目的监测每搏输出量变异度（SVV）对重型颅脑损伤患者容量治疗的反应，观察其对预后的影响。方法选择2013年8月—2014年3月入住我院重症医学科，当日急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ（APACHEⅡ）评分≥15分，ICU住院时间≥3 d，3分...目的监测每搏输出量变异度（SVV）对重型颅脑损伤患者容量治疗的反应，观察其对预后的影响。方法选择2013年8月—2014年3月入住我院重症医学科，当日急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ（APACHEⅡ）评分≥15分，ICU住院时间≥3 d，3分≤GCS≤8分，需机械通气的50例重型颅脑损伤患者，随机分为扩容后采用Flotrac/Vigileo系统监测SVV达10%目标导向治疗组（即试验组），另一组监测扩容后中心静脉压（CVP）达8～12 mm Hg（即对照组）。检测血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平，随访记录患者受伤后3个月～6个月格拉斯哥预后评分（GOS），比较2组患者NSE水平及预后的差异。结果试验组与对照组相比较，血清中的NSE水平低，预后较好，差别有统计学意义。结论扩容后采用Flotrac/Vigileo系统监测SVV达10%目标导向治疗，可以明显降低重型颅脑损伤患者的血清NSE水平，改善预后。展开更多
【目的】纯化猪塞尼卡谷病毒(Seneca Valley virus,SVV)SVV-CH-HB2016毒株,并制备其结构蛋白VP1、VP2和VP3的单克隆抗体。【方法】以蔗糖密度梯度离心法纯化的SVV-CH-HB2016病毒颗粒作为抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0...【目的】纯化猪塞尼卡谷病毒(Seneca Valley virus,SVV)SVV-CH-HB2016毒株,并制备其结构蛋白VP1、VP2和VP3的单克隆抗体。【方法】以蔗糖密度梯度离心法纯化的SVV-CH-HB2016病毒颗粒作为抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行细胞融合。通过间接免疫荧光试验(IFA)结合间接ELISA筛选阳性细胞株,制备能特异性分泌针对结构蛋白的杂交瘤细胞株。采用Western blotting和IFA方法分别检测单克隆抗体与重组表达蛋白及天然结构蛋白的反应性,并对单克隆抗体的病毒中和保护效果进行测定。利用空斑试验和实时荧光定量PCR方法探究中和性单克隆抗体对SVV-CH-HB2016毒株吸附过程的影响,最后用抗体相加试验来分析14株单克隆抗体的抗原表位。【结果】在蔗糖密度梯度为5%~45%(W/V)时获得了纯度较好、浓度较高的SVV-CH-HB2016毒株结构蛋白,免疫小鼠血清抗体效价均达到了1∶12800,成功制备了17株能稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经验证14株单克隆抗体能与重组结构蛋白发生Western blotting反应,17株单克隆抗体能与病毒发生IFA作用;2G6、4A3和4C113株单克隆抗体对SVV-CH-HB2016毒株感染的BHK-21细胞具有明显中和保护作用,也能有效抑制SVV-CH-HB2016毒株对293T细胞的吸附。经分析发现,除1F5与2E1、4B8与4F11外,其余10株单克隆抗体分别针对不同抗原表位。【结论】本研究初步建立了SVV的纯化方法,制备了17株特异性针对SVV-CH-HB2016毒株的单克隆抗体,为后期进一步开展SVV全病毒灭活疫苗的研发、ELISA检测方法的建立及保护性抗原表位的鉴定奠定了基础。展开更多
文摘目的监测每搏输出量变异度（SVV）对重型颅脑损伤患者容量治疗的反应，观察其对预后的影响。方法选择2013年8月—2014年3月入住我院重症医学科，当日急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ（APACHEⅡ）评分≥15分，ICU住院时间≥3 d，3分≤GCS≤8分，需机械通气的50例重型颅脑损伤患者，随机分为扩容后采用Flotrac/Vigileo系统监测SVV达10%目标导向治疗组（即试验组），另一组监测扩容后中心静脉压（CVP）达8～12 mm Hg（即对照组）。检测血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平，随访记录患者受伤后3个月～6个月格拉斯哥预后评分（GOS），比较2组患者NSE水平及预后的差异。结果试验组与对照组相比较，血清中的NSE水平低，预后较好，差别有统计学意义。结论扩容后采用Flotrac/Vigileo系统监测SVV达10%目标导向治疗，可以明显降低重型颅脑损伤患者的血清NSE水平，改善预后。
文摘【目的】纯化猪塞尼卡谷病毒(Seneca Valley virus,SVV)SVV-CH-HB2016毒株,并制备其结构蛋白VP1、VP2和VP3的单克隆抗体。【方法】以蔗糖密度梯度离心法纯化的SVV-CH-HB2016病毒颗粒作为抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行细胞融合。通过间接免疫荧光试验(IFA)结合间接ELISA筛选阳性细胞株,制备能特异性分泌针对结构蛋白的杂交瘤细胞株。采用Western blotting和IFA方法分别检测单克隆抗体与重组表达蛋白及天然结构蛋白的反应性,并对单克隆抗体的病毒中和保护效果进行测定。利用空斑试验和实时荧光定量PCR方法探究中和性单克隆抗体对SVV-CH-HB2016毒株吸附过程的影响,最后用抗体相加试验来分析14株单克隆抗体的抗原表位。【结果】在蔗糖密度梯度为5%~45%(W/V)时获得了纯度较好、浓度较高的SVV-CH-HB2016毒株结构蛋白,免疫小鼠血清抗体效价均达到了1∶12800,成功制备了17株能稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经验证14株单克隆抗体能与重组结构蛋白发生Western blotting反应,17株单克隆抗体能与病毒发生IFA作用;2G6、4A3和4C113株单克隆抗体对SVV-CH-HB2016毒株感染的BHK-21细胞具有明显中和保护作用,也能有效抑制SVV-CH-HB2016毒株对293T细胞的吸附。经分析发现,除1F5与2E1、4B8与4F11外,其余10株单克隆抗体分别针对不同抗原表位。【结论】本研究初步建立了SVV的纯化方法,制备了17株特异性针对SVV-CH-HB2016毒株的单克隆抗体,为后期进一步开展SVV全病毒灭活疫苗的研发、ELISA检测方法的建立及保护性抗原表位的鉴定奠定了基础。
