许铣教授中西医结合治疗玫瑰痤疮的临证经验

许铣教授从事皮肤科临床、科研工作60余年,中西医结合治疗玫瑰痤疮经验丰富。许铣教授认为,肝郁血热、脾胃湿热为玫瑰痤疮的核心病机。治疗应以中药内服为主,结合疾病分型分期辨证论治,红斑与毛细血管扩张期的基本病因病机为肝失疏泄,郁而化热,基本治法为凉血疏肝兼以养阴清热;丘疹脓疱期主要以脾胃运化失司、脾胃湿热为主,治法为清热燥湿、解毒散结。病程日久者往往合并血瘀和湿热。外治中药常选择具有清热凉血、燥湿、解毒之药效及抑菌、控脂之药理作用的中药。同时,可以根据疾病的临床表现选用西药辅助治疗,临床疗效显著,附验案1例加以佐证。

女性盆腔炎性疾病中西医结合诊治指南

盆腔炎性疾病(Pelvic inflammatory disease,PID)是指女性上生殖道的一组感染性疾病,包括子宫内膜炎、输卵管炎、输卵管卵巢脓肿、盆腔腹膜炎。炎症可以局限于一个部分,也可以同时累及几个部位。严重的PID可引起弥漫性腹膜炎、败血症、感染性休克,甚至危及生命。若PID未接受及时彻底的治疗可转为盆腔炎性疾病后遗症(Sequelae of pelvic inflammatory disease,SPID),主要包括慢性盆腔痛、PID反复发作、不孕和输卵管妊娠,严重影响了育龄期女性的身心健康。盆腔炎性疾病多归属于中医学“妇人腹痛”“带下病”和“癥瘕”等范畴,盆腔炎性疾病后遗症多归属于中医学“妇人腹痛”“带下病”“癥瘕”和“不孕”等病证范畴。

基于中医眼科六经辨证理论探讨近视的辨治思路

全球迅速增长的近视问题给人们的生活和学习带来负面影响。近视的病因病理机制复杂,基于不同理论,近视的治疗方法也多种多样。基于中医眼科六经辨证理论,并结合近视的现代医学理论探索其病因和病理机制,分别从厥阴经、少阴经、太阴经论治轻、中度近视、高度近视以及病理性近视,以期为近视的治疗提供思路。

西方错误社会思潮对大学生政治认同的消解及应对

全球化背景下,多元文化交流成为世界潮流,意识形态领域的社会思潮纷纭激荡。高校是社会思潮的汇集地,是意识形态工作的前沿阵地,西方社会中的一些错误思潮给大学生造成思想混乱,对大学生政治认同产生不同程度的冲击。因此,理性剖析西方错误社会思潮的理论本质和政治实质,谨慎研判其消极影响,积极引导大学生的价值观念,强化大学生的政治认同,对提升思想政治教育有效性具有重要的理论和现实意义。

盐酸小檗碱及其与环孢素A合用对大鼠肝脏和小肠CYP3A1的影响

目的 :阐明盐酸小檗碱 (berberinechloride ,Ber)及其与环孢素A (cyclosporin ,CsA)合用对大鼠肝脏和小肠CYP3A1的影响。方法 :实验分 7组 :溶媒对照组、15 0mg·kg-1酮康唑组、10 0mg·kg-1Ber组、2 0 0mg·kg-1Ber组、4 5mg·kg-1CsA组、10 0mg·kg-1Ber +45mg·kg-1CsA组、2 0 0mg·kg-1Ber +45mg·kg-1CsA组 ,采用RT PCR和Westernblot等方法测定大鼠肝脏和小肠CYP3A1的表达水平。结果 :RT PCR结果显示 :灌胃给药 12d后 ,除了 10 0mg·kg-1Ber组外 ,其余各用药组对大鼠肝脏CYP3A1基因表达均有明显的抑制作用。Westernblot结果显示 :给药 6d后 ,2 0 0mg·kg-1Ber +45mg·kg-1CsA组对大鼠肝脏CYP3A1的表达有明显抑制作用 ;给药 12d后 ,10 0mg·kg-1Ber +45mg·kg-1CsA ,2 0 0mg·kg-1Ber +45mg·kg-1CsA组对大鼠肝脏和小肠CYP3A1的表达均有明显抑制作用。结论 :通过增强CsA对肝脏和小肠CYP3A1基因表达的抑制作用 ,从而减少CsA在肝脏和小肠的代谢及消除 ,可能是Ber增加CsA血浓度的重要机制。

马铃薯S病毒外壳蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

以田间采集的马铃薯病叶中提取的马铃薯病毒S(PVS)总RNA为模板,通过RT-PCR获取长度为890 bp的PVS-cp的cDNA,克隆至pGEM-T载体上。酶切回收该基因片段,并构建了该基因的原核表达质粒pBV-pvs。SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析表明:PVS-cp基因在大肠杆菌JM109中可特异地高效表达分子量约33kD的蛋白,且表达蛋白具有良好的抗原活性。利用该表达产物免疫动物家兔,获得的抗血清可用于大田马铃薯S病毒的快速检测。

Smad信号通路在骨髓源性心肌干细胞向心肌分化中的作用

目的研究Smad信号通路在BMP_2诱导的骨髓源性心肌干细胞(MCSCs)向心肌分化中的作用,探讨MCSCs向心肌分化的信号转导机制。方法从SD大鼠骨髓中筛选MCSCs,用骨形态发生蛋白-2(BMP_2)诱导向心肌定向分化。Westernblotting和免疫细胞化学法检测诱导后细胞内磷酸化的Smadl/5/8的表达及其随诱导时间在细胞内分布的变化。RT_PCR检测诱导前后细胞内GATA_4和心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)mRNA的表达。结果BMP_2诱导后15min,细胞内可检测到磷酸化的Smadl/5/8的表达,30min^1h表达明显增加,1h后开始降低,4h呈低表达。BMP_2诱导后15min,磷酸化的Smadl/5/8仅见于胞质中,30min胞质和胞核均见表达,1h主要在胞核内表达。BMP_2诱导后2周,细胞明显表达GATA_4和cTnTmRNA。诱导后4周细胞呈现成熟心肌细胞样形态。用SB203580抑制Smad信号后,GATA_4和cTnTmRNA的表达显著降低,细胞形态变化不明显。结论Smad信号通路在BMP_2诱导MCSCs向心肌分化中发挥重要的介导作用。

产几丁质酶苏云金芽孢杆菌的筛选及其对甜菜夜蛾高毒菌株的增效活性

从 8 0株Bt菌株中筛选出两株几丁质酶活性高的菌株QB5 1和HD7,并通过比色法测定了两菌株分别在不同pH值条件下的酶产量 ,发现两菌株均在pH值为 7.0时产酶量最大 ,分别为 35 5U ml和 314U ml,无论是在酸性还是碱性诱导条件下酶产量均明显降低。以甜菜夜蛾初孵幼虫为对象的生物测定表明 ,两菌株的诱导培养液均对Bt菌株DL5 789有明显的增效活性 ,增效效果分别为 2 .35倍和 1.5 2倍。SDS -PAGE和WesternBlotting分析表明 ,这两株Bt菌株所产生的几丁质酶分子量均为 6 1kDa。

低氧运动后不同恢复环境腓肠肌热休克蛋白70表达变化

目的:实验旨在观察急性间歇低氧(氧含量12.7%)跑台运动后不同恢复环境下大鼠腓肠肌热休克蛋白HSP70表达的时程变化。方法:雄性SD大鼠进行低氧环境下的急性间歇跑台运动,用Western blot方法检测低氧运动后即刻、低氧运动后低氧恢复及常氧氧恢复1 d、2 d、7 d的大鼠腓肠肌HSP70蛋白表达水平。结果:急性间歇低氧运动后即刻HSP70蛋白表达水平开始升高。常氧恢复第1 d HSP70蛋白表达水平显著高于常氧对照组,P<0.05。第2 d、第7 d呈现先降低后升高的趋势;低氧恢复中HSP70蛋白表达水平均显著高于常氧对照组,P<0.05。结论:急性间歇低氧运动后能诱导HSP70蛋白表达水平升高;低氧恢复过程中HSP70蛋白高水平表达维持的时间要比常氧恢复长。

刀额新对虾变应原的分离、鉴定与纯化

目的通过对我国常见的刀额新对虾变应原蛋白进行分离、鉴定与纯化,以提供虾特异性变应原用于食物变态反应疾病的诊断和治疗。方法通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离刀额新对虾的蛋白质组分并测定其分子量,收集过敏病人血清,采用免疫印迹(Western-blotting)法鉴定其变应原成分,通过离子交换层析对刀额新对虾变应原进行初步纯化,通过疏水层析和凝胶过滤层析进一步对变应原纯化。结果刀额新对虾有17条蛋白带,其中主要条带有10条,68和36 kD为可与虾过敏性病人血清IgE结合的特异性变应原;通过各种层析方法纯化出刀额新对虾68 kD变应原,纯度为96%。结论对刀额新对虾变应原进行分离、鉴定和纯化,得到高纯度的68 kD刀额新对虾变应原,为临床虾变态反应疾病的诊断和治疗奠定基础。

本地毛形线虫49 Ku ES蛋白结构基因的分子克隆及原核表达

提取Trichinella nativa(T.nativa)肌幼虫的总RNA,用RT-PCR方法扩增出了编码T.nativa 49 Ku ES蛋白的结构基因。基因克隆后测序,序列测定结果表明:目的基因TNPG长度为951 bp,核苷酸序列同已发表的Trichinella spiralis(T.spiralis)相应的序列P49同源性为97.68%,所推导的氨基酸序列同源性为95.24%。将目的基因TNPG插入到原核表达载体pET-30a的BamHⅠ酶切位点处,并转化到感受态表达菌中进行诱导表达。结果显示TNPG在原核表达菌BL-21中获得了高效表达,表达产物为40.8 Ku的融合蛋白,表达量达到菌体总蛋白的22.8%。通过Western blot分析,表达产物可以被小鼠T.nativa和T.spiralis阳性血清以及它们的中国地理株的小鼠血清特异性识别。

M_3受体激动对心肌细胞损伤的保护作用

目的 探讨激动M3受体对心肌细胞损伤的保护作用。方法 以H2 O2 诱导大鼠培养心肌细胞损伤模型为基础 ,给予M3受体激动剂胆碱和M3受体阻断剂 4DAMP进行干预。末端标记法 (TUNEL)行细胞凋亡检测 ;West ernBlot蛋白印迹检测凋亡抑制蛋白Bcl 2。结果 ①胆碱可显著降低H2 O2 对心肌细胞的损伤 ,提高心肌细胞存活率 ,并降低细胞的凋亡率 ;②胆碱可增加凋亡心肌细胞Bcl 2的表达 ;③M3受体阻断剂 4DAMP可逆转胆碱的上述作用 (P <0 .0 1)。结论 M3受体激动对H2 O2 诱导的心肌细胞损伤有保护作用。

犬瘟热病毒疫苗株H蛋白基因片段的克隆与表达及表达产物抗原性的初步鉴定

根据发表的犬瘟热病毒(CDV)参考株Ondetstepoort的序列设计一对引物,以CDV感染的Vero细胞总RNA为模板,经RT-PCR扩增得到549bp DNA片段,将该片段以正确的阅读框架定向克隆于pGEX-4T-1中,然后将重组质粒转化宿主菌RosettaTM,在37℃、1.0mmol/L IPTG诱导下外源基因获得良好表达。经SDS-PAGE鉴定,表达的融合蛋白约46ku,与预期值一致。Western blot试验显示,CDV免疫的小鼠血清可特异的识别该重组蛋白,表明该重组蛋白具有一定的免疫原性。

半边旗提取物5F对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PMETS-1mRNA和VEGF蛋白表达的影响

目的:研究半边旗提取物5F(以下简称5F)对HO-8910PM细胞内VEGF蛋白及ETS-1mRNA表达的影响,探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制.方法:RT-PCR分析ETS-1mRNA的表达;Western blot分析VEGF蛋白的表达.结果:25～100 μmol/L 5F作用HO-8910PM细胞24 h后,明显下调ETS-1mRNA的表达;5F明显下调VEGF蛋白表达水平.结论:5F抗肿瘤侵袭转移能力与ETS-1mRNA和VEGF蛋白的表达有关.

酸性肽对神经元凋亡的抑制(英文)

背景:高浓度的一氧化氮能引起神经细胞的凋亡。因此抑制一氧化氮引起的细胞凋亡就能达到预防和治疗老年痴呆病的目的。目的:观察酸性肽能否抑制一氧化氮引起的神经元凋亡。设计:对照观察细胞和分子实验。材料:实验于2003-05/2005-05在郑州大学生物活性肽研究所第二实验室和郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室细胞培养室完成。新生的24h内SD雄性大鼠,由河南省动物中心提供(410117)。方法:对新生的SD大鼠海马神经元进行原代培养。取培养至第11天的神经细胞,用不同剂量的酸性肽预处理6h,再加入终浓度为50μmmol/L的亚硝基铁氰化钠,继续培养24h,收集细胞进行实验。每次实验均分为以下5组:正常对照组、亚硝基铁氰化钠处理组、亚硝基铁氰化钠+0.0375mg/mL酸性肽组、亚硝基铁氰化钠+0.075mg/mL酸性肽组,亚硝基铁氰化钠+0.15mg/mL酸性肽组。用噻唑蓝法测定细胞的存活率,用免疫组织化学法对神经丝蛋白进行染色,再用吖啶橙荧光染色法显示细胞凋亡的形态。用琼脂糖凝胶电泳法分析凋亡细胞的DNA梯带。用WesternBlot和吸光度扫描分析Bcl-2蛋白和Bax蛋白的表达水平。主要观察指标:①噻唑蓝法比色法检测细胞存活率的实验结果。②细胞凋亡的核型观察结果。③细胞凋亡的DNA电泳分析。④Bcl-2和Bax蛋白的WesternBlot分析结果。结果:①亚硝基铁氰化钠处理组的神经元存活率为58.9%,亚硝基铁氰化钠+0.037mg/mL酸性肽处理组为70.0%,亚硝基铁氰化钠+0.075mg/mL酸性肽处理组为72.8%,亚硝基铁氰化钠+0.15mg/mL酸性肽处理组为75.3%。②细胞凋亡的核型观察结果:亚硝基铁氰化钠处理组呈现细胞凋亡的明显特征。不同浓度的酸性肽+亚硝基铁氰化钠共同处理组海马神经元的细胞核接近正常对照组的细胞核形态。③细胞凋亡的DNA电泳分析结果表明,仅亚硝基铁氰化钠处理组的神经元DNA在琼脂糖凝胶电泳上显示出清晰的细胞凋亡的特征性DNA梯带。④Bcl-2和Bax蛋白的Western Blot和吸光度扫描分析结果显示,亚硝基铁氰化钠处理组Bcl-2蛋白表达水平下降,Bax蛋白表达水平升高。而不同浓度的酸性肽+亚硝基铁氰化钠共同处理组的Bcl-2蛋白水平随酸性肽浓度逐渐增加,Bax蛋白的表达水平逐渐下降。结论:酸性肽能够抑制神经元的凋亡,增加神经元Bcl-2蛋白的表达水平,抑制神经元Bax蛋白的表达水平。

A组轮状病毒结构蛋白基因在马铃薯细胞中的初步表达

目的 在马铃薯细胞中表达轮状病毒结构蛋白。方法 采用RT PCR扩增截短VP4 蛋白基因 ,克隆于植物表达载体pBI2 2 1,再双酶切pBI2 2 1,将带有CaMV35S启动子、外源基因及终止子的片段转入pSB11,通过三亲杂交方法 ,制备农杆菌转化载体pSB111 VP4 ,并对pSB111 VP4 作点杂交检测 ,筛选鉴定重组子 ,对马铃薯组织细胞进行转化。结果 转化细胞经Western印迹检测其免疫活性 ,具有良好的抗原性。结论 为研制轮状病毒重组疫苗、亚单组疫苗。

益妇宁软胶囊对去势大鼠骨组织雌激素受体表达的影响

目的:研究不同剂量的益妇宁软胶囊(YFN)对去势大鼠骨组织中雌激素受体(ER)表达的影响,探讨该方对绝经后骨质疏松症(PMO)的治疗机制。方法:采用3月龄SD雌性大鼠60只, 50只行双侧卵巢切除术,随机分为YFN大剂量组(相当于原生药0 .8g/kg)、YFN中剂量组(相当于原生药0 .4g/kg)、YFN小剂量组(相当于原生药0 .2g/kg)和阳性药对照组(己烯雌酚0 1mg/kg)、模型对照组,每组10只;另10只为假手术组。术后4周开始给药,给药12周后收集标本。采用放免法测定血清雌二醇水平,Westernblotting免疫印迹法检测胫骨组织中ER表达情况。结论:YFN能明显提高去势大鼠体内雌激素水平及骨组织雌激素受体的表达量,通过这两条途径起到治疗绝经后骨质疏松症的作用。

丝裂原活化蛋白激酶在卵巢癌中的表达及意义

目的：探讨丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）的三个亚族ERK1、JNK1、p38在卵巢癌中表达的意义及三者之间的关系。方法：应用免疫组化及Western bloting印迹分析的方法，检测ERK1、JNK、p38在50例卵巢上皮癌、30例卵巢良性上皮性肿瘤和30例正常卵巢组织中的表达，判断ERK1、JNK1、p38与临床病理因素的关系，明确MAPKs亚族间的相关性。结果：JNK1、p38在Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌组织中的表达明显高于正常卵巢组织和卵巢良性上皮性肿瘤（P〈0．05）。ERK1在Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌组织中的表达明显高于正常卵巢组织和卵巢良性上皮性肿瘤（P〈0．05）。JNK1与p38蛋白阳性率呈明显的正相关（P〈0．05）。结论：MAPKs不同亚族在卵巢癌的发病学中起到重要作用，并与卵巢癌期别有关。

Y14和Upf1在人乳腺癌细胞与乳腺细胞中的表达及意义

目的:研究Y14和Upf1在人乳腺癌细胞株与人乳腺细胞株中的表达及意义。方法:应用Westernblotting、RT-PCR等方法测定Y14和Upf1在人乳腺癌细胞株MCF-7、ZR-75-30、T47D、MDA-MB-435s、MDA-MB-453、MDA-MB-231与乳腺细胞株HBL-100中的表达情况。结果:Y14和Upf1在乳腺癌细胞株与乳腺细胞株中的表达水平有明显差异,6株乳腺癌细胞中的Y14和Upf1表达明显高于乳腺细胞株(P<0.05)。结论:NMD在乳腺癌细胞株中的作用明显强于乳腺细胞株。

抗棉铃虫组织蛋白酶B单克隆抗体的制备及鉴定

分别以棉铃虫组织表达的组织蛋白酶B和基因重组的大肠杆菌表达的组织蛋白酶B为抗原免疫BALB c小鼠 ,选择血清抗体滴度高的免疫小鼠 ,取其脾细胞和Sp2 0骨髓瘤细胞进行细胞融合 .经ELISA法筛选阳性克隆和有限稀释法克隆细胞 ,共获得分泌抗组织蛋白酶B的单克隆抗体杂交瘤细胞 3株 ,分别命名为 9D5 ,10 0E2和10 0H6 .以ELISA法和Westernblotting法对 3株杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体进行了特异性鉴定 ,其中 9D5和10 0E2能够同时识别两种不同来源的组织蛋白酶B ,而 10 0H6只能识别基因重组的大肠杆菌表达的组织蛋白酶B .