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TRESK介导mTOR信号通路对谷氨酸诱导脊髓神经元细胞凋亡的影响 被引量:4
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作者 高润兴 林文静 +5 位作者 何万友 黄振兴 仲吉英 王汉兵 杨承祥 周俊 《广东医学》 CAS 北大核心 2017年第24期3762-3766,共5页
目的观察TRESK介导mTOR信号通路对谷氨酸诱导脊髓神经元细胞凋亡的影响。方法脊髓原代神经元细胞接种于培养孔或培养皿中。采用随机数字表法,将其随机分为4组,每组48孔和18皿:空白对照组(C组)、谷氨酸处理组(G组)、谷氨酸+TRESK siRNA组... 目的观察TRESK介导mTOR信号通路对谷氨酸诱导脊髓神经元细胞凋亡的影响。方法脊髓原代神经元细胞接种于培养孔或培养皿中。采用随机数字表法,将其随机分为4组,每组48孔和18皿:空白对照组(C组)、谷氨酸处理组(G组)、谷氨酸+TRESK siRNA组(Glu+T组)和谷氨酸+TRESK siRNA+mTOR特异性抑制剂组(Glu+T+m组)。C组不予任何处理;G组谷氨酸(100μmol/L)处理24 h;Glu+T组使用TRESK siRNA转染神经元细胞后,谷氨酸(100μmol/L)处理24 h;Glu+T+m组使用TRESK siRNA转染神经元细胞后,终浓度为20 nmol/L的mTOR特异性抑制剂Rapamycin(Rapa)预处理20 min后再用谷氨酸(100μmol/L)处理24 h。各组谷氨酸处理24 h后,测定神经元凋亡率、cleaved Caspase3和Bax蛋白的表达水平,测定mTOR磷酸化水平及TRESK mRNA表达。结果与C组比较,G组大鼠脊髓神经元活力降低,细胞凋亡率升高,cleaved Caspase3和Bax蛋白表达上调(P<0.05);与G组比较,Glu+T组大鼠脊髓神经元活力降低,细胞凋亡率升高,cleaved Caspase3和Bax蛋白表达增加(P<0.05);与Glu+T组比较,Glu+T+m组大鼠脊髓神经元活力升高,细胞凋亡率下降,cleaved Caspase3和Bax蛋白表达减少(P<0.05)。与C组比较,G组脊髓神经元TRESK mRNA表达明显上调(P<0.05);与G组比较,Glu+T组大鼠脊髓神经元TRESK mRNA表达明显下调(P<0.05)。与C组比较,G组脊髓神经元mTOR磷酸化水平表达明显增加(P<0.05);与G组比较,Glu+T组脊髓神经元mTOR磷酸化水平表达明显增加(P<0.05);与Glu+T组比较,Glu+T+m组脊髓神经元mTOR磷酸化水平表达明显减少(P<0.05)。结论 TRESK介导mTOR信号通路抑制谷氨酸诱导脊髓神经元凋亡。 展开更多
关键词 tresk 脊髓 神经元 凋亡 MTOR 谷氨酸
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鞘内注射TRESK过表达腺病毒抑制JNK活化和神经元凋亡减轻神经病理性疼痛 被引量:2
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作者 熊艳峰 林文静 +6 位作者 林森 黄振兴 黄腾 王汉兵 杨承祥 仲吉英 周俊 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第1期30-33,共4页
目的观察鞘内注射TRESK过表达腺病毒对神经病理性疼痛大鼠背根神经节JNK磷酸化和神经元凋亡的影响。方法健康雄性SD大鼠72只,随机分为6组(n=12):空白对照组(C组)、假手术组(S组)、神经病理性疼痛组(NP组)、TRESK过表达腺病毒组(T组)、... 目的观察鞘内注射TRESK过表达腺病毒对神经病理性疼痛大鼠背根神经节JNK磷酸化和神经元凋亡的影响。方法健康雄性SD大鼠72只,随机分为6组(n=12):空白对照组(C组)、假手术组(S组)、神经病理性疼痛组(NP组)、TRESK过表达腺病毒组(T组)、阴性腺病毒组(V组)和生理盐水组(NS组)。NP组、T组、V组和NS组采用坐骨神经分支选择性损伤(SNI)大鼠模型。T组、V组和NS组于造模后分别在鞘内注射TRESK基因重组腺病毒、阴性腺病毒和等容量生理盐水。分别于造模前1 d(基础状态,BL)和造模后1、3、7、14 d(D1、D3、D7、D14),测定机械刺激缩足阈(MWT)和热刺激缩足潜伏期(TWL);D7时每组处死6只大鼠,检测背根神经节TRESK蛋白表达;D14时每组处死剩余6只大鼠,观察DRG神经元凋亡情况、Caspase-3蛋白表达和JNK磷酸化水平。结果与C组、S组、T组相比,NP组、V组和NS组L4,5术侧DRG的TRESK蛋白表达明显降低(P<0.05)。与C组、S组相比,NP组、T组、V组和NS组D1、D3、D7、D14时的MWT明显降低(P<0.05)、L4,5DRG的JNK磷酸化水平明显增高(P<0.05)、L4,5DRG的细胞凋亡率和Caspase-3表达明显增高(P<0.05);与NP组、V组、NS组相比,TRESK组D1、D3、D7、D14时的MWT的明显升高(P<0.05)、L4,5DRG的JNK磷酸化水平明显降低(P<0.05)、细胞凋亡率和Caspase-3表达明显降低(P<0.05)。鞘内注射TRESK过表达腺病毒可明显减轻SNI大鼠的机械痛敏、明显上调SNI大鼠DRG的TRESK表达、明显降低SNI大鼠DRG的JNK磷酸化和神经元凋亡。结论鞘内注射TRESK过表达腺病毒可通过抑制JNK活化和神经元凋亡减轻神经病理性疼痛。 展开更多
关键词 tresk 背根神经节 C-JUN氨基末端激酶 凋亡 神经病理性疼痛
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鞘内注射TRESK-shRNA慢病毒对大鼠痛阈及脊髓JNK磷酸化的影响 被引量:1
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作者 周俊 林文静 +6 位作者 林森 何万友 黄振兴 黄腾 仲吉英 王汉兵 杨承祥 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第21期3173-3176,共4页
目的评价鞘内注射TRESK—shRNA慢病毒对大鼠痛闽及脊髓JNK磷酸化的影响。方法健康雄性SD大鼠,体质量200—250g,进行鞘内置管术。取鞘内置管成功的大鼠36只,采用随机数字表法分为3组(n=12):空白对照组(C组)、TRESK—shRNA慢病毒... 目的评价鞘内注射TRESK—shRNA慢病毒对大鼠痛闽及脊髓JNK磷酸化的影响。方法健康雄性SD大鼠,体质量200—250g,进行鞘内置管术。取鞘内置管成功的大鼠36只,采用随机数字表法分为3组(n=12):空白对照组(C组)、TRESK—shRNA慢病毒组(TRESK组)和阴性慢病毒组(V组)。TRESK组和V组分别鞘内注射TRESK—shRNA慢病毒和阴性慢病毒,10灿慢病毒,病毒滴度为1×10^8IFU/mL,1次/d,连续7d;C组于相同时点鞘内注射10μL生理盐水。各组大鼠分别于鞘内注射前1d(TO)及鞘内注射1d(T1)、3d(T2)、5d(T3)、7d(T4)测定机械刺激缩足阈(MWT)和热刺激缩足潜伏期(TWL)。鞘内注射7d疼痛行为学测定结束后处死大鼠,取L4-5段背根神经节(DRG)和脊髓组织,reahimePCR检测背根神经节TRESKmRNA表达,Western blot检测脊髓JNK磷酸化水平。结果TRESK组乃、T4时的MWT明显低于C组(P〈0.05)。与C组相比,TRESK组L4-5,术侧DRG的TRESKmRNA表达明显降低(P〈0.05)。与C组相比,TRESK组L4~5脊髓的JNK磷酸化水平明显增高(P〈0.05)。结论鞘内注射TRESK—shRNA慢病毒可降低大鼠的机械痛阈,可能与激活脊髓JNK磷酸化有关。 展开更多
关键词 tresk 背根神经节 脊髓 JNK
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骨癌痛大鼠脊髓背角TRESK表达水平的变化 被引量:1
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作者 张登文 吴焕兵 +5 位作者 张传汉 夏辉 徐林 姚文龙 田玉科 王学仁 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期127-129,142,共4页
目的探讨骨癌痛大鼠脊髓背角神经元双孔钾离子通道TRESK(TWIK-related spinal cord K+channel,TRESK)表达水平的变化。方法雌性SD大鼠(体重150~180g),随机分为假手术组(Sham组)和骨癌痛组(BCP组)。在术前1d、术后3、5、9、14d分别测量... 目的探讨骨癌痛大鼠脊髓背角神经元双孔钾离子通道TRESK(TWIK-related spinal cord K+channel,TRESK)表达水平的变化。方法雌性SD大鼠(体重150~180g),随机分为假手术组(Sham组)和骨癌痛组(BCP组)。在术前1d、术后3、5、9、14d分别测量各组大鼠机械缩足阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)的变化,于第14天取腰段脊髓免疫荧光染色及Western blot检测各组大鼠腰段脊髓背角神经元TRESK的表达变化。结果手术前两组大鼠MWT值差异无统计学意义(P>0.05);BCP组在手术后5dMWT值开始降低,与Sham组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光染色显示TRESK的表达主要位于脊髓背角。Western blot检测结果显示,BCP组的TRESK蛋白表达较Sham组明显减少(P<0.05)。结论骨癌痛大鼠脊髓背角神经元TRESK表达降低,这种表达的改变可能与骨癌痛发生机制相关。 展开更多
关键词 骨癌痛 tresk 脊髓背角
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Roles of TRESK,a novel two-pore domain K+channel,in pain pathway and general anesthesia 被引量:1
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作者 黄东越 于布为 范秋维 《Neuroscience Bulletin》 SCIE CAS CSCD 2008年第3期166-172,共7页
TRESK is the most recently reported two-pore domain K^+ channel, and different from other two-pore domain channels in gene, molecular structure, electrophysiological and pharmacological properties. Although the curre... TRESK is the most recently reported two-pore domain K^+ channel, and different from other two-pore domain channels in gene, molecular structure, electrophysiological and pharmacological properties. Although the current knowledge of this potassium channel is inadequate, researches have demonstrated that TRESK is remarkablely linked to acute and chronic pain by activation of calcineurin. The fact that TRESK is sensitive to volatile anesthetics and localization in central nerve system implies that TRESK may play a very important role in the mechanism mediating general anesthesia. The further research of TRESK may contribute to explore the underlying mechanism of some pathological conditions and yield novel treatments for some diseases. 展开更多
关键词 tresk two-pore domain K^+ channels CALCINEURIN dorsal root ganglion
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大鼠脊髓背角神经元TRESK变化对lncRNA表达谱的影响 被引量:1
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作者 王文康 许立新 +4 位作者 阮祥才 郑彬 林涛 应彦璐 李恒昌 《中国医学创新》 CAS 2020年第33期26-29,共4页
目的:检测原代大鼠脊髓背角神经元双孔钾离子通道TRESK的变化对lncRNA表达谱的影响。方法:培养原代大鼠脊髓背角神经元,随机分为4组:空白组、谷氨酸(Glu)组、Glu+NC siRNA组、Glu+TRESK siRNA组。免疫印迹法和RT-PCR分别检测各组神经元T... 目的:检测原代大鼠脊髓背角神经元双孔钾离子通道TRESK的变化对lncRNA表达谱的影响。方法:培养原代大鼠脊髓背角神经元,随机分为4组:空白组、谷氨酸(Glu)组、Glu+NC siRNA组、Glu+TRESK siRNA组。免疫印迹法和RT-PCR分别检测各组神经元TRESK蛋白和mRNA表达,基因芯片检测Glu+NC siRNA组和Glu+TRESK siRNA组lncRNA差异表达谱,并对差异表达的lncRNA进行生物信息分析,从而预测TRESK变化对脊髓神经元生物功能的影响。结果:与空白组相比,Glu组和Glu+NC siRNA组TRESK蛋白及mRNA表达均明显上调(P<0.05);与Glu+NC siRNA组相比,Glu+TRESK siRNA组脊髓神经元TRESK蛋白及mRNA表达均明显下调(P<0.05)。基因芯片结果显示,Glu+TRESK siRNA组脊髓神经元lncRNA表达谱发生显著变化,其中212个基因表达上升,110个基因表达下降。GO分析差异表达的lncRNA主要参与炎症反应和神经元凋亡等生物功能过程,KEGG通路富集分析显示涉及mTOR信号通路、蛋白激酶信号通路和GRCP信号通路富集度最高。结论:谷氨酸诱导神经元TRESK中相关lncRNA表达谱发生差异,从而引起细胞炎症反应和神经元凋亡,其中mTOR信号通路、蛋白激酶信号通路和GRCP信号通路可能是主要的靶点通路。 展开更多
关键词 脊髓 tresk lncRNA 神经病理性疼痛
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鞘内注射TRESK基因重组腺病毒对坐骨神经分支选择性损伤大鼠的镇痛作用 被引量:1
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作者 高润兴 王汉兵 +1 位作者 仲吉英 周俊 《临床和实验医学杂志》 2014年第23期1929-1932,共4页
目的研究鞘内注射TRESK基因重组腺病毒(p Ad/CMV/V5-DEST-TRESK)对坐骨神经分支选择性损伤(SNI)大鼠痛觉过敏的影响。方法雄性SD大鼠36只,随机分为6组(n=6):Ⅰ组为空白对照组;Ⅱ组为假手术组;Ⅲ组为SNI模型组;Ⅳ组大鼠制备SNI模... 目的研究鞘内注射TRESK基因重组腺病毒(p Ad/CMV/V5-DEST-TRESK)对坐骨神经分支选择性损伤(SNI)大鼠痛觉过敏的影响。方法雄性SD大鼠36只,随机分为6组(n=6):Ⅰ组为空白对照组;Ⅱ组为假手术组;Ⅲ组为SNI模型组;Ⅳ组大鼠制备SNI模型后鞘内单次注射生理盐水25μl;Ⅴ组和Ⅵ组大鼠制备SNI模型后,鞘内分别单次注射滴度为1.31×109TU/ml的阴性腺病毒和p Ad/CMV/V5-DEST-TRESK。各组大鼠于术前1 d及术后1 d、3 d、5 d、7 d、14d分别测定机械痛阈和热痛阈;术后14 d检测L4,5术侧背根神经节(DRG)的TRESK蛋白表达。结果Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组术后1 d、3 d、5 d、7 d、14 d的机械痛阈明显低于Ⅰ组(P〈0.05),Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组5 d、7 d、14 d的机械痛阈明显低于Ⅵ组(P〈0.05);与术前比较,Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组术后1-14 d的机械痛阈明显降低(P〈0.05)。Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组L4,5术侧DRG的TRESK蛋白表达明显低于Ⅰ组(P〈0.05),Ⅵ组L4,5术侧DRG的TRESK蛋白表达明显高于Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组(P〈0.05)。结论鞘内注射p Ad/CMV/V5-DEST-TRESK可上调SNI大鼠DRG的TRESK蛋白表达,减轻SNI大鼠的痛觉过敏。 展开更多
关键词 大鼠 神经病理性疼痛 tresk基因重组腺病毒 鞘内注射 背根神经节 钾通道
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TRESK介导mTOR信号通路对大鼠脊髓神经元细胞凋亡的影响
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作者 王文康 李恒昌 陈廷凤 《中国医药科学》 2021年第5期32-35,共4页
目的探究双孔钾离子通道(TRESK)介导的mTOR信号通路对大鼠脊髓神经元细胞凋亡的影响。方法培养100例SD大鼠的脊髓原代神经元细胞,分为4组,每组各25例,A组采用TRESK siRNA、mTOR特异性抑制剂、谷氨酸处理,B组采用mTOR特异性抑制剂、谷氨... 目的探究双孔钾离子通道(TRESK)介导的mTOR信号通路对大鼠脊髓神经元细胞凋亡的影响。方法培养100例SD大鼠的脊髓原代神经元细胞,分为4组,每组各25例,A组采用TRESK siRNA、mTOR特异性抑制剂、谷氨酸处理,B组采用mTOR特异性抑制剂、谷氨酸处理,C组不进行任何处理,D组仅进行谷氨酸处理。对比各组24 h后的脊髓神经元凋亡蛋白水平、脊髓神经元活力、脊髓神经元细胞凋亡率、测定mTOR磷酸化水平及TRESK mRNA表达水平。结果A组、B组、D组的cleaved Caspase3水平和Bax水平均高于C组,差异有统计学意义(P<0.05),B组的cleaved Caspase3和Bax水平最高,与其他组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与C组比较,A、B、D组SD大鼠脊髓神经元活力均降低,细胞凋亡率均升高(P<0.05);与C组比较,A、B、D组mTOR磷酸化水平表达、TRESK mRNA表达均降低(P<0.05)。结论由TRESK介导的mTOR信号通路在抑制谷氨酸诱导的脊髓神经元凋亡中产生一定作用。 展开更多
关键词 tresk MTOR信号通路 脊髓神经元 细胞凋亡
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TRESK通道与偏头痛 被引量:3
9
作者 陈康 肖哲曼 《神经疾病与精神卫生》 2014年第4期410-412,共3页
TRESK通道(TWIK-related Spinal Cord K^+ Channel,TRESK)是最近新发现与先兆偏头痛相关的双孔钾离子通道(K2P),其在基因、分子结构、生理药理学特性方面不同于K2P,家族的其他双孔钾离子通道。研究发现TRESK通道突变可致神经元... TRESK通道(TWIK-related Spinal Cord K^+ Channel,TRESK)是最近新发现与先兆偏头痛相关的双孔钾离子通道(K2P),其在基因、分子结构、生理药理学特性方面不同于K2P,家族的其他双孔钾离子通道。研究发现TRESK通道突变可致神经元兴奋性增加,先兆偏头痛中TRESK通道异常致疼痛阈值降低的机制,提示TRESK通道可能成为偏头痛或疼痛治疗靶点之一。 展开更多
关键词 偏头痛 tresk 超敏化 发病机制
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