基于UPLC-QTOF-MS和UNIFI软件的中药非法添加色素筛查平台建设

目的:基于超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱法(UPLC-QTOF-MS)分析和UNIFI软件,建立包含45种常见中药非法添加色素的筛查平台,以期为中药材(饮片)质量监管提供技术方法,提高监管效率。方法:采用Waters ACQUITY UPLC BEH-C18色谱柱,以5 mmol·L^(–1)的乙酸铵水溶液和乙腈为流动相梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^(–1),同时利用UPLC-QTOF-MS/MSE进行质谱检测分析,基于电喷雾离子源(ESI)在m/z 50~1200范围内进行正、负离子扫描,并与色素对照试剂进行比对。最后,将45种色素的名称、CAS号、分子式、结构图(.mol格式)、碎片离子等信息导入UNIFI软件,构建中药非法添加色素筛查平台并进行验证分析。结果:成功构建了包含45种添加色素的快速筛查平台,45种色素检测下限为0.33~24.83 ng·mL^(–1),此外对蒲黄、红花、五味子3个品种的市售中药进行了色素筛查,检出有红色和黄色添加色素如金橙Ⅱ、柠檬黄和皂黄等。结论:建立的色素快速筛查平台可快速、简便、高效地实现中药非法添加色素的筛查并有效提高药品监管效率。

基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱联用技术的荆莲核消方化学成分分析

基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MSE),结合UNIFI软件对荆莲核消方(JLHXF)进行化学成分解析。使用Supelco Ascentis?Express C18色谱柱(3.0 mm×50 mm,2.7μm)在乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)的流动相体系下进行梯度洗脱;利用电喷雾离子源(ESI)在正、负离子模式下进行扫描,借助UNIFI软件及相关文献对成分进行分析鉴定。通过UPLC-Q-TOF-MSE技术在正、负离子模式下采集复方的质谱数据,通过化合物的精确相对分子质量和串联质谱数据采用UNIFI软件辅助解析,结合对照品质谱信息及相关文献,共鉴定和推断出187个化学成分,其中黄酮类化合物77个、有机酸类化合物41个、萜类化合物26个、苯丙素类化合物24个、苯酞类化合物12个以及其他类化合物7个。UPLC-Q-TOF-MSE技术可快速鉴定出荆莲核消方中的化学成分,准确性较高,为该方药效物质基础研究提供了可靠依据。

Unify 1.8软件在天然产物非靶向筛查中的应用

建立了超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱仪(UPLC-Q-TOF/MS)检测茶树提取物,并根据目标化合物特征离子的精确质量数、二级碎片等信息利用Unify 1.8软件非靶向快速筛查其中未知组分的方法.从数据导入、分析方法建立、创建分析三步来阐述Unify 1.8软件在天然产物非靶向筛查中的应用,该方法无需标准品即可快速筛样品组分,快速、准确、分析通量高,为天然产物中未知组分的快速筛查和质量控制提供重要的方法依据,也为后续使用者提供明确的方法指导.

经方甘草干姜汤成分的快速分析及其治疗呼吸系统疾病的作用

目的对经方甘草干姜汤的化学成分进行快速定性分析,探讨其治疗呼吸系统疾病(肺纤维化、间质性肺病、慢性阻塞性肺病、哮喘)的作用。方法首先采用UPLC Q⁃TOF/MS高分辨质谱技术结合UNIFI软件对经方甘草干姜汤的化学成分进行定性分析;然后采用系统药理学方法,利用TCMSP、GAD、TTD、Swiss Target Prediction等数据库及Cytoscape分析软件构建甘草干姜汤疾病⁃成分⁃靶点网络;通过生物信息学技术富集的相关通路及生物过程;最后通过分子对接技术对关键靶点进行验证。结果共鉴定得到116种成分,主要是姜酚类、三萜皂苷和黄酮类等成分,其中炮姜21种,炙甘草97种,两者共有成分2种。在116种成分中根据OB和DL值筛选得到40种成分,查阅文献补充活性成分12种,共52种成分,对应的837个靶点与1207个呼吸系统疾病靶点匹配后得到211个共有靶点,通过DAVID数据库分析得到83条KEGG通路(P<0.05),主要集中在神经活性配体⁃受体相互作用、钙信号通路、乙型肝炎、PI3K⁃Akt信号通路、HIF⁃1信号通路等。GO富集分析得到BP、CC、MF结果各405、52、108条。分子对接结果显示,关键靶点ESR1、ESR2、PPARG、PTGS2分别与12、21、37、24个核心成分有较好的相互作用。结论初步揭示了甘草干姜汤治疗呼吸系统疾病的药效物质基础和作用机制。