益气活血通脉颗粒调控小胶质细胞表达MMP-9与TIMP1蛋白介导脑缺血再灌注损伤的作用机制

目的探讨益气活血通脉颗粒治疗调控小胶质细胞表达MMP-9与TIMP1蛋白介导脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法采用BV2小胶质细胞进行氧糖剥夺和复氧实验,设置模型组、空白组、MMP-9 siRNA组、益气活血通脉颗粒组、MMP-9 siRNA+益气活血通脉颗粒组。除空白组外,其余4组均置于氧糖剥夺罐进行氧糖剥夺/复氧实验。CCK8检测各组细胞增殖能力。Western blot检测各组小胶质细胞中MMP-9与TIMP1蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组小胶质细胞存活率明显降低(P<0.01),与模型组比较,MMP-9 siRNA组、益气活血通脉颗粒组与MMP-9 siRNA+益气活血通脉颗粒组小胶质细胞存活率升高(P<0.05或P<0.01)。与空白组比较,模型组小胶质细胞MMP-9蛋白表达水平升高(P<0.01),TIMP1蛋白表达水平降低(P<0.01),MMP-9 siRNA组、益气活血通脉颗粒组与MMP-9 siRNA+益气活血通脉颗粒组MMP-9蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01),TIMP1蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。结论益气活血通脉颗粒能够调节MMP-9/TIMP1平衡,有助于抵抗缺氧复氧导致的小胶质细胞损伤。

胃炎Ⅰ号对CAG大鼠胃黏膜MMP1与TIMP1 mRNA表达的影响

目的研究胃炎Ⅰ号对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠胃黏膜MMP1和TIMP1 mRNA表达的影响,探讨胃炎Ⅰ号对CAG大鼠胃黏膜损伤的疗效作用机制。方法将SD大鼠随机分为正常对照组和造模组,参照文献制造CAG模型;造模成功后采用胃炎I号煎剂高中低剂量(2.16,1.08,0.54 g.kg-1)及维酶素(0.86 g.kg-1)治疗CAG模型大鼠,实时荧光定量PCR技术检测MMP1及TIMP1 mRNA表达。结果与正常对照组比较,CAG组大鼠胃黏膜MMP1 mRNA表达降低(P<0.05),TIMP1 mRNA表达无明显变化(P>0.05);各治疗组与模型组比较,中剂量胃炎I号组对CAG大鼠胃黏膜病变疗效最佳,可提高MMP1 mRNA表达(P<0.05)。结论 CAG大鼠胃黏膜MMP1 mRNA表达水平下降,TIMP1 mRNA的表达未见明显异常,可能是慢性萎缩性胃炎的病理机制之一;胃炎I号可提高胃黏膜组织的MMP1 mRNA表达,有助于胃黏膜组织的修复,则是其治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制之一。

MMP9、TIMP1及VEGF在子宫内膜异位症患者在位内膜的表达

研究基质金属蛋白酶 9(matrixmetalloproteinase 9,MMP9)及其抑制剂 (tissueinhibitorofmetalloproteinase 1,TIMP1)和血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在子宫内膜异位症 (endometriosis,EM)患者的在位内膜中的表达。采用免疫组化SP法分别检测 4 5例EM(研究组 )在位内膜及 32例子宫肌瘤 (对照组 )的在位内膜中MMP9、TIMP1及VEGF的表达。MMP9、TIMP1、MMP9 TIMP1和VEGF在研究组和对照组的表达分别为 0 336 ,0 2 76 ;0 2 5 3,0 2 6 7和 1 2 93,1 0 34;0 372 ,0 2 88。其中MMP9、MMP9 TIMP1和VEGF在研究组中的表达显著高于对照组内膜 (P <0 0 1)。EM患者的在位内膜中MMP9、VEGF高表达可能是EM发生发展的重要原因。诊刮筛选出高MMP9、VEGF表达的在位内膜可望成为预测和诊断EM的方法之一。

第三磨牙近中阻生对邻近第二磨牙龈沟液中MMP8和TIMP1的影响

目的:探讨第三磨牙近中阻生对邻近磨牙龈沟液中MMP8和TIMP1的影响。方法:选择64例口腔科就诊的战士,分为4组,A组下颌第二磨牙伴第三磨牙近中阻生,第三磨牙无冠周炎病史,龈瓣颜色正常;B组下颌第二磨牙伴第三磨牙近中阻生,6个月内第三磨牙有冠周炎病史,龈瓣颜色正常;C组下颌第二磨牙伴第三磨牙近中阻生,有冠周炎;D组无下颌第三磨牙,第二磨牙作为对照。收集下颌第二磨牙龈沟液,检测MMP8和TIMP1水平,同时测定第二磨牙龈沟出血指数、探诊深度和菌斑指数等指标。结果:MMP8和TIMP1各组间均有统计学差异(C组>B组>A组>D组)。MMP8/TIMP1 B组和A组之间无明显差别,其余各组间差异有统计学意义。临床指标中,C组的菌斑指数明显高于D组,A、B、C组的探诊深度大于D组。结论:第三磨牙近中阻生在无炎症状态时可引起第二磨牙龈沟液MMP8、TIMP1、MMP8/TIMP1和探诊深度等牙周炎潜在致病因素的变化,出现冠周炎症时变化更加显著。

通心络胶囊干预载脂蛋白E基因敲除小鼠MMP-1、MMP-9及TIMP1的研究

目的通过通心络胶囊对载脂蛋白E基因敲除〔ApoE(-/-)〕模型组小鼠基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)水平等指标的干预变化,探究其治疗冠心病(CHD)的机理。方法将40只ApoE(-/-)小鼠作为实验组,建立冠状动脉粥样硬化(AS)模型,随机分为模型组等5组,分别给予辛伐他汀及不同剂量的通心络胶囊进行干预,另选8只同系的小鼠作为正常对照组。通过对模型组小鼠血清MMP-1、MMP-9和TIMP1水平的观察,比较分析通心络胶囊对ApoE(-/-)小鼠冠状AS的调节作用并探讨其机理。结果通心络胶囊高剂量组小鼠血清MMP-1和MMP-9水平均低于模型组,而TIMP1水平高于模型组,与模型组相比,均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。通心络胶囊中剂量组小鼠血清MMP-9水平低于模型组,与模型组相比有统计学意义(P<0.05)。结论通心络胶囊具有抑制血管重构和稳定斑块的作用。

MMP1,TIMP1在肺癌组织中的表达及临床生物学意义

目的 :研究基质金属蛋白酶 1(MMP 1)和基质金属蛋白酶组织抑制剂 1(TIMP 1)在肺癌组织中表达及其临床生物学意义。方法 :常规石蜡包埋切片行SABC免疫组织化学检测 4 6例肺癌组织中MMP 1和TIMP 1的表达。结果 :4 6例肺癌和 15例正常肺组织中MMP1表达阳性的例数分别为 2 4例 (5 2 .2 % )和 3例 (2 0 % ) ,两者无相关性 ;TIMP1在正常肺组织和肺癌中的表达分别为 12例 (80 % )和 19例 (41.3% ) ,肺癌明显低于正常肺组织 ;MMP1和TIMP1在肺癌中表达与其分化程度、分期、淋巴结转移有明显相关性 ,且MMP1与TIMP1的表达呈明显负相关。结论 :MMP1和TIMP1蛋白的表达与肺癌的发生发展、生物学行为、侵袭和转移有关 。

MMP1、TIMP1在放射复合伤口愈合过程中的表达及对伤口愈合过程的影响(英文)

利用放射复合伤口动物模型 ,动态观察伤口愈合过程中MMP1 ,TIMP1 ,mRNA转录及蛋白表达的变化及其对伤口愈合和组织改建的影响。结果显示 :2 5Gy(γ射线 )局部照射对伤口愈合有明显的损害作用 ,照射组伤口较对照组延迟 6d愈合。在伤口愈合的炎症期和肉芽组织生长期 ,照射组新生表皮细胞中MMP1表达与对照组相近 ,在后期 ,随着照射组伤口愈合的延迟其表达相对较高。在伤后 3— 1 4d ,TIMP1在对照组新生表皮细胞中呈弱阳性 ,表皮覆盖后呈阴性 ,而在照射组表皮覆盖前呈阴性或弱阳性。MMP1与TIMP1在照射组肉芽组织成纤维细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞中表达较对照组明显降低 ,在愈合后期因辐射所致伤口愈合的延迟其表达时相拖后。结果表明 :辐射所致MMP1与TIMP1在伤口肉芽组织中表达明显降低 ,直接影响细胞迁移、血管形成和瘢痕组织形成等病理过程 ,是辐射影响伤口愈合的重要机制之一。

益气解毒化瘀小复方及其单味药对大鼠肾小球系膜细胞MMP3、TIMP1表达及细胞外基质产生的影响

目的:探讨益气解毒化瘀小复方及其单味药对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠肾小球系膜细胞MMP3(GMCs),TIMP1表达及细胞外基质FN,Col-IV胶原蛋白的影响。方法:常规培养大鼠肾小球系膜细胞,RT-PCR法检测各组对大鼠肾小球系膜细胞MMP3、TIMP1的表达,双抗体ELISA夹心法检测各组对细胞外基质FN,Col-IV胶原蛋白的影响。结果:小复方组降低系膜细胞MMP3、TIMP1表达最为明显,小复方组降低细胞外基质FN,Col-IV胶原蛋白的影响最为明显,与各单味药,西药对照组比较,有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。结论:益气解毒化瘀小复方可有效地抑制肾小球系膜细胞增殖,有效地促进系膜细胞凋亡,并优于单味药,从而达到抗肾小球硬化,保护肾脏的目的。

脑得生胶囊对家兔血管成形术后MMP-2和TIMP1表达的影响

目的通过探讨兔腹主动脉成形术后血管再狭窄和MMP-2、TIMP1表达变化之间的关系,探讨脑得生胶囊预防再狭窄的可能机制。方法健康雄性大耳白兔30只,随机分成对照组、拉伤组、高脂组、脑得生组。采用高胆固醇喂养加腹主动脉内皮剥脱制作血管狭窄模型,之后行血管球囊扩张成形术。于术后4 w处死动物,取血管成形术部位血管标本。进行光镜及免疫组化染色。结果高脂组内膜增生最明显,内膜面积最大而管腔面积最小;脑得生组内膜面积较高脂组明显减小,管腔面积明显扩大。免疫组化染色:对照组无MMP-2和TIMP1表达,拉伤组只有微量表达。高脂组MMP-2和TIMP1表达明显升高,较对照组和拉伤组有显著差异(P<0.05),经脑得生治疗后,MMP-2和TIMP1表达有下降趋势,MMP-2和TIMP1的比值较高脂组明显增大(P<0.05)。内膜的增生以及血管腔的狭窄程度与MMP-2和TIMP1的表达也有很好的相关性(r=0.54,P<0.01)。结论脑得生胶囊可能是通过影响MMP-2和TIMP表达而抑制家兔血管成形术后的内膜增殖。

异基因造血干细胞移植前肿瘤和移植后第二肿瘤中survivin,MMP2,TIMP1,CD44和nm23的表达变化

目的探讨在不同免疫状态下发生的移植前肿瘤和移植后第二肿瘤,其肿瘤粘附、扩散及存活相关因子Survivin,MMP2,TIMP1,CD44和nm23的表达变化。方法急性淋巴细胞白血病骨髓标本和异基因造血干细胞移植后发生的淋巴瘤标本均来自于同一个病人,应用免疫组织化学方法对两份肿瘤标本进行了Survivin,MMP2,TIMP1,CD44和nm23的表达差异对比研究。结果移植前患者的白血病骨髓标本细中,Survivin,MMP2,TIMP1,CD44和nm23明显强表达,移植后发生的淋巴瘤标本细胞中的上述分子不表达或极弱表达。结论接受异基因外周造血干细胞移植的患者发生的第二肿瘤,其与恶性肿瘤存活、黏附和转移有关的分子Survivin、MMP2、TIMP1、CD44和nm23的表达均较普通免疫状态下出现表达抑制现象。

保肝复功水煎剂对大鼠肝纤维化TGFβ1、TIMP1、MMP1表达的影响

目的:为了探讨保肝复功水煎剂抗肝纤维化的作用机理。方法:通过四氯化碳致小鼠肝损伤模型,利用基因芯片技术研究TGFβ1、MMP1及TIMP1在肝组织中的表达情况。结果:保肝复功水煎剂干预性治疗使实验组大鼠肝组织MMP1表达上调,TIMP1、TGFβ表达下调。结论:保肝复功水煎剂在肝组织中具有明显使MMP1表达上调,TIMP1、TGFβ表达下调的作用,从而促进了胞外基质的降解,抑制发挥肝纤维化的作用。

S100A_4在肺癌中的表达及其与MMP9/TIMP1表达失衡的关系

目的:研究S100A4在人肺癌中的表达及其临床生物学意义,探讨其在肺癌的侵袭和转移中的作用及其与MMP9/TIMP1表达失衡的关系。方法:采用S-P免疫组化法检测50例肺癌及6例正常肺组织中S100A4、MMP9及TIMP1的表达水平。结果:S100A4、MMP9和TIMP1在肺癌中表达显著高于正常肺组织;非小细胞肺癌中表达明显高于小细胞肺癌(P<0.05);腺癌中表达明显高于鳞癌(P<0.05)。S100A4和MMP9表达与非小细胞肺癌临床病理特征关系密切,在有淋巴结转移组与无转移组中两者均有显著性差异(P<0.05)。在肺癌不同临床TNM分期中,S100A4和MMP9阳性表达随临床分期的升高而明显增加,各期间均有显著性差异(P<0.05)。MMP9表达与非小细胞肺癌分化程度密切相关,随分化程度的降低,MMP9阳性率升高(P<0.05);S100A4阳性率随分化程度的降低也有升高趋势,但没显著性差异。S100A4表达与肿瘤大小有密切的正相关关系,随肿瘤体积的增大,S100A4的阳性率升高(P<0.05)。S100A4与MMP9呈正相关(P<0.05);MMP9与TIMP1呈正相关关系(P<0.05)。结论:S100A4和MMP9与肺癌的侵袭和转移有密切的关系,可以作为评估肺癌病人预后的重要指标。TIMP1不是简单对MMP9的局部升高起反应。S100A4参与调节MMP9的表达,则可能为肺癌的治疗开辟一条新的途径。

MMP9、TIMP1、CCL21在结直肠癌患者血清中的表达水平及与预后的关系

目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP9)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1)和趋化因子21(CCL21)在结直肠癌(CRC)患者血清中的表达水平及与预后的关系。方法回顾性分析106例CRC患者的临床资料,比较术前、术后1周及6次化疗后患者的血清MMP9、TIMP1及CCL21水平。应用Spearman相关分析法分析术前血清MMP9、TIMP1、CCL21表达水平与Duke's分期、分化程度的相关性,应用Cox比例风险回归模型分析影响CRC患者预后的因素。结果术后1周及6次化疗后CRC患者的血清MMP9、TIMP1及CCL21水平均低于术前,差异均有统计学意义(P﹤0.05);术后1周和6次化疗后CRC患者的血清MMP9、TIMP1及CCL21水平比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。Spearman相关分析结果显示,Duke's分期与CRC患者的术前血清MMP9、TIMP1、CCL21水平均呈明显正相关(r=0.732、0.701、0.674,P﹤0.01),分化程度与CRC患者的术前血清MMP9、TIMP1、CCL21水平均呈明显负相关(r=-0.701、-0.728、-0.693,P﹤0.01)。Cox回归分析结果显示,术前MMP9、TIMP1及CCL21水平均是CRC患者预后的独立危险因素(P﹤0.05)。结论 MMP9、TIMP1及CCL21表达水平与CRC的恶性程度有关,可为CRC患者的预后判断提供重要的参考依据。

应用cDNA微阵列技术研究MMP1,TIMP1基因在肺癌中的表达

研究基质金属蛋白酶 1 (MMP1 )和基质金属蛋白酶组织抑制物 1 (TIMP1 )基因在肺鳞癌、肺腺癌中的表达。方法 :利用含 4 0 96个基因的cDNA微阵列检测肺鳞癌、肺腺癌组织与正常肺组织的差异表达基因 ,重点分析MMP1 ,TIMP1在肺鳞癌与肺腺癌中的表达。结果 :MMP1 ,TIMP1基因在肺鳞癌与肺腺癌中均表达上调。结论 :MMP1 ,TIMP1在肺鳞癌、肺腺癌中均出现表达上调 ,可作为肺鳞癌。

侵袭性牙周炎牙龈组织中TIMP1基因表达多态性研究

目的:探讨TIMP1基因表达多态性与汉族人群侵袭性牙周炎(AP)易感性的关系。方法:收集汉族重度AP女性患者36例及35名无牙周炎女性对照者的牙龈组织,采用标准酚-氯仿抽提法和蛋白酶K消化法提取DNA。用甲基化敏感的限制性内切酶PCR法测定TIMP1基因的甲基化修饰情况,分析对照组与患者组基因表达的差异。结果:重度女性AP患者组中两条X染色体上TIMP1基因都处于去甲基化状态的比例高于对照组,差异有统计学意义。结论:TIMP1基因表达多态性可能与汉族人群AP的易感性有关。

八味护肝胶囊对大鼠酒精性肝纤维化血清TGF-β1、TIMP1的影响

目的探讨八味护肝胶囊对酒精性肝纤维化(ALF)大鼠的保护作用及其作用机制。方法将雄性Wistar大鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、八味护肝胶囊组、益肝灵胶囊组。用烈性酒灌胃的方法制备ALF大鼠模型,造模时间为12周。造模成功后,给予相应的组八味护肝胶囊、益肝灵胶囊治疗4周。于16周末检测各组大鼠血清肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP),肝纤维化指标透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CIV),肝纤维化血清转化生长因子β1(TGF-β1)、金属蛋白酶组织抑制剂l(TIMP1)等细胞因子的含量。肝组织采用HE染色、Mas-son染色,光镜观察各组肝细胞变性、坏死和纤维增生的情况。结果与模型组比较,八味护肝胶囊组大鼠血清ALT,AST,TP,HA,LN,C IV明显降低(P<0.01),血清和肝组织中TGF-β1,TIMP1等致纤维化因子表达减少,肝组织细胞变性、坏死亦明显减轻,有统计学意义(P<0.05)。结论采用烈性酒灌胃法能成功制备大鼠ALF模型;八味护肝胶囊能降低血清ALT、AST水平,提示其具有减轻肝细胞损伤、保护肝细胞的作用;治疗后血清中HA、LN和CⅣ型胶原以及TGF-β1、TIMP1的含量明显低于模型组,说明八味护肝胶囊具有抗纤维化作用,对TGF-β1、TIMP1的抑制作用可能是其治疗酒精性肝纤维化的机制之一。

增生性瘢痕与萎缩性瘢痕中c-fos mRNA、c-jun mRNA及MMP1、TIMP1表达的研究

目的探讨增生性瘢痕与萎缩性瘢痕中c-fos mRNA、c-jun mRNA及基质金属蛋白酶MMP1、基质金属蛋白酶抑制剂TIMP1与瘢痕增生之间的关系。方法临床上收集32例深度烧伤后瘢痕标本,其中烧伤后4～10个月增生性瘢痕标本18例,烧伤后2～4年内萎缩性瘢痕标本14例。采用RT-PCR方法对上述瘢痕组织中c-fos mRNA、c-jun mRNA进行半定量检测;采用免疫组化方法检测基质金属蛋白酶1(MMP1)、基质金属蛋白酶1抑制剂(TIMP1)表达情况,并利用图象分析方法进行结果分析。结果增生性瘢痕中c-fos mRNA表达增高,与萎缩性瘢痕中c-fos mRNA表达有差异(P<0.01);c-jun mRNA表达在两组中表达无差异(P>0.05)。基质金属蛋白酶1抑制剂(TIMP1)在增生性瘢痕中TIMP1表达减少,统计学上低于萎缩性瘢痕TIMP1表达(P<0.01);基质金属蛋白酶1(MMP1)在增生性瘢痕与萎缩性瘢痕中表达无差异(P>0.05)。结论增生性瘢痕中c-fos基因mRNA表达增高,有利于刺激MMP1对细胞外基质(ECM)的降解,对减轻瘢痕的增生有一定作用;增生性瘢痕中TIMP1表达降低,通过减少对MMP1的拮抗作用而达到减轻瘢痕增生的作用。

复方鳖甲软肝方对LPS刺激肾小管上皮细胞MMP9／TIMP1表达的影响

目的:研究复方鳖甲软肝方对肾小管上皮细胞LPS刺激不同时段表达MMP9、TIMP1的影响。方法:制备含药血清,将5％含药血清培养基加入体外培养的肾小管上皮细胞,分别于LPS刺激 24 h及48 h采用免疫组化及Western blot方法检测各组MMP9、TIMP1的表达。结果:LPS刺激肾小管上皮细胞12 h后,细胞胞浆内MMP9活性逐渐增强;24h达到高峰;TIMP1于LPS刺激24 h逐渐增强,48 h达到高峰上。复方鳖甲软肝方降低24h时MMP9的表达,同时也降低48h时TIMP1的表达。结论:复方鳖甲软肝方含药血清能抑制细胞早期MMP9的表达,可降低MMP9早期对基膜的破坏引起的上皮细胞转化,同时又降低后期TIMP1的表达,从而促进细胞外基质的降解,其双向调节作用可能是其防治肾间质纤维化的机制之一。

MMP9及TIMP1 mRNA在先兆子痫患者胎盘中的表达及其意义

目的 检测基质金属蛋白酶 9及其抑制物 1的mRNA(MMP9mRNA、TIMP1mRNA)在先兆子痫患者胎盘中的表达 ,以探求MMP9在先兆子痫发病机制中的意义。方法 用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)技术检测正常妊娠(10例 ) ,先兆子痫 (2 2例 )剖宫产后胎盘中MMP9、TIMP1基因在转录水平的表达。结果 重度先兆子痫胎盘中MMP9mRNA表达量降低 (0 .0 5± 0 .0 4 ) ,TIMP1mRNA表达量增加 ,MMP9/TIMP1比值下降 (0 .0 4± 0 .0 3) ,与轻度先兆子痫及正常对照组比较有明显意义。结论 MMP9表达在基因转录水平就已经下调 ,同时因TIMP1表达增强其活性进一步被抑制 ,因而在先兆子痫的发生和发展中有重要意义。

骨软骨瘤和骨恶性肿瘤MMP1和TIMP1表达意义

目的 研究骨软骨瘤和骨恶性肿瘤MMP1、TIMP1表达及其临床病理意义。方法 骨肿瘤组织脱钙后常规石蜡包埋切片,ABC免疫组化法。结果 15例骨软骨瘤MMP1均为阴性和TIMP1均阳性,45例骨恶性肿瘤MMP1阳性29例(64％)和TIMP1阳性20例(44％),骨恶性肿瘤MMP1阳性率明显高于骨软骨瘤,TIMP1则相反。组织学分级Ⅰ级和无原发灶外转移的骨恶性肿瘤MMP1阳性率明显低于组织学分级Ⅲ级和有原发灶外转移病例。但TIMP1则相反。骨恶性肿瘤中MMP1表达与TIMP1表达呈密切负相关。结论 MMP1和TIMP1表达与骨恶性肿瘤生物学行为、转移和侵袭潜能以及预后有密切关系,均为重要生物学标记物;骨良性病变MMP1和TIMP1检测对预防和早期发现骨恶性肿瘤具有重要临床价值。