基于UPLC-QTOF-MS解析苦荞黄酮组成及药理学网络分析

为优化苦荞黄酮提取工艺并明确其具体成分结构和含量及药理作用,本研究以四川省凉山彝族自治州甘洛县优质苦荞为研究对象,对超声提取苦荞黄酮工艺进行了优化,采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)对主要黄酮成分进行结构鉴定,并采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪对鉴定到的黄酮进行准确定量,同时利用中药系统药理学(TCMSP)系统分析其网络药理学特性。结果表明,超声辅助乙醇提取苦荞黄酮的最优条件为乙醇浓度90%(V/V)、超声功率140 W、超声温度70℃、超声时间60 min、提取溶剂与苦荞原料比50∶1(mL·g^(-1)),该条件下,提取液中共鉴定到黄酮16种,其中芦丁、表儿茶素和儿茶素含量分别达到115.81、72.99和23.08μg·mL^(-1)。这16种黄酮在防治心血管疾病、慢性炎症性疾病上具有重要作用。本研究可为苦荞精深加工综合利用尤其是功能性苦荞产品开发利用奠定基础。

基于UPLC-QTOF-MS和网络药理学探讨平卧菊三七治疗高尿酸血症潜在作用机制

目的鉴定平卧菊三七入血化学成分,采用网络药理学方法探讨平卧菊三七治疗高尿酸血症潜在作用机制。方法通过超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱(UPLC-QTOF-MS)联用技术鉴定大鼠入血成分,利用TCMSP、Swiss Target Prediction、Gene-Cards数据库获得入血成分及疾病作用靶点,并通过STRING数据库、Cytoscape软件筛选核心靶点并构建PPI网络图、“入血成分-交集靶点”图;运用DAVID平台进行基因本体(GO)功能富集及KEGG通路富集分析。结果测得平卧菊三七入血成分24个,共筛选得到13个核心靶点、162个生物过程、86条信号通路。结论平卧菊三七可能通过槲皮素、咖啡酸、芦丁、秦皮乙素等活性成分作用于STAT3、RELA、IL6、PTGS2等核心靶点来调控细胞增殖、迁移等多个生物学过程,从而协同发挥治疗高尿酸血症的作用。

基于UPLC-QTOF-MS/MS的卷柏化学成分分析

利用超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱法(UPLC-QTOF-MS/MS)对中药卷柏的化学成分进行快速分析及鉴定。采用Agilent Poroshell 120 SB-Aq(2.7μm,2.1 mm×100 mm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,进样量为3μL;选择电喷雾离子源分别在正、负离子模式下扫描分析,通过保留时间、精确相对分子质量和二级质谱裂解碎片,对所得成分的主要色谱峰进行鉴定。结果显示从卷柏中共鉴定出54个化学成分,主要包括双黄酮及黄酮类15个、炔酚类12个、酚酸类10个、苯丙素类5个、甾体类2个、萜类2个、氨基酸及肽类2个、酯类2个和其他类4个,并首次探讨炔酚类成分的裂解规律。该研究建立的UPLC-QTOF-MS/MS方法可以快速准确且较全面地分析鉴定卷柏中的化学成分,可为其质量控制及药效物质基础研究提供科学依据。

金花茶花朵和叶片UPLC-QTOF-MS分析

[目的]鉴定分析金花茶花朵和叶片中主要化学成分、含量及其变化特征,为金花茶资源的进一步开发利用提供科学依据。[方法]利用超高效液相色谱-飞行时间质谱联用(UPLC-QTOF-MS)技术定性定量分析金花茶花瓣、雄蕊、老叶和新叶中花青苷、类黄酮及儿茶素类成分与含量。[结果]花青苷天竺葵素-3-O-葡萄糖苷和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷均为金花茶中首次发现,其中,矢车菊素-3-O-葡萄糖苷仅存在于紫红色新叶中。类黄酮木犀草素-7-O-芸香糖苷和染料木苷为金花茶中首次发现,槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素-7-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-芸香糖苷和山柰酚-3-O-葡萄糖苷为金花茶叶片中首次发现。金花茶花瓣与雄蕊中花青苷相差不大,但却低于叶片尤其新叶;花朵中儿茶素类远高于叶片尤其新叶。金花茶花瓣和雄蕊中总黄酮及槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-芸香糖苷和山柰酚-3-O-葡萄糖苷均相差不大,但却远高于叶片。金花茶新叶中主要类黄酮成分木犀草素-7-O-芸香糖苷及总类黄酮明显高于老叶。[结论]金花茶中共鉴定出2种花青苷、6种类黄酮和2种儿茶素;槲皮素-3-O-葡萄糖苷等类黄酮是金花茶花朵呈现黄色的主要原因,矢车菊素-3-O-葡萄糖苷是金花茶新叶呈现紫红色的主要原因。

UPLC-QTof-MS测定不同提取条件下柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的转化规律

使用UPLC-QTof-MS研究了不同提取条件下柴胡皂苷a、d的转化规律。色谱柱为Acquity UPLC BEH C18（2.1 mm×50 mm,1.7μm）;流动相为乙腈-0.01%甲酸水溶液;流速为0.45 mL/min。以四极杆串联飞行时间质谱（Q-Tof）为检测器,使用负离子检测模式,对经过12种不同提取方法提取的柴胡样品（1~12）进行检测。得到柴胡皂苷a、d不同提取方法下的转化规律：酸性常温条件下水解生成柴胡皂苷b1、b2,酸性加热情况下糖苷键水解生成皂苷元;中性、碱性条件下均较稳定。实验结果对柴胡皂苷a、d的提取、分离、分析提供了参考依据。

UPLC-QTOF-MS结合主成分分析法考察生晒参与红参的化学成分差异

目的利用超高效液相-四级杆-飞行时间串联质谱(UPLC/Q-TOF-MS)结合主成分析法考察人参在蒸制前后人参皂苷类成分的变化。方法采用UPLC T_(3)C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相0.1%甲酸-0.1%甲酸乙腈梯度洗脱,在负离子模式下采集质谱数据,应用UNIFI 1.8.0等软件进行主成分分析(PCA),比较人参在蒸制前后生晒参、红参中人参皂苷类成分的变化。结果通过UNIFI软件鉴别生晒参、红参中的成分49种,同时鉴别出21个差异性marker成分。结论负离子模式下可鉴别出人参在蒸制前后中人参皂苷类成分的变化,提示人参皂苷类成分发生水解反应,其产物可能是生晒参和红参药物差别的物质基础。

UPLC-QTOF-MS测定沉积物中7种新型污染物

本研究建立了固相萃取（SPE）-超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（UPLC-QTOF-MS）检测沉积物中水杨酸（SA）、萘普生（NAX）、布洛芬（IBU）、酮洛芬（KET）、双氯芬酸（DIC）、降固醇酸（CLO）和三氯生（TRI）7种新型污染物的分析方法。样品用甲酸-丙酮溶液（1∶99,V/V）超声提取,MAX阴离子固相萃取柱净化,UPLC-QTOF-MS测定。在优化的实验条件下,7种新型污染物在2~500μg/L浓度范围内线性关系良好,线性相关系数均大于0.99,方法检出限（S/N=3）为0.5~0.6μg/kg,方法定量限（S/N=10）为1.5~2.0μg/kg（均以干重计）,3个添加浓度水平（低、中、高）的回收率为87.8%~105.1%,相对标准偏差（n=5）为3.1%~12.2%。利用该方法对广州市流溪河段表层沉积物样品进行分析,检出4种污染物,最高浓度范围为6.51~12.26μg/kg（以干重计）。该方法高效、准确,适用于沉积物中7种污染物的测定。

UPLC-QTOF-MS法快速测定化妆品中添加的7种性激素

目的建立快速、准确检测化妆品中非法添加的7种性激素的方法。方法采用UPLC-QTOF-MS法,使用Agilent ZORBAX Extend-C18（2.1×50mm,1.8μm）柱,以乙腈（A）水（B）为流动相,流速0.3m L·min^-1,柱温：30℃;选择ESI离子源,正负离子扫描等模式测定7种性激素。通过比较各样品峰与对照品峰的分子离子峰、二级碎片离子峰、色谱保留时间等信息确定添加的成分,并根据外标法以质谱峰面积计算添加成分的含量。结果在上述色谱及质谱条件下,雌三醇、雌二醇、雌酮、己烯雌酚、睾丸酮、甲睾酮、黄体酮7种性激素能被准确检出,最低检出限（LOD）均在3~80ng·mg^-1之间,标准加样回收率均在80.3%~103.5%之间。结论本方法快速准确方便、灵敏度较高,可作为化妆品中非法添加性激素的测定方法。

UPLC-QTOF-MS技术分析马家柚果肉成分

本文采用超高压液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-DAD-QTOF-MS)对马家柚果肉中的化学成分进行分析。采用反相Agilent C18(50mm×2.1mm,1.8μm)色谱柱,甲醇与水(含0.1%甲酸)二元线性梯度洗脱,检测波长340nm,流速0.25m L/min,柱温25℃;以6538 UHD Accurate-MS Q-TOF LC/MS质谱仪进行检测。通过得到的样品电喷雾-质谱(ESI-MS)负离子扫描模式下的准分子离子峰、碎片信息(Product ions)、保留时间(TR)、紫外色谱图(λmax nm)等信息,查阅相关文献,对11种化学成分进行初步解析,推测为(1)柠檬酸、(2)圣草素-7-O-葡萄糖甙、(3)芹菜素-6-C-葡萄糖-7-O-葡萄糖苷、(4)新圣草枸橼苷、(5)柚皮素-7-O-葡萄糖苷、(6)柚皮苷、(7)新橙皮苷、(8)乙酰柚皮苷、(9)野漆树甙、(10)山柰酚7-O-鼠李糖3-O-鼠李糖苷和(11)柚皮素。其中柚皮苷为马家柚中主要的黄酮苷类成分。

UPLC-QTOF-MS分析乌蔹莓成分及多组分定量研究

目的定性分析乌蔹莓化学成分并对其主要成分建立定量分析方法。方法采用高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)技术,选用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在正、负离子模式下采集数据。运用PeakView软件对结果进行分析,根据化合物的相对保留时间、准分子离子峰和碎片离子峰等信息,并结合对照品和相关文献进行成分鉴定。采用UPLC法对4个主要成分(木犀草素-7-O-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素、芹菜素)建立含量测定方法。结果从乌蔹莓中共推断并鉴定出31个化学成分,包括黄酮及其苷类6个,香豆素类3个,萜类及三萜类7个,脂肪酸酯类7个,其他类8个。3批乌蔹莓中木犀草素-7-O-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素、芹菜素含量范围分别为0.061%~0.15%、0.077%~0.14%、0.011%~0.028%、0.020%~0.062%。结论该分析方法可以快速、准确地分析乌蔹莓中的化学成分,建立的定量方法为乌蔹莓质量控制及制剂开发奠定了基础。

基于UPLC-QTOF-MS和HPLC-QQQ-MS技术的鹰嘴豆酚类化合物定性、定量分析及其抗氧化能力研究

鹰嘴豆为一种高营养豆类植物。为深入了解其营养价值,用80%甲醇溶液提取酚类物质,对提取物中不同存在形态的酚类化合物及其抗氧化活性进行测定,并对其提取物进行酚类的定性及定量分析。结果表明,酚酸含量最高部分为糖苷键合态酚类物质(0.81 mg/g),黄酮含量最高部分为游离态酚类物质(0.26 mg/g),不同存在形式酚类物质含量及抗氧化能力不同;80%甲醇提取物通过UPLC-QTOF-MS定性分析,对其24种化合物进行鉴定,包括12种黄酮、4种酚酸;HPLC-QQQ-MS定量分析表明:对羟基苯甲酸、香豆酸、原儿茶酸类化合物含量丰富。

UPLC-QTOF-MS法同时测定春季文冠果叶中11种黄酮类化合物的含量

目的建立UPLC-QTOF-MS法同时测定春季文冠果叶中11种黄酮类化合物的含量。方法采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以体积分数0.05%甲酸水为流动相A,体积分数0.05%甲酸乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速0.4 mL·min-1,电喷雾离子源(ESI),负离子全扫描模式,选择性离子监测定量方式进行。结果表没食子儿茶素,表儿茶素,杨梅素-3-O-芸香糖苷,芦丁,杨梅苷,山柰酚-3-O-芸香糖苷,槲皮苷,杨梅树皮素,山柰酚-3-O-α-吡喃鼠李糖苷,木犀草素和槲皮素质量浓度分别在0.38~38.00、0.46~46.00、0.90~90.00、0.75~75.00、1.60~160.00、0.45~45.00、0.60~60.00、0.016~1.60、0.30~30.00、0.010~1.00、0.010~1.00 g·L-1内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数r均大于0.999。精密度、稳定性和重复性的RSD值均小于15%,平均回收率在91.5%~110.4%内,RSD小于6.5%。结论所建立的UPLC-QTOF-MS法适用于文冠果叶中黄酮类化合物的含量测定,为文冠果叶的合理应用提供依据。

UPLC-QTOF-MS比较当归和川芎煎液化学成分差异

目的考察中药当归和川芎煎液的化学成分差异,以探讨其药效差异的物质基础。方法采用UPLC-QTOFMS技术对市场上正规销售的当归和川芎饮片进行比较。数据统计分析采用主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析。成分鉴别采用与标准品比较、基于自制自动化预鉴别软件的一级质谱精确质荷比分析和二级质谱碎片分析。结果当归和川芎煎液化学成分差异明显;三糖以及可能含有丁烯基苯酞结构的化合物等在当归、川芎煎液中含量差异明显;阿魏酸含量差异不突出。结论川芎煎液三糖含量高于当归煎液,另外发现多种有明显差异的LC-MS信号,为探讨当归、川芎药效差异提供了参考。

基于UPLC-QTOF-MS法的苦丁茶冬青化学成分分析

利用超高效液相色谱联用四级杆串联飞行时间质谱仪(UPLC-QTOF-MS)分析苦丁茶冬青70%的乙醇提取物成分。用ACQUITY HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%的甲酸水和甲醇为流动相梯度洗脱,体积流量为0.3 mL/min,使用ESI离子源分别在正、负离子模式下采集数据,鉴定出23种化合物,包括4种酚酸类、2种黄酮类、17种三萜类物质。该方法为苦丁茶冬青化学成分的鉴定和质谱引导型制备提供了一种新的方法。

基于UPLC-QTOF-MS/MS的藏药翼首草不同提取物化学成分比较研究

应用UPLC-QTOF-MS/MS鉴定翼首草化学成分,对其水提取物和醇提取物中差异性化合物进行辨识并进行半定量评价。从4批翼首草药材中共鉴定出48个化合物,其中5个化合物首次在翼首草发现。75%乙醇提取物及水提取物整体化学轮廓差异较大,从中辨识16个差异性化合物,其中4个(rivularicin等)化合物为醇提液中所特有。水提取物中neochlorogenic acid等4个化合物含量较高;75%乙醇提取物中sylvestroside III等8个化合物含量较高。该含量差异是否会对其药效产生影响仍有待进一步研究。

基于UPLC-QTOF-MS技术分析不同产地丹参药材化学成分的差异

目的:分析不同产地丹参药材化学成分的差异,探讨不同环境对丹参化学成分合成积累的影响。方法:采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-QTOF-MS)测定不同产地丹参样品的质谱数据;原始数据经过MS-DIAL软件处理后,通过SIMCA-P 14.1软件,依次进行主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),结合SPSS 22.0软件单向方差分析,筛选并鉴定不同产地丹参差异化学成分,同时进行半定量分析。结果:不同产地丹参样品的化学组成差异明显;初步筛选出144个离子,共鉴定出22个差异化学成分,含有酚酸类成分12个,丹参酮类成分10个,且22个差异化学成分呈现不同的变化规律。结论:该研究为丹参优势资源筛选以及丹参药材品质形成的机制提供了参考依据。

结合UPLC-QTOF-MS和网络毒理学技术初探补骨脂致肝毒性机制

目的分析鉴定大鼠灌胃补骨脂(FP)后肝中的化学成分,结合网络毒理学初探FP致肝毒性潜在毒性机制。方法采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)及UNIFI数据筛查平台,快速鉴定灌胃FP后大鼠肝中的化学成分,运用多个数据库获取化学成分靶点、肝毒性靶点、成分-肝毒性共有靶点、间接靶点等信息,利用String数据库和Cytoscape 3.6.1软件对以上靶点进行蛋白质-蛋白质互作(PPI)网络构建及基因本体(GO)生物功能、京都基因和基因组百科全书数据库(KEGG)通路富集分析,筛选得到FP致肝毒性的关键靶点和潜在作用机制。结果从大鼠肝中鉴定出FP原型成分11种。网络毒理学研究表明,FP致肝毒性的潜在作用靶点共计52个,通路23条,其中ALB、HOMX1、GSR、GSTM3、CYP2C9等靶点,以及甲状腺合成途径、谷胱甘肽代谢途径与FP肝毒性有较强的相关性。结论利用UPLC-QTOF-MS结合UNIFI数据筛查平台快速鉴定了11种大鼠肝内源自FP的化学成分,通过网络毒理学研究初步预测了FP致肝毒性的潜在分子机制,为FP肝毒性的深入研究奠定了基础。

UPLC-QTOF-MS法研究甘油三酯作为水生环境中农药污染的潜在生物标志物

以鲫鱼为代表性研究对象,采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)技术,分别研究了3种农药(敌百虫,高效氯氰菊酯和吡虫啉)对其体内代谢的影响.通过Masslynx软件在MS E模式下采集数据,使用UNIFI软件进行自动检测和数据过滤,并将差异性物质与在线代谢组数据库进行比较,鉴定出甘油三酯类(TGs)物质具有明显差异.其中,吡虫啉对TGs代谢的影响最大,且肝脏的代谢差异比大脑更显著,低浓度的急性暴露诱导肝脏中的TGs积累,其含量与暴露浓度之间的关系符合Michaelis-Menten方程的增长趋势.结果表明,TGs可在短时间内(≤2 h)灵敏地反映农药吡虫啉的低浓度(≤20 ng/mL)暴露,可作为考察吡虫啉对水生生物毒性的潜在生物标记物,有助于建立一种快速、灵敏的预警方法.

直接稀释-UPLC-QTOF-MS法快速测定辣椒粉中20种合成染料

采用直接稀释前处理法,结合超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS),对辣椒粉中苏丹红等20种禁用合成染料进行快速分析。该方法以水/乙腈/丙酮(v/v/v=2/3/3)混合体系为提取溶剂,提取液未经净化,用0.1%甲酸甲醇溶液稀释5倍后进行UPLC-QTOF-MS分析,在8 min内实现20种染料的良好分离及检测,定量限(LOQ)为1~40μg/kg,回收率为54.72%~117.77%,RSD在0.56%~16.27%范围,满足检测要求。将建立的方法应用于30个辣椒粉样品中目标染料的检测,未检出阳性样品。该方法样品前处理过程快速简化,节约溶剂、降低检测成本、缩短分析周期,符合绿色检验检测要求。

UPLC-QTOF-MS法分析沙棘果实、叶和枝的成分

目的UPLC-QTOF-MS法分析沙棘Hippophae rhamnoides L.果实、叶和枝的成分。方法沙棘果实80%乙醇提取物的分析采用硅胶、大孔树脂、Sephadex LH-20、半制备液相色谱进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。通过UPLC-QTOF-MS对沙棘果实、叶和枝不同部位化学成分进行分析。结果从中分离得到6个化合物,分别鉴定为柽柳黄素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-α-L-鼠李糖苷(1)、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-α-L-鼠李糖苷(2)、1-甲基-1,2,3,4-四氢咔啉-3-羧酸(3)、异鼠李素-3-O-β-D-槐二糖-7-O-α-L-鼠李糖苷(4)、芦丁(5)、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(6)。共鉴定30个化合物,包括8个鞣质类和22个黄酮类,其中25个化合物为3种部位的共有成分。结论化合物3为首次从沙棘属植物中分离得到。该方法准确稳定,重复性好,可用于沙棘的质量控制。