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人Shisa样蛋白1(SHISAL1)抗原表位区预测及其小鼠多克隆抗体的制备 被引量:2
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作者 王金丽 张新展 +2 位作者 高义沙 周莉莉 孙达权 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期363-370,共8页
目的优化人Shisa样蛋白1(SHISAL1)抗原后制备小鼠抗多克隆抗体,并鉴定抗体特异性.方法利用生物信息学方法预测SHISAL1蛋白的抗原表位区,选取SHISAL1蛋白第28~97位氨基酸残基组成的多肽作为抗原,并命名为(SHISAL1-N);利用分子克隆技术,... 目的优化人Shisa样蛋白1(SHISAL1)抗原后制备小鼠抗多克隆抗体,并鉴定抗体特异性.方法利用生物信息学方法预测SHISAL1蛋白的抗原表位区,选取SHISAL1蛋白第28~97位氨基酸残基组成的多肽作为抗原,并命名为(SHISAL1-N);利用分子克隆技术,将其编码序列克隆后插入pET-28a载体中构建重组质粒pET28a-SHISAL1-N.然后将pET28a-SHISAL1-N和已构建的pET28a-SHISAL1全长重组质粒转化BL21(DE3),用异丙基-β-D硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达.两种蛋白纯化后分别免疫雌性昆明小鼠,Western blot法、免疫沉淀及免疫荧光细胞化学染色法观察两种抗体的特异性与灵敏性.结果成功构建pET28a-SHISAL1-N重组质粒,诱导两种融合蛋白表达,获得两种类型的SHISAL1小鼠多克隆抗体.Western blot结果表明以SHISAL1为免疫原所制备的抗体特异性和灵敏性较差,而以SHISAL1-N免疫原所制备的抗体能特异性识别不同的细胞内源性的SHISAL1蛋白;免疫沉淀结果表明SHISAL1-N抗体可以结合肝癌细胞中的SHIISAL1蛋白;免疫荧光细胞化学染色结果证明SHISAL1-N抗体与细胞质中的SHISAL1蛋白特异性结合.结论成功优化SHISAL1抗原并制备了小鼠抗人SHISAL1多克隆抗体,可应用于Western blot实验、免疫沉淀和免疫荧光细胞化学染色. 展开更多
关键词 shisa样蛋白1(shisaL1) 抗原表位 多肽 原核表达 多克隆抗体
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小鼠抗人Shisa样蛋白1(SSL1)多克隆抗体的制备和应用 被引量:6
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作者 周莉莉 陈相屹 +3 位作者 余畅 湛钊 雷霆雯 孙达权 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期843-848,共6页
目的制备抗Shisa样蛋白l(SSLl)的多克隆抗体,并探讨其在SMMC-7721肝癌细胞中的定位。方法通过反转录PCR从HepG2肝癌细胞中克隆人SSL1基因,将其插入到pET-28a中构建pET28a-SSLl原核表达载体,导入大肠杆菌BU1(DE3)中,用异丙基-B-D-硫代半... 目的制备抗Shisa样蛋白l(SSLl)的多克隆抗体,并探讨其在SMMC-7721肝癌细胞中的定位。方法通过反转录PCR从HepG2肝癌细胞中克隆人SSL1基因,将其插入到pET-28a中构建pET28a-SSLl原核表达载体,导入大肠杆菌BU1(DE3)中,用异丙基-B-D-硫代半乳毗喃糖昔(IPTG)诱导融合蛋白大量表达,通过Ni-NTA亲和层析柱纯化蛋白;然后,利用纯化的蛋白免疫雌性昆明小白鼠,Western blot法鉴定抗体特异性,免疫荧光细胞化学染色法观察SSL1在SMMC-7721亚细胞中的表达,并用高尔基体荧光探针Golgi-Tracker Red对高尔基复合体进行标记以明确SSL1在SMMC-7721亚细胞中的定位。结果成功扩增SSL1基因,构建重组原核表达质粒pET28a-SSLl,经诱导获得较高纯度的SSL1蛋白,制备了抗SSL1多克隆抗体。免疫荧光染色结果显示,SSL1主要在SMMC-7721细胞的细胞质中表达,Golgi-Tracker Red标记结果表明,SSL1主要定位于SMMC-7721细胞的高尔基体上。结论成功制备了有较高特异性的小鼠抗SSL1多克隆抗体,并确定SSL1定位于SMMC-7721细胞的高尔基体。 展开更多
关键词 shisa样蛋白1(SSL1) 原核表达 多克隆抗体 亚细胞定位
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The Research on Character Design Based on the Chinese Mythology:A Case Study of Shisa
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作者 FANG Wen-ting GAO Ya-juan +1 位作者 LIN Po-hsien LIN Rung-tai 《Cultural and Religious Studies》 2018年第1期51-61,共11页
Chinese mythology with its profound cultural asserts and the unconstrained imagination is an indispensable factor in animation creation.The rich resources of myth in ancient China provided a broad space for the creati... Chinese mythology with its profound cultural asserts and the unconstrained imagination is an indispensable factor in animation creation.The rich resources of myth in ancient China provided a broad space for the creation of animation film and inherited a long ethnic culture.Firstly,the study creates an animation mythological character design model according to the literature review to provide the operational theory for animation design,which consists of three main parts:central idea,research method,and conceptual model.Secondly,the research sums up the animation character creative process framework through the case of Shisa with the specific ideas of creative design.Four steps are used to design a mythological character:set a scenario(illustration),tell a story(interpretation),write a script(reaction),and design a character(reflection).It has analyzed how to integrate the information about the mythology and stimulate the designers’creative imagination in the animation character design in order to create the artworks with unique oriental charm. 展开更多
关键词 CHARACTER DESIGN CHINESE MYTHOLOGY shisa
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厦门、金门、琉球三地的“风狮爷”石雕文化 被引量:3
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作者 曾智焕 《山西广播电视大学学报》 2017年第2期106-108,共3页
"风狮爷"原是闽南沿海民众为防风、固沙而独创的辟邪镇煞物,并崇奉于闽南文化圈,这一现象在厦门、金门、琉球三岛尤为明显。该物常设立于建物的门或屋顶、村落的高台等处,用来替人、家宅、村落避邪镇煞。其造型推测是由庙宇... "风狮爷"原是闽南沿海民众为防风、固沙而独创的辟邪镇煞物,并崇奉于闽南文化圈,这一现象在厦门、金门、琉球三岛尤为明显。该物常设立于建物的门或屋顶、村落的高台等处,用来替人、家宅、村落避邪镇煞。其造型推测是由庙宇门口的石狮形象演变而来的,特点是狮面人身、周身彩绘,呈直立状,或威武或俏皮,与北方石狮守门户、保平安不同,风狮爷是镇煞、镇风沙的神兽,寄托了世代闽南沿海人一种祛邪、避灾、祈福的美好愿望。 展开更多
关键词 厦门 金门 琉球 风狮爷
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厦门、金门、琉球的闽南“风狮爷”文化情缘
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作者 曾智焕 《安徽理工大学学报(社会科学版)》 2017年第3期37-39,共3页
风狮爷原是闽南沿海民众为防风、固沙而独创的辟邪镇煞物,并崇奉于闽南文化圈,这一现象在厦门、金门、琉球三岛尤为明显。该物常设立于建物的门或屋顶、村落的高台等处,用来替人、家宅、村落避邪镇煞。其造型推测是由庙宇门口的石狮形... 风狮爷原是闽南沿海民众为防风、固沙而独创的辟邪镇煞物,并崇奉于闽南文化圈,这一现象在厦门、金门、琉球三岛尤为明显。该物常设立于建物的门或屋顶、村落的高台等处,用来替人、家宅、村落避邪镇煞。其造型推测是由庙宇门口的石狮形象演变而来的,特点是狮面人身、周身彩绘,呈直立状,或威武或俏皮,与北方石狮守门户、保平安不同,风狮爷是镇煞、镇风沙的神兽,寄托了世代闽南沿海人一种祛邪、避灾、祈福的美好愿望。 展开更多
关键词 厦门 金门 琉球 风狮爷
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