姜黄素通过调控TGF-β1/Smad信号通路抑制恶性胶质瘤生长的作用机制

目的探究姜黄素对恶性胶质瘤生长的影响及可能机制。方法以人恶性胶质瘤细胞U87为研究对象,随机分为空白对照组(无任何干预)、姜黄素低、中、高(10、20、40μmol·L^(-1))、替莫唑胺组(40μmol·L^(-1))、姜黄素40μmol·L^(-1)+LY210976110μmol·L^(-1)、姜黄素40μmol·L^(-1)+SRI-01138110μmol·L^(-1),干预48 h。CCK-8法、Transwell法对各组U87细胞活性、迁移及侵袭能力测定,经由流式细胞术测定U87细胞周期变化,Western blot法测定U87细胞TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白表达水平。结果姜黄素组与替莫唑胺组干预48 h后U87细胞活性百分比、细胞迁移及侵袭数目均低于空白对照组(P<0.05),且均随姜黄素剂量增大而下降(P<0.05)。对比空白对照组,姜黄素组及替莫唑胺组Sub-G_(0)期细胞数增多(P<0.05),G_(2)/M期细胞数减少(P<0.05)。姜黄素高剂量组及替莫唑胺组U87细胞TGF-β1、p-Smad 3、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9蛋白相对表达量均低于空白对照组(P<0.05),Smad 7、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白相对表达量均高于空白对照组(P<0.05)。姜黄素高剂量组与替莫唑胺组各指标对比差异均无统计学意义(P>0.05)。相比姜黄素高剂量组,TGF-β1/Smad通路抑制剂能进一步抑制U87细胞活性、迁移及侵袭,降低TGF-β1、p-Smad 3、MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量(P<0.05),提高Smad 7、E-cadherin蛋白相对表达量(P<0.05),而TGF-β1/Smad通路激活剂反之(P<0.05)。结论姜黄素能抑制恶性胶质瘤U87细胞生长,其机制可能与调控TGF-β1/Smad信号通路相关。

TGF-β1/Smad信号通路在妊娠期高血压疾病中的表达及其与病情严重程度和不良妊娠结局的关系研究

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad信号通路在妊娠期高血压疾病(HDP)患者胎盘中的表达及临床意义。方法回顾性选取2021年2月至2023年2月在新疆医科大学第六附属医院妇产科诊断为HDP的单胎孕妇100例,分为轻度组70例,重度组30例。另选正常单胎妊娠孕妇100名作为对照组。采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法检测胎盘中TGF-β1、Smad2和Smad3的表达水平,并统计妊娠结局。利用多因素Logistic回归模型来分析TGF-β1/Smad信号通路主要蛋白与HDP以及不良妊娠结局的独立相关性;应用受试者工作特征(ROC)曲线分析TGF-β1/Smad信号通路主要蛋白对HDP的诊断价值以及对妊娠结局的预测价值。结果重度组胎盘组织中TGF-β1、Smad2和Smad3的表达水平分别为(18.10±3.59)%、(4.69±1.01)%、(3.01±0.53)%,轻度组分别为(12.17±3.28)%、(3.16±0.74)%、(2.18±0.47)%,均高于对照组[(9.96±2.42)%、(2.47±0.68)%、(1.77±0.45)%],且重度组高于轻度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。100例HDP患者中,妊娠结局良好者81例,妊娠结局不良者19例。妊娠结局不良者胎盘组织中TGF-β1、Smad2和Smad3的表达水平分别为(18.18±3.53)%、(4.77±1.02)%、(3.15±0.54)%,均高于妊娠结局良好者[(12.96±3.32)%、(3.35±0.69)%、(2.26±0.47)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,TGF-β1、Smad2和Smad3是导致HDP发生的独立危险因素(P<0.05),也是HDP患者不良妊娠结局的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,TGF-β1、Smad2、Smad2及三者联合诊断HDP的曲线下面积(AUC)分别为0.823、0.867、0.803、0.966,以三者联合诊断价值最高(敏感度为93.00%,特异度为88.00%);TGF-β1、Smad2、Smad3及三者联合预测HDP患者不良妊娠结局的AUC分别为0.846、0.934、0.820、0.974,以三者联合预测价值最高(敏感度为95.83%,特异度为90.70%)。结论TGF-β1/Smad信号通路参与了HDP的发生与发展,TGF-β1、Smad2和Smad2对诊断HDP及预测HDP患者不良妊娠结局的价值较高,且随着病情的加重,TGF-β1、Smad2和Smad2逐渐升高。

中医药调控TGF-β1/Smad信号通路防治肝纤维化的研究概况

肝纤维化是多种慢性肝病进展为肝硬化、肝癌等恶性肝病极其重要的病理过程,肝硬化和肝癌是不可逆的,而肝纤维化却具有不完全可逆性。目前,国内外对肝纤维化的治疗主要是以去除致病因素或对症治疗为主,尚缺乏特异性治疗药物。中医药通过抑制TGF-β1/Smad信号通路的转导,可有效拮抗肝纤维化的发生发展。该综述通过筛选近五年的相关实验研究文献,从TGF-β1/Smad信号通路在肝纤维化中的作用、中医对肝纤维化的认识以及中医药靶向调控TGF-β1/Smad信号通路防治肝纤维化的研究三个方面进行了归纳总结,为该领域研究人员提供中医药思路。

中医药基于TGF-β1/Smad信号通路治疗IgA肾病的研究进展

免疫球蛋白A(IgA)肾病是一种最常见的肾小球肾炎,是导致终末期肾衰竭的主要原因之一。IgA肾病的发生、发展与肾脏纤维化的进展存在紧密的关联性,因此针对性治疗肾脏纤维化,对于延缓IgA肾病的进展有重大的意义。TGF-β1/Smad信号通路在肾脏纤维化的病理发展中发挥着重要的作用。近些年来,中医药在防治IgA肾病中有着独特的优势,为明确中医药调控TGF-β1/Smad信号通路来治疗IgA肾病作用靶标,文章借鉴了国内、国外近十余年的文献,借助中医药的研究,从中药单体、中药复方几个方面,对治疗IgA肾病的作用进行了系统化的研究,旨在为临床上防治IgA肾病提供有效的依据。

基于TGF-β1/Smad信号通路探讨度拉糖肽联合达格列净治疗早期糖尿病肾病的研究

目的 探讨度拉糖肽联合达格列净治疗早期糖尿病肾病的疗效及其对TGF-β/Smad信号通路的调控作用。方法 本研究为前瞻性研究,选取2022年5月至2023年4月温州市第七人民医院收治的108例早期糖尿病肾病(DN)患者,依据随机数字表法分为对照组和研究组,各54例。对照组采用达格列净治疗,研究组在对照组基础上联合度拉糖肽治疗。观察两组治疗前后血脂指标[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、肾功能指标[血尿素、血肌酐、肾小球滤过率(GFR)、尿微量白蛋白(mAlb)]、肾纤维化指标[血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1 (TGF-β1)、Smad同源蛋白(Smad1、Smad2、Smad3、Smad4)]和炎症指标[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和超敏C-反应蛋白(hsCRP)]变化,采用转录组测序揭示两组患者外周血细胞差异基因谱。结果 治疗后,研究组血尿素、血肌酐、mA1b、TC、TG、HbA1c、空腹血糖和LDL-C均低于对照组,而HDL-C和GFR均高于对照组(均P <0.05)。研究组炎症因子(IL-6、hs-CRP、TNF-α)表达水平均低于对照组(均P<0.05);肾纤维化指标(TGF-β1、Smad2、Smad3、VEGF)均低于对照组(均P<0.05)。转录组测序表明TGF-β1/Smad为度拉糖肽联合达格列净的特异性调控信号通路。两组不良反应发生率差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 度拉糖肽联合达格列净能够通过调控TGF-β1/Smad信号通路改善早期糖尿病肾病患者的临床症状,对阻滞疾病向终末期进展具有积极作用。

中药单体调控TGF-β1/Smad信号通路防治糖尿病肾病研究进展

转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1/Smad信号通路是糖尿病肾病肾脏纤维化的关键信号通路之一。TGF-β1/Smad信号通路能通过促进细胞外基质(extracellular matrix,ECM)积聚,抑制ECM的降解,增加纤连蛋白和胶原蛋白Ⅳ表达,促进炎症因子释放,诱导足细胞凋亡等对肾纤维化过程进行调控,部分中药单体可调控TGF-β1/Smad信号通路,显著干预糖尿病肾病的发生发展过程,且取得良好的临床疗效。目前,已初步明确TGF-β1/Smad在糖尿病肾病发生发展中的作用机制,但仍存在许多问题:(1)TGF-β1/Smad信号通路在干性糖尿病肾病和湿性糖尿病肾病中的参与程度和差异不明确;(2)不同功效的中药对纤维化保护性通路发挥正向调节和负向调节作用方向尚不明确;(3)TGF-β1/Smad信号通路会与其他通路形成信号串扰,需探索各条通路间的相互影响机制,并在微观领域深入观察各信号通路对细胞的调控机制;(4)很多中药既能干预TGF-β1/Smad信号通路,又能干预其他通路如自噬、凋亡,在糖尿病肾病的临床治疗中,其疗效的核心机制到底是哪一通路,可能需要精准靶向药物对信号通路进行阻断和促进后,观察疗效的变化来确定;(5)现有的通过调控TGF-β1/Smad治疗糖尿病肾病的临床研究较少,主要以动物实验和基础实验为主,缺少大样本、多中心、前瞻性、长周期的高质量临床试验;(6)目前关于中药有效成分的研究较多,但在中药单体、单体组合方面的研究存在明显不足。今后,需进一步明确TGF-β1/Smad信号通路在干性糖尿病肾病和湿性糖尿病肾病中的参与程度及差异性,明确不同功效的中药对纤维化保护性通路的调节作用,应用分子对接等技术探索中药的有效成分,尤其是对中药单体及单体组合。

圣草酚对TGF-β1诱导的人皮肤成纤维细胞增殖、氧化应激反应及TGF-β1/Smad信号通路活化的影响

目的 探讨圣草酚对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人皮肤成纤维细胞(HSF)的增殖、氧化应激反应及TGF-β1/Smad信号通路活化的影响。方法 将HSF分为对照组、模型组、圣草酚低剂量组、圣草酚中剂量组、圣草酚高剂量组、SB-431542组。对照组不做任何处理,模型组用5.0 ng/mL TGF-β1干预24 h,圣草酚低剂量组、圣草酚中剂量组、圣草酚高剂量组分别用40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L圣草酚和5.0 ng/mL TGF-β1同时干预24 h,SB-431542组用10μmol/L SB-431542和5.0 ng/mL TGF-β1同时干预24 h。检测各组HSF细胞活力、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平、活性氧簇(ROS)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,TGF-β1、α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(Co lⅢ)、基质金属蛋白酶2(MMP2)的mRNA表达量及TGF-β1的蛋白表达水平。检测对照组、模型组、圣草酚中剂量组HSF的Smad2、Smad3、磷酸化Smad2 (p-Smad2)、磷酸化Smad3 (p-Smad3)蛋白表达水平。结果 与对照组相比,模型组的HSF细胞活力及α-SMA蛋白表达水平增加,ROS含量增加而SOD活性降低,TGF-β1、α-SMA、ColⅠ、Co lⅢ和MMP2 mRNA表达量上调,TGF-β1、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3的蛋白表达量亦上调(P<0.05)。与模型组相比,圣草酚各剂量组和SB-431542组HSF细胞活力降低、ROS含量降低、SOD活性增强,且α-SMA、ColⅠ、Co lⅢ、MMP2的mRNA表达量和TGF-β1蛋白表达量下调,圣草酚中剂量组、圣草酚高剂量组和SB-431542组HSF细胞中α-SMA蛋白表达水平降低,圣草酚中剂量组及SB-431542组Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达量下调(P<0.05)。圣草酚低剂量组、圣草酚中剂量组、圣草酚高剂量组HSF细胞活力、α-SMA蛋白表达水平、ROS含量依次降低,SOD活性依次增强,α-SMA、ColⅠ、Co lⅢmRNA表达量依次降低(P<0.05)。结论 圣草酚可能通过抑制氧化应激反应及TGF-β1/Smad通路的活化,从而剂量依赖性地抑制TGF-β1诱导的HSF细胞纤维化。

化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏病理及肾脏TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的分析化瘀通络中药对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏病理及肾脏TGF-β1/Smad信号通路相关因子表达的影响。方法糖尿病大鼠模型采用高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素建立,大鼠分为正常对照组、模型组、中药组和厄贝沙坦组,各组相应药物剂量灌胃。灌胃16周检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白定量(24hUTP),肾组织行光镜、电镜观察,Real-time PCR检测肾脏TGF-β1、Smad2、Smad7mRNA的表达。结果与正常对照组比较,模型组各项指标均有差异(P<0.05);与模型组比较,两治疗组Scr、BUN、24hUTP及TGF-β1、Smad2 mRNA表达水平明显下降(P<0.05),Smad7 mRNA表达水平明显上升(P<0.05),病理损伤明显减轻;与厄贝沙坦组比较,中药组24hUTP明显降低(P<0.05)。结论化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏有保护作用,其机制可能与调节TGF-β1/Smad信号通路有关。

当归、川芎联合应用对肺纤维化模型大鼠TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的筛选当归、川芎治疗肺纤维化模型大鼠的最佳配比,并观察其对TGF-β1/Smad信号通路的影响。方法 SD大鼠分为8组,即正常对照组,肺纤维化模型组,强的松组,当归组,川芎组,当归、川芎不同配比组,复制肺纤维化大鼠模型并给予相应药物治疗,每天1次,共4周。给药结束后,检测大鼠肺功能,ELISA测定肺泡灌洗液中TNF-α(肿瘤坏死因子-α)、IL-1β(白介素-1β)、IL-6(白介素-6)、NF-κB(核因子-κB)水平。取肺组织测定羟脯氨酸水平,HE、Masson染色后观察其形态。采用免疫组化及RT-PCR技术检测肺组织TGF-β1/Smad信号通路关键分子的表达。结果当归、川芎配伍使用可不同程度改善肺纤维化模型大鼠肺功能,降低炎症因子及羟脯胺酸水平,减轻肺组织病理形态学,以1∶2组作用更明显,并可降低肺纤维化模型大鼠肺组织TGF-β1(转化生长因子-β1)、Smad2、Smad3、α-SMA(α-平滑肌肌动蛋白)的mRNA及蛋白表达。结论当归、川芎1∶2配伍对肺纤维化模型大鼠肺功能有一定改善作用,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad信号通路有关。

肾康丸对糖尿病肾病大鼠TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的探讨肾康丸对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠TGF-β1/Smad信号通路影响。方法用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法诱导建立大鼠糖尿病(diabetes mellitus,DM)模型,模型成功后随机分为3组:模型对照组、开搏通组、肾康丸组,另设正常对照组,治疗8周后,取大鼠肾脏,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法观察各组大鼠肾脏组织纤连蛋白(fibronetin,FN)和TGF-β1mRNA基因表达情况;采用免疫组化法观察各组大鼠肾脏组织Smad2、Smad3蛋白表达的情况。结果在治疗的8周里,模型组大鼠血糖均维持在16.7mmol/L以上;出现多饮、多食、多尿、消瘦的DM症状;8周后,DN模型组大鼠与正常大鼠比较,肾脏组织中FN和TGF-β1mRNA基因表达显著上调(P<0.01),Smad2、Smad3蛋白表达明显增加。肾康丸和开搏通都可以抑制DN大鼠肾脏组织中FN和TGF-β1mRNA基因表达,差异具有统计学意义(P<0.01),都可以减少Smad2、Smad3蛋白的表达。结论肾康丸可以抑制DN大鼠肾脏中TGF-β1/Smad信号转导通路的激活,减少细胞外基质合成和分泌,从而延缓DN进程。

福辛普利对肾小球系膜细胞TGF-β1/Smad信号通路的干预作用

目的观察新型血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)--福辛普利(fosinopril,FOS)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)Ⅰ型胶原(ColⅠ)蛋白分泌和Smad2、Smad7mRNA表达量的影响。方法建立体外培养的大鼠GMC,鉴定后3～10代用于实验。实验分为正常对照组、TGF-β1刺激组(加5ng/L TGF-β1和5%的胎牛血清)和FOS组(加5ng/L TGF-β1、10μmol/L FOS和5%的胎牛血清)3组,分别于6、24和48h后ELISA法测定细胞培养上清液中ColⅠ蛋白表达量,荧光定量PCR法检测Smad2、Smad7 mRNA表达量的变化。结果①正常培养的大鼠GMC均有一定量的ColⅠ蛋白表达;TGF-β1刺激组在各时间点ColⅠ蛋白分泌均高于对照组(P<0.01),FOS各组ColⅠ蛋白分泌均低于TGF-β1刺激组(P<0.05)。②正常培养的大鼠GMC可表达一定量Smad2、Smad7 mRNA,TGF-β1刺激组在各时间点Smad2、Smad7 mRNA表达量均高于对照组,FOS治疗组Smad2 mRNA表达量均低于TGF-β1刺激组;Smad7 mRNA表达量在TGF-β1刺激组和FOS治疗组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论FOS可抑制TGF-β1诱导的GMC分泌ColⅠ增加,且能够从mRNA水平抑制TGF-β1诱导的大鼠Smad2 mRNA的表达量;FOS可能部分通过抑制TGF-β1/Smad信号通路中的Smad2的表达而发挥延缓肾小球硬化的作用。

灯盏花乙素对肝星状细胞及TGF-β1/Smad信号通路的作用评价

目的观察灯盏花乙素(scutellarin)对肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)及转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad信号通路的影响,探讨scutellarin抗肝纤维化的机制。方法建立TGF-β1诱导的HSC LX-2模型,CCK-8法检测scutellarin对细胞增殖的作用,化学发光法检测scutellarin对Caspase3/7活性的影响,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测细胞上清液Ⅰ型前胶原的含量,ELISA法检测细胞Smad2和Smad3磷酸化水平。结果scutellarin能抑制HSC增殖,增强细胞Caspase3/7活力,抑制Ⅰ型前胶原分泌,降低LX-2细胞Smad2和Smad3磷酸化水平。结论抑制TGF-β1/Smad信号通路可能是scutellarin抗肝纤维化的作用机制。

TGF-β1/Smad信号通路在皮肤病理性瘢痕及瘢痕癌组织中的变化

目的:探讨TGF-β1/Smad信号通路在皮肤病理性瘢痕及瘢痕癌组织中的变化。方法:将20份病理性瘢痕组织标本设为观察A组、20份瘢痕癌组织标本设为观察B组,20份正常皮肤组织设为对照组,分别使用蛋白免疫印迹(Western blotting)和实时荧光PCR(real time PCR)观察三组组织标本TGF-β1和Smad蛋白和基因的变化情况。结果:1Western blotting:观察B组的TGF-β1和Smad蛋白显著高于观察A组和对照组(P<0.01),TGF-β1和Smad在观察A组与对照组之间无统计学差异(P>0.05);2Real time PCR:观察B组的TGF-β1和Smad基因显著高于观察A组和对照组(P<0.01),TGF-β1和Smad在观察A组与对照组之间无统计学差异(P>0.05);3相关性分析:在皮肤瘢痕癌标本中TGF-β1与mRNA TGF-β1(r=0.727 P<0.01),Smad与mRNA Smad(r=0.812 P<0.01)的表达均呈正相关。结论:瘢痕癌变上调TGF-β1、Smad的表达,在瘢痕癌中TGF-β、Smad同时存在蛋白水平和基因水平的异常表达,可将改变TGF-β1/Smad信号通路的标志蛋白的表达做为治疗疤痕癌的靶方向。

老年系统性硬化症继发肺间质纤维化患者体内巨噬细胞因子、TGF-β1/Smad信号通路的应答及预测价值

目的探讨老年系统性硬化症(SSc)继发肺间质纤维化患者体内巨噬细胞因子、转化生长因子(TGF)-β1/Smad信号通路的应答分析及预测价值。方法收集2015年5月至2019年5月收治的SSc继发肺间质纤维化患者30例、非特异性肺间质纤维化患者30例及在此期间门诊进行体检的健康人群30例,分别为特异组、非特异组和健康组。检测3组巨噬细胞各项因子〔包括TGF-β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-8、巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-12〕表达水平,并作出分析。结果3组各项指标对比差异有统计学意义(P<0.05)。其中,特异组巨噬细胞各项因子各项指标表达明显高于非特异组与健康组(P<0.05),非特异组明显高于健康组(P<0.05)。结论巨噬细胞中的TGF-β、TNF-α、IL-8、MIP-1α对老年SSc继发肺间质纤维化患者具有重要表达意义。

中药肝心宁对CCl_4诱导的肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的:研究中药肝心宁对CCl4诱导的大鼠肝纤维化肝脏TGF-β1及Smad-3表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法:采用四氯化碳皮下注射并饲以高脂低蛋白饲料和30%酒精诱导大鼠肝纤维化模型,68只雄性SD大鼠随机分成5组:正常组(11只)、模型组(15只)、阳性对照组(14只)、肝心宁高剂量组(14只)和肝心宁低剂量组(14只),6周末处死所有动物,行HE染色,光镜下观察肝组织肝纤维化程度,并采用RT-PCR半定量方法,检测大鼠肝组织TGF-β1 mRNA、Smad-3mRNA的表达水平。结果:与正常对照组相比,模型组TGF-β1 mRNA、Smad-3 mRNA表达明显增强。经肝心宁治疗后大鼠肝脏TGF-β1表达比模型组减弱,肝心宁同时下调Smad3的表达。另外,肝心宁组大鼠肝脏病理变化显著改善。结论:肝心宁可下调TGF-β1 mRNA、Smad-3 mRNA蛋白的表达,从而抑制或减轻肝纤维化的形成。

基于TGF-β1/Smad信号通路的新冠康复颗粒对肺纤维化早期大鼠上皮间质转化的影响研究

目的观察新冠康复颗粒对博来霉素诱导肺纤维化早期大鼠上皮间质转化及TGF-β1/Smad信号通路的蛋白表达的影响。方法50只SPF级雄性wistar大鼠随机分为正常组、模型组和新冠康复颗粒低剂量(16.28g·kg^(-1))、中剂量(32.55g·kg^(-1))、高剂量(65.10g·kg^(-1))组,每组10只。除正常组外,其他组通过气管注射博莱霉素复制肺纤维化大鼠模型。术后第5天开始,新冠康复颗粒组大鼠分别灌服不同浓度中药颗粒剂冲剂,正常组和模型组大鼠灌服等体积生理盐水,于术后第11天麻醉取材。HE和Masson染色观察肺组织病理形态、肺泡炎症及肺纤维化程度,酶联免疫吸附法检测肺组织IL-6、E-cad和a-SMA表达,蛋白免疫印迹法检测肺组织Collagen I、TGF-β1、p-Smad2、Smad2及Smad7蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠肺组织IL-6、a-SMA含量及Collagen I、TGF-β1、p-Smad2/Smad2蛋白相对含量均显著升高(P<0.01),E-cad含量和Smad7蛋白相对含量均显著降低(P<0.01);与模型组比较,新冠康复颗粒高剂量组大鼠肺组织IL-6含量及TGF-β1蛋白表达水平降低(P<0.05),a-SMA含量及Collagen I、p-Smad2/Smad2蛋白相对含量均显著降低(P<0.01),E-cad含量和Smad7蛋白相对含量均显著升高(P<0.01)。结论新冠康复颗粒的早期干预可减少炎症因子释放,抑制上皮间质转化,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad信号通路蛋白的表达有关。

基于TGF-β1/Smad信号通路探讨芪白平肺方对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(痰瘀阻肺证)患者诱导痰炎症因子及气道重塑的影响

目的:基于TGF-β1/Smad信号通路探讨芪白平肺方对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(痰瘀阻肺证)患者诱导痰炎症因子及气道重塑的影响。方法:选择92例慢性阻塞性肺疾病急性加重期(痰瘀阻肺证)患者进行前瞻性研究,采用随机数字表法将纳入病例分为治疗组和对照组,两组患者均根据治疗指南行基础对症治疗,治疗组患者在此基础上加服芪白平肺方进行治疗,两组患者均连续治疗10 d,疗程结束后统计疗效。比较两组患者治疗前后中医证候积分、肺功能,检测诱导痰中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)、白细胞介素-5(IL-5)和γ干扰素(IFN-γ)含量,以及外周血转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3、Smad7含量。结果:治疗组患者疗效明显优于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者各项中医证候积分均低于治疗前(P<0.05),且治疗组患者治疗后各项中医证候积分明显低于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者FVC和FEV1%明显高于治疗前(P<0.05),且治疗组患者治疗后FVC和FEV1%明显高于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者诱导痰IL-5含量低于治疗前,IFN-γ含量明显高于治疗前(P<0.05),且治疗组患者治疗后诱导痰IL-5低于对照组,IFN-γ含量明显高于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者诱导痰MMP-9、TIMP-1含量明显低于治疗前(P<0.05),且治疗组患者治疗后诱导痰MMP-9、TIMP-1含量明显低于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者外周血TGF-β1、Smad3含量明显低于治疗前(P<0.05),Smad7含量明显高于治疗前(P<0.05)。治疗后治疗组患者外周血TGF-β1、Smad3含量明显低于对照组(P<0.05),Smad7含量明显高于对照组(P<0.05)。结论:芪白平肺方治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(痰瘀阻肺证)疗效较好,可有效提高患者肺功能,降低诱导痰中炎症因子含量并纠正MMP-9、TIMP-1水平,其作用机制可能是通过调节TGF-β1/Smad信号通路而促进细胞外基质和胶原沉积,从而改善气道重塑。

六君子汤辅助TP方案治疗晚期食管癌的价值及其对TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的 研究六君子汤辅助TP方案治疗晚期食管癌的价值,另观察患者TGF-β1/Smad信号通路相关受体表达情况。方法 选取江苏省淮安市肿瘤医院肿瘤科2017年3月至2018年3月收治的晚期食管癌患者94例,以随机数表法分为观察组与对照组,各47例。对照组实施TP方案治疗,观察组在对照组基础上加用六君子汤治疗,对比两组治疗后临床疗效及治疗期间毒副反应程度,对比两组治疗前后血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)水平,另采取Westemblot法检测TGF-β1/Smad信号通路相关受体[转化生长因子β1型Ⅰ型受体(TGFβ1RⅠ)、转化生长因子β1型Ⅱ型受体(TGFβ1RⅡ)、胰腺癌缺失因子4(Smad4)、胰腺癌缺失因子7(Smad7)]表达情况。结果 观察组治疗后临床有效率为72.34%,疾病控制率为93.62%,显著高于对照组的51.06%、74.47%,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组化疗期间恶心呕吐严重程度及白细胞计数下降程度与对照组对比较轻,差异均有统计学意义(P<0.05);两组脱发严重程度及血红蛋白减少程度对比差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后IgA、IgG、IgM水平显著高于治疗前及对照组治疗后,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后TGFβ1RⅠ、TGFβ1RⅡ、Smad4显著低于对照组,Smad7显著高于对照组(P<0.05)。结论TP方案治疗晚期食管癌的同时加用六君子汤能够提高临床治疗效果,有效减轻化疗带来的毒副反应,其机制考虑与影响食管癌患者TGF-β1/Smad信号通路有关,仍需后期深入研究。

杜仲多糖通过TGF-β1/Smad信号通路抑制ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移

目的探讨杜仲多糖对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及迁移的影响。方法体外培养大鼠VSMC,用ox-LDL及不同浓度的杜仲多糖处理。甲基噻唑基四唑法检测细胞增殖;酶联免疫吸附试验检测白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;Transwell实验检测细胞迁移;划痕实验检测划痕愈合率;Western blot检测转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad信号通路相关蛋白Smad2/3、p-Smad2/3的表达。结果ox-LDL处理VSMC后,细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)、p-Smad2/3蛋白水平显著升高(P<0.05),细胞培养上清液中IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.05),细胞活力显著升高(P<0.05),迁移细胞数、划痕愈合率显著增高(P<0.05);杜仲多糖处理后可明显逆转ox-LDL对VSMC增殖及迁移的作用(P<0.05);添加TGF-β1后,Cyclin D1、CDK2、p-Smad2/3蛋白水平显著升高(P<0.05),IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.05),细胞活力显著升高(P<0.05),迁移细胞数显著增多(P<0.05)。结论杜仲多糖可能通过抑制TGF-β1/Smad信号通路的活化从而抑制ox-LDL诱导的VSMC增殖及迁移。