辛硫磷降解菌X-1的分离鉴定及降解性状的初步研究

通过富集培养从南京周围土壤中分离到一株辛硫磷降解菌X 1.X 1能以辛硫磷为唯一碳源生长 ,初步鉴定为邻单胞菌属 (Plesiomonassp .) .X 1有广泛的碳、氮源利用谱 ,在 2 5— 30℃长势较好 ,最适生长pH是 7 0 .X 1能在 2 4h内 ,使辛硫磷降解 96 % .质粒检测发现有两条大的质粒条带 .

大鼠全脑缺血再灌注后HAX-1蛋白与皮质神经元凋亡的关系

目的探讨大鼠全脑缺血再灌注后皮质组织中HAX-1蛋白(HS1-associated protein X-1,HAX-1)与皮质神经元凋亡的关系。方法建立大鼠四血管法全脑缺血模型,将实验动物分为5组(n=5):正常组,缺血6、24、48、72h组。采用HE染色,观察大鼠皮层组织病理变化;采用免疫组化、TUNEL法检测大鼠全脑缺血再灌注后HAX-1蛋白的表达以及皮质神经元凋亡蛋白Caspase-3的表达情况。结果HAX-1蛋白在缺血后6h表达最高(37.60±3.45),24、48、72h降低[分别为(11.40±1.14)、(10.40±1.52)、(9.80±1.30)],且低于正常水平(P<0.01);Caspase-3蛋白随着缺血时间的延长逐渐增高[6、24、48、72h分别为(72.80±5.49)、(106.20±6.91)、(129.00±19.74)、(166.20±15.32)](P<0.01),并伴随神经元凋亡的数目逐渐增加[(92.00±9.06)、(133.80±10.64)、(157.00±10.83)、(187.80±14.96)]。结论全脑缺血再灌注后皮质神经元中HAX-1蛋白在短期缺血中表达升高,可能参与神经元的抗凋亡,随着缺血时间延长,其表达水平降低,与神经元的凋亡增强相关。

黑曲霉X-1产木聚糖酶液体发酵工艺研究

目的:提高黑曲霉X-1菌株液体发酵木聚糖酶的产量。方法:采用单因素和正交试验对黑曲霉X-1菌株产木聚糖酶液体发酵培养基和培养条件进行了优化。结果:通过正交试验找出最大影响因素为玉米芯和葡萄糖的供应,优化后的最佳培养基和培养条件为:玉米芯粉3%,葡萄糖0.5%,蛋白胨1%,KH2PO40.5%,MgSO4.7H2O 0.1%,Tween-80 0.1‰,pH 6.5,30℃、200r/min摇瓶培养120h。结论:黑曲霉X-1菌株在优化后的培养基和培养条件下,木聚糖酶活力高达1630.78U,比优化前木聚糖酶活力(724.63U)提高了125.05%。

小鼠HAX-1基因重组腺病毒载体的构建表达和鉴定

目的构建小鼠Hax-1基因的重组腺病毒载体,以期进一步进行系统性红斑狼疮模型BXSB小鼠的体内实验研究。方法用RT-PCR方法扩增小鼠全长Hax-1基因,经T/A克隆后,亚克隆至穿梭质粒pAdtrack-CMV上,在BJ5183细菌中和AdEasy-1进行同源重组,筛选阳性克隆,酶切、测序鉴定正确后,脂质体法转染AD-293细胞进行包装,扩增,氯化铯密度梯度离心纯化病毒并检测其滴度。RT-PCR鉴定重组腺病毒转染AD-293细胞后Hax-1的表达,同时进行野生型腺病毒的检测。结果经酶切及测序证实Hax-1基因重组腺病毒载体构建成功。PCR检测转染后AD-293细胞内Hax-1基因水平的表达,且无野生型腺病毒的产生。结论成功构建了含小鼠Hax-1基因的重组腺病毒载体,为探讨Hax-1的生物学功能奠定了基础。

卵巢癌组织即刻早期基因IEX-1的表达

目的检测即刻早期基因X-1(IEX-1)在卵巢癌、卵巢良性肿瘤组织及交界性卵巢肿瘤组织中的表达,初步探讨其与卵巢癌发生发展的关系。方法应用免疫组化法对105例卵巢组织(良性肿瘤21例、交界性肿瘤24例、恶性肿瘤60例)进行IEX-1蛋白检测。结果IEX-1蛋白在卵巢癌组织中的阳性表达率[38.3%(23/60)]均明显低于良性[80.9%(17/21)]和交界性[62.5%(15/24)]卵巢肿瘤组织(P<0.01),IEX-1在不同年龄、组织学类型的卵巢癌中阳性表达率差异无统计学意义;FIGO分期晚期(Ⅲ～Ⅳ期)及组织分化程度低者(G3)IEX-1阳性表达率低于FIGO分期早期(Ⅰ～Ⅱ)及中高分化者(G1～G2),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论IEX-1蛋白低表达可能与卵巢癌的发生发展有关。

新生大鼠缺血缺氧性脑损伤组织中HAX-1、Caspase-3、bcl-2表达变化及意义

目的观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)组织中血细胞特异蛋白1相关蛋白X-1(HAX-1)、Caspase-3、bcl-2的表达,并探讨其意义。方法 128只大鼠随机分为观察组和对照组各64只,观察组采用Rice法制备HIBD模型,对照组仅分离左侧颈总动脉不结扎。分别于造模后0、2、6、12、24、48、72 h断头取脑,采用Western blot法检测大脑皮层HAX-1、Caspase-3、bcl-2蛋白。结果与对照组同时点比较,观察组HAX-1于造模后6、12、18、48 h表达升高,Caspase-3于造模后6、12、18 h表达升高,bcl-2于造模后2、6、12 h表达升高,P均<0.05;观察组造模后12、18 h的HAX-1的表达水平均高于造模后6 h,P均<0.05。结论新生大鼠HIBD模型大脑皮层中存在HAX-1、Caspase-3、bcl-2高表达,三者共同参与了HIBD的发生、发展。

黑洞候选体X射线双星Cyg X-1硬度比周期特性研究

利用离散傅里叶分析法,基于RXTE(Rossi X-ray Timing Explorer)/ASM(All-Sky Monitor,1.5～12 keV)观测数据,对黑洞候选体X射线双星Cyg X-1硬度比HR(5～12 keV/3～5 keV)(简写HR)的时变特性进行了分析,结果表明黑洞候选体X射线双星Cyg X-1硬度比HR存在明显的周期特性:(1)混合态(硬态+软态,本文指MJD=50087～55841期间所有的观测数据)时,HR存在T≈5.6 d、40.0 d、78.4 d、173.8 d以及400/800 d的时变周期;(2)硬态时,HR存在T≈5.6 d、33.7/67.6 d、45.3 d和165.3 d的周期特性;(3)软态时,HR出现了T≈38.5 d、48.1 d和128.3 d的周期性变化.并利用粘滞理论和Zdziarski吸积盘模型讨论了以上周期特性的物理机制.

β-环糊精和Triton X-100存在下邻菲口罗啉—四碘荧光素分光光度法测定水中微量锌

研究了在β-环糊精（β-CD）和Triton X-100存在下，Zn（Ⅱ）与邻菲啰啉和四碘荧光素的显色反应，建立了光度法测定水中微量锌的新方法。结果表明：络合物的最大吸收波长为570nm，表观摩尔吸光系数为1．75×10^5L·mol^-1·cm^-1，25mL溶液中锌质量在0～20μg范围内服从比尔定律。方法已用于管网水中微量锌的测定。

Triton X-100体系层状液晶结构及其润滑性能

用小角X射线衍射和2HNMR方法测定TritonX 100/n C10H21OH/H2O体系层状液晶的结构.用高速环块磨损验机考察了不同组分含量的层状液晶对铝合金 钢磨擦副润滑性能的影响.结果表明:随着水含量的增加,层液晶两亲双层中分子的有序度降低,润滑效果也降低;随着Tri tonX 100含量增加,层状液晶两亲双层中分子有序度增加,其润滑效果提高.

黑洞候选体X射线双星Cyg X-1光变曲线的研究

利用Rossi X-ray Timing Explorer(RXTE)卫星从1996年1月到2005年5月的公共资料,研究了黑洞候选体X射线双星Cyg X-1光变曲线的周期性,并且发现了一些有趣的周期特性(T=1．0±0．2天和T=18．0±3．0天)．在硬态时,T=1．0±0．2天和T=18．0±3．0天的周期特性同时出现在它的光变曲线之中,但在软态时仅有T=1．0±0．2天的周期出现．采用一种新的方法(即微分法),同时为了检验微分法的正确性,还利用传统的方法(即快速傅立叶变换和叠加法)分析了相同的资料,并得到了与微分法相同的结果．另外也对Cyg X-1的轨道周期进行了研究,结果发现T=5．6天的轨道周期不仅出现在硬态,同时也出现在软态,只是在硬态时比在软态时明显．

TZ5X-1大斜度定向井小井眼取心技术

在塔里木油田的大斜度、小井眼中取心还是首次。介绍了塔里木油田TZ5X - 1井的取心情况 ,TZ5X - 1井最大井斜 70 .5° ,井眼直径 15 2 .4mm ,取心地层为奥陶系灰岩和白云岩 ,可钻性差、易破碎。根据地质情况 ,优选了LC - 15 2取心工具 ,与常规 2 5 0P取心工具相比 ,有独特的内外筒扶正功能 ,平均取心收获率达到 94 .9%。

IEX-1蛋白在胃癌中的表达及其意义

目的揭示即刻早期反应X-1(IEX-1)蛋白在胃癌组织及细胞系中的表达,探讨其对人胃癌细胞凋亡和增殖的影响。方法采用免疫组织化学法检测100例胃镜活检标本中IEX-1蛋白的表达,用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot检测人正常胃黏膜细胞GES-1和胃癌细胞MKN28中IEX-1基因和蛋白的表达,同时转染IEX-1的过表达质粒pc DNA3-FLAG-IEX-1和干扰质粒p LL3.7-si-IEX-1,分别采用流式细胞术及四甲基偶氮唑盐比色法检测IEX-1对细胞周期、凋亡及增殖的影响。结果胃癌组织中IEX-1蛋白表达水平高于正常胃组织和慢性胃炎组织(P<0.05),且随着病情进展,IEX-1表达水平有逐渐升高的趋势。相对于人正常胃黏膜细胞GES-1,胃癌细胞MKN28中IEX-1基因和蛋白表达更高(P<0.05)。与对照组相比,IEX-1蛋白表达增高后S期细胞比例升高,G2期细胞比例降低,细胞增殖率升高,凋亡减少(P<0.05),而干扰IEX-1蛋白表达后,G1期细胞升高,G2期细胞比例下降,细胞增殖率下降,细胞凋亡增加(P<0.05)。结论 IEX-1蛋白在胃癌组织中呈高表达,在人胃癌细胞中上调IEX-1蛋白能促进细胞增殖,发挥抗凋亡能力,干扰IEX-1蛋白表达能阻滞细胞周期进程,并诱导凋亡。

CirX-1的时变性质

利用 RXTE在不同时期的观测数据 ,分析了 Cir X-1功率密度谱和交叉谱 .功率密度谱表明 ,如果 Cir X-1是 Z源 ,那么所采用的数据将处于 Z源的不同态 ,即垂直水平分支态、水平分支态、正常分支态和耀斑分支态 .各个态上的交叉谱显示 ,随着吸积率的变化 ,Cir X-1的交叉谱由硬向软转化 ,这和 Cir X-1在一个完整 Z形状上的时变性质一致 .

基于Jurkevich法Cyg X-1光变周期特性研究

针对天文观测数据不等间隔的特点,利用Jurkevich方法对黑洞候选体X射线双星Cyg X-1近16年的Rossi X-ray Timing Explorer(RXTE)All-Sky Monitor(ASM)数据进行了频谱分析,并结合Kidger周期存在可信度的判据,发现Cyg X-1存在363±11.5 d的光变周期,但没有发现420 d的光变周期,而且150 d的光变周期可能仅仅是51±1.4 d光变周期的观测表象。

短发夹状RNA靶向抑制HaCaT细胞Hax-1基因的表达研究

目的观察短发夹状干扰RNA靶向抑制Hax-1基因诱导HaCaT细胞凋亡的作用。方法构建特异性抑制Hax-1的shRNA表达载体并转染HaCaT细胞;分别采用半定量PCR以及Western blot从mRNA和蛋白水平检测干扰效果;流式细胞术检测HaCaT细胞的凋亡。结果 Hax-1基因mRNA水平以及蛋白水平的表达均得到显著抑制,HaCaT细胞凋亡率明显升高。结论靶向Hax-1的shRNA显著抑制了Hax-1基因在HaCaT细胞中的表达,并明显诱导HaCaT细胞凋亡。

HAX-1调控人宫颈癌Hela的细胞增殖

目的探讨造血细胞特异性蛋白1(HS-1)相关蛋白X-1(HAX-1)对宫颈癌Hela细胞增殖的调控作用。方法以人宫颈癌Hela细胞系为研究模型,采用脂质体介导法将HAX-1 siRNAs和阴性对照siRNA转染Hela细胞并构建HAX-1沉默细胞系(HAX-1沉默组),以HAX-1高表达质粒和pcDNA3.1空载质粒转染Hela细胞并构建HAX-1过表达细胞系(HAX-1过表达组)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测转染后Hela细胞中HAX-1的表达情况;EdU试验检测转染后的细胞增殖能力;MTT试验检测转染后的细胞活力;流式细胞术检测HAX-1对转染后Hela细胞周期和细胞凋亡的变化;RT-qPCR检测转染后Ki-67、c-Myc、BCL-2/BAX基因的表达水平。结果沉默HAX-1后,Hela细胞中HAX-1 mRNA和蛋白质的水平显著降低,而过表达HAX-1后,Hela细胞中HAX-1 mRNA和蛋白质的水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。过表达HAX-1后,HAX-1过表达组中EdU阳性细胞数目下降,细胞活力降低,G1期细胞比例增加,S期细胞比例降低,细胞凋亡率上升,增殖相关基因Ki67表达降低,BCL-2/BAX基因显著降低(P<0.05),而HAX-1沉默组则具有相反的表现。结论HAX-1的表达抑制了Hela细胞增殖,并通过BCL-2/BAX途径诱导其凋亡。

天鹰座X-1能谱和千赫兹准周期振荡频率的相关

通过分析1997年2月27日和3月1日对天鹰座X-1的两次空间数据观测．发现千赫兹QPO频率同X射线能诺有一定相关，其行为类似于另一个X射线暂现源4U1608-52，讨论了分析结果对了解吸积及QPO产生过程的意义．

Cyg X-1频谱的细微结构

利用线性状态空间模型（Ｌｉｎｅａｒ Ｓｔａｔｅ Ｓｐａｃｅ Ｍｏｄｅｌ－ＬＳＳＭ），将 Ｃｙｇ Ｘ－１的功率谱分解为ＬＳＳＭ产生的模型功率谱和剩余功率谱两部分．集中分析剩余功率谱，结果显示， Ｃｙｇ Ｘ－１在低／硬态、转换态和高／软态三种状态的剩余功率谱有着不同的结构特征．其中高／软态和低／硬态的剩余功率谱存在一个宽峰结构，中心频率分别为～ ８ Ｈｚ和～ ５ Ｈｚ，低／硬态的剩余功率诺在～ ０．０７ Ｈｚ达到极大；转换态的剩余功率谱有双峰结构，其中心频率分别在～０．５—４Ｈｚ和～５—１１Ｈｚ，与我们以前分析的 ＱＰＯ的中心频率很接近，说明 ＱＰＯ与线性状态空间所要求的自回归模型可能属于不同的物理过程．与总功率谱比较，剩余功率谱对谱的变化部分（例如ＱＰＯ、截断频率等）更为敏感，本文对剩余功率谱中谱峰变化的原因做了初步的探讨．

Cyg X-1 X辐射的功率谱

运用自回归功率谱研究CygX－1X辐射的频谱特征，结果显示CygX－1转换态和高／软态时变频谱的连续成分，可以统一由有截断的幂律加噪声成分描述，转换态存在小于3Hz的宽峰结构及准周期振荡（QPO）成分（4－12Hz），而高／软态完全可由截断幂律谱描述，不存在显著的QPO．截断频率在各态都相当稳定，在不同态的演化与平流为主的吸积流模型（ADAF）预期的情形一致．本文结果表明，自回归功率港分析是研究X射线双星光变特征的一个有效的方法．