汽油和甲醇两种燃料的汽车尾气的TK基因突变试验比较

甲醇燃料极有希望成为更清洁的汽油替代品,然而有关甲醇燃料汽车尾气对健康影响的研究报道极少,更未见对甲醇和汽油两种燃料汽车尾气的遗传毒性进行比较研究。为此本课题在同样的车型,同样的工况条件下采集了甲醇尾气和汽油尾气,选用L 5 178Y细胞Thymidine kinase(TK)基因突变试验,在同样的剂量范围进行了两种尾气的遗传毒性检测,并与微核试验和彗星试验的结果进行了比较。结果显示,在33～133ml/ m l范围内,汽油尾气的遗传毒性强于甲醇尾气,但是甲醇尾气的细胞毒性强于汽油尾气;与微核试验和彗星试验比较证实,L 5 178Y细胞TK基因试验检测基因突变更加灵敏。

昆明山海棠总生物碱诱导小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变的研究

目的 :研究昆明山海棠 (THH)总生物碱对小鼠淋巴瘤L5 178Y细胞tk基因的影响。方法 :用抽提的THH总生物碱对L5 178Y细胞进行浓度梯度染毒 ,不同时间点进行单细胞微孔接种 ,计数阳性集落 ,测定细胞接种效率、相对存活率、相对悬浮增长率和突变频率。结果 :随着THH总生物碱作用剂量的增加 ,L5 178Y细胞相对存活率和相对悬浮增长率均明显下降 ;在 0 .1～ 2 .0 g·L-1范围内可诱导细胞tk位点的突变 ,诱发突变频率是自发突变频率的 2～ 9倍。在tk位点诱发了两种不同表型的突变集落 ,即大集落与小集落 ,但以大集落为主 ,这一现象可能与THH的作用机制有关。结论 :THH总生物碱对L5 178Y细胞具有肯定的细胞毒性与诱导基因突变作用。

TK基因突变试验检测叶绿素的抗诱变性

目的:用人的类淋巴母细胞TK6的TK基因突变试验检测叶绿素的抗诱变性。方法:不加S9活化的条件下,用叶绿素10、20、40、80μg/ml与阳性致突变物丝裂霉素C(MMC)0.5μg/ml同时处理TK6细胞3 h,采用微孔板法进行平板接种效率和突变频率的测定。结果:随受试物剂量的增加,叶绿素对MMC诱变性的拮抗作用增大,当剂量达到40μg/ml以上时总突变频率较MMC组有显著降低(P<0.05)。结论:叶绿素具有拮抗MMC诱导的tk基因突变的作用。

TK基因突变试验——琼脂平皿法与微孔平板法的比较

目的 TK(thymidinekinase)基因突变试验可采用琼脂平皿法或微孔平板法 ,本研究旨在比较两种方法的优劣 ,为选择一种适于在国内推广的方法提供依据。方法 同时使用琼脂平皿法和微孔平板法对四种化学物 (MMS、EMS、MMC、KCl)的致突变性进行检测与评价。结果 两种方法检出三种诱变剂的结果基本一致 ,但对KCl而言 ,琼脂平皿法检测结果为阴性 ,而微孔平板法检测结果为阳性。结论 就目前实验结果来看 ,宜推广琼脂平皿法在国内的应用。最终结论尚需增加更多受实物后才能确定。

L5178Y与TK6细胞的TK基因突变实验比较

目的 比较 L 5 178Y与 TK6细胞在 TK基因突变试验系统中的异同和优劣。方法 采用 L 5 178Y和TK6细胞做 TK基因突变试验微孔平板法 ,对四种受试物 (MMS、EMS、MMC、KCl)的致突变性进行检测与评价。结果 两种细胞对四种受试物的检测结果基本一致 ,但 TK6细胞对四种受试物的耐受性均低于 L 5 178Y细胞 ,且相对突变指数显著高于 L 5 178Y细胞。结论 两种细胞应用于本试验各有其优越性 ,但由于 TK6细胞来自于人类 ,实际应用意义大于 L 5 178Y细胞 ,建议推广 TK

WTK1细胞tk基因突变的多重PCR分析

目的探讨WTK1细胞tk位点自发和诱发突变体的突变谱和突变热点。方法用甲磺酸甲酯、丝裂霉素C和叠氮钠染毒WTK1细胞后,筛选出tk基因突变集落,用多重PCR方法对WTK1细胞tk基因突变谱进行分析。结果三种受试物均能诱导WTK1细胞tk位点突变频率增高,且存在剂量-反应关系;所分析的突变体中绝大部分缺失tk基因外显子4和5-7。结论三种受试物对WTK1细胞均有致突变作用;tk位点的突变存在明显的突变热点。

用tk基因突变试验评价长春新碱和秋水仙碱的遗传毒性

目的评价有丝分裂抑制剂长春新碱和秋水仙碱的遗传毒性,并比较短期和长期tk基因突变试验的检出灵敏度.方法用长春新碱和秋水仙碱对小鼠淋巴瘤细胞分别进行3h及24h染毒,用微孔板法进行tk基因突变试验,计算相对悬浮生长、接种效率、相对存活率、相对总生长及突变频率等指标,并比较短期和长期处理的结果.结果两种受试物3h处理均未出现明显的阳性反应,而24h连续处理后,两种受试物均能诱导tk基因突变频率增高,诱发突变频率分别为自发突变频率的1.6～4.8倍和2.1～6.2倍,呈阳性结果.结论长春新碱和秋水仙碱在长期处理试验中能诱导tk基因突变,而在短期处理试验中未发现明显诱变性,即长期处理能提高tk基因突变试验的检出灵敏度.

长春花碱3和24h处理TK6细胞TK基因突变试验比较研究

[目的]比较用长春花碱对人淋巴母细胞TK6处理3h和24h的诱变性。[方法]用长春花碱对TK6细胞分别进行3h和24h染毒处理,用微孔板法进行TK基因突变试验。计算TK6细胞的接种效率(PE)、相对存活率RS、相对悬浮增值率RSG、总的相对增长率RTG、突变频率MF。[结果]在3h处理条件下,随长春花碱浓度的增加,RS、RTG和RSG等均降低,中、高剂量水平已表现出明显的细胞毒性,但各剂量水平的MF与溶剂对照比较差异均有统计学意义(P﹤0.05);在24h处理条件下,其MF随VBL浓度的增加而增加,并有一定的剂量-反应关系。[结论]较长时间处理对于长春花碱等细胞周期依赖性的毒物是必要的。

长春花碱和秋水酰胺诱导TK6和TK6-E6细胞TK基因突变比较研究

目的比较TK6和TK6-E6人类淋巴母细胞TK基因突变试验对2种纺锤体毒物——长春花碱(VBL)和秋水酰胺(CCM)检出情况的差异。方法用长春花碱和秋水酰胺处理TK6和TK6-E6细胞24小时,进行常规TK基因突变试验,检测细胞毒性及tk位点突变频率。结果随着长春花碱和秋水酰胺浓度的增加,TK6和TK6-E6细胞的相对存活率(RS%)和相对悬浮生长率(RSG%)均降低。相同剂量下,TK6-E6细胞的RS%和RSG%均比TK6高。长春花碱和秋水酰胺对TK6和TK6-E6细胞均有致突变性,TK6-E6细胞的诱发和自发突变频率高于TK6,而除了突变频率(MF)中CCM5·0ng/ml组和SC%中CCM0·625ng/ml组外,其它相同剂量下,TK6-E6的MF和慢生长集落百分比(SC%)均高于TK6细胞(P<0·05)。结论两种细胞都可用于TK基因突变试验,但由于TK6-E6所用细胞量少,倍增时间较短,故建议使用TK6-E6细胞。

用TK基因突变试验评价丙烯酰胺的致突变性

用小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验对丙烯酰胺的致突变性进行了研究。实验设0.10、0.25、0.50、0.75mg/ml4个剂量组和阴性、阳性对照组。结果发现,随着丙烯酰胺剂量的增加,细胞相对悬浮增长率下降,tk位点的突变频率显著增加,0.5、0.75mg/ml两剂量组的突变频率与阴性对照组相比有显著性差异,并且有剂量效应关系,表明丙烯酰胺有明显的细胞毒性,并可诱发tk位点的突变。

用TK基因突变试验评价土荆芥精油的遗传毒性

目的:采用TK基因突变试验评价土荆芥精油的遗传毒性,为其安全性评价提供资料。方法:土荆芥精油浓度设置分别为体积分数0.002%、0.004%、0.006%和0.008%,对L5178Y细胞进行3 h染毒处理;同时分别设二甲基亚砜(DMSO)和环磷酰胺(CP)为溶剂对照和阳性对照,微孔板法进行TK基因突变试验。检测土荆芥精油对L5178Y细胞的细胞毒性及TK基因位点突变频率。结果:随土荆芥精油浓度的增大,L5178Y细胞相对存活率(RS)、相对悬浮生长率(RSG)和相对总生长率(RTG)较溶剂对照组有下降趋势;0.008%剂量组时,RS、RSG和RTG分别为溶剂对照组的29.38%、38.13%和5.75%,表现出明显的细胞毒性;与溶剂对照组相比,突变频率(TMF)随土荆芥精油浓度增加则呈上升趋势(F=410.5,P=0.00)。TMF在土荆芥精油各浓度组间以及和阳性、溶剂对照组间的多重比较差异均有统计学意义(P<0.05)。小集落百分比(SC)均超过95%。结论:土荆芥精油具有一定的细胞毒性,可诱导L5178Y细胞TK基因位点突变频率增高,有一定的致突变性。

不同焦油释放量卷烟诱导TK基因突变能力的比较研究

目的:研究卷烟烟气冷凝物对TK基因的致突变作用,并比较不同焦油释放量卷烟样品的TK基因致突变能力。方法:以盒标焦油为5、8和11 mg的市售卷烟(分别为1、2和3号样品)烟气冷凝物为受试物,分别以20、40、60、80、100、150μg/mL的卷烟烟气冷凝物对小鼠淋巴瘤细胞L5178Y tk+/-3.7.2C进行染毒处理,以15μL/mL的二甲基亚砜为溶剂对照,3μg/mL的环磷酰胺为阳性对照,处理3 h,细胞洗涤重新接种培养2 d,加入三氟胸苷继续培养12 d后,计数有突变集落生长的孔数,计算各样品剂量组的三氟胸苷抗性突变频率,并比较不同样品的致突变强度。结果:1号样品在剂量为150μg/mL时、2号样品和3号样品在剂量为100μg/mL时,小鼠淋巴瘤细胞三氟胸苷抗性突变频率是溶剂对照组3倍以上,并且随着卷烟烟气冷凝物剂量的增加,三氟胸苷抗性突变频率呈上升趋势,呈现明显的剂量-反应关系,3种卷烟样品的TK基因致突变强度分别为0.37、0.36和0.38。结论:3种卷烟样品的烟气冷凝物均对小鼠淋巴瘤细胞表现出TK基因致突变作用,比较3种样品的致突变强度发现,卷烟烟气的致突变强度与焦油释放量无明显相关关系。

用TK基因突变试验评价葛根素的抗诱变性

背景与目的:用TK6人类淋巴母细胞TK基因突变试验评价葛根素的抗诱变性。材料与方法:设溶剂对照组、5μg/ml甲基磺酸甲酯(MMS)组、5μg/mlMMS分别加葛根素25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的各试验组、5μg/mlMMS+100μg/mlVitC对照组,共6组。按上述分组加入葛根素与MMS处理4h后测定第0d的平板接种效率(PE0)、第3d的平板接种效率(PE3)、细胞悬浮生长率(RSG)和总突变频率(TMF)。结果:100μg/ml葛根素剂量组能显著降低MMS诱导的TK基因突变频率。结论:在本实验条件下,葛根素在较高剂量范围可抑制MMS诱导的TK6细胞TK基因突变,有潜在的开发应用前景。

小鼠淋巴瘤tk基因突变试验检测雄黄的致突变性

目的用小鼠淋巴瘤tk基因突变试验检测雄黄浸出液的致突变性。方法在加或不加S9(萃巴比妥钠+β萘黄酮诱导鼠肝匀浆上清液)条件下,用不同质量浓度雄黄浸出液可溶性砷处理小鼠淋巴瘤L5178Y细胞,采用微孔板法进行细胞毒、平板接种效率和突变频率测定,用统计学方法进行评价。结果非活化条件下用雄黄浸出液处理3 h和24 h后,随着浸出液可溶性砷质量浓度的增加,小鼠淋巴瘤细胞的平板效率(PE0和PE2)、相对存活率(RS0)、相对悬浮生长(RSG)、相对总生长率(RTG)逐渐下降,24 h作用后最高剂量3.0μg/mL的RS0仅为6.72%、RSG仅为3.94%、RTG仅为0.34%,表明雄黄对小鼠淋巴瘤细胞有明显的毒性,且作用时间长细胞毒性更明显。随着浸出液可溶性砷质量浓度的上升,抗性突变频率(MF)呈现上升趋势,表明雄黄具有致突变性。延长处理时间,雄黄的致突变性增强。活化条件下小鼠淋巴瘤细胞的PE0、PE2、RS0、RSG、RTG和MF的变化与非活化条件下结果相似,表明浸出液可溶性砷的毒性和致突变性不依赖于S9的活化。结论雄黄浸出液可溶性砷对小鼠淋巴瘤L5178Y细胞具有致突变性。

小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验检测染料木素的诱变性

目的:用小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验检测染料木素的诱变性。方法:不加S9活化的条件下,用染料木素5、10、15、20μg/ml处理L5178Y细胞3h,采用微孔板法进行细胞毒性、平板接种效率和突变频率测定。结果:随染毒剂量的增加,染料木素对L5178Y的细胞毒性增大。染料木素能诱发L5178Y细胞tk位点突变频率显著增高,当剂量达到15μg/ml以上时其诱发突变频率为自发突变的3倍以上。结论:染料木素对L5178Y细胞有明显的细胞毒性,并可诱发tk基因突变。

用TK基因突变试验评价大蒜素的抗诱变性

[目的]用TK6人类淋巴母细胞的TK基因突变试验评价大蒜素的抗诱变性,为大蒜素抗诱变作用及其可能机制的研究提供毒理学依据,并为TK基因突变试验在抗诱变性检测方面的应用及推广积累资料。[方法]设溶剂对照组、5μg/ml MMS组、5μg/ml MMS+大蒜素0.1μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml试验组、5μg/ml MMS+100μg/ml VitC对照组。分别采用同时处理和后处理两种方法测定PE0、PE3、RS和TFT。[结果]大蒜素在两种处理条件下均能显著降低MMS诱导的TK基因突变频率,并呈较好的量效关系,两种处理条件的作用强度差异无统计学意义。[结论]在本实验条件下,大蒜素可抑制MMS诱导的TK6细胞TK基因突变,有很好的开发应用前景。

运用TK基因突变试验及小鼠微核试验测定95%乙草胺原药的遗传毒性

[目的]观察95%乙草胺原药的遗传毒性,为其安全使用及农药管理登记提供依据。[方法]建立95%乙草胺原药的致突变试验模型,通过TK基因突变频率和微核率对其遗传毒性进行评价。[结果]95%乙草胺原药各剂量组TK6细胞TK位点突变频率与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);与阴性对照组比较,95%乙草胺原药染毒组的骨髓嗜多染红细胞微核率未见明显增高(P>0.05)。[结论]在本试验条件下,95%乙草胺原药无诱导小鼠骨髓细胞染色体损伤及致TK6细胞基因突变的作用。

用TK基因突变试验和彗星试验评价亚硒酸钠的致突变性和抗突变性

目的用TK基因突变试验和彗星试验检测亚硒酸钠(Na2SeO3)的致突变性和抗突变性。方法设阴性对照组、阳性对照组、抗突变对照组,以及致突变试验组和抗突变试验组各5个剂量组,处理L5178Y细胞3 h,按常规方法进行TK基因突变试验和彗星试验。结果 TK基因突变试验中,6.0～24.0μg/ml Na2SeO3致突变试验组的突变频率(MF)显著高于阴性对照组;0.2～1.6μg/ml Na2SeO3抗突变试验组的突变频率低于丝裂霉素C(MMC)阳性对照组。在彗星试验中,3.0～24.0μg/ml Na2SeO3致突变试验组的平均拖尾率和Olive尾距(OTM)显著大于阴性对照组;0.2～1.6μg/ml Na2SeO3抗突变试验组的平均拖尾率和平均OTM值显著低于重铬酸钾(K2Cr2O7)阳性对照组。结论在不同的剂量范围内,亚硒酸钠可表现出一定的致突变作用和抗突变作用。