注射STZ建立 DN模型 ,分设模型组、复肾汤治疗组、缬沙坦对照组及正常组 ,检测 2 4 h尿蛋白、血肌酐、尿肌酐、肾重、体重及肾组织 TGF- β1 表达 ,并观察肾脏组织形态学改变。结果 :复肾汤能够减少 DN大鼠尿蛋白的排泄 ,抑制过度增高的内生肌酐清除率 ,减轻肾脏肥大及肾小球系膜基质增生、硬化 ,抑制肾组织 TGF- β1 表达。结论 :复肾汤具有降低蛋白尿和抑制肾小球早期肥大及 TGF- β1

改良链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病模型及其饲养方法

链脲佐菌素(STZ)诱导制备糖尿病大鼠模型的方法操作简单,模型可靠、稳定,因此该种方法被广泛应用于糖尿病的基础研究中。本实验通过对正常组和模型组两组大鼠的观察,发现:造模成功的大鼠在72h内体重比造模前普遍减少,多精神萎靡,皮毛缺少光泽,色灰黄,摄食量、饮水量、尿量明显增加。尾静脉采血法测量血糖时,要注意采血部位的局部消毒。

STZ诱导小鼠糖尿病模型中T、B淋巴细胞功能的变化

目的:探讨多次小剂量注射链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病模型小鼠中T、B淋巴细胞功能的变化及可能的机制,为小鼠糖尿病模型的应用提供实验依据。方法:①采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导昆明小鼠糖尿病作为动物模型。②用ConA和Insulin分别刺激脾和胸腺T细胞,采用MTT法检测成熟与未成熟T细胞对于丝裂原和特异性抗原的增殖转化能力。③采用ELISA间接法测定血清中Insulin自身抗体(IAA)的水平。④采用ELISA夹心法测定小鼠脾细胞及胸腺细胞培养上清的IL4与IFNγ的含量。结果:①糖尿病模型组血清中Insulin自身抗体(IAA)含量明显高于正常组(P<0.05)。②模型组成熟T细胞(脾脏细胞)对于ConA刺激的增殖能力较弱(P<0.05),对于Insulin刺激的增殖能力与正常组没有显著差别(P>0.05);模型组未成熟T细胞(胸腺细胞)对于ConA刺激的增殖能力与正常组没有显著差别(P>0.05),而对于Insulin刺激的增殖能力较高(P<0.05)。③模型组脾细胞培养上清的IFNγ的含量明显高于对照组(P<0.05),而胸腺细胞培养上清中IFNγ的含量在模型组与对照组之间无明显差异,IL4在实验组和对照组均未检出。结论:多次小剂量注射STZ诱导糖尿病小鼠模型是自身免疫应答所导致;自身免疫性T、B细胞的功能及自身抗体均有增强;Th1介导的细胞免疫在STZ诱导的糖尿病中发挥着重要作用。

葛根素对STZ糖尿病模型大鼠视网膜VEGF的调节及对视网膜细胞凋亡的促进作用的研究

目的研究葛根素对链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子(VEGF)的调节及对视网膜细胞凋亡的促进作用。方法清洁级SD大鼠随机分为实验组及对照组各28只,实验组一次性腹腔注射1%STZ诱发糖尿病模型,对照组腹腔注射磷酸盐缓冲液(PBS)。成模后给两组大鼠分别注射葛根素,4、8、16、24周后采用实时荧光定量(Real-time PCR)观察VEGF的表达水平,流式细胞技术检测细胞凋亡,WB检测凋亡相关蛋白磷酸化AKT(pAKT)及Caspase3、8、9表达量。结果与对照组相比,实验组大鼠注射葛根素4、8周后VEGF表达量,视网膜组织细胞凋亡,pAKT、Caspase8、Caspase9及Caspase3表达均改变不明显,差异无统计学意义(P>0.05);但16、24周后VEGF表达量发生明显下降(P<0.05),视网膜组织细胞凋亡发生明显升高(P<0.05),pAKT表达下调,Caspase8、Caspase9及Caspase3表达均上调(P<0.05)。结论较长时间注射葛根素能下调糖尿病大鼠视网膜VEGF的表达,从而下调pAKT表达,最终导致Caspase3、8、9的表达上调,诱导细胞发生凋亡。此研究结果为糖尿病性视网膜病变的治疗提供了实验依据。

姜黄素对STZ诱导C57BL/6小鼠血糖、血脂影响

目的:研究姜黄素对链脲佐菌素(STZ)诱导C57BL/6小鼠血糖以及血脂的影响。方法:链脲佐菌素(STZ)合并高脂肪饮食诱导糖尿病小鼠模型,并随机分为正常组、模型组、阳性药组和姜黄素组,正常组、模型组灌胃0.5%CMC-Na,阳性组灌胃二甲双胍0.3 g/kg,姜黄素组灌胃姜黄素0.2 g/kg,连续给药8周。第8周最后一次给药后测定血糖、血脂、糖耐量、胰岛素耐量水平。结果:灌胃葡萄糖出现糖负荷以后,二甲双胍组血糖水平明显低于模型组(P<0.05);糖负荷后1 h时,姜黄素组血糖值明显较低(P<0.05)。注射胰岛素1 h后,姜黄素组血糖值明显低于模型组(P<0.05);二甲双胍组1 h后血糖明显低于模型组(P<0.05)。模型组血糖和糖化血红蛋白水平显著高于正常对照组,差异均具有显著性(P<0.05)。姜黄素组血清TG、LDL-C、HDL-C与模型组相比明显下降,均有显著差异(P<0.05),而TC水平降低不明显。结论:姜黄素可降低STZ所致糖尿病小鼠的血糖,增加糖耐量,提高小鼠机体胰岛素的敏感性,同时可纠正糖尿病小鼠脂代谢紊乱。

侧脑室注射STZ造模致大鼠阿尔茨海默病的实验研究

目的以行为学和免疫组化为指标,探讨STZ在AD大鼠造模中的作用。方法 36只健康Wistar大鼠随机分为正常组、模型对照组、模型组。用水迷宫检测学习记忆,免疫组化法检测NGF及c-fos的表达。结果模型组大鼠逃避潜伏期和游泳路程明显延长,c-fos表达高于正常组而NGF表达低于正常组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论侧脑室注射STZ可以引起大鼠学习记忆障碍、c-fos表达增强及NGF表达降低。此造模方法可以作为研究AD的一种有用的动物模型。

硒对STZ诱发糖尿病大鼠骨密度影响的研究初报

比较了在低硒饲料的基础上补充不同形态硒对糖尿病大鼠骨密度的影响。健康SD大鼠 1 2 8只 ,体重 50～ 60 g,随机分为 4组 ,每组 32只 ,雌雄各半 ,其中Ⅰ组为低硒对照组 (饲料含硒量 0 0 37mg/kg) ;Ⅱ组为补充亚硒酸钠组 (饲料含硒量 0 3mg/kg) ;Ⅲ组为补充富硒麦芽组(饲料含硒量 0 3mg/kg) ;Ⅳ组为补充富硒酵母组 (饲料含硒量 0 3mg/kg)。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组的饲料均是在Ⅰ组低硒饲料的基础上分别添加适量的亚硒酸钠、富硒麦芽、富硒酵母后配制而成。喂饲 5周后 ,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组用链脲佐菌素 (streptozotocin ,STZ)按 60mg/kg腹腔注射诱发糖尿病 ,继续饲喂 6周。用单光子吸收法测定各组大鼠的肱骨、股骨、胫骨、桡骨的骨密度。结果表明 :①STZ致糖尿病大鼠的骨密度随时间的延长有逐渐下降的趋势。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ补硒组大鼠可以在一定时间内延缓STZ致糖尿病大鼠的骨密度下降。在此期间骨密度的下降以肱骨出现最早 ,股骨次之 ,桡骨、胫骨再次之。②饲料补硒组糖尿病大鼠的肱骨、股骨中硒的含量较饲料低硒组糖尿病大鼠的肱骨、股骨中硒的含量显著提高。③补充硒的形态 ,即有机硒 (富硒麦芽、富硒酵母 )或无机硒 (亚硒酸钠 )对糖尿病大鼠肱骨、股骨、胫骨、桡骨的骨密度影响差异不显著。

紫红獐牙菜对STZ糖尿病小鼠的降糖作用

目的:对紫红獐牙菜4个提取部位的降血糖作用进行筛选,并探查其降血糖活性的作用机制是否影响胰岛素的分泌、体重。方法:采用渗漉法提取紫红獐牙菜的乙醇提取物,并将提取物依次萃取分离出乙醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位及水溶性4个部位。通过将此4个部位对由STZ诱导的2型糖尿病小鼠进行抗高血糖作用的药理活性研究,根据实验结果对此4个部位进行有效部位筛选,设定高低剂量组从而考察其量效关系。同时观察其对STZ诱导的2型糖尿病小鼠给药物7 d后对小鼠胰岛素抵抗的影响。结果:乙酸乙酯部位及水溶性部位对STZ引起的高血糖小鼠的血糖有较强的抑制作用,而正丁醇及乙醚部位则相对较差。并且各部位对小鼠胰岛素抵抗有十分显著改善。结论:乙酸乙酯及水溶性部位降血糖作用较明显。