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HMGB1-TLR4-MyD88-NF-κB信号通路在大鼠胸部创伤后心肌损伤的调节机制研究
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作者 邱美光 张旭鸣 +3 位作者 何武兵 林世水 林昊 许志贤 《创伤与急诊电子杂志》 2019年第1期11-15,共5页
目的探讨HMGB1-TLR4-MyD88-NF-κB信号通路在胸部创伤多发肋骨骨折后心肌损伤的调节机制,观察心肌损伤后炎性细胞因子IL-4、IL-6、IL-10表达变化。方法(1)根据自由落体原理自制大鼠胸部创伤后多发肋骨骨折伴心肌损伤的模型;(2)实验分组... 目的探讨HMGB1-TLR4-MyD88-NF-κB信号通路在胸部创伤多发肋骨骨折后心肌损伤的调节机制,观察心肌损伤后炎性细胞因子IL-4、IL-6、IL-10表达变化。方法(1)根据自由落体原理自制大鼠胸部创伤后多发肋骨骨折伴心肌损伤的模型;(2)实验分组:①对照组;②创伤后4h组、创伤后8h组、创伤后12h组;各组雄性大鼠10只。检测各组心肌组织TLR4、MyD88、NF-κBp65、P-NF-κBp65蛋白含量;检测血浆心肌损伤标志物肌钙蛋白I(cTnI)、HMGB1、IL-4、IL-6、IL-10水平变化。结果与对照组比较,创伤后4h心肌组织TLR4、MyD88、P-NF-κBp65即开始上升;创伤后随时间延长表达明显增高(P<0.05),NF-κBp65无明显的变化;血浆TnI、HMGB1、IL-6水平与对照组比较,创伤后4h即开始上升;且随时间延长表达明显增强(P<0.05),但IL-4、IL-10无明显的上升。结论内源性危险分子HMGB1于胸部创伤后明显表达上升,激活TLR4-MyD88-NF-κB信号通路,同时刺激前炎症细胞因子IL-6等大量释放,加重心肌损伤。 展开更多
关键词 HMGb1-tlr4-myd88-nf-κb信号通路 胸部创伤 心肌损伤 免疫调节
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卡维地洛对肝纤维化动物模型TLR4-MyD88-NF-κB信号通路的影响及其抗肝纤维化的作用机制 被引量:4
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作者 陈建勇 郝芳艳 +2 位作者 林近秋 田晓鹏 王素格 《新疆医科大学学报》 CAS 2021年第7期771-776,共6页
目的探讨卡维地洛对肝纤维化动物模型TLR4-MyD88-NF-κB信号通路的影响及其抗肝纤维化的作用机制。方法将60只SD大鼠作为研究对象,随机分为空白对照组、模型组以及低、中、高剂量卡维地洛组,每组各12只。采用胆总管结扎法建立模型组和... 目的探讨卡维地洛对肝纤维化动物模型TLR4-MyD88-NF-κB信号通路的影响及其抗肝纤维化的作用机制。方法将60只SD大鼠作为研究对象,随机分为空白对照组、模型组以及低、中、高剂量卡维地洛组,每组各12只。采用胆总管结扎法建立模型组和卡维地洛组大鼠的肝纤维化模型,并于造模成功后48 h开始,低、中、高剂量卡维地洛组每天分别灌胃给药药液0.5、1.0、1.5 mg/kg;空白对照组和模型组灌胃等量蒸馏水。干预4 w后比较各组大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)水平、炎症因子[白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平以及肝纤维化血清指标[羟脯氨酸(Hyp)、层黏连蛋白(LN)、III型前胶原肽(PIIINP)]水平。并取出每组大鼠的肝脏左叶组织进行切片,采用常规HE染色和Masson三色染色后于显微镜下观察对比肝脏纤维化程度;采用Westernblot法检测各组大鼠肝组织中NF-κB与TLR4/MyD88蛋白表达水平;采用实时定量PCR法检测NF-κB与TLR4/MyD88 mRNA水平。结果HE及Masson三色染色结果显示模型组大鼠肝纤维模型造模成功,与空白对照组比较,模型组IL-1、IL-6、TNF-α、ALT、AST以及Hyp、LN、PIIINP水平明显升高(P<0.05),ALB水平水平明显下降(P<0.05);干预4 w后,低、中、高剂量卡维地洛组大鼠血清ALT、AST、炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α水平以及Hyp、LN、PIIINP相比模型组明显下降(P<0.05),ALB水平明显上升(P<0.05),且随着给药剂量增加,各因子水平改善更显著。模型组大鼠TLR4、MyD88和NF-κB蛋白及mRNA表达水平相比空白对照组明显升高(P<0.05)。不同剂量卡维地洛干预后,随着剂量增加,TLR4、MyD88和NF-κB蛋白及mRNA表达水平逐渐降低(P<0.05)。结论卡维地洛可能通过调控TLR4-MyD88-NF-κB信号通路调控TLR4、MyD88以及NF-κB蛋白表达,发挥抑制肝脏炎症反应和抗纤维作用,从而改善肝纤维化程度。 展开更多
关键词 卡维地洛 肝纤维化 tlr4-myd88-nf-κb信号通路 抗肝纤维化
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哮喘丸抑制顽固性咳嗽及其对TLR4-MyD88-NF-κBp65信号通路的调控作用 被引量:6
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作者 彭冬冬 刘学武 +2 位作者 张丹 姜德建 王菲 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期774-781,共8页
目的:咳嗽变异性哮喘是顽固性咳嗽的主要病因。观察哮喘丸对咳嗽变异性哮喘大鼠的治疗效果,并进一步探讨其作用机制。方法:选用4%鸡蛋清白蛋白和2%的Al(OH)3共同致敏大鼠,建立咳嗽变异性哮喘大鼠模型。模型大鼠分别灌胃给予低、中、高剂... 目的:咳嗽变异性哮喘是顽固性咳嗽的主要病因。观察哮喘丸对咳嗽变异性哮喘大鼠的治疗效果,并进一步探讨其作用机制。方法:选用4%鸡蛋清白蛋白和2%的Al(OH)3共同致敏大鼠,建立咳嗽变异性哮喘大鼠模型。模型大鼠分别灌胃给予低、中、高剂量(0.9,1.8,3.6 g/kg)哮喘丸或孟鲁司特钠,每天1次,连续14 d,并于干预7,14 d后从各组分别随机取5,10只大鼠用于采集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)和气管、肺组织。对BALF中的白细胞及嗜酸性粒细胞计数;采用ELISA试剂盒检测各组大鼠BALF中IFN-γ,IL-1β,TNF-α的水平;对各组大鼠肺组织行病理学检查,观察其组织形态学变化;采用蛋白质印迹法检测各组大鼠肺组织中TLR4,MyD88,NF-κBp65和p-p65的蛋白质表达。结果:哮喘丸能明显减少变异性哮喘模型大鼠BALF中白细胞及嗜酸性粒细胞的数目(P<0.05或P<0.01),并能改善气管及支气管黏膜上皮增生和肺组织炎症细胞浸润程度;干预14 d,与模型对照组比较,哮喘丸高剂量组IFN-γ水平明显升高(P<0.01),IL-1β和TNF-α水平明显降低(均P<0.05),大鼠肺组织TLR4,MyD88,p-p65及p65的蛋白质表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:哮喘丸对大鼠顽固性咳嗽具有治疗作用,其作用机制可能与调控气道TLR4-MyD88-NF-κBp65信号通路,调节炎症和免疫反应有关。 展开更多
关键词 哮喘丸 顽固性咳嗽 咳嗽变异性哮喘 tlr4-myd88-nf-κbp65信号通路
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葛根素通过调节TLR4-MyD88-NF-κB信号通路对糖尿病小鼠肾损伤的改善作用
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作者 尧献赏 邓旺生 +5 位作者 徐小惠 张晓琳 吴娅妮 庞小红 黄建春 卢顺玉 《广西医科大学学报》 CAS 2023年第11期1771-1777,共7页
目的:研究葛根素(puerarin)通过调节TLR4-MyD88-NF-κB信号通路对糖尿病小鼠肾损伤的改善作用。方法:小鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建糖尿病小鼠模型,分为糖尿病模型组(模型组)、二甲双胍组、葛根素组,另设正常对照组。正常对照组和模... 目的:研究葛根素(puerarin)通过调节TLR4-MyD88-NF-κB信号通路对糖尿病小鼠肾损伤的改善作用。方法:小鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建糖尿病小鼠模型,分为糖尿病模型组(模型组)、二甲双胍组、葛根素组,另设正常对照组。正常对照组和模型组小鼠灌胃予生理盐水,二甲双胍组灌胃予二甲双胍320 mg/kg·d^(-1),葛根素组腹腔注射葛根素65 mg/kg·d^(-1),各实验组共干预4周。每周测定各组小鼠的空腹血糖(FBG),称量体重,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组小鼠血清肌酐、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),苏木精—伊红(HE)染色观察小鼠肾组织病理损伤情况,免疫组化观察Toll样受体-4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子κB(NF-κB)蛋白在肾组织的表达水平。结果:与正常对照组比较,模型组FBG、肌酐、IL-6、TNF-α水平明显升高(P<0.05),肾小球增大,肾组织正常结构被破坏,肾小球基底膜增厚,且肾组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达增多(P<0.05);与模型组比较,葛根素组的FBG、Scr、IL-6、TNF-a的含量明显降低(P<0.05),减轻肾组织损伤,肾组织TLR4、MyD88、NF-κB表达减少(P<0.05)。结论:葛根素对糖尿病小鼠肾损伤具有明显的改善作用,可能与其调控TLR4-MyD88-NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 葛根素 糖尿病肾损伤 tlr4-myd88-nf-κb信号通路
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Phycocyanin attenuates X-ray-induced pulmonary inflammation via the TLR2-MyD88-NF-κB signaling pathway 被引量:2
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作者 LIU Qi LI Wenjun +3 位作者 LU Lina LIU Bin DU Zhenning QIN Song 《Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2019年第5期1678-1685,共8页
Phycocyanin (PC), a natural algal protein, is reported for having anti-oxidant and antiinfl ammatory properties. We investigated its ability to attenuate lung infl ammation in mice subjected to X-ray radiation. Male C... Phycocyanin (PC), a natural algal protein, is reported for having anti-oxidant and antiinfl ammatory properties. We investigated its ability to attenuate lung infl ammation in mice subjected to X-ray radiation. Male C57BL/6 mice were assigned to the control, total body irradiation, PC pretreatment, and PC treatment groups. Mice in the PC pretreatment group were gavaged with 200 mg/kg PC for 7 consecutive days before irradiation, and those in the PC treatment group were gavaged with 200 mg/kg PC for 7 consecutive days after irradiation. Lungs were collected on Day 7 after irradiation exposure. Hematoxylin and eosin staining of mouse lung sections showed considerable infl ammation damage 7 days after irradiation compared with the control lung but a reduction in pathological injury in the PC treatment group. Pretreatment or treatment with PC signifi cantly decreased levels of interleukin-6 and tumor necrosis factor-α in the lung, and also increased the relative mRNA expression of superoxide dismutase and glutathione. In vivo, PC signifi cantly reduced the expression of Toll-like receptor TLR2, myeloid diff erentiation primary response Myd88, and nuclear factor NF-κB, at both the transcriptional and translation level. Taken together, these data indicated that PC attenuated lung infl ammatory damage induced by radiation by blocking the TLR2- MyD88-NF-κB signaling pathway. Therefore, PC could be a protective agent against radiation-induced infl ammatory damage in normal tissues. 展开更多
关键词 PHYCOCYANIN infl ammatory tlr2-myd88-nf-κb SIGNALING PATHWAY
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基于TLR4/MyD88/NF-κB与p38 MAPK信号通路研究麻杏石甘汤减轻咳嗽变异性哮喘大鼠炎症反应的作用及机制 被引量:4
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作者 付智慧 周霖 聂安政 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1000-1006,共7页
探讨麻杏石甘汤对咳嗽变异性哮喘(CVA)大鼠炎症反应的作用及机制。6~8周龄SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、孟鲁司特钠组以及麻杏石甘汤低、中、高剂量组,每组8只;采用卵蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)_(3)]致敏并用OVA激发的方法复制... 探讨麻杏石甘汤对咳嗽变异性哮喘(CVA)大鼠炎症反应的作用及机制。6~8周龄SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、孟鲁司特钠组以及麻杏石甘汤低、中、高剂量组,每组8只;采用卵蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)_(3)]致敏并用OVA激发的方法复制大鼠CVA模型,正常组、模型组给予等体积生理盐水灌胃,各受试药组给予相应药物灌胃。实验结束后,检测各组大鼠血液白细胞计数,血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化;蛋白免疫印迹法检测肺组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)和磷酸化核转录因子-κB p65(p-p65)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)水平,实时荧光定量分析法检测肺组织中TLR4、MyD88 mRNA表达水平。结果显示,与正常组比较,模型组大鼠具有明显哮喘表型,血液白细胞计数和IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.01),IL-10水平显著降低(P<0.01),气道周围炎症细胞浸润明显,细胞排列紊乱,肺组织中TLR4、MyD88、p-p65/NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK水平以及TLR4、MyD88 mRNA水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,孟鲁司特钠组、麻杏石甘汤高剂量组白细胞计数和IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.01),IL-10水平显著升高(P<0.01),气道炎症细胞浸润、细胞排列紊乱程度明显减轻,肺组织中TLR4、MyD88、p-p65/NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK水平以及TLR4、MyD88 mRNA水平显著降低(P<0.01)。与孟鲁司特钠组比较,麻杏石甘汤高剂量组大鼠血液白细胞数,血清中IL-10和TNF-α含量,肺组织中TLR4、MyD88、p-p65/NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK水平及TLR4、MyD88 mRNA水平,均无显著差异。麻杏石甘汤具有抑制CVA大鼠气道炎症反应的作用,其作用机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB以及p38 MAPK信号通路的激活相关。 展开更多
关键词 麻杏石甘汤 咳嗽变异性哮喘 炎症反应 tlr4/MyD88/NF-κb信号通路 p38 mapk信号通路
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miR-203下调TLR4-Myd88-NF-κB信号通路诱导M2型巨噬细胞极化 被引量:4
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作者 李登 沙明磊 +2 位作者 陈磊 赵圣 邵怡 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第17期3201-3208,共8页
目的:验证miR-203通过与TLR4 mRNA的3'-UTR特异性结合下调TLR4-Myd88-NF-κB信号通路诱导M2型巨噬细胞极化。方法:通过miRanda软件预测TLR4 mRNA 3'-UTR存在mi R-203结合位点。根据TLR4 mRNA 3'-UTR序列设计目的基因片段以... 目的:验证miR-203通过与TLR4 mRNA的3'-UTR特异性结合下调TLR4-Myd88-NF-κB信号通路诱导M2型巨噬细胞极化。方法:通过miRanda软件预测TLR4 mRNA 3'-UTR存在mi R-203结合位点。根据TLR4 mRNA 3'-UTR序列设计目的基因片段以及突变型目的基因片段,以pmirGLO为载体构建双荧光素酶报告基因野生型载体(pmirGLO-TLR4 3'-UTR)及其突变型载体(pmirGLO-mut-TLR4 3'-UTR)。将293T细胞共转染pmirGLO-TLR4 3'-UTR质粒或pmirGLO-mut-TLR4 3'-UTR质粒及mmu-mi R-203-3p mimics或mimic NC,通过双荧光素酶报告基因系统验证mi R-203可以与TLR4 m RNA的3'-UTR特异性结合,通过Real-time PCR及Western blot验证小鼠巨噬细胞RAW264.7转染了mmu-miR-203-3p mimics、mimic NC后,M1型巨噬细胞markers (i NOS, TNF-α, CCL-3, IL-23),M2型巨噬细胞markers (Arg-1, CX3CR1, IL-4, MRC, IL-10, Ym-1)及TLR4-Myd88-NF-κB信号通路的表达。使用TLR4抑制剂TAK-242抑制小鼠巨噬细胞TLR4-Myd88-NF-κB信号通路后,转染mmu-miR-203-3p mimics、mimic NC,再次检测M1,M2型巨噬细胞markers及TLR4-Myd88-NF-κB信号通路的表达。结果:双荧光素酶报告基因系统显示293T细胞转染了pmirGLO-TLR4 3'-UTR质粒及mmu-miR-203-3p mimics后,其相对荧光素酶活性△CT较转染了pmirGLO-mut-TLR4 3'-UTR质粒或者mimic NC均有显著降低,其差异达到统计学意义(P<0.05)。Real-time PCR及Western blot显示转染了mmu-miR-203-3p mimics的小鼠巨噬细胞M1型巨噬细胞markers (i NOS, TNF-α, CCL-3, IL-23)表达减少,M2型巨噬细胞markers (Arg-1, CX3CR1, IL-4, MRC, IL-10, Ym-1)表达增加,同时伴有TLR4-Myd88-NF-κB信号通路表达下调,而通过给予TAK-242抑制了mmu-miR-203-3p mimics下调TLR4-Myd88-NF-κB信号通路及诱导M2型巨噬细胞极化的作用。结论:mi R-203与TLR4 m RNA的3'-UTR特异性结合下调TLR4-Myd88-NF-κB信号通路诱导M2型巨噬细胞极化。 展开更多
关键词 miR-203 RAW264.7 双荧光素酶报告基因系统 巨噬细胞极化 tlr4-myd88-nf-κb
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木丹颗粒对糖尿病周围神经病变大鼠TLR4相关通路的调控作用研究 被引量:5
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作者 周密 姚伟洁 《西部中医药》 2021年第10期52-56,共5页
目的:探讨木丹颗粒对糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)大鼠坐骨神经Toll样受体4(toll-like receptor-4,TLR4)蛋白相关通路的调控作用。方法:将SD雄性大鼠随机分为空白对照组和高糖组,高糖组制备糖尿病模型,并分... 目的:探讨木丹颗粒对糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)大鼠坐骨神经Toll样受体4(toll-like receptor-4,TLR4)蛋白相关通路的调控作用。方法:将SD雄性大鼠随机分为空白对照组和高糖组,高糖组制备糖尿病模型,并分为模型组,α-硫辛酸组和木丹颗粒组,给予相应药物干预12周后,收集大鼠腹主动脉血制备血清,采用酶联免疫吸附剂法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)和白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)含量,收集坐骨神经用于RT-PCR法、免疫荧光化学法和Western blot法测定Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38 MAPK)的mRNA和蛋白表达,电镜下观察大鼠主骨神经髓鞘结构形态。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠神经传导速度(nerve conduction velocity,NCV)显著降低(P<0.05),鼠尾热痛阈值(thermal pain threshold,TPT)显著升高(P<0.05),坐骨神经出现脱髓鞘现象;血清中炎症因子TNF-α和IL-6含量显著升高(P<0.05),坐骨神经中TLR4、MyD88、NF-κB和p38 MAPK的mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,木丹颗粒组大鼠NCV显著升高(P<0.05),TPT显著降低(P<0.05);脱髓鞘现象显著改善;血清中炎症因子TNF-α和IL-6含量显著降低(P<0.05),坐骨神经中TLR4、MyD88、NF-κB和p38 MAPK的mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.05)。结论:木丹颗粒能够通过调控TLR4/MyD88/NF-κB通路和TLR4/p38 MAPK通路改善炎症反应,改善周围神经功能的损伤,从而防治DPN。 展开更多
关键词 糖尿病周围神经病变 木丹颗粒 tlr4/MyD88/NF-κb通路 tlr4/p38 mapk通路 动物实验
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Elaidic acid-induced intestinal barrier damage led to gut-liver axis derangement and triggered NLRP3 inflammasome in the liver of SD rats
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作者 Hui Liu Xuenan Li +5 位作者 Lu Li Yucai Li Haiyang Yan Yong Pang Wenliang Li Yuan Yuan 《Food Science and Human Wellness》 SCIE CSCD 2024年第3期1279-1291,共13页
Previous studies have shown that trans fatty acids(TFA) are associated with several chronic diseases,the gut microbiota is directly influenced by dietary components and linked to chronic diseases.Our research investig... Previous studies have shown that trans fatty acids(TFA) are associated with several chronic diseases,the gut microbiota is directly influenced by dietary components and linked to chronic diseases.Our research investigated the effects of elaidic acid(EA),a typical TFA,on the gut microbiota to understand the underlying mechanisms of TFA-related chronic diseases.16S rDNA gene sequencing on faecal samples from Sprague-Dawley rats were performed to explore the composition change of the gut microbiota by EA gavage for 4 weeks.The results showed that the intake of EA increased the abundance of well-documented harmful bacteria,such as Proteobacteria,Anaerotruncus,Oscillibacter and Desulfovibrionaceae.Plus,EA induced translocation of lipopolysaccharides(LPS) and the above pathogenic bacteria,disrupted the intestinal barrier,led to gut-liver axis derangement and TLR4 pathway activation in the liver.Overall,EA induced intestinal barrier damage and regulated TLR4-MyD88-NF-κB/MAPK pathways in the liver of SD rats,leading to the activation of NLRP3 inflammasome and inflammatory liver damage. 展开更多
关键词 Elaidic acid(EA) Gut microbiota Intestinal barrier Gut-liver axis tlr4-myd88-nf-κb/mapk pathways NLRP3 inflammasome
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高糖对HK-2细胞缺氧复氧损伤的影响及TLR7-MyD88-NF-κB信号通路的作用 被引量:1
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作者 黄亚医 赵博 +3 位作者 汪华新 刘康 周芳 肖业达 《现代医学》 2018年第1期11-14,共4页
目的:探讨高糖对HK-2细胞缺氧复氧损伤的影响及TLR7-My D88-NF-κB信号通路的作用。方法:随机将人肾小管上皮细胞(HK-2)分为低糖组(LG组)、低糖缺氧复氧组(LH/R组)、高糖组(HG组)及高糖缺氧复氧组(HH/R组)4组,每组n=6。采用高糖刺激72 ... 目的:探讨高糖对HK-2细胞缺氧复氧损伤的影响及TLR7-My D88-NF-κB信号通路的作用。方法:随机将人肾小管上皮细胞(HK-2)分为低糖组(LG组)、低糖缺氧复氧组(LH/R组)、高糖组(HG组)及高糖缺氧复氧组(HH/R组)4组,每组n=6。采用高糖刺激72 h建立高糖模型,缺氧4 h复氧2 h建立缺氧复氧模型。采用CCK-8和LDH释放实验检测细胞活性,ELISA法检测细胞IL-6和TNF-α水平,免疫荧光法检测肾脏细胞TLR7、My D88和NF-κB蛋白的表达。结果:与LG组相比,LH/R组、HG组、HH/R组的CCK-8活性下降,LDH、IL-6、TNF-α、TLR7、My D88及NF-κB蛋白表达增加(均P<0.05);与LH/R组相比,HG组LDH、IL-6、TLR7、My D88及NF-κB蛋白表达增加(均P<0.05),HH/R组CCK-8活性下降,LDH、IL-6、TNF-α、TLR7、My D88及NF-κB蛋白表达增加(均P<0.05);与HG组相比,HH/R组CCK-8活性下降,LDH、IL-6、TNF-α、TLR7、My D88及NF-κB蛋白表达增加(均P<0.05)。与HG组相比,HH/R组My D88及NF-κB蛋白表达增加(均P<0.05)。结论:TLR7-My D88-NF-κB信号通路激活参与了HK-2细胞的缺氧复氧损伤,高糖导致该损伤进一步加重。 展开更多
关键词 高糖 缺氧复氧 tlr7-myd88-nf-κb
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艾灸对类风湿性关节炎大鼠关节滑膜组织Toll样受体4-骨髓样分化因子88-核转录因子-κB信号通路的影响 被引量:61
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作者 袁娟 胡玲 +4 位作者 宋小鸽 唐照亮 张传英 余爽 尤元梅 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期199-204,共6页
目的:观察艾灸对类风湿性关节炎(RA)大鼠关节滑膜组织Toll样受体4-骨髓样分化因子88-核转录因子-κB(TLR 4-MyD 88-NF-κB)信号通路的影响,进一步探讨艾灸治疗RA的作用机制。方法 :40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组和药物组,每... 目的:观察艾灸对类风湿性关节炎(RA)大鼠关节滑膜组织Toll样受体4-骨髓样分化因子88-核转录因子-κB(TLR 4-MyD 88-NF-κB)信号通路的影响,进一步探讨艾灸治疗RA的作用机制。方法 :40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组和药物组,每组10只。采用风、寒、湿环境因素结合弗氏完全佐剂的方法复制RA模型。艾灸组以艾条悬灸大鼠"足三里""肾俞"穴,每天1次,连续治疗15d。药物组以雷公藤溶液灌胃(8.75mL/kg),每天1次,共15d。观察关节滑膜组织病理形态学变化,放射免疫法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)含量,实时荧光定量PCR方法检测滑膜组织TLR 4、MyD 88、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)mRNA的表达,免疫组化方法检测NF-κB p 65的表达。结果:与正常组比较,模型组滑膜组织有明显的病理改变,大量单核细胞及淋巴细胞等炎性细胞浸润,滑膜表面不整齐,滑膜增生变厚;与模型组比较,艾灸组和药物组均能明显缓解炎性细胞对滑膜的浸润,改善滑膜细胞增生反应。与正常组比较,模型组血清TNF-α、IL-1含量升高(P<0.01),滑膜TLR 4mRNA、MyD 88mRNA、TRAF-6mRNA及NF-κB p 65表达均升高(P<0.01);与模型组比较,艾灸组和药物组血清中TNF-α、IL-1含量降低(P<0.01),滑膜TLR 4mRNA、MyD 88mRNA、TRAF-6mRNA及NF-κB p 65表达均降低(P<0.01,P<0.05)。结论:艾灸具有调节细胞因子的作用,其机制可能与艾灸抑制滑膜组织TLR 4-MyD 88-NF-κB信号通路的异常激活有关。 展开更多
关键词 艾灸 类风湿性关节炎 滑膜组织 tlr 4-myd 88-nf-κb通路
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短穗兔耳草中3个化合物对大鼠慢性酒精性肝损伤合并痛风性关节炎的作用及其机制研究
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作者 朱继孝 周琳 +2 位作者 张初玲 熊雯雯 程虹毓 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期822-831,共10页
目的通过建立大鼠慢性酒精性肝损伤合并痛风性关节炎模型,研究槲皮素、松果菊苷和芹菜素对p38MAPK/JNK、TLR4/MyD88/NF-κB和NLRP3信号通路的影响,探讨短穗兔耳草中单体化合物抗慢性酒精性肝损伤合并痛风性关节炎的作用机制。方法将80... 目的通过建立大鼠慢性酒精性肝损伤合并痛风性关节炎模型,研究槲皮素、松果菊苷和芹菜素对p38MAPK/JNK、TLR4/MyD88/NF-κB和NLRP3信号通路的影响,探讨短穗兔耳草中单体化合物抗慢性酒精性肝损伤合并痛风性关节炎的作用机制。方法将80只大鼠随机分为正常组,模型组,联苯双酯组(100 mg·kg^(-1)),秋水仙碱组(0.3 mg·kg^(-1))及槲皮素(50、25 mg·kg^(-1))、松果菊苷(50、25 mg·kg^(-1))、芹菜素(50、25 mg·kg^(-1))各剂量组。每日上午按10 mL·kg^(-1)给药,下午以4 mL·kg^(-1)开始梯度给56度红星二锅头,每周增加2 mL·kg^(-1),直至10 mL·kg^(-1)保持,连续灌胃8周。于灌胃第53天复制痛风性关节炎模型,检测各时间段足趾容积。第8周末次给药后取血,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)水平、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG);酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素1β(IL-1β);蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测肝脏和滑膜中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子κB(NF-κB)、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组各时间段大鼠足肿胀度均明显升高(P<0.05,P<0.01);血清中ALT、AST、ALP、TC、TG、IL-1β水平均明显升高(P<0.01);肝组织和滑膜组织中p-p38MAPK、p-JNK、MyD88、p-NF-κB、TLR4、NLRP3蛋白表达水平均有不同程度升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组在24 h足肿胀度呈现明显下降趋势(P<0.01);各给药组ALT、TC水平有不同程度下降(P<0.05,P<0.01);除松果菊苷低剂量组外,各给药组AST、ALP水平有不同程度下降(P<0.01);除槲皮素高剂量组外,各给药组TG水平有不同程度下降(P<0.01);各组大鼠肝脏组织及滑膜组织中p-p38MAPK、p-JNK、MyD88、p-NF-κB、TLR4、NLRP3蛋白表达量均下调(P<0.05,P<0.01)。结论短穗兔耳草中单体对慢性酒精性肝损伤合并痛风性关节炎大鼠模型表现出一定的异病同治的治疗效果,其可能是基于p38MAPK/JNK、TLR4/MyD88/NF-κB和NLRP3信号通路发挥治疗作用的。 展开更多
关键词 短穗兔耳草 槲皮素 松果菊苷 芹菜素 慢性酒精性肝损伤 痛风性关节炎 p38mapk/JNK tlr4/MyD88/NF-κb NLRP3 大鼠
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滋肾丸含药血清对大鼠膀胱平滑肌细胞Toll样受体及其下游信号转导通路的影响 被引量:1
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作者 吴酉霆 梁国强 +2 位作者 倪道磊 金伟民 蒋春波 《长春中医药大学学报》 2017年第2期212-214,共3页
目的观察滋肾丸含药血清对脂多糖(LPS)刺激的大鼠膀胱平滑肌细胞表达Toll样受体4(TLR4)、Toll样受体5(TLR5)及其下游信号转导通路髓样分化蛋白(MyD88),以及MYD88非依赖型途径激活核因子-κB(NF-κB)蛋白表达的影响。方法用LPS(1μg/m L... 目的观察滋肾丸含药血清对脂多糖(LPS)刺激的大鼠膀胱平滑肌细胞表达Toll样受体4(TLR4)、Toll样受体5(TLR5)及其下游信号转导通路髓样分化蛋白(MyD88),以及MYD88非依赖型途径激活核因子-κB(NF-κB)蛋白表达的影响。方法用LPS(1μg/m L)刺激大鼠膀胱平滑肌细胞株,同时分别给予滋肾丸含药血清5.54、27.7 g/(kg.U)进行干预,Western-blot方法测定TLR4,TLR5和下游通路相关蛋白的表达,分析评价滋肾丸含药血清的现代药效学基础。结果滋肾丸含药血清27.7 g/(kg.U)对LPS刺激的TLR4、TLR5及其下游通路的MyD88和NF-κB有抑制作用,滋肾丸含药血清5.54 g/(kg.U)对LPS刺激的病理性升高无抑制作用。结论滋肾丸的药效学作用可能与抑制TLR4、TLR、MyD88和NF-κB蛋白表达有关,且与剂量呈依赖性。 展开更多
关键词 滋肾丸 膀胱平滑肌细胞 tlr4/tlr5 MyD88-nf-κb
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