基于HPLC-ECD研究景天三七抗氧化活性的谱效关系

目的:基于谱效关系研究,寻找景天三七抗氧化活性的物质基础,为其质量控制提供一定的参考依据。方法:建立不同产地景天三七的HPLC-ECD(High performance liquid chromatography-Electrochemical Detection,HPLC-ECD)指纹图谱并进行相似度评价;通过偏最小二乘回归分析和灰色关联分析研究指纹图谱与其抗氧化活性之间的谱效关系。结果:建立了景天三七的HPLC-ECD指纹图谱,样品间的相似度较高,共标定17个共有峰,通过与对照品比对鉴别出了没食子酸、原儿茶酸、色氨酸、没食子酸甲酯、表没食子儿茶素、咖啡酸、表没食子儿茶素没食子酸酯、鸢尾酚酮、杨梅苷、异槲皮苷、迷迭香酸和槲皮苷等12种成分;谱效关系表明,没食子酸、原儿茶酸、表没食子儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、迷迭香酸和槲皮苷的VIP值均大于1;其中没食子酸、迷迭香酸和槲皮苷的关联度接近于0.8。分子对接结果表明,表没食子儿茶素没食子酸酯、杨梅苷、异槲皮苷、迷迭香酸和槲皮苷的Libdock Score较高。因此,表没食子儿茶素没食子酸酯、杨梅苷、异槲皮苷、迷迭香酸和槲皮苷等化合物为景天三七抗氧化活性的关键成分。结论:结合化学计量学方法进行谱效关系研究,确定了景天三七抗氧化活性物质基础,可为景天三七的质量评价提供了一定的科学依据。

The fingerprint and flavonoids contents by HPLC and the UPLC-DAD-Q-TOF-MS analysis of Sedum aizoon L.

Fingerprint analysis of Sedum aizoon L.was carried by High-performance liquid chromatography.There were 27 common peaks in the fingerprint of 10 samples.Eight of these common peaks,peaks 1(arbutin),4(gallic acid),10(myricetin-3-O-β-D-glucopyranoside),14(myricetin-3-O-α-L-rhamnopyranoside),19(quercetin-3-O-α-L-rhamnopyranoside),22(kaempferol-3-O-α-L-rhamnopyranoside),24(quercetin)and 26(kaempferol)were identified by reference substances.Moreover,six flavonoid compounds were simultaneously determined by the above method.By comparing with the constituents in the aerial parts,roots and flowers,it’s easy found that the aerial parts of S.aizoon had abundant flavonoids and the flavonoid aglycones mostly exist in the roots,while the flavonoid glycosides largely existing in the flowers.In addition,an UPLC-DAD-Q-TOF-MS method was developed for qualitative analysis of the aerial parts of S.aizoon.This study may provide a preliminary reference for the quality control of S.aizoon.

江西景天属一新种——溪水景天

【目的】2021年在中国江西东北部阳际峰国家级自然保护区进行林木种质资源调查时发现一种景天科(Crassulaceae)景天属(Sedum L.)植物,该种与已报道的同属植物均有区别,本文予以论述并确定其分类学地位。【方法】跟踪阳际峰保护区多个种群,在不同物候期进行详细观察和形态学比较,确定其相近种及区别特征,进而通过文献检索和标本查询确定其在全国分布情况。【结果】该种营养枝在幼苗阶段呈莲座状,最为相似种为细小景天(Sedum subtile Miq.),区别特征为新发现种具有发达且3叶轮生的不育枝、花茎上每分枝5~16朵花,苞片匙状倒披针形;细小景天不育枝细弱且叶互生或对生、花茎每分枝3~5朵花、苞片线形。【结论】该种为景天属一新种,命名为“溪水景天”(Sedum fluviale B.Chen&Z.W.Zhu)。该种专一性地生于溪流环境,分布范围较广,包括江西、浙江、福建、安徽、湖南、贵州等省(区、市),此前存在较多错误鉴定的情况。模式标本存放于上海辰山植物标本馆(CSH)。

HPLC法同时测定养心草中没食子酸、槲皮素和山萘酚的含量

建立了高效液相色谱法同时测定养心草中没食子酸、槲皮素和山萘酚的含量。采用Hypersil C18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm),流动相为甲醇(A)-0.2%磷酸水溶液(B),梯度洗脱,流速1.0mL/min;柱温25℃;检测波长260nm。在选定色谱条件下没食子酸、槲皮素和山萘酚线性关系良好;没食子酸、槲皮素和山萘酚加标回收率分别为98.37%、99.61%、97.81%,RSD分别为2.32%、2.15%、2.20%。方法简便快速,结果准确可靠,可用于控制中药养心草的质量。

不同预处理和干燥方式下养心菜粉色泽、功能成分和抗氧化性水平的比较

为了研究养心菜的加工适用性,拓展其利用途径,采用未预处理(Untreated,UT)、沸水漂烫(Boiling Water Blanching,BWB)、沸水+护色漂烫(COLOR Protection+Water Blanching,CPB)、蒸汽漂烫(Steam Blanching,SB)与冻融(Freeze-Thawing,FT)五种预处理方式处理后,分别进行热风干燥(Hot Air Drying,HA)、热泵干燥(Heat Pump Drying,HP),得到UT HP、UT HA、BWB HP、BWB HA、CPB HP、CPB HA、SB HP、SB HA、FT HP及FT HA 10种养心菜粉,比较不同预处理方式和干燥方式下养心菜色泽、功能成分及抗氧化能力水平的变化。结果表明:UT HP没食子酸和山萘酚含量最高,但色泽差、叶绿素含量较低,干燥时间长;CPB HP的干燥时间短,Vc含量最高,具有较高的抗氧化水平,但没食子酸含量较低;SB HP总酚、总黄酮、槲皮素含量最高,其他品质指标介于中间;FT HP养心菜具有最好的色泽、最高的叶绿素、游离氨基酸含量,但总酚、总黄酮、槲皮素、山萘酚以及抗氧化水平低。从主成分分析来看,BWB HP、CPB HP、SB HP和BWB HA、CPB HA、SB HA的养心菜品质分别具有一定的相似性,UT HP、FT HP、UT HA、UT HA和其有明显差异。该文综合比较了养心菜不同预处理及干燥方法的优劣,在养心菜下游的功能性食品的开发过程中,可以根据需求选择合适的干燥方法。

HPLC-ESI-MS/MS法对景天三七成分的分析

目的:对景天三七药材中成分进行分析鉴定。方法:采用Luna C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);柱温25℃,流速1mL.min-1,柱后分流。进样量20μL。流动相采用梯度洗脱;A相:pH3.2甲酸水溶液,B相:乙腈;梯度为:0～10min,B液3%;10～90min,B液3%～50%。质谱离子源为ESI,样品采用MS和MS/MS全扫描两种模式进行分析。结果:鉴定了景天三七乙醇提取物中的4个成分,分别属于酚酸类、黄酮类和苷类。结论:对景天三七成分的鉴定为其研究和应用提供新的实验资料。

养心草中山奈酚成分的HPLC-MS/MS分析及含量测定

目的:首次发现养心草中含有黄酮类化合物山奈酚并测定其含量。方法:用Waters LC-MS/MS分析仪,XTerra-MS C18(5μm,2.1×150mm)色谱柱,乙腈-水-甲酸(40∶60∶1)为流动相,发现养心草中的山奈酚;用岛津高效液相色谱仪,SHIM-PACK VP C18(250mm×4.6mm,10μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.4%磷酸(59∶41),流速为1.0ml/min,检测波长为370nm,测定养心草中山奈酚的含量。结果:出现m/z287.1[M+H]+峰为质谱的特征峰,与标准品具有高相似度,证明样品中含有山奈酚;山奈酚在2.0-8.0μg范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=40343X-11107(r=0.9998),平均回收率为102.53%,RSD为0.92%(n=6)。结论:本方法简便准确,重现性好,可作为养心草药材中山奈酚的分析及含量测定方法。

NaCl胁迫对接种AMF费菜生长和叶绿素含量及荧光参数的影响

试验以费菜(Sedum aizoon L.)为材料,研究了不同浓度NaCl(0、8、12、16、20 g·kg^(-1))处理下接种GMH、GMA 28 d费菜幼苗的生长、叶绿素含量及叶绿素荧光参数变化。结果表明,当NaCl浓度在0~8 g·kg^(-1)时,随着盐处理浓度的增大,费菜叶绿素含量增加,初始荧光(Fo)增大,盐害指数增大,最大荧光(Fm)、光系统II(PSII)最大光化学效率(Fv/Fm)下降、实际光化学效率(ΦPSⅡ)减小,非光化学猝灭(NPQ)上升,叶片通过调节热耗散维持较高的光化光能量分配;光化学猝灭(q P)与PSII电子传递速率(ETR)降低,电子传递受到抑制。NaCl浓度超过8 g·kg-1时,光保护机制作用遭到破坏。接种AMF费菜根长、株高、根冠比、根系活力与对照CK相比均有显著增加。接种AMF植株的Fv/Fm得到明显提高,减轻了盐害对费菜电子传递速率和光能转化效率的影响,并配合通过增加热耗散来降低过剩激发能对PSII的伤害,同时维持尽量多的能量参与光化学反应,提高了费菜的光合能力,增强了费菜的盐耐受程度,但当NaCl浓度超过12 g·kg-1时,盐害同样也伤害费菜的PSII。同时,接种GMA提高费菜耐盐性的效果高于接种GMH。

养心草中槲皮素成分的HPLC-MS/MS分析及含量测定

目的：对养心草及其胶囊中的槲皮素的含量进行分析并测定其含量。方法：用Waters LC-MS／MS分析仪。Symmetry（3μm2．1mm×150mm）色谱柱；流动相为0．1％甲酸，乙腈，梯度洗脱，用三重四极杆串联谱仪分析养心萆及其胶囊中的槲皮素；用高效液相色谱仪，HIM—PACKVPc1。（101μm，250mm×4．6mm）色谱柱，流动相为甲醇-0．4％磷酸（55：45），检测波长为370nm，测定养心草及其胶囊中槲皮素的含量。结果：其保留时间是3，06，[M＋H]峰为m／z303．4，质谱特征与标准品具有高相似度，验证了样品中含有槲皮素；槲皮素在1．216—12．161μg范围内呈良好的线性关系，回归方程为Y=40386X-14138（r=0．9991），平均回收率为102．08％，RSD=2．71％（n=6）。结论：本法简便，快速，灵敏，准确，重现性好，可作为养心草及其胶囊中槲皮素的分析及含量测定方法。

HPLC法同时测定景天三七中没食子酸、没食子酸甲酯和对羟基苯甲酸的含量

目的建立同时测定景天三七3个酚类成分的HPLC分析方法。方法采用TOP ODS-AQ(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.1%磷酸溶液(D)为流动相,梯度洗脱(0~30 min,10%A→35%A;30~55 min,80%A→80%A),流速0.8 mL/min,检测波长为254 nm。结果没食子酸、没食子酸甲酯及对羟基苯甲酸进样浓度分别在2.42~242.20μg/mL(r=0.9999),2.47~246.8μg/mL(r=0.9999),0.473~47.3μg/mL(r=0.9999),范围内线性关系良好;平均回收率(n=6)分别为99.21%、102.11%、104.12%;不同产地及不同药用部位的3个酚类成分在数量上或质量上有明显差异。结论本法操作简便,结果准确,可用于景天三七药材中酚类多指标成分的质量控制。

基于一测多评法的景天三七质量控制研究

采用Agilent ZROBAX SB-Aq(4.6 mm×250 mm, 5μm)色谱柱;以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为0.8 mL/min,进样量为10μL,检测波长为350 nm,柱温为35℃。建立一测多评法同时测定景天三七中槲皮苷、杨梅苷、异槲皮苷、番石榴苷4个黄酮类成分含量。上述4个成分在相应的浓度范围内线性关系良好(R^(2)=1),以槲皮苷为内参物,杨梅苷、异槲皮苷、番石榴苷的相对校正因子分别为1.091、0.897及0.983,RSD分别为0.48%、0.28%、0.08%;28批不同产地的景天三七中4个有效成分采用一测多评法与外标法的实测值之间无显著性差异。综上,一测多评法测定景天三七中杨梅苷、异槲皮苷、番石榴苷、槲皮苷4个成分的含量准确可行,可用于景天三七的质量控制。

酒用高粱间作不同密度养心菜试验研究

为探索酒用高粱分带粮菜间套作最佳立体高效栽培模式,选用酒用高粱与养心菜不同密度间作,结果表明,酒用高粱宽窄行分带栽培条件下,667 m^(2)行间间作9 000株养心菜,综合产值达8 272.20元,纯收益为5 801.20元,位居第一。试验结果证明,在酒用高粱行间间作养心菜对高粱的生长无不良影响,相反通过酒用高粱在宽窄行栽培条件下与养心菜间作套种高矮成层,充分利用土地养分、水分,做到作物间优势互补,同时利于改善作物的通风透光条件,提高光能利用率,充分发挥边行优势带来的增产作用,能提高土地利用率,提高农户收入。

HPLC法同时测定养心草中五种成分的含量

建立HPLC法同时测定养心草中5种成分的含量并采用单因素和正交试验筛选最优提取工艺。结果表明,采用建立的HPLC含量测定方法可以同时准确测定5种成分的含量,杨梅苷、芦丁、槲皮苷、槲皮素、山柰酚分别在22~88μg/mL、5~20μg/mL、18~64μg/mL、0.32~1.28μg/mL、0.56~2.24μg/mL,与峰面积线性关系良好,加样回收率在95.61%~107.38%,回收率的RSD为1.37%~4.60%,均符合要求,最优提取工艺为50%甲醇90℃加热回流提取30 min。

景天三七抗动脉粥样硬化作用

目的:研究景天三七抗动脉粥样硬化作用。方法:将雄性新西兰大白兔随机分成4组,分别为实验模型对照组、辛伐他汀组、景天三七组、空白对照组,空白对照组予普通饲料喂养10周,其余3组予高脂饲料喂养10周造模,第10周后,空白对照组与实验模型对照组每天灌胃等量生理盐水,辛伐他汀组及景天三七组分别予辛伐他汀、景天三七灌胃,1次/d,连续给药10周后收集兔子血清,检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,对兔子腹主动脉进行HE染色,观察其组织结构形态。结果:第10周时,与空白对照组比较,其他3组兔子血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C水平均明显升高(P<0.05),说明兔子动脉粥样硬化模型建立成功。20周后,与实验模型对照组比较,景天三七组兔子血清中TG、LDL-C水平明显降低(P<0.05),HDL-C明显升高(P<0.05),TC水平无明显差异(P>0.05);与辛伐他汀组比较,景天三七组兔子血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C水平无明显差异(P>0.05)。景天三七组治疗前后比较,TG、LDL-C水平明显降低(P<0.05),TC、HDL-C水平无明显差异(P>0.05)。兔子腹主动脉HE染色结果显示,与空白对照组比较,实验模型对照组、辛伐他汀组与景天三七组兔子腹主动脉有明显动脉粥样硬化斑块形成,且病变范围及程度明显;辛伐他汀组与景天三七组腹主动脉粥样硬化斑块面积较实验模型对照组减少。结论:景天三七一定程度上能够抑制兔子粥样硬化斑块形成,降低TG、LDL-C,起到降脂作用。

生物有机肥对养心菜品质和产量的影响

利用研制的包含多种功能菌(白黄链霉菌TD-1、固氮菌JZ1、无机磷分解菌JWP1、有机磷分解菌JP12、解钾菌JK1)的菌剂对不同原料配比制成的农业有机废弃物堆肥进行二次发酵,制得具有促生功能的生物有机肥,并用于扦插养心菜种植中,探究生物有机肥对养心菜产量和品质的影响。结果表明:相较于不施肥组和未二次发酵处理的有机肥组,不同原料配比的二次发酵生物有机肥对养心菜的产量和品质有明显提高。在种植70 d后,N3M生物有机肥组的养心菜生长指标较佳,须根分支数、单株产量最高,分别为15.00根和11.89 g,株高增量达到456.10%,显著高于不施肥组。在品质指标中,N3M处理组养心菜的单宁含量为2.19 mg·kg^(-1),较不施肥组降低了40.5%,养心菜涩味明显降低,同时该组养心菜的VC和总黄酮含量较不施肥组和未二次发酵组也有所提高。综上所述,施用适宜配方的生物有机肥能促进养心菜生长,同时提高其品质和产量。因此,生物有机肥可作为一种绿色环保肥料用于农业生产。

费菜成份含量测定及费菜总黄酮抗氧化研究

为了了解费菜中的成份及功效,本文探究费菜汁和渣中总黄酮的含量,以及费菜叶中总黄酮的抗氧化活性。为了试验结果更精确,该文以总黄酮简便并最优的提取工艺分别提取出费菜汁总黄酮并分析它们的含量。通过探究费菜总黄酮对自由基的清除能力和总还原力,以抗坏血酸(VC)为阳性对照物,对比评估费菜总黄酮的抗氧化活性。

苗药六月还阳研究进展

六月还阳是贵州特色苗药,也为民间常用药物,具有止血散瘀、清热解毒、消肿止痛等功效,主要用于治疗疮痈疽疔、跌打损伤、虫蛇咬伤及各类出血病症。其药用历史悠久,效果显著。其主要含有黄酮类、酚酸类、生物碱类等化学成分,具有抗炎、解痉、抗氧化等药理作用。文章通过检索文献和整合资料,对六月还阳药用历史、生药学研究、化学成分、药理活性以及临床应用的研究进行综述,以期为六月还阳的进一步深入研究及开发利用提供参考依据。

四种屋顶绿化候选植物的耐热性研究

筛选适应屋顶特殊环境的绿化植物是屋顶绿化的基础,耐热性是屋顶绿化植物必备的指标之一,本试验选择中华景天、胭脂红景天、花蔓草、佛甲草等4种屋顶绿化候选植物,研究了在高温胁迫条件下植株的形态特征、目测质量、植物株高、盖度、叶片相对含水量、电导率。结果表明:所有参试植物的生长和生理指标都随热胁迫的程度而变化,但植物之间差异显著。热胁迫15d,中华景天、胭脂红景天、花蔓草、佛甲草的目测质量分别下降30%、70%、85%、89%;盖度分别下降4%、58%、92%、98%,株高分别下降10%、24%、73%、48%;相对含水量分别下降12%、16%、21%、21%;电导率分别上升到2.8、4.1、4.5、5.4倍;说明佛甲草的耐热性最差,花蔓草的耐热性略高于佛甲草,胭脂红景天和中华景天的耐热性要显著高于佛甲草和花蔓草。

费菜总黄酮碱法提取工艺及抗氧化活性

为了研究费菜中总黄酮的碱法提取工艺及其抗氧化活性,该文以总黄酮得率为试验指标,考察了料液比、溶液pH值、提取温度及提取时间等因素对提取效果的影响,并通过正交试验优化了提取工艺参数。结果表明,碱法提取最适宜的工艺条件为:料液比1:10,溶液pH值9,提取温度100℃,提取时间6h,在该条件下,总黄酮的得率为5.37%。所得的费菜总黄酮对DPPH、羟基自由基及超氧阴离子自由基具有较强的清除作用,半抑制浓度(IC50)分别为0.013、0.109和0.996mg/mL,表明费菜总黄酮具有一定的抗氧化活性。该试验结果为费菜的进一步开发利用提供了科学依据。

Anti--inflammatory effect of ethyl acetate extract of Sedum aizoon L. in LPS-stimulated RAW 264.7 macrophages and its HPLC fingerprint

Sedum aizoon L.（SA） has been widely used for treatment of various hemorrhages, insomnia, pain and trauma？ however, its anti-inflammatory activity is unknown. In this study, we firstly investigated the anti--inflammatory activity of SA extracts by petroleum ether（PE）, ethyl acetate（EtOAc）, and H2O in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Results showed that the EtOAc extract rich in phenolics and flavonoids significantly inhibited LPS-induced NO, TNF--α, and IL-6 production in RAW 264.7 cells（P0.01）, suggesting that this extract possessed potent anti--inflammatory activity. The phytochemical profile of the effective extract was subsequently analyzed by HPLC fingerprint with 11 standards. The results indicated that gallic acid, protocatechuic acid, p--hydroxybenzoic acid, ethyl gallate, iriflophene, 5,7-dihydroxy chromone, quercitrin, quercetin, luteolin, kaempferol, and isorhamnetin were present in this extract, which might contribute to its anti-inflammatory activity. Thus, the Et -OAc extract of SA showed anti-inflammatory activity and could be used as a potential natural anti--inflammatory agent.