端粒蛋白TRF1、TRF2和TIN2在宫颈鳞癌中的表达及意义

目的研究端粒结合蛋白TRF1、TRF2和TIN2在宫颈鳞癌中的表达及意义。方法采用免疫组化方法检测TRF1、TRF2和TIN2蛋白在15例正常宫颈上皮和35例宫颈鳞癌组织中的表达。结果 TRF1蛋白在宫颈鳞癌中阳性表达率(40.0%)低于正常宫颈上皮组织(86.7%)(P<0.01)。TRF2蛋白在宫颈鳞癌中的表达(80.0%)高于正常宫颈上皮组织(33.3%,P<0.01)。TIN2蛋白在宫颈鳞癌中表达(74.3%)高于正常宫颈上皮组织(40.0%,P<0.01)。结论 TRF1蛋白表达降低和TRF2与TIN2蛋白表达升高在宫颈癌的发展过程中起重要作用。

A study of the relationship between expression level of TRF1 protein and telomerase activity in human acute leukemia

Objective： To study the expression level of TRF1 （telomeric repeat binding factor 1） protein in human acute leukemia and relationship between expression level of TRF1 protein and telomerase, Methods： A quantitative Western±Blot technique was developed using anti±TRF1^33±277 monoclonal antibody and GST±TRFI purity protein as a standard to further determine the expression level of TRF1 protein in total proteins extracted from clinical specimens. Results： Bone marrow tissues of 20 acute leukemia patients were studied, 11 healthy donors＇ bone marrows were taken as a control. The expression level of TRF1 protein was significantly higher （P〈0.01） in normal bone marrow （（2.2174±0.462） μg/μl） than that of acute leukemia patients （（0.7544±0.343） μg/μl）, But there was no remarkable difference between ALL and ANLL patients （（0.6184±0.285） μg/μl vs （0.8454±0.359） μg/μl, P〉0.05）. After chemotherapy, TRFI expression level of patients with complete remission elevated （（0.7724±0.307）/μg/μl vs （1.6834±0,344）μg/μl, P〈0.01 ）, but lower than that of normal （（2.2174±0.462）/μg/μl, P〈0.01）. There was no significantly difference after chemotherapy （（0.7264±0.411） μg/μl vs （0.895±0.339） μg/μl,p〉0.05）. TRF1 expression level of patients with complete remission is higher than that of patients without complete remission （（1,683±0.344）μg/μl vs （0.895±0.339）μg/μl P〈0.01）. All samples were determined for telomerase activity. It was confirmed that the activity of telomerase in normal bone marrow was lower than that of acute leukemia patients （（0.125±0.078） μg/μl vs （0.765±0.284）μg/μl, P〈0.01）. There was no significant difference of expression level ofTRF I protein between ALL and ANLL patients （（0.897±0.290） μg/μl vs （0.677±0.268） μg/μl, P〉0.05）. After chemotherapy, telomerase activity of patients with complete remission decreased （（0.393±0.125） μg/μl）, but was still higher than that of normal （（0.125±0.078） μg/μl, P〈0.01）. Conclusion： The expression level of TRF1 protein has correlativity to the activity of telomerase （P〈0.001）.

PinX1在食管鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨Pin2/TRF1结合蛋白X1(PinX1)与食管癌发生发展及与临床病理特征的关系。方法采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和流式细胞术方法(FCM)检测50例原发性食管癌患者的癌组织及食管切缘正常黏膜(距离癌5 cm以上)中PinX1的表达。结果 PinX1mRNA和蛋白在食管癌组织中表达显著低于食管正常组织(P<0.01)。且在食管癌中的表达与癌细胞分化程度、浸润深度及淋巴结转移呈负相关(P<0.05),但与患者年龄、性别无关(P>0.05)。结论 PinX1作为一种潜在的抑癌基因,其表达下调可能参与了食管鳞状细胞癌的发生和发展,是判定癌分化程度、浸润转移和判定预后的分子标志物。

PinX1基因在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的分析Pin2/TRF1结合蛋白X1(Pin2/TRF1-interacting protein X1,PinX1)基因在非小细胞肺癌组织中表达,探讨PinX1基因在肺癌发生发展中的作用及其临床意义。方法对56例肺癌组织及癌旁正常组织应用半定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测其中的PinX1的mRNA表达水平,应用端粒重复序列扩增(telomeric repeat anplication protocol,TRAP)-酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测其中的端粒酶活性。结果 PinX1在不同病理类型的肺癌组织中表达无显著性差异,与临床分期和预后之间呈显著相关性,与端粒酶活性呈负相关。结论 PinX1的下调可能与肺癌的发生、发展过程中端粒酶激活有关。检测PinX1的表达水平对评价肺癌预后有重要的临床价值。

PinX1的原核表达、纯化及其与hTERT的相互作用

目的:原核表达人Pin2/TRF1结合蛋白X1(PinX1),确定该蛋白与人端粒酶逆转录酶(hTERT)催化亚基的相互作用。方法:用PCR方法从乳腺文库中扩增PinX1基因的编码序列,克隆至pET-32a载体构建重组质粒pHisPinX1,经双酶切鉴定后转化大肠杆菌BL21并进行诱导表达,SDS-PAGE和Western印迹检测His-PinX1的表达;用His磁珠纯化His-PinX1,在人肾胚细胞293T内检测His-PinX1与hTERT的相互作用。结果:扩增得到980 bp的PinX1基因;Western印迹检测表明,相对分子质量约57×103的His-PinX1获得表达,且纯化的His-PinX1与hTERT具有相互作用。结论:表达并纯化得到了与hTERT相互作用的His-PinX1,为深入研究PinX1的功能奠定了基础。

子宫内膜癌组织中端粒蛋白TRF1和TRF2的表达及意义

目的研究子宫内膜癌组织内端粒蛋白TRF1、TRF2的表达水平及临床应用意义。方法选取韶关市第一人民医院2015年1月-2016年12月住院部收治的60例子宫内膜癌患者作为病例组,同时选取同期在我院行诊断性刮宫术治疗的30例健康子宫内膜患者作为对照组。采用免疫组化方法对两组患者的端粒蛋白TRF1、TRF2及细胞分化水平进行检测,并比较两组患者端粒蛋白TRF1、TRF2阳性率。结果子宫内膜癌的病理分级、临床分期、淋巴结转移、肌层浸润等情况与端粒蛋白TRF1、TRF2的表达水平无明显相关性;TRF1、TRF2在子宫内膜癌、健康子宫内膜内表达相关性明显(Rs_1=0.519,P_1=0.000;Rs_2=0.541,P_2=0.000)。结论临床医学可根据端粒蛋白TRF1、TRF2表达水平进行早期子宫内膜癌防治,为临床医学研究提供分子生物学机制,降低子宫内膜癌发生风险,改善治疗效果。