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工程教育中心何以推动科教融合——荷兰4TU工程教育中心的探索性单案例研究
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作者 魏丽娜 张炜 《中国高校科技》 2024年第1期60-66,共7页
工程教育中心作为建立在大学或研究机构中的跨学科交叉合作平台,是连接科学研究与教育实践的纽带,在高质量工程人才培养中发挥着重要作用。荷兰4TU工程教育中心利用4所顶尖理工大学在工程学科和教育领域的独特优势,积极与研发单位、教... 工程教育中心作为建立在大学或研究机构中的跨学科交叉合作平台,是连接科学研究与教育实践的纽带,在高质量工程人才培养中发挥着重要作用。荷兰4TU工程教育中心利用4所顶尖理工大学在工程学科和教育领域的独特优势,积极与研发单位、教育单位、企业部门合作,通过将前沿科学研究彻底融入工程课程设计、教学模式等多个方面,形成了独具一格的科教融合工程人才培养模式。文章从战略目标、组织架构、运行机制、质量保障4个维度详实分析了4TU工程教育中心推动科教融合的内在机制,总结归纳其在主题项目设置、教育共同体形成、课程体系迭代、创新网络构建、内外部质量保障等方面的核心特征,期望对我国科教融合的工程教育改革与建设有所启示。 展开更多
关键词 科教融合 4tu工程教育中心 组织架构 运行机制
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The water-soluble TF3 component from Eupolyphaga sinensis Walker promotes tibial fracture healing in rats by promoting osteoblast proliferation and angiogenesis
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作者 Binghao Shao Xing Chen +7 位作者 Jin'ge Du Shuang Zou Zhaolong Chen Jing Wang Huaying Jiang Ruifang Lu Wenlan Wang Chunmei Wang 《Journal of Traditional Chinese Medical Sciences》 CAS 2024年第2期245-254,共10页
Objective:To determine the active components of Eupolyphaga sinensis Walker(Tu Bie Chong)and explore the mechanisms underlying its fracture-healing ability.Methods: A modified Einhorn method was used to develop a rat ... Objective:To determine the active components of Eupolyphaga sinensis Walker(Tu Bie Chong)and explore the mechanisms underlying its fracture-healing ability.Methods: A modified Einhorn method was used to develop a rat tibial fracture model.Progression of bone healing was assessed using radiological methods.Safranin O/fast green and CD31 immunohistochemical staining were performed to evaluate the growth of bone cells and angiogenesis at the fracture site.Methylthiazoletetrazolium blue and wound healing assays were used to analyze cell viability and migration.The Transwell assay was used to explore the invasion capacity of the cells.Tubule formation assays were used to assess the angiogenesis capacity of human vascular endothelial cells(HUVECs).qRT-PCR was used to evaluate the changes in gene transcription levels.Results: Tu Bie Chong fraction 3(TF3)significantly shortened the fracture healing time in model rats.X-ray results showed that on day 14,fracture healing in the TF3 treatment group was significantly better than that in the control group(P=.0086).Tissue staining showed that cartilage growth and the number of H-shaped blood vessels at the fracture site of the TF3 treatment group were better than those of the control group.In vitro,TF3 significantly promoted the proliferation and wound healing of MC3T3-E1s and HUVECs(all P<.01).Transwell assays showed that TF3 promoted the migration of HUVECs,but inhibited the migration of MC3T3-E1 cells.Tubule formation experiments confirmed that TF3 markedly promoted the ability of vascular endothelial cells to form microtubules.Gene expression analysis revealed that TF3 significantly promoted the expression of VEGFA,SPOCD1,NGF,and NGFR in HUVECs.In MC3T3-E1 cells,the transcript levels of RUNX2 and COL2A1 were significantly elevated following TF3 treatment.Conclusion: TF3 promotes fracture healing by promoting bone regeneration associated with the RUNX2 pathway and angiogenesis associated with the VEGFA pathway. 展开更多
关键词 tu Bie Chong Water-solube component Fracture RATS OSTEOBLAST ANGIOGENESIS
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沉默TUFM通过AMPK/mTOR信号通路调控线粒体自噬对肺源性心脏病模型大鼠肺动脉高压的影响 被引量:1
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作者 崔本科 王岩 +2 位作者 卢云凤 杜鹃 翟羽涵 《疑难病杂志》 CAS 2024年第4期478-486,共9页
目的探讨线粒体翻译延伸因子Tu(TUFM)通过线粒体自噬促进肺动脉高压(PAH)血管重塑的作用机制。方法2022年1月—2023年6月于辽宁省人民医院中心实验室进行实验。将36只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为空白对照(Ctrl)组、模型(PAH)组... 目的探讨线粒体翻译延伸因子Tu(TUFM)通过线粒体自噬促进肺动脉高压(PAH)血管重塑的作用机制。方法2022年1月—2023年6月于辽宁省人民医院中心实验室进行实验。将36只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为空白对照(Ctrl)组、模型(PAH)组、TUFM过表达(OE)组、OE阴性对照(OE-NC)组、短发夹RNA(Sh)敲除TUFM(Sh)组和Sh-NC阴性对照(Sh-NC)组,每组6只。除Ctrl组外,其余大鼠均一次性腹腔注射1%野百合碱(60 mg/kg)诱导心源性肺水肿PAH大鼠模型;大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)在低氧(3%O 2)条件下培养24 h模拟体内肺动脉高压微环境,分为常氧(Norm)组、低氧(Hyp)组、小干扰RNA(SiRNA)-1组、SiRNA-2组、Si-NC组、OE-NC组和OE组。右心导管插管和脉冲多普勒超声检测大鼠肺血流动力学;苏木素-伊红染色检测肺小动脉病理结构;免疫荧光共染检测TUFM组织定位;细胞计数法检测细胞增殖;透射电镜观察线粒体结构和自噬小体;蛋白免疫印迹检测TUFM、自噬、凋亡和磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白表达。结果与Ctrl组比较,PAH组大鼠TUFM蛋白表达升高,且主要与PASMC标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在肺小动脉内膜存在共定位,而与内皮细胞标志物CD31无共定位,肺动脉收缩压(PASP)升高,肺动脉血流加速时间(PAAT)缩短,远端肺小动脉管壁呈向心性增厚,管腔狭窄几乎堵塞,TUFM、苄氯素1重组蛋白(BECN1)、人微管相关蛋白轻链3(LC3)II/I和B淋巴细胞瘤2(Bcl2)蛋白表达升高,P62、Bcl2相关X蛋白(Bax)和凋亡酶激活因子(Apaf)蛋白表达降低(P<0.05);与PAH组比较,OE组PASP升高,PAAT缩短,肺小动脉管壁厚度升高,肺动脉TUFM、BECN1、LC3II/I和Bcl2表达升高,P62、Bax和Apaf表达降低(P<0.05);与PAH组比较,Sh组PASP降低,PAAT延长,肺小动脉管壁厚度和管腔狭窄度有所改善,TUFM、BECN1、LC3II/I和Bcl2表达降低,P62、Bax和Apaf表达升高(P<0.05)。与Norm组比较,Hyp组PASMC细胞TUFM蛋白表达升高;与Si-NC组细胞相比,SiRNA-1和SiRNA-2组P62、Bax蛋白表达升高,BECN1、LC3II/I、Bcl2、TUFM表达降低,线粒体结构完整,PASMC细胞增殖活性降低,细胞p-AMPK表达降低,p-mTOR表达升高(P<0.05);与OE-NC组比较,OE组细胞P62和Bax蛋白表达降低,BECN1、LC3II/I、Bcl2和TUFM表达升高,部分线粒体损伤崩解,嵴断裂消失,PASMC细胞增殖活性明显升高,细胞p-AMPK表达升高,p-mTOR表达降低(P<0.05)。结论沉默TUFM可通过激活AMPK/mTOR信号通路促进线粒体自噬加速PAH肺动脉平滑肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 肺动脉高压 线粒体翻译延伸因子tu 平滑肌细胞 线粒体自噬 AMPK/mTOR通路 大鼠
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绵羊肺炎支原体EF-Tu蛋白的原核表达及多克隆抗体制备 被引量:2
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作者 王永飞 邓博文 +5 位作者 刘晓艳 哈尔勒哈·阿曼太 郭嘉栋 周正国 蔡江 李有文 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期689-699,共11页
[目的]克隆绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)EF-Tu基因,原核表达获得EF-Tu蛋白,制备抗EF-Tu蛋白的兔源多克隆抗体,为研究肺炎支原体EF-Tu蛋白的结构和功能奠定基础。[方法]采用重叠延伸PCR方法将pET-28a-EF-Tu质粒中EF-Tu... [目的]克隆绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)EF-Tu基因,原核表达获得EF-Tu蛋白,制备抗EF-Tu蛋白的兔源多克隆抗体,为研究肺炎支原体EF-Tu蛋白的结构和功能奠定基础。[方法]采用重叠延伸PCR方法将pET-28a-EF-Tu质粒中EF-Tu基因中间的TGA密码子突变为TGG,并对测序结果与其他支原体参考株进行相似性比对和遗传进化分析,利用在线软件对其推测的蛋白序列进行生物信息学分析。将突变后的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行原核表达,经SDS-PAGE和Western blotting鉴定,利用镍柱亲和层析法纯化,以纯化的EF-Tu融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,采用间接ELISA和Western blotting检测多克隆抗体效价及免疫反应性。[结果]试验成功突变了EF-Tu基因中TGA位点,并构建了融合表达His标签pET-28a-EF-Tu′原核表达载体。生物信息学分析表明,克隆的EF-Tu基因与绵羊肺炎支原体MoGH3-3菌株相似性最高,亲缘关系最近;编码387个氨基酸,无N-糖基化位点和跨膜区域,存在10个丝氨酸、20个苏氨酸、4个酪氨酸磷酸化位点,二级结构由无规则卷曲(35.14%)、α-螺旋(26.87%)、延伸链(26.87%)及β-转角(11.11%)构成。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,目的蛋白大小约为43 ku,蛋白纯化浓度为0.615 g/L。ELISA和Western blotting结果显示,制备的多克隆抗体效价可达1∶128 000,能够特异性识别EF-Tu融合蛋白,具有良好的免疫反应性。[结论]本研究成功突变了EF-Tu基因的TGA密码子,原核表达并纯化获得EF-Tu融合蛋白,制备其多克隆抗体效价为1∶128 000,为后续研究肺炎支原体EF-Tu蛋白结构和生物学功能及其疫苗研发提供了试验基础。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 重叠延伸PCR EF-tu基因 多克隆抗体
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秦川牛宰后成熟过程中线粒体翻译延长因子Tu与能量代谢的关联性分析
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作者 司健芳 高爽 +2 位作者 张静 李亚蕾 罗瑞明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第17期1-8,共8页
目的:线粒体翻译延长因子Tu(mitochondrial Tu translation elongation factor,TUFM)已被证明参与秦川牛宰后成熟过程中的细胞自噬活动,实验探究该过程中TUFM表达与能量代谢变化的关系。方法:以秦川牛背最长肌为研究对象,测定4℃不同成... 目的:线粒体翻译延长因子Tu(mitochondrial Tu translation elongation factor,TUFM)已被证明参与秦川牛宰后成熟过程中的细胞自噬活动,实验探究该过程中TUFM表达与能量代谢变化的关系。方法:以秦川牛背最长肌为研究对象,测定4℃不同成熟时间(0、2、12、24、48、96、144、192 h)TUFM表达量及含量、葡萄糖(glucose,GLU)、乳酸(lactic acid,LA)、腺苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、单磷酸腺苷(adenosine monophosphate,AMP)6种物质含量以及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)、磷酸丙糖异构酶(triose phosphate isomerase,TPI)、苹果酸脱氢酶(malate dehydrogenase,MDH)、细胞色素c氧化酶(cytochrome c oxidase,COX)5种酶活性的变化情况。结果:在秦川牛宰后成熟期间,GLU、ATP、ADP、AMP含量和LDH、SDH、TPI活性均呈下降趋势,TUFM表达量、MDH活性及LA和TUFM含量均呈先上升后下降趋势,COX活性呈先下降后上升再下降趋势。能量代谢各指标和TUFM蛋白主要在宰后初期发挥作用,对宰后初期及宰后中后期分别进行Pearson相关性分析,结果表明,在宰后初期牛背最长肌中TUFM表达量与MDH、LA呈极显著正相关(P<0.01),与ATP、ADP、AMP、LDH、SDH、TPI、COX、GLU呈极显著负相关(P<0.01)。在宰后中后期,TUFM表达与所有指标(GLU、LA、ATP、ADP、AMP、LDH、MDH、SDH、TPI、COX)均呈极显著正相关(P<0.01)。结论:在宰后初期TUFM表达量逐渐增加,可为肌肉细胞提供能量从而用于能量代谢途径,该过程可能是TUFM正向参与细胞自噬所致。在宰后中后期能量短缺时,TUFM可能抑制细胞自噬,优先将能量用于除细胞自噬外的其他重要途径(如能量代谢途径)以维持细胞稳态。综上,在宰后成熟过程中TUFM具有双重作用,可调节细胞自噬为能量代途径提供能量,有助于维持宰后能量代谢持续的时间。 展开更多
关键词 线粒体翻译延长因子tu 能量代谢 秦川牛 细胞自噬
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异氟烷麻醉对小鼠自发肌电及TUS/TMAS诱发肌电的影响
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作者 王茹茹 周晓青 +4 位作者 赵渝卉 刘煦 刘志朋 王欣 殷涛 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期10-17,共8页
经颅超声刺激(TUS)和经颅磁声耦合刺激(TMAS)调控运动皮层效果明显,但受限于清醒状态动物难以束缚,已有研究大多在麻醉状态下进行,对麻醉减弱调控效果的分析集中于中枢神经系统。本研究记录了异氟烷麻醉下24只小鼠的肢体自发肌电和TUS/T... 经颅超声刺激(TUS)和经颅磁声耦合刺激(TMAS)调控运动皮层效果明显,但受限于清醒状态动物难以束缚,已有研究大多在麻醉状态下进行,对麻醉减弱调控效果的分析集中于中枢神经系统。本研究记录了异氟烷麻醉下24只小鼠的肢体自发肌电和TUS/TMAS诱发肌电,定量分析了麻醉对自发肌电和诱发肌电发放率、潜伏期、时长和幅值的影响。结果显示,随着异氟烷输出浓度从0.40%增加至0.75%,每周期内小鼠自发肌电频次减少约50%,肌电发放时长变短,呈抑制状态;TUS/TMAS诱发肌电的成功率分别降低约50%和70%、潜伏期均延长约0.1 s、时长分别缩短约0.3和0.5 s,表明TUS/TMAS对运动皮层的调控效果随麻醉程度的加深而减弱。肢体自发和诱发肌电在发放率和时长上存在关联性特征,提示麻醉状态下小鼠自发肌电抑制状态可能是刺激效果减弱的影响因素之一。 展开更多
关键词 经颅超声刺激(tuS) 经颅磁声耦合刺激(TMAS) 肌电 麻醉
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An Investigation of Moxibustion Treatment for Abscesses in the Song Dynasty:Focusing on the“Jiu Ai Tu” 被引量:1
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作者 WANG Li 《Chinese Medicine and Culture》 2024年第3期241-250,共10页
Jiu Ai Tu(The Moxa Treatment)from the Song dynasty is the earliest surviving painting that focuses on the subject of acupuncture and moxibustion.This paper takes the medical activities depicted in the artwork as its r... Jiu Ai Tu(The Moxa Treatment)from the Song dynasty is the earliest surviving painting that focuses on the subject of acupuncture and moxibustion.This paper takes the medical activities depicted in the artwork as its research object and systematically analyzes the external treatment methods for abscesses during the Song dynasty reflected in Jiu Ai Tu.By examining the understanding of abscesses during that period,the paper explores the level of development in external medicine techniques.By analyzing the medical awareness and behaviors of patients when facing such severe illnesses,it aims to explore the societal cognition and experiences regarding health and disease.The paper attempts to present the folk medical ecology of the Song dynasty represented by Jiu Ai Tu. 展开更多
关键词 Jiu Ai tu ABSCESS Moxibustion method Traditional Chinese medicine Chinese external medicine
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一种Turbo迭代译码的联合自适应方案 被引量:2
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作者 王萍 宋荣方 《南京邮电大学学报(自然科学版)》 北大核心 2012年第4期14-18,共5页
迭代译码可以提高Turbo码的译码性能,但也增加了译码时延。为了降低Turbo译码时延,提出了一种联合自适应优化方案,首先在保证系统总体性能要求的情况下,利用外部自适应迭代准则确定迭代次数,然后在此基础上进一步采用内部迭代停止准则,... 迭代译码可以提高Turbo码的译码性能,但也增加了译码时延。为了降低Turbo译码时延,提出了一种联合自适应优化方案,首先在保证系统总体性能要求的情况下,利用外部自适应迭代准则确定迭代次数,然后在此基础上进一步采用内部迭代停止准则,该联合自适应迭代方案的平均迭代次数比单独的外部和内部迭代方案都小,误帧率性能与外部自适应迭代相当。 展开更多
关键词 tuRBO译码 迭代次数 tu信道
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Quantum Inverse Measurement Theory Contributing to the Birth of Interpretation System of Quantum Mechanics of Local-Realism and Determinism
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作者 Runsheng Tu 《Journal of Modern Physics》 2017年第8期1398-1469,共72页
The existing interpretation of quantum mechanics is contrary to common sense. The existing quantum mechanical interpretation schemes are puzzling. The confusing theory is unconvincing, and needs to be amended and comp... The existing interpretation of quantum mechanics is contrary to common sense. The existing quantum mechanical interpretation schemes are puzzling. The confusing theory is unconvincing, and needs to be amended and completed. The successful interpretation program of quantum mechanics of local-realism and determinism is undoubtedly the most attractive. Preparing the interpretation program deserves to be chosen as a research goal. It is a very good premise to believe that an object particle consists of light-knot of monochromatic waves. According to this premise, the erroneous recognition about “superposition principle, wave-particle duality and uncertainty principle” can be corrected. Under this premise, above research goal is achieved by establishing, applying quantum mechanics inverse measurement theory, adhering to the principle that there must be a complete empirical chain in the derivation process of experimental conclusion, and using the side effect caused by accompanying-light to explain the diffraction experiment of object particles. Electron secondarily diffraction and other experiments directly prove that there is the measurement (observation) which may not destroy quantum coherence. The diffraction experiments of all kinds of particles show that the Keeping and playing of the coherence of moving particles in the vacuum have nothing to do with their previous experience. These are the existing experiments, to be found, that support the theory of quantum inverse measurements. The verification experiment of quantum inverse measurement is designed. The absolute superiorities of quantum inverse measurement and the new view of measurement of quantum mechanics are listed. These superiorities are that: it has the characteristics of local-realism and determinism;it is not contrary to common sense and there is no confusing place;it can predict several phenomena that cannot be predicted by other theories. A solid theoretical foundation has been laid for “correctly understanding the microscopic world” and establishment of local realism quantum mechanics. 展开更多
关键词 QUANtuM INVERSE MEASUREMENT LOCAL REALISM DETERMINISM QUANtuM Entanglement tu’s MEASUREMENT View of QUANtuM Mechanics Light-Knot Electronic Structure Model
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黄瓜(Cucumis sativus L.)果瘤基因Tu的精细定位 被引量:4
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作者 杨绪勤 张微微 +3 位作者 任国良 何欢乐 潘俊松 蔡润 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2014年第3期69-74,共6页
黄瓜果实果瘤性状是非常重要的农艺性状,以黄瓜(Cucumis sativus L.)华北有瘤品系S52(P1)和欧洲无瘤品系S06(P2)为亲本,构建826株F2(S06×S52)群体为试验材料,对黄瓜果瘤基因Tu进行精细定位研究。田间调查和遗传分析发现F2群体的果... 黄瓜果实果瘤性状是非常重要的农艺性状,以黄瓜(Cucumis sativus L.)华北有瘤品系S52(P1)和欧洲无瘤品系S06(P2)为亲本,构建826株F2(S06×S52)群体为试验材料,对黄瓜果瘤基因Tu进行精细定位研究。田间调查和遗传分析发现F2群体的果实表现型为有果瘤与无果瘤,卡方值(χ2=0.583<3.84)检验表明其分离比符合3∶1,表明黄瓜果瘤性状是单基因控制的显性性状。早期研究中Tu基因被初步位于第5染色体的标记SSR16203和C_SC933之间,本研究利用公布的黄瓜基因组序列在这两标记之间设计了100对SSR引物,通过分析在两亲本的多态性,最后筛选得到4对SSR多态性标记。然后利用SSR16203和C_SC933标记和这4个多态性引物对826株F2群体进行进一步交换单株分析,最后将Tu基因定位于两翼标记SSR7和SSR18之间,剩余的交换单株分别为11株、16株,物理距离为263kb。经过FGENESH基因预测软件(http:∥www.softberry.com)分析,该区间仅含有候选基因31个。本研究为进一步果瘤基因Tu的最后克隆提供良好的研究基础。 展开更多
关键词 黄瓜 果瘤基因tu 精细定位 SSR标记
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SDH/SONET低阶支路VT/TU映射芯片实现 被引量:6
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作者 叶波 李天望 +1 位作者 张立军 罗敏 《光通信技术》 CSCD 北大核心 2009年第3期14-17,共4页
设计了SDH/SONET的低阶支路VT/TU映射芯片,单片实现28通道DS1/VC-11或21通道E1/VC-12到7个VTG/TUG-2的映射及逆映射,或DS1/E1/VC的组合到VTG/TUG-2的混合映射。该芯片带有支路环回和指针处理功能,支持UPSR环形网络拓扑结构。采用TSMC 0... 设计了SDH/SONET的低阶支路VT/TU映射芯片,单片实现28通道DS1/VC-11或21通道E1/VC-12到7个VTG/TUG-2的映射及逆映射,或DS1/E1/VC的组合到VTG/TUG-2的混合映射。该芯片带有支路环回和指针处理功能,支持UPSR环形网络拓扑结构。采用TSMC 0.13μm CMOS工艺流片成功,电路规模约23.7万门。 展开更多
关键词 SDH/SONET VT/tu 映射 芯片
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小麦蓝矮病植原体延伸因子(EF-Tu)tuf基因序列的同源性分析 被引量:15
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作者 安凤秋 吴云锋 +2 位作者 孙秀芹 顾沛雯 杨英 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期74-80,共7页
目的利用分子生物学方法分析小麦蓝矮病植原体延伸因子tuf基因,从亚组水平上确定小麦蓝矮病植原体的分类地位。方法电镜观察自然发病的小麦蓝矮病病叶;用引物fTufu/rTufu对小麦蓝矮病植原体延伸因子tuf基因进行PCR扩增;核苷酸序列测定... 目的利用分子生物学方法分析小麦蓝矮病植原体延伸因子tuf基因,从亚组水平上确定小麦蓝矮病植原体的分类地位。方法电镜观察自然发病的小麦蓝矮病病叶;用引物fTufu/rTufu对小麦蓝矮病植原体延伸因子tuf基因进行PCR扩增;核苷酸序列测定及分析。结果经电镜超微结构观察,在韧皮部观察到大量典型植原体。通过PCR扩增得到约850bp的特异片段。感受态转化后,进行测序,结果表明小麦蓝矮病植原体tuf基因片段长842bp,编码280个氨基酸。分析比较15种植原体延伸因子tuf基因的同源性,结果表明小麦蓝矮病植原体与三叶草绿变(KVF)亲缘关系最近,核苷酸同源性为99.9%,氨基酸同源性为100%。结论从亚组水平上确定了小麦蓝矮病植原体的分类地位,为研究小麦蓝矮病植原体的来源及致病分子机理提供理论依据。 展开更多
关键词 小麦蓝矮病 植原体 延伸因子tuf基因 同源性
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新疆枣疯病植原体tuf基因的克隆与序列分析 被引量:7
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作者 韩剑 徐金虹 +2 位作者 王同仁 张祥林 罗明 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期476-483,共8页
【目的】枣疯病是一种重要的植原体病害,了解新疆枣疯病植原体的系统发育关系及遗传分化,获取其分子特征信息。【方法】利用植原体tuf基因通用引物fTufu/rTufu对新疆枣疯病病株总DNA进行PCR扩增,对部分扩增片段克隆、测序及相似性分析... 【目的】枣疯病是一种重要的植原体病害,了解新疆枣疯病植原体的系统发育关系及遗传分化,获取其分子特征信息。【方法】利用植原体tuf基因通用引物fTufu/rTufu对新疆枣疯病病株总DNA进行PCR扩增,对部分扩增片段克隆、测序及相似性分析。【结果】获得新疆枣疯病阿克苏株系(JWB-ASZ)和喀什株系(JWB-KHZ)的tuf基因片段分别为841和814 bp。经同源性比较分析,新疆枣疯病阿克苏株系(JWB-ASZ)与喀什株系(JWB-KHZ)均隶属于16S rⅤ-B亚组枣疯病植原体。其中JWB-KHZ株系与枣疯病植原体河北株系的tuf基因核苷酸及氨基酸同源性最高,分别达到90.2%和81.5%;JWB-ASZ与枣疯病植原体陕西株系的tuf基因核苷酸及氨基酸同源性最高,分别达到94.2%和94.6%,而与16S rⅤ其它亚组的核苷酸及氨基酸同源性均低于70%。枣疯病阿克苏株系与喀什株系的tuf基因核苷酸及氨基酸序列之间存在明显差异,同源性仅为为73.5%和63.5%。【结论】研究报道了新疆枣疯病植原体tuf基因序列,为揭示新疆枣疯病植原体不同株系的分子特征、分子变异和遗传多样性提供了基础。 展开更多
关键词 枣疯病 植原体 tuf基因 序列分析
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肠炎沙门氏菌tu-fA基因缺失株的构建及其生物学特性研究 被引量:5
14
作者 司微 于申业 +2 位作者 陈利苹 刘思国 李广兴 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期361-365,共5页
为构建肠炎沙门氏菌(S.enterica)tu-fA基因缺失株及鉴定其生物学特性,本实验利用Red重组系统,以pKD3中的FRT-氯霉素抗性(cat^r)基因-FRT序列为模板,利用含有tu-fA基因两端序列的引物,经PCR扩增同源重组DNA片段(tu-fA5'-FRT-cat^r-FR... 为构建肠炎沙门氏菌(S.enterica)tu-fA基因缺失株及鉴定其生物学特性,本实验利用Red重组系统,以pKD3中的FRT-氯霉素抗性(cat^r)基因-FRT序列为模板,利用含有tu-fA基因两端序列的引物,经PCR扩增同源重组DNA片段(tu-fA5'-FRT-cat^r-FRT-tu-fA3'),将该DNA片段电转化于含有质粒pKD46的S.enterica SM6株中进行同源重组,通过氯霉素抗性筛选tu-fA基因缺失的SM6株(SM6△tu-f A::cat),再通过导入质粒pCP20于SM6△tu-fA::cat中敲除cat r基因,从而构建了tu-fA基因缺失株SM6△tu-fA。生物学特性鉴定结果表明,基因缺失株具有良好的遗传稳定性;与亲本株相比,细菌形态未发生明显改变,但基因缺失株体外生长速率略低,利用碳源的能力有所增强;缺失株侵袭Caco-2细胞的能力与亲本株相比有所降低,表明tu-f A基因编码的延伸因子(EF-Tu)在调控细菌侵袭细胞的过程中起着一定的作用。本研究通过构建tu-fA基因缺失的S.enterica株,为进一步研究tu-fA基因编码的EF-Tu的功能奠定基础。 展开更多
关键词 Red同源重组系统 tu-fA基因 缺失株
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肠炎沙门菌延伸因子EF-Tu缺失株对环境压力的应答变化 被引量:5
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作者 刘松艳 周薇 +4 位作者 司微 王曼宇 张童利 刘思国 于申业 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期31-34,共4页
延伸热不稳定因子(EF-Tu)广泛存在于原核生物中,主要生物功能是在蛋白质合成过程中负责肽链的延伸。为研究肠炎沙门菌EF-Tu的tuf A基因缺失对环境压力的应答变化,本研究利用改进的Red同源重组方法构建肠炎沙门氏菌SM6株的tuf A缺失株,... 延伸热不稳定因子(EF-Tu)广泛存在于原核生物中,主要生物功能是在蛋白质合成过程中负责肽链的延伸。为研究肠炎沙门菌EF-Tu的tuf A基因缺失对环境压力的应答变化,本研究利用改进的Red同源重组方法构建肠炎沙门氏菌SM6株的tuf A缺失株,命名为SM6Δtuf A,并鉴定缺失株的形态学变化,分析耐酸性、渗透应力、温度缺氧应力、氧化应力的改变。结果表明缺失株对酸性条件及升温缺氧的耐受与亲本株相似;对渗透压的耐受稍强于亲本株,但差异不显著;对氧化压力的耐受显著弱于亲本株。本研究构建的肠炎沙门氏菌tuf A基因缺失株SM6Δtuf A,为进一步研究EF-Tu在沙门氏菌的生物学和致病机制中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 延伸因子EF-tu RED同源重组 沙门氏菌 生物学特性 环境压力
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罗非鱼源无乳链球菌兼职蛋白EF-Tu的克隆、表达及其抗原性检测 被引量:2
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作者 刘家星 汪开毓 +4 位作者 陈德芳 刘韬 贺扬 曾宇鲲 蒋洁 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期334-343,共10页
为检测罗非鱼源无乳链球菌兼职蛋白EF-Tu(延伸因子Tu,Elongation Factor Tu)的抗原性,本实验克隆了罗非鱼源无乳链球菌HN0303的EF-Tu基因序列,并进行了蛋白相关性质的预测和系统发育树的构建。通过原核表达得到EF-Tu重组蛋白,同时利用... 为检测罗非鱼源无乳链球菌兼职蛋白EF-Tu(延伸因子Tu,Elongation Factor Tu)的抗原性,本实验克隆了罗非鱼源无乳链球菌HN0303的EF-Tu基因序列,并进行了蛋白相关性质的预测和系统发育树的构建。通过原核表达得到EF-Tu重组蛋白,同时利用纯化的蛋白免疫家兔获得多克隆兔抗EF-Tu重组蛋白血清以用于EF-Tu蛋白抗原性检测。结果显示,罗非鱼源无乳链球菌HN0303 EF-Tu基因有1个由1197个碱基组成的ORF,编码398个氨基酸。生物信息学分析显示其分子式为C_(1933)H_(3096)N_(532)O_(615)S_(11),分子质量为43.981 ku,理论等电点为4.749;具有多个磷酸化位点,不具有信号肽和跨膜区域;具有保守的EFTu结构域、EF-Tu-II结构域和EF-Tu-Ⅲ结构域,且与其他来源无乳链球菌的EF-Tu蛋白具有很高的同源性;具有较高的抗原指数,表明其可形成多个抗原表位。SDS-PAGE检测发现,诱导表达的重组蛋白以包涵体的形式出现在沉淀中,大小约为66.4 ku。Western Blot分析表明,兔抗EF-Tu重组蛋白血清能分别特异性结合菌体蛋白和EF-Tu重组蛋白。同时使用兔抗EF-Tu重组蛋白血清封闭罗非鱼源无乳链球菌HN0303表面的EF-Tu蛋白后,无乳链球菌HN0303粘附EPC(Epithelioma papulosum cyprini,鲤鱼上皮细胞)的能力下降了79.99%±2.43%。本研究表明,原核表达的罗非鱼源无乳链球菌EF-Tu重组蛋白具备较好的抗原性,用其制备的兔抗血清能够较好地抑制罗非鱼源无乳链球菌的粘附,推测其可能为罗非鱼源无乳链球菌亚单位疫苗的候选蛋白。 展开更多
关键词 罗非鱼 无乳链球菌 EF-tu 克隆 原核表达 抗原性
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Tu方程族的高阶双约束流的分离变量(英文) 被引量:5
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作者 曾云波 曹昕 《数学进展》 CSCD 北大核心 2002年第2期135-147,共13页
本文给出了 Tu方程族的高阶双约束流,其自由度为 ZN+l.根据通常的办法,利用 Lax矩阵仅能引入N+l对标难分离变量和N+l个分离变量方程.本文构造出另外N对分离变量及N个分离变量方程.此外,还建立了双约束流和Tu... 本文给出了 Tu方程族的高阶双约束流,其自由度为 ZN+l.根据通常的办法,利用 Lax矩阵仅能引入N+l对标难分离变量和N+l个分离变量方程.本文构造出另外N对分离变量及N个分离变量方程.此外,还建立了双约束流和Tu方程族的Jacobi反演问题. 展开更多
关键词 tu方程族 高阶 分离变量 双约束流 Jacobi反演问题 LAX表示 Lax矩阵
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油菜根圈枯草芽孢杆菌Tu-100抗真菌范围和防治作用 被引量:3
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作者 江木兰 赵瑞 +2 位作者 胡小加 万霞 张银波 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期355-358,共4页
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)具有抗胁迫生长和强竞争性等优势,是一种具有应用潜力的农作物病害生防细菌。本研究以来源于油菜根际、具有促生作用的枯草芽孢杆菌Tu-100为材料,研究了其抑制农作物真菌病原菌的作用范围和效果。... 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)具有抗胁迫生长和强竞争性等优势,是一种具有应用潜力的农作物病害生防细菌。本研究以来源于油菜根际、具有促生作用的枯草芽孢杆菌Tu-100为材料,研究了其抑制农作物真菌病原菌的作用范围和效果。结果证明:Tu-100对供试的12种真菌均有明显抑制作用。对峙培养试验结果显示:直接用Tu-100的发酵菌液与供试的10种病原真菌形成了明显的抑菌圈,浓缩10倍后对供试的12种真菌均形成直径27-40mm的抑菌圈。离体叶片上防治菌核病(Sclerotinia sclerotiorum)的试验结果显示:Tu-100菌液对油菜、大豆菌核病和玉米小斑病(Bipotam maydis)均有显著防治作用。该菌株防治植物根部病害的进一步研究将具有实际应用意义。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌tu-100 抗真菌范围 生防作用
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Tu-2制剂对肉兔生产性能及肠道微生物菌群的影响 被引量:2
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作者 顾雅君 李秀敏 +2 位作者 刘建荣 王世英 李宾 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第5期164-166,175,共4页
选用500只体质量相近的35日龄健康肉兔,随机分成试验组和对照组.对照组饲喂基础日粮,试验组35~59日龄饲喂添加0.1% Tu-2制剂的基础日粮,之后停止饲喂Tu-2制剂,以探究Tu-2制剂对肉兔生产性能及肠道微生物菌群的影响.结果显示:添加0.1... 选用500只体质量相近的35日龄健康肉兔,随机分成试验组和对照组.对照组饲喂基础日粮,试验组35~59日龄饲喂添加0.1% Tu-2制剂的基础日粮,之后停止饲喂Tu-2制剂,以探究Tu-2制剂对肉兔生产性能及肠道微生物菌群的影响.结果显示:添加0.1%的Tu-2制剂后,肉兔平均日增体质量提高12.84%,料重比降低11.67%,腹泻率下降43.75%;第8~25天,试验组肉兔粪便中芽孢杆菌、双歧杆菌、乳酸菌数量分别提高34.51%,43.73%、30.89%,大肠杆菌数量降低30.56%;停喂Tu-2制剂后,试验组肉兔生产性能及粪便中菌群数量等指标又逐渐接近对照组.可见,Tu-2制剂可改善肉兔肠道生态环境,有效预防腹泻,提高饲料转化率. 展开更多
关键词 肉兔 tu-2制剂 微生物菌群 腹泻 生产性能
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转录因子FOXP4在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其对喉鳞癌TU177细胞生物学特性的影响 被引量:1
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作者 赵岩 刘胜辉 +4 位作者 王晶田 石艳凤 石健 吴干勋 兰利利 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期895-902,共8页
目的:检测转录因子FOXP4(Forkhead box P4)在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)组织和细胞系中的表达,及其对LSCC细胞TU177体外增殖、迁移、侵袭、细胞周期及凋亡的影响,并探讨其与上皮-间质转化(epithelialmesench... 目的:检测转录因子FOXP4(Forkhead box P4)在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)组织和细胞系中的表达,及其对LSCC细胞TU177体外增殖、迁移、侵袭、细胞周期及凋亡的影响,并探讨其与上皮-间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)进程间的关系。方法:从河北医科大学第四医院生物标本库选取2013年6月至2015年12月收治的40例LSCC手术患者的癌及癌旁组织标本,应用qPCR法检测FOXP4在LSCC与相应癌旁组织中的表达水平,应用qPCR法和Western blotting检测FOXP4在人LSCC细胞系(AMC-HN-8、TU177、TU686及TU212)中的表达水平。采用小干扰RNA敲低TU177细胞中FOXP4的表达,MTS实验、克隆形成实验、Transwell实验及流式细胞术分别检测FOXP4敲低对TU177细胞增殖、迁移、侵袭、周期及凋亡的影响。应用qPCR法检测si-FOXP4转染TU177细胞后EMT标志物N-钙黏蛋白(N-cad‐herin)、β-连环蛋白(β-catenin)、波形蛋白(Vimentin)、扭曲蛋白(Twist)、转录因子Snail及锌指E盒结合蛋白1(zine finger E box binding homeobox 1,ZEB1)mRNA的变化情况,应用Western blotting测定FOXP4敲低后N-cadherin、β-catenin、Vimentin及Twist蛋白水平的改变。结果:在LSCC组织中FOXP4的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05),且与肿瘤的TNM分期及淋巴结转移相关(均P<0.05)。FOXP4在LSCC细胞中的表达亦高于癌旁组织(P<0.05或P<0.01)。转染si-FOXP4的TU177细胞中FOXP4的表达显著低于对照组(P<0.01)。与对照组相比,敲低FOXP4可抑制TU177细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01),敲低FOXP4可使细胞周期阻滞于G0/G1期(P<0.01),减少S期的复制(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.01),敲低FOXP4可降低TU177细胞中N-cadherin、β-catenin、Vimentin、Twist、Snail、ZEB1的mRNA水平(P<0.05或P<0.01)以及N-cadherin、β-catenin、Vimentin、Twist的蛋白水平。结论:FOXP4的高表达可能与LSCC的发生和发展相关,FOXP4敲低可以抑制LSCC细胞的体外增殖、迁移与侵袭能力,使细胞G0/G1期阻滞及促进凋亡,且可能参与EMT进程。 展开更多
关键词 转录因子 FOXP4 喉鳞状细胞癌 tu177细胞 生物学特性 细胞周期 凋亡
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