WISP-1与VEGF-A在老年食管鳞癌组织中表达的临床意义

目的探索WNT1诱导信号通路蛋白-1(WISP-1)及血管内皮生长因子-A(VEGF-A)在老年食管鳞状细胞癌(ESCC)患者中作为新的分子标志物的临床价值。方法将老年ESCC分为65~70岁组与>70岁组,分别应用免疫组织化学染色法与RT-PCR检测WISP-1、VEGF-A蛋白与m RNA的表达。Log rank检验分析临床病理特征与食管鳞癌预后的关系。结果ESCC组织中WISP-1阳性表达率明显高于癌旁组织(53.33%vs.35.42%,P=0.045)、>70岁及有淋巴结转移的患者显著高于65~70岁(P=0.047)及无淋巴结转移的患者(P=0.032)。ESCC组织中VEGF-A蛋白的阳性表达率显著高于癌旁组织(50.00%vs.20.83%,P=0.001),浸润程度T3~T4期、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期显著高于T1~T2、无淋巴结转移、Ⅰ~Ⅱ期患者(P=0.030、0.006、0.010)。WISP-1mRNA和VEGF-A mRNA表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05)。单因素分析结果表明WISP-1及VEGF-A表达水平与老年ESCC的预后相关(P<0.05),多因素分析结果表明淋巴结转移是影响老年ESCC患者预后的独立危险因素。结论WISP-1及VEGF-A与老年ESCC患者恶性行为相关,且年龄越大,WISP-1表达越高,有作为老年ESCC新的分子标志物的潜能。

sgp130对糖尿病小鼠视网膜p-STAT3及VEGF-A表达的影响

目的:观察可溶性糖蛋白130(sgp130)对糖尿病(DM)小鼠视网膜p-STAT3及VEGF-A表达的影响,探讨sgp130防治糖尿病视网膜病变(DR)炎性损害的可能性。方法:小鼠45只被随机分为正常组、DM组和sgp130组。采用链脲佐菌素对DM组和sgp130组进行DM造模。正常组、DM组不做特殊干预,sgp130组在第1、5wk被给予1.5mg/mL sgp1302μL进行玻璃体腔注射治疗。10wk后处死所有小鼠,检查视网膜组织IL-6、p-STAT3、VEGF-A等蛋白的表达。结果:在第10wk时,DM组视网膜IL-6、p-STAT3、VEGF-A表达较正常组升高(均P<0.01)。sgp130组p-STAT3、VEGF-A表达水平较DM组低(均P<0.01)。结论:sgp130可以选择性拮抗IL-6反式信号传导通路,下调下游炎性因子VEGF-A的表达,可以用于干预DM引起的IL-6相关性视网膜炎性损害。

VEGF-A和VEGF-C在乳腺癌组织中的表达及其意义

背景与目的:VEGF家族都与血管生成相关,血管内皮生长因子-A(vascularendothelialgrowthfactorA,VEGF-A)和血管内皮生长因子-C(vascularendothelialgrowthfactorC,VEGF-C)与肿瘤的生长和转移关系密切。本研究探讨乳腺癌组织中VEGF-A、VEGF-C的表达与癌细胞增殖、微血管密度(microvesseldensity,MVD)和淋巴结转移的关系。方法:采用免疫组织化学方法观察98例乳腺癌组织中VEGF-A、VEGF-C、增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)、CD34的表达情况。结果:98例乳腺癌组织中,VEGF-A阳性率为85.7%(84/98),VEGF-C阳性率90.8%(89/98),两者在淋巴结转移组表达均高于未转移组,差异具有显著性(P<0.05)。PCNA的表达随着VEGF-A、VEGF-C表达强度增强,肿瘤细胞增殖活性也随之增强(r=0.432,P=0.000;r=0.294,P=0.001)。淋巴结转移组MVD值(64.26±26.40)明显高于未转移组(50.29±29.35)(P<0.05),且随着VEGF-A表达增强,MVD也随之增高(r=0.327,P<0.001),VEGF-C表达与MVD无相关性(r=0.123,P>0.05)。结论:VEGF-A主要介导了血管生成、细胞增殖和转移;VEGF-C促进乳腺癌细胞增殖,与血管密度无关,与淋巴结转移密切相关。

血清HIF-1α、VEGF-A、CEA和CA19-9表达水平对胃癌根治术后患者复发转移的预测研究

目的:探讨胃癌根治术后患者血清HIF-1α、VEGF-A、CEA和CA19-9表达水平与胃癌临床病理特征、复发转移的关系。方法:采用回顾性的方法,对2010年1月至2012年9月于我院行胃癌根治术患者病历进行抽取,共计76例患者。对患者辅助化疗前后、随访截止前最近一次复诊时/复发转移时血清HIF-1α、VEGF-A、CEA和CA19-9的浓度进行整理与分析。结果:76例患者辅助化疗前后血清HIF-1α、VEGF-A、CEA和CA19-9表达水平之间的差异无统计学意义(P>0.05)。35例复发转移患者复发转移时血清HIF-1α、CEA浓度较辅助化疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05)。35例患者复发转移时血清HIF-1α、CEA浓度较41例未复发转移患者随访截止前最近一次复诊时升高,差异有统计学意义(P<0.05)。亚组分析示31例血清CEA浓度维持在正常水平的患者,12例复发转移患者的血清HIF-1α浓度较19例未复发转移患者明显升高(P=0.022)。结论:胃癌根治术后患者复发转移时血清HIF-1α、CEA浓度升高;CEA浓度在正常范围内的患者,复发转移时血清HIF-1α浓度升高,提示根治术后患者血清HIF-1α浓度的动态升高可能预示胃癌复发转移。

有氧运动对2型糖尿病大鼠肾脏VEGF-A及VEGFR2蛋白表达的影响

目的:研究有氧运动对2型糖尿病大鼠肾脏VEGF-A、VEGFR2蛋白表达的影响,并对其可能机制进行探讨。方法:通过高糖高脂饲喂5周加低剂量腹腔注射STZ复制2型糖尿病大鼠模型,7周后成模SD大鼠被随机分为糖尿病安静组和糖尿病运动组,另设正常对照组。采用7周有氧游泳运动只对糖尿病运动组进行干预,实验末测定血糖、24 h UA、肾皮质VEGF-A及VEGFR2和p-VEGFR2蛋白的表达及光镜、电镜观察肾小球形态结构的变化。结果:光镜下糖尿病运动组大鼠肾小球增大不明显,毛细血管袢大多数开放,球囊壁渗出、粘连等现象较糖尿病安静组明显改善;基底膜无明显增厚,足突融合等现象较糖尿病安静组均有所减轻;血糖浓度和24 h UA排泄量降低显著(P<0.05或P<0.01);肾皮质VEGF-A、VEGFR2和p-VEGFR2蛋白的表达均较糖尿病安静组显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:运动对2型糖尿病大鼠肾脏有保护作用,其作用机制可能是通过其降低血糖及下调2型糖尿病状态下表达增加的VEGF-A和VEGFR2蛋白水平,而减轻大鼠肾脏损伤。

消痰散结方对胃癌微血管密度及VEGF-A/VEGFR-2的影响

目的研究消痰散结方对胃癌MVD及VEGF-A/VEGFR-2表达的影响。方法对20例自愿进行单纯中药抗肿瘤治疗的胃癌患者,留取消痰散结方进行干预前及干预6个月后的胃癌(癌组织、癌旁近端、远端)标本。采用免疫组化SP法检测CD34标记微血管密度MVD,Western Blot、RT-PCR检测VEGF-A/VEGFR-2的表达。结果消痰散结方对胃癌组、癌旁近端组、远端组微血管密度MVD和VEGF-A/VEGFR-2有不同程度的下调作用。胃癌组消痰散结方治疗后微血管密度和VEGF-A/VEGFR-2下降幅度最大(P<0.05),有统计学意义;近端组、远端组治疗后微血管密度和VEGF-A/VEGFR-2略有下降,无统计学意义(P>0.05)。结论消痰散结方治疗胃癌的部分作用机制可能与其抑制VEGF-A/VEGFR-2信号通路降低微血管密度有关。

miRNA-16对肺腺癌A549细胞增殖和VEGF-A表达水平的影响

目的探讨miRNA-16作用不同时间对体外培养的人肺腺癌A549细胞增殖的影响,以及对VEGF-A表达水平的影响。方法将50 nmol/L,的miRNA-16和阴性对照序列用Lipofectamine 2000转染进人肺腺癌A549细胞中,通过qRT-PCR法检测转染后A549细胞中miRNA-16的表达水平,MTT法检测转染miRNA-16后细胞的增殖抑制情况,ELISA法检测转染miRNA-16后细胞VEGF-A表达水平。结果转染培养24h后,测得转染组miRNA-16表达水平明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);转染组细胞增殖抑制率明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);转染组细胞VEGF-A表达水平较阴性对照组和空白对照组明显降低(P<0.05)。结论 miRNA-16能引起细胞增殖抑制,并且可能与下调VEGF-A的表达有关。

双丹明目胶囊对糖尿病模型大鼠视网膜VEGF-a、VEGF-b表达的影响

目的观察双丹明目胶囊对糖尿病模型大鼠视网膜VEGF-a、VEGF-b表达的影响。方法将40只SD大鼠,采用随机数字表法分为A(正常组)、B(模型组)、C(双丹明目组)、D(阳性对照组)4组,每组10只20眼。将B、C、D三组实验大鼠采用STZ(以50 mg/kg的剂量)一次性尾静脉注射建立糖尿病视网膜病变模型,造模1周后开始连续灌胃用药,灌胃后4周、8周,分别处死一半动物,采用免疫组化法检测视网膜组织中VEGF-a、VEGF-b的表达。结果成模后用药第4周、8周,模型组、双丹明目组、阳性对照组视网膜中VEGF-a、VEGF-b蛋白表达平均灰度值均低于正常组,平均光密度值均高于正常组,其中模型组与正常组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01);双丹明目组、阳性对照组VEGF-a、VEGF-b表达的平均灰度值均高于模型组、平均光密度值均低于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论双丹明目胶囊能明显提高糖尿病模型大鼠视网膜中VEGF-a、VEGF-b表达的平均灰度值、降低其平均光密度值,表明双丹明目胶囊能明显降低VEGF-a、VEGF-b在视网膜中的表达。

动态检测乳腺癌患者手术前后血清IL-6、VEGF-A表达的临床意义

目的对乳腺癌患者手术前后动态检测血清中白细胞介素-6(IL-6)、血管内皮生长因子-A(VEGF-A),探讨IL-6、VEGF-A表达与乳腺癌预后的相关性。方法作者将60例乳腺癌患者及57例乳腺良性病患者分为两组:观察组(60例乳腺癌患者);对照组(67例乳腺良性病患者)。作者分别手术前、后均采用双抗体夹心法(ELISA法)检测两组病人血清IL-6、VEGF-A的表达。结果①观察组、对照组术前血清IL-6、VEGF-A水平表达具有差异性(P<0.01);术前、后观察组本组血清IL-6、VEGF-A水平表达呈显著差异(P<0.01)。结论通过对两组血清IL-6、VEGF-A表达的动态变化,观察组IL-6、VEGF-A表达的动态变化,显示乳腺癌患者手术前后不同的IL-6、VEGF-A表达与其预后呈正相关性改变。

动态检测CA-153、VEGF-A探讨乳腺癌预后的相关性研究

目的通过对乳腺癌患者手术前后动态检测其血清CA-153、VEGF-A,探讨CA-153、VEGF-A表达与乳腺癌预后的相关性。方法作者将127例乳腺良、恶疾病患者分为两组:观察组(60例乳腺癌患者);对照组(67例乳腺良性疾病患者)。手术前、后均采用ELISA分别检测患者血清CA-153、VEGF-A水平。结果①观察组与对照组患者术前检测血清中CA-153、VEGF-A,表达已具有差异性变化(P<0.01);②观察组手术前、后乳腺癌患者血清CA-153、VEGF-A水平表达呈差异性改变(P<0.01)。③观察组手术后与对照组血清CA-153表达(P>0.05);VEGF-A表达(P<0.05)。结论通过对两组血清CA-153、VEGF-A表达的差异,乳腺癌患者手术前后不同的CA-153、VEGF-A表达与其预后呈正相关性改变。

消瘤汤对结直肠癌移植瘤裸鼠血清VEGF-A、VEGF-C蛋白表达的影响

目的:探讨消瘤汤对结直肠癌移植瘤裸鼠血清VEGF-A、VEGF-C蛋白表达的影响。方法:SPF级裸小鼠60只按随机数字表分为治疗组(消瘤汤正常剂量组、贝伐单抗组及消瘤汤高、低剂量组)和对照组,取结直肠癌患者新鲜手术标本切成小植块移植到裸鼠皮下,肿瘤成长后再分别取小植块经手术移植到一批裸鼠结肠系膜侧。移植后,消瘤汤正常剂量组给予消瘤汤正常剂量灌胃;贝伐单抗组给予贝伐单抗静脉注射;消瘤汤高、低剂量组分别予消瘤汤高、低剂量灌胃;对照组给予蒸馏水灌胃。观察治疗组和对照组裸鼠血清VEGF-A、VEGF-C蛋白表达情况。结果:各治疗组裸鼠血清VEGF-A、VEGF-C蛋白表达水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);消瘤汤组与贝伐单抗组及消瘤汤高、低剂量组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:消瘤汤能抑制结直肠癌患者血清VEGF-A、VEGF-C蛋白表达可能是消瘤汤抗肿瘤的作用机制之一。

结直肠癌中FcγRⅡ和VEGF-A的表达与临床意义

目的:探讨免疫球蛋白G Fc段低亲和力受体Ⅱ(FcγRⅡ)和表皮生长因子A(VEGF-A)在结直肠癌,发生发展中的作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR法,检测FcγRⅡ、VEGF-A基因在56例大肠癌组织和相应切缘正常组织中的表达,分析FcγRⅡ和VEGF-A与患者临床病理特征之间的关系,以及FcγRⅡ与VEGF-A的相关性。结果:FcγRⅡ基因表达在大肠癌组织中较正常组织低,其表达与大肠癌患者的浸润深度和TNM分期相关(均P<0.05)。VEGF-A基因表达在大肠癌组织中较正常组织高,其表达与大肠癌患者的年龄、肿瘤大小、浸润深度和TNM分期相关(均P<0.05)。肠癌患者FcγRⅡ基因的表达与VEGF-A呈负相关(r=-0.104,P=0.002)。结论:FcγRⅡ基因与肠癌的侵袭转移等密切相关,其高表达提示较好的预后,推测可能是通过调控VEGF-A的表达而发挥作用。FcγRⅡ基因有望成为肿瘤免疫治疗的新途径。

雷帕霉素对人淋巴瘤Raji细胞增殖、VEGF-A及HIF-1α表达的影响

目的:探讨雷帕霉素对人淋巴瘤细胞株Raji细胞体外增殖、VEGF-A及HIF-1α表达的影响及其临床意义。方法:不同浓度(0、10、50、100、250、500nmol/L)雷帕霉素对Raji细胞作用不同时间(24、48、72h)后,使用CCK8法检测细胞增殖的变化;采用蛋白质印记法(Western blot,WB)检测72h组不同浓度m TOR、VEGF-A、HIF-1α蛋白变化;采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测其mRNA的变化。结果:雷帕霉素对Raji细胞增殖具有显著抑制作用(P<0.01);雷帕霉素处理72h后的Raji细胞,随着药物浓度增加,m TOR、VEGF-A和HIF-1α蛋白明显减少(P<0.01);雷帕霉素处理后的Raji细胞,随着药物浓度和作用时间的增加,m TOR、VEGF-A和HIF-1α的mRNA明显减少(P<0.01);m TOR、VEGF-A及HIF-1α的mRNA表达两两之间呈正相关性。结论:雷帕霉素通过m TOR通路,能明显抑制人淋巴瘤Raji细胞增殖过程,表现出明显的时间、剂量效应依赖关系;同时也可明显减少m TOR、VEGF-A、HIF-1α的mRNA的转录表达,减少p-m TOR、VEGF-A、HIF-1α等蛋白的翻译表达,从而抑制Raji细胞的生长及其血管新生。

大肠癌中淋巴管密度和VEGF-A表达与微血管密度的关系

目的探讨大肠癌中淋巴管密度(LVD)和血管内皮生长因子-A(VEGF-A)的表达与微血管密度(MVD)的关系。方法应用抗podoplanin及抗VEGF-A单克隆抗体检测大肠癌组织及相应正常大肠组织中的LVD,并计数CD34阳性着色的大肠癌组织MVD。结果①大肠癌组织中的LVD明显高于相应的正常组织(P<0.01),LVD与淋巴管内癌栓密切相关(P<0.05)。②VEGF-A在大肠癌组织中的表达显著高于相应正常组织(P<0.01),VEGF-A的表达与MVD(P<0.05)相关但与LVD无关(P>0.05)。③大肠癌中MVD显著高于LVD(P<0.01),但两者无关。结论淋巴管的形成在大肠癌的发生、发展过程中起重要的作用;VEGF-A在大肠癌组织中可诱导微血管形成但与淋巴管的形成无关;大肠癌的MVD显著高于LVD,但两者无相关性,提示血管形成及淋巴管形成在大肠癌的发生、发展过程中可能为相互独立的过程。

VEGF-A和VEGF-C在乳腺癌组织中的表达及意义

目的探讨同时阻断血管内皮生长因子A(VEGF-A)、血管内皮生长因子C(VEGF-C)的表达,是否能有效抑制肿瘤血管和淋巴管的新生,从而抑制肿瘤增殖和转移。方法收集临床手术切除、石蜡包埋的乳腺癌标本98例、转移淋巴结42例、癌前病变7例,观察乳腺癌组织中VEGF-A、VEGF-C、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果 98例乳腺癌中癌细胞表达VEGF-A蛋白者84例(85.7%),89例VEGF-C染色阳性(90.8%)。VEGF-A、VEGF-C表达在淋巴结转移组明显高于未转移组(P<0.05)。随着VEGF-A、VEGF-C表达增强,PCNA表达渐增强,VEGF-A、VEGF-C分别与PCNA表达呈等级相关。结论 VEGF-A、VEGF-C可促进MCF-7细胞的增殖,阻断两者的表达。VEGF-A在乳腺癌间质血管生成中起重要促进作用。VEGF-A蛋白表达与乳腺癌淋巴结转移密切相关。

VEGF-A信号通路与肾小球滤过屏障

肾小球滤过屏障（Glomerular filtration barrire,GFB）由多窗孔内皮细胞及其表面糖蛋白、基底膜（glomerular basement membrane,GBM）和足细胞及其足突裂孔隔膜三部分组成,是阻止血浆蛋白滤过的主要物理屏障。最近研究表明,GFB并非被动地阻止血浆蛋白漏出,而是一个动态功能整体,依赖于内皮细胞、GBM和足细胞之间精密的相互作用,

VEGF-A相关基因扩增是预测索拉菲尼对肝细胞肝癌治疗有效的分子标志

<正>最近Elad Horwitz等[1]通过对动物模型及临床肝癌标本的研究发现,VEGF-A相关基因的扩增是预测原发性肝细胞肝癌患者接受索拉菲尼治疗反应的分子标志。首先作者通过分析Mdr2-/-小鼠肝癌标本及人肝癌标本中发现7%~10%的肝细胞肝癌有与VEGF-A相关的基因扩增。

重组VEGF-A_(189)发酵、纯化及鉴定

为了获得大量重组血管内皮生长因子(VEGF-A189)蛋白的可溶性表达,对重组VEGF-A189工程菌进行发酵条件的优化并开展发酵研究.通过摇瓶培养进行可溶性发酵条件优化,在5L发酵罐中发酵重组VEGF-A189工程菌,将发酵产物经镍离子柱亲和层析纯化,并对发酵产物进行SDS-PAGE,WesternBlot和ELISA等分析鉴定.结果表明,重组VEGF-A189工程菌可溶性发酵条件为:37℃培养重组VEGF-A189工程菌4h,加入0.3mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)于28℃诱导表达4h.在5L发酵罐中按比例放大发酵,在补料发酵3.5h后菌体密度(A600nm)达到8.0,调整发酵温度到28℃,IPTG诱导4h后的菌体密度为13.72,菌体产量为40g/L.镍离子柱亲合层析纯化后重组VEGF-A189纯度达到90%以上,回收率大于80%,WesternBlot、ELISA分析结果显示,重组VEGF-A189蛋白和抗VEGF抗体有良好的结合活性.结果表明经过发酵条件优化后发酵可获得有免疫结合活性的可溶性重组VEGF-A189蛋白.

IL-6、VEGF-A因子动态变化与消化道恶性肿瘤预后的相关性研究

目的通过动态检测消化道恶性肿瘤患者手术前后其血清中白细胞介素-6(IL-6)、血管内皮生长因子-A(VEGF-A)的表达,探讨消化道恶性肿瘤预后与IL-6、VEGF-A表达的相关性。方法作者将67例消化道恶性肿瘤患者设为观察组;69例消化道良性疾病患者设为对照组。作者分别在手术前、后采血,统一用双抗体夹心法(ELISA法)动态检测两组患者血清IL-6、VEGF-A的表达水平。结果①两组术前血清IL-6、VEGF-A水平表达已呈差异性变化(P<0.01);②观察组手术前、后血清IL-6、VEGF-A水平表达(P<0.01);③观察组手术后与对照组相比较IL-6表达(P>0.05);而VEGF-A表达仍高于对照组(P<0.05)。结论通过对两组血清IL-6、VEGF-A表达的差异,及观察组手术前、后IL-6、VEGF-A表达的动态变化,显示消化道恶性肿瘤患者血清IL-6、VEGF-A表达与其预后呈正相关性改变。