虎杖苷调节Akt/MDM2/p53信号通路对胆囊癌细胞增殖、迁移和细胞周期的影响

目的探讨虎杖苷(PD)调节蛋白激酶B/原癌基因MDM2/抑癌基因p53信号通路对胆囊癌细胞增殖、迁移和细胞周期的影响。方法以人胆囊癌细胞株(GBC-SD)为研究对象,体外培养人胆囊癌细胞株(GBC-SD),使用浓度为10~160 mmol/L的虎杖苷处理细胞24、48、72 h,采用CCK-8法检测细胞的增殖能力,确定最佳实验浓度。将GBC-SD细胞分为对照组(Control组)、虎杖苷低、中、高浓度组(PD-L组、PD-M组、PD-H组)、虎杖苷+Akt激活剂组(PD+SC79组),Transwell小室法评价细胞的迁移能力,Hoechst染色观察细胞的凋亡,流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡,Western blot检测Akt、MDM2、p53磷酸化水平,建立荷瘤小鼠模型评价虎杖苷对胆囊癌肿瘤生长的影响。结果浓度为10~160 mmol/L的虎杖苷处理细胞24 h,可显著抑制GBC-SD细胞的增殖活性,选择10、20、40 mmol/L的虎杖苷进行后续实验;与Control组比较,PD-L组、PD-M组、PD-H组GBC-SD细胞的迁移数、细胞凋亡率、G2/M期细胞比例及S期细胞比例、P-Akt、P-MDM2蛋白表达显著降低,G0/G1期细胞比例、P-p53蛋白表达显著升高,且呈浓度依赖性(P<0.05);与PD-H组比较,PD+SC79组GBC-SD细胞的迁移数、细胞凋亡率、G2/M期细胞比例及S期细胞比例、P-Akt、P-MDM2蛋白表达显著升高,G0/G1期细胞比例、P-p53蛋白表达显著降低(P<0.05);虎杖苷干预治疗后,小鼠移植瘤的生长速度显著降低(P<0.05)。结论虎杖苷可以通过调节Akt/MDM2/p53信号通路使细胞周期阻滞,抑制胆囊癌细胞增殖、迁移。

P53、P16及Ki-67与早期食管癌患者ESD术后复发的关系分析

目的 分析研究抑制蛋白基因P53(P53)、抑制蛋白基因P16(P16)及细胞增殖核抗原Ki-67(Ki-67)与早期食管癌患者内镜黏膜下剥离术(ESD)术后复发的关系。方法 选取2019年1月至2023年1月三门峡市中心医院收治80例的早期食管癌患者作为研究对象,均进行ESD治疗。比较所有患者癌组织与癌旁组织(距肿瘤边缘>3 cm,镜下未见肿瘤组织或不典型增生组织)P53、P16、Ki-67蛋白表达。ESD术后对患者随访1年,根据有无术后复发食管癌,将患者分为复发组(n=20)与无复发组(n=60)。比较两组癌组织P53、P16、Ki-67蛋白表达。采用多因素Logistic回归分析早期食管癌患者ESD术后复发的影响因素,并绘制ROC曲线分析P53、P16、Ki-67蛋白表达与早期食管癌患者ESD术后复发。结果 与癌旁组织相比,癌组织P53、Ki-67蛋白表达升高,P16蛋白表达降低(t=9.276、13.987、10.595,均P<0.05);复发组的癌组织P53、Ki-67蛋白表达均高于无复发组,P16蛋白表达低于无复发组(t=5.086、4.648、5.139,均P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,肿瘤低分化(OR=1.870)、肿瘤浸润侵犯黏膜下层(OR=1.808)、有淋巴结转移(OR=2.089)、P53蛋白高表达(OR=2.046)、P16蛋白低表达(OR=1.988)及Ki-67蛋白高表达(OR=1.761)均是早期食管癌患者ESD术后复发的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,P53、P16、Ki-67蛋白表达及联合检测的曲线下面积(AUC)分别为0.803、0.828、0.834、0.942,联合检测优于单一检测(P<0.05)。结论 P53、P16及Ki-67蛋白与早期食管癌患者ESD术后复发情况相关,可以作为辅助预测的相关诊断指标。

三阴性乳腺癌EGFR、Ki-67、P53及CTC表达与预后的关系研究

目的探讨三阴性乳腺癌表皮生长因子受体(EGFR)、细胞核增殖相关抗原Ki-67(Ki-67)、P53及循环肿瘤细胞(CTC)表达与预后的关系。方法选取95例三阴性乳腺癌患者,免疫组化检测病理组织标本中EGFR、Ki-67、P53表达;所有患者接受8个周期化疗,采用膜滤过分离肿瘤细胞技术(ISET)检测化疗前后的CTC表达,并分析化疗前后CTC表达与化疗疗效的关系;分析CTC与EGFR、Ki-67、P53表达的关联性;随访患者无进展生存期(PFS),采用COX回归分析三阴性乳腺癌进展的危险因素。结果EGFR、Ki-67、P53阳性检出率分别为44.21%(42/95)、63.16%(60/95)、56.84%(54/95);化疗后患者的CTC阳性检出率(14.74%)低于化疗前(61.05%,P<0.05);化疗疗效与化疗后CTC阳性表达呈负相关(P<0.001);COX回归分析显示,临床分期为Ⅲ期、EGFR阳性、化疗后CTC阳性是三阴性乳腺癌进展的独立危险因素(P<0.05);不同临床分期患者PFS比较,Ⅰ期>Ⅱ期>Ⅲ期,EGFR阳性患者PFS短于阴性患者,化疗后CTC阳性患者PFS短于阴性患者(P<0.05)。结论化疗前EGFR阳性表达、化疗后CTC阳性表达与三阴性乳腺癌患者预后差有关,化疗后CTC阳性率越低患者化疗疗效越好。

组织中P53、人表皮生长因子受体2表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系

目的:探讨组织中P53、人表皮生长因子受体2(HER2)表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系.方法:选取2019年2月至2023年2月于本院采取手术治疗的60例乳腺癌患者作为研究对象.检测其组织中P53、HER2表达,分析其阳性表达与乳腺癌患者不同临床病理特征的相关性.结果:60例乳腺癌患者肿瘤组织中,P53、HER2阳性率分别为53.33%(32/60)和45%(27/60).Ⅲ期、组织低分化、发生淋巴结转移乳腺癌患者的P53、HER2阳性率,显著高于Ⅰ/Ⅱ期、组织中高分化、未发生淋巴结转移者,差异均有统计学意义(P<0.05).乳腺癌患者肿瘤组织中P53、HER2阳性表达,与肿瘤分期、淋巴结转移情况呈正相关关系(r>0,P<0.05),与组织分化程度呈负相关关系(r<0,P<0.05).结论:乳腺癌患者肿瘤组织中P53、HER2多呈阳性表达.肿瘤分期、组织分化程度、淋巴结转移情况,可能与P53、HER2表达有关.

Hp、RASAL2、CDH1及TP53对胃癌前病变与早期胃癌的鉴别诊断价值

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)、RAS蛋白激活样因子2(RASAL2)、钙黏蛋白1(CDH1)及肿瘤抑制基因P53(TP53)对胃癌前病变与早期胃癌的鉴别诊断价值。方法选取2021年6月至2023年6月收治的早期胃癌52例,根据1:1选例原则另选取同期胃癌前病变52例、胃炎52例,分别纳入胃癌组、癌前组、胃炎组。比较3组及不同病理特征的早期胃癌患者Hp、RASAL2、CDH1、TP53阳性表达率,比较胃癌组Hp阳性、阴性患者RASAL2、CDH1、TP53阳性表达率,采用Spearman相关分析探讨各指标阳性表达与早期胃癌患者部分病理特征的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析联合检测对早期胃癌及胃癌前病变的鉴别诊断价值。结果3组Hp、CDH1、TP53阳性表达率胃癌组>癌前组>胃炎组,RASAL2阳性表达率胃癌组<癌前组<胃炎组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。胃癌组Hp阳性患者CDH1、TP53阳性表达率高于Hp阴性患者,RASAL2阳性表达率低于Hp阴性患者(P<0.05,P<0.01);早期胃癌患者Hp、RASAL2、CDH1、TP53阳性表达率在肿瘤浸润深度及淋巴结转移方面比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。Hp、CDH1、TP53阳性表达与早期胃癌肿瘤浸润深度、淋巴结转移均呈正相关,RASAL2阳性表达与之呈负相关(P<0.01)。ROC曲线分析结果显示,Hp、RASAL2、CDH1、TP53联合诊断胃癌前病变的曲线下面积(AUC)为0.904(95%CI:0.846,0.945),联合诊断早期胃癌的AUC为0.894(95%CI:0.819,0.946)。结论Hp、CDH1、TP53在早期胃癌组织中阳性表达率较高,RASAL2阳性表达率较低,联合检测对胃癌前病变及早期胃癌具有一定鉴别诊断价值,可作为临床鉴别诊断胃癌前病变、早期胃癌的辅助指标。

肺癌组织和外周血中p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5和MAGE A1蛋白水平检测及其临床价值探讨

背景与目的:肺癌发病机制具有多样性,但一经确认,往往已错过最佳治疗时机,本文通过探讨肺癌组织和外周血中抑癌基因(p53)、蛋白基因产物(PGP9.5)、转录因子(SOX2)、肿瘤相关基因编码蛋白(GAGE7)、解旋酶(GBU4-5)和黑色素瘤抗原(MAGE A1)蛋白水平的相关性,同时分析其在肺癌诊疗中的应用价值。方法:回顾并分析2018年5月—2020年5月在复旦大学附属肿瘤医院确诊的100例肺癌患者的病历资料,临床TNM分期Ⅰ期25例,Ⅱ期45例,Ⅲa期30例;非小细胞肺癌80例,小细胞肺癌20例;取手术切除的肿瘤组织和癌旁组织,采用免疫组织化学染色法检测上述6种蛋白的水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)法检测其基因表达,采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)检测外周血中6种蛋白的抗体阳性情况。结果:肿瘤组织中p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5和MAGE A1蛋白的阳性率和基因表达水平均明显高于癌旁组织(P<0.05);将其与肿瘤的临床病理学特征进行相关分析发现,肿瘤组织和外周血中的p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5和MAGE A1蛋白的阳性率和基因表达水平与肿瘤TNM分期和分化级别有关(P<0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤直径、病理学类型无关(P>0.05)。肿瘤组织中6种蛋白的表达水平与外周血清表达具有较好的一致性(P>0.05)。结论:肺癌肿瘤组织和外周血中p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5和MAGE A1蛋白表达阳性与肿瘤TNM分期及分化级别密切相关。

以p53为靶点的新型抗肿瘤化合物细胞筛选模型的构建与应用

目的构建含有p53蛋白结合位点的p21或survivin基因启动子区的荧光素酶报告基因重组质粒,并获得稳定转染的细胞模型用于抗肿瘤化合物筛选。方法将含有p53蛋白结合位点的p21或survivin启动子区序列连接到pGL4.17-basic载体上,分别获得报告基因重组质粒pGL4.17-p21和pGL4.17-survivin;将两种重组质粒分别转染A549细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞株A549-p21和A549-survivin;对该细胞模型进行条件优化,并将可调节p53蛋白表达的多种抗肿瘤药物作用于稳定转染细胞,通过荧光素酶检测和western blot方法验证细胞模型用于药物筛选的可行性。结果成功建立了分别含有p21或survivin启动子报告基因的A549-p21和A549-survivin稳定细胞模型,多种抗肿瘤药物作用该细胞后能够通过调节p53蛋白表达而影响报告基因荧光素酶活性。结论构建的稳定转染细胞模型可以用于筛选以p53为靶点的抗肿瘤化合物。

宫颈癌p53外显子7突变与p53蛋白高表达的关系

目的 探讨宫颈癌 p5 3外显子 7突变与 p5 3蛋白高表达的关系。方法 采用免疫组织化学、聚合酶链反应 ( PCR)、限制性酶解片段长度多态性 ( RFL P)分析等方法对 49例宫颈癌组织石蜡包埋标本中 p5 3外显子 7的突变与 p5 3蛋白表达进行了检测。结果 p5 3外显子 7的突变率 8.2 % ( 4/ 49)显著低于 p5 3蛋白阳性率49.0 % ( 2 4/ 49) (χ2 =18.0 5 ,P<0 .0 0 1) ;p5 3外显子 7突变不一定 p5 3蛋白阳性。结论 p5 3外显子 7突变可能是部分宫颈癌变的一个重要因素 ;大部分宫颈癌可能主要由于高危人乳头状瘤病毒 ( HPV)感染后 ,通过 E6 / p5 3蛋白复合物的形成使 p5

放射控导的wt-p53蛋白正反馈基因环路对肺腺癌细胞周期、凋亡及放射敏感性的影响

目的研究体外环境放射控导的wt-p53蛋白正反馈基因环路对肺腺癌细胞细胞周期、凋亡率及放射敏感性的影响。方法采用直线加速器8MV-X线,400MU/min、4Gy、源皮距100cm的照射条件照射治疗组pE6R4-p53-EGFP/H1299转染细胞和对照组H1299(p53-/-)、pE6-p53-EGFP/H1299和pR4-p53-EGFP/H1299转染细胞,12h后收集各组细胞,流式细胞仪分析该环路在放射线诱导下对肺腺癌细胞周期和细胞凋亡率的影响;绘制细胞放射剂量-存活曲线,计算平均致死剂量(Do)值及放射增敏比(sensitive enhancement ratio,SER)。结果4Gy8MV-X线照射治疗组和对照组细胞后12h,治疗组细胞在照射后(75.13±1.42)%发生明显G0/G1期阻滞;照射后各组细胞凋亡率均高于照射前,照射后治疗组细胞凋亡率为(23.73±0.21)%,分别是对照组H1299(p53-/-)细胞[(4.17±0.12)%]、pE6-p53-EGFP/H1299细胞[(15.67±0.32)%]、pR4-p53-EGFP/H1299细胞[(9.23±0.15)%]的5.69、1.51倍和2.57倍。治疗组pE6R4-p53-EGFP/H1299细胞和对照组pE6-p53-EGFP/H1299、H1299(p53-/-)细胞Do值分别0.91、1.073、1.413Gy,根据Do值计算SER分别为2.63和1.34。结论放射可诱导wt-p53蛋白正反馈基因环路上调wt-p53蛋白表达,从而调控肺腺癌细胞发生显著G/G1阻滞,使细胞凋亡比例增加,显著提高了肺腺癌细胞放射敏感性。

调控p53蛋白的转录因子

肿瘤抑制因子p53被称为"分子警察",它在维持细胞正常生长及抑制恶性增殖过程中起重要作用。p53的表达水平受多种因素影响,其中转录水平的调控是基因发挥功能的一个重要步骤。因此,针对调控p53蛋白的转录因子这一环节阐明p53发挥功能的分子机理,有望为肿瘤治疗、预防和新药研发提供新的靶标。本文着重对调控p53蛋白的转录因子进行综述。

C-erbB-2、p53和PCNA对乳腺浸润性癌预后价值的Cox回归分析

目的探讨癌基因。ｃ－ｅｒｂＢ－２产物、抑癌基因ｐ５３突变型蛋白的过度表达以及增殖细胞核抗原标记指数（ＰＣＮＡ－ＬＩ）与乳腺浸润性癌临床病理指标的联系及其预后价值。方法随机收集７９例临床随访资料齐备的病人，用免疫组化ＡＢＣ法检测其ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｐ５３和ＰＣＮＡ的表达情况，用Ｃｏｘ回归分析其预后意义。结果ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｐ５３过度表达的阳性率分别为３１．７％和４８．１％。ＰＣＡＮ－ＬＩ中位数为１７．６％。ｃ－ｅｒｂＢ－２与ｐ５３过度表达之间以及其与ＰＣＮＡ－ＬＩ、肿瘤大小、组织学分级、腋淋巴结状态等指标间均无明确的相互关联。ＰＣＮＡ－ＬＩ与组织学分级呈正相关，但高ＰＣＮＡ－ＬＩ与不良预后无明显关联。Ｃｏｘ回归分析显示，腋淋巴结、ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｐ５３过度表达等３项指标反映不良预后，危险度分别是３．３０６、１．４１９６、１．４９８４。结论ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｐ５３过度表达是两项危险度仅次于腋淋巴结状态的反映乳腺浸润性癌不良预后的指标，ＰＣＮＡ－ＬＩ无预后价值。

p53,p16和PTEN基因蛋白在前列腺癌中的表达及意义

【目的】探讨 p5 3、p16和PTEN在前列腺癌组织中的表达及其与肿瘤分级、分期及转移的关系。【方法】应用免疫组化方法对 4 5例前列腺癌组织进行了p5 3、p16和PTEN蛋白检测。【结果】在前列腺癌组织中 p5 3、p16和PTEN蛋白表达阳率分别为 4 2 .2 % (19/ 4 5 )、5 7.8% (2 6 / 4 5 )和 31.1% (14 / 4 5 )。p5 3、p16和PTEN蛋白表达与前列腺癌分级、分期和转移相关 (P <0 .0 5 )。【结论】p5 3。

非小细胞肺癌中PTEN及p53的表达及其临床意义

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)中PTEN及p53的表达及其临床意义。方法采用免疫组化S-P法,对61例NSCLC手术切除标本进行PTEN及突变型p53蛋白表达研究,分析其与NSCLC患者的病理类型及临床分期、预后的关系。结果(1)非小细胞肺癌中PTEN的表达明显低于对照组(P<0.05);而p53蛋白则明显增高。(2)PTEN表达与组织学类型、临床分期和淋巴结转移显著相关;p53表达与性别和淋巴结转移显著相关。(3)非小细胞肺癌标本中PTEN与p53的表达呈显著负相关(rs=-0.282,P<0.05)。(4)Kaplan-Meier生存分析显示,PTEN表达阴性组患者平均生存期为36.5月,阳性组为71.0月;p53表达阴性组患者平均生存期为70.1月,阳性组为46.0月,经Logrank检验均显示P<0.05。结论PTEN的表达缺失及野生型p53基因的突变,可能是导致NSCLC发生的重要原因之一,可以作为肿瘤基因治疗的靶点;PTEN及p53的表达与NSCLC患者的预后关系密切,可能是肿瘤预后的标志物;PTEN与p53的表达呈明显的负相关,两者是否通过同一途径,或者两条途径如何相互影响,需进一步研究。

日光性角化病中突变型P53蛋白表达及临床意义

目的探讨突变型P53蛋白在日光性角化病(SK)组织中的表达及临床意义。方法链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法检测突变型P53蛋白在40例SK组织中的表达水平,以20例正常皮肤组织作为对照。结果突变型P53蛋白在SK组织和正常皮肤组织中的阳性率分别为65.00%、10.00%,其在SK组织中的表达明显强于其在正常皮肤组织中的表达,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论突变型P53蛋白表达与SK相关,提示SK皮损细胞中有P53蛋白的异常表达。

VEGFR-3、APC、P53蛋白在胃癌及癌前病变中的表达及与淋巴结转移的相关性分析

目的探讨血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)、结肠腺瘤息肉病(APC)和抑癌基因(P53)蛋白在胃癌及癌前病变中的表达及与淋巴结转移的相关性。方法选择2018年3月—2020年3月行胃切除及胃镜活检标本130例,其中肠上皮化生35例、异型增生42例、胃癌53例,另选取同期32例胃癌手术标本断端正常胃黏膜组织作为对照,检测不同组织中VEGFR-3、APC蛋白和P53蛋白的表达情况,并分析其与胃癌淋巴结转移的相关性。结果胃癌组织中VEGFR-3和P53蛋白阳性表达率高于异型增生、肠上皮化生和正常胃黏膜组织,且异型增生组织中VEGFR-3和P53蛋白阳性表达率高于肠上皮化生和正常胃黏膜组织(P<0.05)。APC蛋白在胃癌、异型增生和肠上皮化生组织中的阳性表达率低于正常胃黏膜组织(P<0.05)。分化程度为低中分化、临床分期为Ⅲ/Ⅳ期、VEGFR-3阳性为胃癌淋巴结转移的独立危险因素(P<0.05,P<0.01)。结论VEGFR-3和P53蛋白在胃癌及癌前病变组织中阳性表达率高,APC蛋白阳性表达率低,可作为辅助诊断指标,且VEGFR-3与胃癌淋巴结转移密切相关,可用于评估胃癌的发生、发展。

大肠腺癌p53和表皮生长因子受体的表达及其意义

目的 探讨p5 3与表皮生长因子受体 (EGFR)蛋白在大肠腺癌中的表达及其意义。方法 采用免疫组织化学单克隆抗体Envision方法 ,检测 166例大肠腺癌、5 5例大肠腺瘤和 2 0例大肠增生性黏膜组织中 p5 3及EGFR蛋白的表达水平。结果 p5 3和EGFR的阳性细胞表达率由增生性黏膜、腺瘤至腺癌依次递增 ,分别为 10 .0 %、3 6.4%、63 .0 %和 40 .0 %、5 5 .0 %、75 .3 % ,各组比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 1)。p5 3和EGFR均与大肠癌的分化程度、淋巴结转移和分期有关。结论 p5 3和EGFR蛋白表达率与大肠癌的分化程度、分期、浸润及转移均密切相关 ,此

非小细胞肺癌组织P53、P16和Bcl-2蛋白表达及意义

目的探讨P53、P16和Bcl-2蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化技术,检测原发性非小细胞肺癌组织60例和距离肿瘤边缘5 cm以上的癌旁正常肺组织18例的P53、P16和Bcl-2蛋白的表达。结果 P53、P16和Bcl-2蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达与癌旁正常肺组织比较,差异有显著性（Hc=10.003~14.783,P〈0.01）。非小细胞肺癌组织P53、P16蛋白的表达与肿瘤的分化程度有关（Hc=15.119、19.078,P〈0.01）,Bcl-2蛋白的表达与肿瘤的分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关（Hc=16.271、13.205,u=2.849,P〈0.01）。非小细胞肺癌组织的P53与P16蛋白表达之间呈负相关（rs=-0.437,P〈0.01）。结论 P53、P16及Bcl-2蛋白的表达失衡与非小细胞肺癌的发生发展密切相关。

p53蛋白在大肠癌中过度表达与组织学类型及分级的关系

目的：探讨大肠癌的发生与组织学的类型及分化程度的关系。方法：用免疫组织化学及常规病理学方法检测55例大肠癌中抑癌基因，p53蛋白的过度表达。结果：p53蛋白的过度表达在大肠癌中为8%，而在正常组织及良性肿瘤中为无表达。按Turbull分期，不同分期大肠癌中p53蛋白过度表达阳性率不同，早期癌（Ⅰ～Ⅱ期）中为32.1%。（9/28），晚期癌（Ⅲ～Ⅵ期）中为48.1%（13/27）（P＜0.015），p53蛋白过度表达在不同组织类型中阳性率不同，如粘液腺癌为41.6%，明显低于管状腺癌的66.6%和乳头状腺癌的53.3%的阳性率。其粘液腺癌与管状腺癌的差异显著（P＜0.05）。p53蛋白的过度表达在不同分化程度的大肠癌中阳性率亦不同，高分化癌为37.5%；而低分化癌为75.4%，（P＜0.05）。结论：p53蛋白过度表达可能发生于大肠癌病理过程的晚期阶段，可作为大肠癌有参考价值的预后指标之一。

p53介导蜕膜化受损致复发性流产的研究进展

复发性流产(RSA)病因复杂,约50%的RSA患者病因不明,其中由于蜕膜化受损所致的胚胎反复丢失成为学者关注的焦点。p53通过参与多种信号通路介导蜕膜化受损从而引发RSA。其中p53/p21信号通路过度激活可干扰细胞周期调控因子的表达,使细胞周期进入停滞状态,蜕膜多倍体化障碍,转而促进细胞凋亡,影响胚胎着床。而在雌二醇(E_2)/p53-白血病抑制因子(LIF)-信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路中,p53在雌激素的协同作用下促进植入期子宫内膜腺体分泌LIF,并激活JAK/STAT信号通路,为胚胎着床创造有利条件。研究表明,参与调控p53信号通路的长链非编码RNA(lnc RNA)功能异常及p53通路基因多态性均可影响p53的活性,从而影响蜕膜化及妊娠结局。现就近年来国内外p53蛋白家族及其通路参与蜕膜化的相关研究进行综述。

早期肺癌病人血液中p53的克隆及其pEGFP-N1-p53的构建

首先用RT-PCR方法从早期肺癌病人的外周血中克隆出人抗癌基因p53,经测序确认为野生型后,通过酶切、连接、转化构建出扩增质粒pMD18-T-p53,然后构建出含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的真核表达质粒pEGFP-N1-p53。pEGFP-N1-P53经限制性内切酶Hind III和BamH I酶切,酶切产物电泳结果显示的两个片段(1 188 bp和4 695 bp)和实验预期相符,测序结果表明:获得野生型人抗癌基因p53并构建了真核表达载体pEGFP-N1-p53。