T-SPOT.TB试验中TBAg/PHA比值在结核性脑膜炎早期诊断中的应用

目的:探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)中结核特异性抗原孔(TBAg)斑点形成细胞数与阳性对照孔植物血凝素(PHA)形成斑点数的比值(TBAg/PHA ratio)对结核性脑膜炎(TBM)的早期诊断价值。方法:收集疑似TBM患者148例,入院24 h内采集脑脊液进行常规、生化及病原微生物检测,同时采集外周静脉血进行T-SPOT.TB检测。结果:148例患者中最终纳入131例(88.5%),其中TBM组为55例,非TBM组为76例。TBM组的T-SPOT.TB试验阳性率高于非TBM组(P<0.05),诊断TBM的敏感性为81.8%,特异性为76.3%。当采用0.07作为TBAg/PHA比值的截断值时,诊断TBM的敏感度、特异度和ROC曲线下面积分别为78.2%、92.1%、0.871。结论:采用TBAg/PHA比值法可显著提高T-SPOT.TB诊断TBM的特异性。

正交定向调控VFAs奇偶数比率对合成PHAs的影响

为了定向调控挥发性脂肪酸(VFAs)中奇偶数碳比率,在合成聚羟基链烷酯(PHAs)过程中改变PHB和PHV的比率,从而改变可生物降解塑料的内在性能。以淘米水为单一发酵对象,将pH值、温度、发酵天数作为影响因素,通过L9(33)正交试验观察VFAs中奇偶数脂肪酸变化,和污泥中聚磷菌合成PHAs的变化规律。结果表明当温度为35℃,pH值为8,第7天时奇偶数碳比率约为1∶1;当温度为25℃,p H值为8,第9天时奇偶数碳比率约为1∶2;当温度为45℃,pH值为6,第7天时奇偶数碳比率约为1∶3。将这3种不同比率的组合等量投加至污泥中,PHAs含量有显著增加,其中发酵液奇偶数碳比率为1∶1时PHAs积累量最高,为80.69 mg/L。研究表明pH值对偶数脂肪酸影响最大,发酵天数对奇数脂肪酸影响最大。而且发酵液比化学碳源更有利于PHAs的合成,使厌氧阶段PHB的质量分数显著增加,好氧阶段PHV的质量分数显著增加。

PHAs缓释碳源在垂直流人工湿地中的应用效果

对于低碳氮比的污水,在不外加碳源的情况下,以PHAs缓释碳源作为垂直流人工湿地的反硝化脱氮填料,通过对垂直流人工湿地的不同进水碳氮比、水力停留时间等条件进行优化,研究缓释碳源对人工湿地脱氮效果的影响。结果表明:整体上,PHAs缓释碳源的释碳速率及可控性均较好,能很好地起到提高碳氮比的作用,对于进水C/N比为3.5和3.0的污水脱硝态氮效果最佳,可达80%以上;对于不同的水力停留时间,综合经济性及反硝化脱氮效果,最佳水力停留时间为1.5 d。

T-SPOT联合颗粒酶B阳性Ts淋巴细胞对成人结核病诊断的价值

目的探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)联合颗粒酶B(GrB)+CD8^(+)T淋巴细胞在诊断结核病中的价值。方法选取南昌大学第一附属医院2021年2月至2022年3月疑似结核病患者212例,所有患者均保留T-SPOT结果,流式细胞仪检测外周血中T淋巴细胞亚群及其穿孔素和GrB的表达,根据出院最终诊断分为结核病组和非结核病组,比较两组间T-SPOT斑点数和淋巴细胞亚群及其穿孔素和GrB表达差异,ROC曲线分析ESAT-6斑点数,CFP-10斑点数,结核特异性抗原(TBAg)与植物血凝素(PHA)斑点数的比值(TBAg/PHA)(ESAT-6/PHA和CFP-10/PHA中较大的一个),GrB^(+)Ts(CD8^(+)T)及“结核比值”[TBAg/(PHA*GrB^(+)Ts)]的诊断效能。结果GrB^(+)Ts细胞百分比在结核组中显著高于非结核组(44.95±2.98 vs 33.49±1.87,P<0.05),而总T细胞、穿孔素+T细胞,GrB^(+)T细胞,Ts细胞和穿孔素+Ts细胞百分比差异无统计学意义(P>0.05);非结核组T-SPOT.TB阳性率为51.85%,明显低于结核组的92%,且结核组的A抗原斑点数及B抗原斑点数显著大于非结核组(P<0.05),ROC曲线显示A抗原诊断结核病的灵敏度和特异性分别为80.0%和56.8%,曲线下面积(AUC)为0.748,约登指数为0.368;B抗原的灵敏度和特异性为分别62.0%和77.8%,AUC为0.758,约登指数为0.398;A抗原+B抗原灵敏度和特异性为72.0%和74.1%,AUC为0.796,约登指数为0.461;结核组的TBAg/PHA比率要显著高于非结核组(1.21±0.17 vs 0.26±0.02,P<0.001)以0.59为cut-off值时,诊断结核病的灵敏度和特异性分别为66%和91.4%,AUC高达0.852,约登指数为0.574;结核组的“结核比值”要显著高于非结核组(4.58±0.87 vs 1.71±0.24,P<0.01),以1.24为cut-off值时,诊断结核病的灵敏度和特异性分别为82.0%和72.2%,AUC为0.794,约登指数为0.542。结论应用TBAg/PHA比率和TBAg/(PHA*GrB^(+)Ts)比值诊断结核病的效能要优于常规的T-SPOT检测,两者结合使用对结核病诊断可能具有重要价值。

同步硝化反硝化SBBR处理低C/N比生活污水的启动与稳定运行

以低C/N比实际生活污水为处理对象,聚氨酯海绵填料为生物载体(填料填充率25%),采用逐步提高氮负荷的方式,在较短的时间内(98 d)成功启动了同步硝化反硝化(simultaneous nitrification and denitrification,SND)的序批式生物膜反应器(sequencing batch biofilm reactor,SBBR)。实时定量PCR(real-time qualitative polymerase chain reaction,real-time q PCR)结果表明系统内硝化菌得到富集。在稳定运行期间,系统对有机物及氮的去除效果良好,平均出水COD、4NH-N+、TN分别为38.28 mg·L-1、1.23 mg·L-1、8.23 mg·L-1。微生物将大部分碳源以聚羟基脂肪酸酯(poly-β-hydroxyalkanoate,PHA)的形式储存至体内,系统内3NO-N-的去除主要通过内源反硝化作用,且反硝化过程基本无2NO-N-积累,平均SND率为70.57%,TN去除率高达82.95%。由于硝化反应和反硝化反应在同一反应器内同时进行,反硝化过程产生的碱度可补充硝化过程消耗的碱度,维持系统内p H的相对稳定。此外,可以通过DO和p H的变化判断SND的进行状态,有效地控制反应时间,节省动力消耗。

A/O系统中不同缺氧/好氧体积比对活性污泥沉降性能的影响

为探究A/O系统中不同的缺氧与好氧体积比与活性污泥沉降性能的关系,以实际生活污水为进水水质,考察了不同的A/O比(2/6,4/4,6/2)对污泥沉降性能和丝状菌生长的影响.结果表明,当A/O比为2/6时,系统能够维持良好的沉降性能,优势丝状菌为Type 0041;当A/O比为4/4时,系统的沉降性能恶化,SVI最高达到357m L/g,优势丝状菌为Type 0041,Type 1701;当A/O比为6/2时,系统发生了微膨胀现象并实现了稳定的短程硝化反硝化,优势丝状菌为Thiothrix.nivea.可见不同的A/O比对活性污泥沉降性能影响较大,同时污泥胞内胞外贮存特性及系统的脱氮除磷性能也受到严重影响.

胸腔积液TBAg/PHA比值在结核性胸膜炎早期诊断中的应用价值

目的探讨胸腔积液结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)中结核特异性抗原(TBAg)与植物血凝素(PHA)两者的定量比值(TBAg/PHA)对结核性胸膜炎(TBP)的诊断价值。方法分析2018年1月至2019年3月广州市胸科医院胸腔积液患者447例的临床资料,447例患者中TBP组为316例,非TBP组为131例。进行胸腔积液T-SPOT.TB检测,并对敏感度、特异度、准确度等指标进行诊断性试验评价。结果胸腔积液T-SPOT.TB试验诊断TBP的敏感度为82.3%,特异度为82.4%,准确度82.3%,阳性预测值和阴性预测值分别为91.8%、65.9%。当采用0.25作为TBAg/PHA比值的截断值时,诊断TBP的敏感度、特异度和ROC曲线下面积分别为84.8%、93.5%、0.862(95%CI:0.800~0.925)。TBP组的胸腔积液T-SPOT.TB结果阳性率为82.3%,非TBP组为17.6%,差异有统计学意义(P<0.05)。比较胸腔积液T-SPOT.TB试验结果中ESAT-6 sfc、CFP-10 sfc、PHA sfc、ESAT-6/PHA比值、CFP-10/PHA比值和TBAg/PHA比值。除PHA sfc外,TBP组的其他各项指标均高于非TBP组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胸腔积液TSPOT.TB试验采用TBAg/PHA比值法对TBP的早期诊断价值明显优于T-SPOT.TB试验定性的结果。

结核病T细胞中结核特异性抗原和植物血凝素比值在活动性结核与潜伏结核鉴别诊断中的应用价值

目的分析结核病T细胞中结核特异性抗原(TBAg)和植物血凝素(PHA)比值(TBAg/PHA)在活动性结核与潜伏结核鉴别诊断中的应用价值。方法选取2016年9月—2018年9月期间在粤北第二人民医院就诊疑似肺结核患者,进行结核感染T细胞检测(T-SPOT.TB)阳性的患者673例进行研究,其中诊断为活动性结核(ATB)的患者351例,潜伏性结核感染(LTBI)的患者322例,结合临床表现、病原学检测与影像学检查,对比这两组人群中T-SPOT.TB斑点数[1],从而确定TBAg/PHA界值,分析T-SPOT.TB中TBAg/PHA比值在活动性结核和潜伏结核鉴别诊断中的应用价值。结果潜伏性结核感染TBAg/PHA<0.3为T-SPOT阳性(低值),活动性结核TBAg/PHA>0.3为T-SPOT阳性(高值)。结论TBAg/PHA最佳的比值界值0.3可有效区分ATB与LTBI,诊断准确率更高,具有更高的应用价值,值得推广和进一步加强研究。

利用丁酸合成PHA高效菌株的筛选及摇瓶发酵特性研究

从活性污泥中分离到1株能够利用丁酸合成聚羟基脂肪酸酯(PHA)的细菌WD-3,对该菌株积累PHA的发酵特性进行了研究,包括PHA产量随碳氮比、pH、发酵时间的变化,并考察了整个发酵过程中碳源、氮源、生物量、pH值和PHA产量之间的关系.结果表明,当C/N为35,pH为7.0时,WD-3的PHA合成能力最高.在最佳培养条件下,细胞生长达到稳定期时,该菌PHA产量高达3.01 g.L-1,占细胞干重的45.4%,且PHV所占比例达到三分之一.经16S rRNA基因测序分析,初步确定该菌属于γ-变形菌亚纲中的肠杆菌属Enterobacter.