UFLC-Q-TOF-MS/MS结合指纹图谱定性评价菝葜(金刚藤)药材质量的研究

目的:构建菝葜(金刚藤)的指纹图谱,并对菝葜药材进行聚类分析。方法:采用Ultimate 3000 DGLC高效液相色谱仪,流动相:乙腈-0.1%磷酸,流速:1.0 ml/min,进样:10μL,柱温:30℃,检测波长:303 nm,色谱柱:Hitachi High-Tech C18(4.6 mm×250 mm,5μm)。结合超快速高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UFLC-Triple TOF-MS/MS)对不同产地来源的菝葜药材共有峰进行指证。通过相似度评价和聚类分析对20批次菝葜药材指纹图谱进行分析。结果:建立了分离度、稳定性、重复性均良好的菝葜药材HPLC指纹图谱,指认了19个共有峰,确证了其中17个化学成分。菝葜药材化学成分主要是黄酮类、有机酸类和皂苷类。20批次菝葜药材相似度较小(<0.9),但所有样品样品可分为3类,其中黄酮类化合物成分含量较高的被聚为一类,为云南产地的药材。结论:该方法操作简单、重复性好、准确可靠,更有效地控制菝葜药材质量。

UFLC-Q-TOF-MS法分析蓬莪术有效成分

目的采用快速液相与四极杆飞行时间串联质谱(UFLC-Q-TOF-MS)法分析蓬莪术Curcuma Phaeocaulis Valeton有效成分。方法利用大鼠皮下注射盐酸肾上腺素联合冰水浸泡的方法复制急性血瘀症模型,采用全自动血液流变学仪测定不同切变率的全血黏度。蓬莪术95%乙醇提取物及醇提后剩余物水提物的分析采用Agilent Exteng-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.3 m L/min;柱温30℃。结果蓬莪术提取物及醇提后水提物均具有活血化瘀作用。通过二级质谱分析结合对照品数据及相关文献,共从中鉴定出11种倍半萜类成分和2种姜黄素类成分。结论蓬莪术95%乙醇提取物中具有活血化瘀活性的成分是倍半萜类及姜黄素类化合物。

茵陈标准汤剂与其饮片中的化学成分比较

目的 比较茵陈标准汤剂及其饮片中的化学成分,为阐明其药效物质奠定基础。方法 制备茵陈标准汤剂和饮片供试品溶液,采用超快速液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UFLC-Q-TOF-MS/MS)技术在负离子模式下进行检测,利用PeakView 1.6质谱分析软件提取各样品总离子流图,通过与对照品、文献数据、化合物在线检索数据库PubChem等比对,鉴定茵陈标准汤剂及其饮片中的化学成分,并进行差异成分分析。结果 在茵陈标准汤剂及其饮片中共鉴定出化学成分125个,包括有机酸类成分50个、黄酮类成分39个、香豆素类成分3个、氨基酸类成分2个、木脂素类成分5个、其他类成分26个。茵陈标准汤剂中的3-甲氧基-咖啡酸-4-O-葡萄糖苷、对羟基苯甲酸、咖啡酸4-O-葡萄糖苷、spiraeoside、phenyl β-D-glucoside未在其饮片中检测到,而饮片中的6′-6′绿原酸二聚体、槲皮素-5-葡萄糖苷、apigenin 7-methyl ether 5-(6″-malonylglucoside)、槲皮素-3-O-阿拉伯糖苷、6″-caffeoylhyperin、6-O-caffeoyl-D-glucoside未在标准汤剂中检测到。结论 茵陈饮片中的大部分成分传递到了标准汤剂中,但有少数成分在煎煮过程中全部或部分发生了化学反应,在标准汤剂中转化成了其他成分或形成了新成分。

蓬莪术醋制前后UFLC-Q-TOF-MS色谱峰与抑制小鼠尾血栓形成作用的相关性研究

蓬莪术的生品及醋制品均为中医临床的常用药物,抑制小鼠尾血栓形成是反映中药活血化瘀作用的重要指标之一。传统炮制理论认为醋性味酸苦微温,作为辅料渗入莪术进行炮制后,可改变药物的活血化瘀作用。为此,该实验使用了中药谱效学的研究方法,通过超快速液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UFLC-Q-TOF-MS)法建立蓬莪术生品与醋制品抑制小鼠尾血栓形成作用的谱效关系,以探讨莪术醋制后活血化瘀作用发生改变的原因。实验以蓬莪术生品与醋制品醇提物的UFLC-Q-TOF-MS图谱的峰面积及其抑制小鼠尾血栓形成药效为基础,采用OPLS-DA法对UFLC-Q-TOF-MS图谱和抑制小鼠尾血栓形成的药效进行相关性分析。经Simca-P软件分析表明指纹图谱中的16,24(去氢木香内酯),3,11,22(α-脱氢姜黄烯),19[(R)-(-)-α-姜黄烯],23,10号峰对区分蓬莪术生品及醋制品贡献较大。该研究从抑制小鼠尾血栓形成的药效角度,用谱效关系的技术手段找到了导致蓬莪术生品与醋制品药效变化的指标性成分,为阐明中药在炮制前后产生活血化瘀作用变化提供新的依据。

HPLC-PDA指纹图谱结合UFLC-Q-TOF-MS定性鉴别评价连翘药材质量

采用Waters Symmetry C18色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),以甲醇(A)-0. 1%甲酸水(B)为流动相梯度洗脱,流速1 m L·min-1,柱温30℃,检测波长265 nm,优化连翘药材HPLC指纹图谱。采用UFLC-Q-TOF-MS正负离子模式鉴定连翘中化学成分。通过相似度评价,结合聚类分析,对48批不同产地、不同加工方式以及不同规格的连翘药材进行质量评价。不同产地的连翘药材确定了18个共有峰,其指纹图谱相似度均大于0. 98,进一步采用液质联用法鉴定出56个化学成分;不同的加工方式对连翘药材质量影响较大,与水煮烘干、直接烘干相比,以生晒为加工方式的药材质量明显下降,相似度约为0. 58;不同规格的连翘药材质量也有区别,老翘相似度约为0. 78,老翘中有效成分如连翘酯苷A、连翘苷等含量明显降低;聚类分析结果与相似度评价结果基本一致。连翘的指纹图谱的构建和化学模式的识别,为连翘药材质量控制提供更全面的参考。

醋甘遂活性部位各成分群对斑马鱼胚胎的急性毒性比较研究

采用模式生物斑马鱼的胚胎评价醋甘遂活性部位各成分群急性毒性,同时采用UFLC-Q-TOF-MS对各成分群的化学成分进行定性研究。以24 h健康斑马鱼胚胎为研究对象,各成分群设9个浓度和1个空白对照组,考察给药后96 h其对斑马鱼胚胎存活率的影响,计算不同样品对斑马鱼胚胎的半数致死浓度(LC_(50))。结果显示,各成分群对斑马鱼胚胎的急性毒性大小依次为B>C>A>D,成分群D的毒性不明显。UFLC-Q-TOF-MS分析结果显示成分群B主要检测到巨大戟烷型二萜类成分,成分群C主要检测到假白榄烷型二萜类成分。关联毒性研究结果,推测假白榄烷型二萜类成分可能为醋甘遂中更为低毒的活性成分,可为进一步深入探究醋甘遂"有故无殒"的物质基础提供依据。

模式识别结合多指标成分定性及定量分析3个主产区紫苏叶特征成分

目的对3个产地紫苏叶药材特征性成分进行差异性分析。方法采集了不同主产区20批紫苏叶药材,分别采用指纹图谱、UFLC-Q-TOF-MS定性鉴别及HPLC多指标成分定量结合聚类分析的方法对紫苏叶药材的特征性组分进行差异性分析。结果 3个产区20批次药材叶指纹图谱相似度均在0.900以上,因而无法通过相似度区分不同产地药材;进一步以UFLC-Q-TOF-MS及对照品对照鉴定了指纹图谱中21个特征峰成分;并对其中6个黄酮苷、2个酚酸及1个单萜主要特征组分含量进行了对比分析,结果显示总黄酮苷含量3个产地差异并不明显,而酚酸及紫苏醛成分产地间差异显著,其中安徽太和县产区药材中酚酸总含量明显高于广东英德和河北安国产地,广东英德产紫苏叶中紫苏醛成分含量较高,结合聚类分析可以将3个产地紫苏叶药材进行区分。结论多指标成分定性定量能较准确地分析不同产地紫苏叶药材的质量状况,比单一含量测定或指纹图谱相似度评价方法更为客观,也为紫苏叶药材质量控制及产地优选提供了参考。