炎调方通过PD-1/PD-L1通路抑制脓毒症大鼠T淋巴细胞衰竭的实验研究

目的研究炎调方对脓毒症大鼠T淋巴细胞及T淋巴细胞表面表面程序性死亡蛋白(PD-1)、程序性死亡蛋白配体(PD-L1)表达的影响。方法SD大鼠(雄性)分为正常组、假手术组、模型组和炎调方组。盲肠结扎穿孔(CLP)制备脓毒症大鼠模型,于造模后12、24、48、72 h采集外周血处死大鼠(每个时间点各5只大鼠),采用流式细胞分析法测定CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)比例;双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定CD4^(+)及CD8^(+)表面PD-1、PD-L1表达水平。结果白介素-6(IL-6)在脓毒症模型组12 h分泌达到高峰后逐渐下降,降钙素原(PCT)在模型组24 h达到高峰后逐渐下降;炎调方组在12 h降低IL-6的水平(P<0.05),24 h时明显降低IL-6、PCT的水平(P<0.01)。模型组CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)比例早期分泌开始减少,48 h分泌达最低点(P<0.01);炎调方组在48 h时可升高CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)比例,提高CD4^(+)/CD8^(+)的比值而具体调节T细胞活化和增殖的功能。模型组CD4^(+)、CD8^(+)表面PD-1、PD-L1表达水平早期24 h即表达增多(P<0.01),72 h表达最多;炎调方组24 h时即可抑制PD-1、PD-L1的表达水平而具体改善T细胞衰竭的作用。CD4^(+)的比例与CD4^(+)表面PD-1、PD-L1的表达呈负相关(P<0.01);CD8^(+)比例与CD8^(+)表面PD-1、PD-L1的表达呈负相关(P<0.01)。结论脓毒症早期48 h内即出现了T细胞活化和增殖的功能衰竭引起的T细胞免疫抑制。炎调方能在脓毒症早期改善T细胞活化和增殖的功能,其机制可能与抑制PD-1/P-L1通路有关。

炎调方调控LncRNA-Miat对急性脓毒症患者免疫功能及肠道微生态的保护作用

目的 探讨炎调方调控长链非编码RNA-心肌梗死相关转录本(LncRNA-Miat)对急性脓毒症患者肠道微生态、免疫功能的保护作用。方法 选取2020年1月至2022年10月收治的急性脓毒症患者108例,根据随机数字表法分为对照组和观察组,每组54例。对照组采取常规对症治疗,观察组采用常规对症治疗+炎调方,2组均连续治疗10 d。观察组6例因意识改变或昏迷无法口服中药退出研究,为保持例数一致,对照组剔除6例,观察组和对照组各有48例进入研究。统计2组中医疗效、中医证候积分、LncRNA-Miat、磷脂酶张力蛋白同源物(PTEN)表达水平、免疫功能[核因子κB(NF-κB)mRNA、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)mRNA、白介素-1β(IL-1β)、IL-18]、肠道微生态(乳酸杆菌、肠杆菌、葡萄球菌)、28 d病死率。结果 观察组总有效率为83.33%(40/48)高于对照组62.50%(30/48),观察组发热、口渴饮冷、汗出、气喘、乏力评分低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组PTEN、LncRNA-Miat、NF-κB、NLRP3 mRNA、IL-1β、IL-18、葡萄球菌、肠杆菌低于对照组,乳酸杆菌高于对照组(P<0.05);与对照组相比,观察组APACHEⅡ、SOFA较低(P<0.05);2组28 d病死率对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 联合炎调方治疗急性脓毒症患者,可有效调控LncRNA-Miat表达,改善患者肠道微生物平衡,提高机体免疫,缓解临床病症,促进病情好转。

加味炎调方治疗急性胰腺炎致急性胃肠损伤临床疗效观察

目的观察加味炎调方治疗急性胰腺炎致急性胃肠损伤的临床疗效。方法将90例急性胰腺炎致急性胃肠损伤患者随机分为治疗组和对照组,每组45例。对照组在基础治疗的基础上予乌司他丁治疗,治疗组在对照组基础上联合加味炎调方治疗。疗程均为1周,观察临床疗效,比较胃肠功能及相关实验室指标(IL-10、TNF-α、hs-CRP)的变化情况。结果 (1)治疗组、对照组总有效率分别为91.11%、75.56%;临床疗效比较,治疗组明显优于对照组(P<0.05)。(2)治疗组自主排便、肛门排气、肠鸣音恢复时间均早于对照组(P<0.05);治疗组胃肠减压引流量明显高于对照组(P<0.05)。(3)治疗前后组内比较,两组IL-10均较治疗前升高(P<0.05),TNF-α、hs-CRP水平均较治疗前降低(P<0.05);组间治疗后比较,治疗组IL-10水平显著高于对照组(P<0.05),TNF-α、hs-CRP水平显著低于对照组(P<0.05)。结论加味炎调方联合西药治疗急性胰腺炎致急性胃肠损伤,可有效促进患者胃肠功能的恢复,抑制炎症反应。

炎调方改善老年急性胆囊炎PTGD后炎症指标的随机对照临床研究

目的:探讨炎调方对老年急性胆囊炎(AC)行经皮经肝胆囊穿刺置管引流术(PTGD)后患者的临床疗效。方法:采用随机、单盲、安慰剂对照临床研究方法。纳入72例老年AC行PTGD患者,随机分为对照组和治疗组,每组各36例。PTGD后所有患者均给予常规干预,在此基础上,对照组患者予以炎调方安慰剂口服治疗,治疗组患者予以炎调方口服治疗,治疗周期为4周。治疗前后检测并比较两组患者的炎症反应指标[包括白细胞(WBC)、中性粒细胞百分比(N%)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白介素(IL)-6]、肝功能指标[包括总胆红素(TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转肽酶(GGT)、凝血酶原时间(PT)]水平,比较两组患者的中医临床症状总积分。结果:试验过程中,对照组4例患者被剔除,治疗组6例患者被剔除,最终纳入统计分析者对照组32例、治疗组30例。①治疗后,两组患者的WBC、N%、CRP、PCT、IL-6水平较治疗前均显著降低(P<0.05),且治疗组患者的CRP、PCT、IL-6水平低于对照组(P<0.05)。②治疗后,两组患者的TBIL、PT水平较治疗前均显著降低(P<0.05),但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。③治疗后,两组患者的中医临床症状总积分较治疗前均显著降低(P<0.01),且治疗组患者的总积分低于对照组(P<0.05)。结论:老年AC患者PTGD后使用炎调方内服有助于进一步减轻胆囊穿刺后的炎症反应、改善临床症状,值得临床推广应用。

炎调Ⅱ号方对脓毒症大鼠凝血功能的影响

目的:观察炎调Ⅱ号方对脓毒症大鼠凝血功能的影响,并探讨其作用机制。方法:清洁级健康雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、炎调Ⅱ号方组及四妙勇安汤组。正常组以0.9%NaCl溶液灌胃1 d,不手术;假手术组以0.9%NaCl溶液灌胃1 d后行假手术(经麻醉后开腹,轻轻翻动肠道后关腹);炎调Ⅱ号方组、四妙勇安汤组、模型组分别以炎调Ⅱ号方(9.9 g/kg)、四妙勇安汤(9.9 g/kg)及等容量0.9%NaCl注射液灌胃1 d后采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型。分别于造模后12 h处死动物,并进行肺组织HE染色,采用ELISA法测定大鼠凝血功能及血清组织因子(TF)、组织因子抑制剂(TFPI)、血管性血友病因子(vWF)、血栓调节蛋白(TM)、可溶性血管内皮细胞蛋白c受体(SEPCR)含量。结果:肺组织HE染色结果显示,模型组可见肺组织毛细血管充血,间质增生,黏液分泌堵塞,肺组织破坏;炎调Ⅱ号方及四妙勇安汤组肺组织损伤范围较小,肺泡量较多,肺内微血栓少,肺间质水肿、炎性细胞浸润及肺实变较模型组减轻。模型组大鼠血活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、国际标准化比率(INR)、血浆凝血酶原时间(PT)值较假手术组明显升高(P<0.05);炎调Ⅱ号方组、四妙勇安汤组APTT、FIB、INR、PT值较模型组明显降低(P<0.05)。模型组大鼠TF、TFPI、vWF、TM、SEPCR水平较假手术组显著增高(P<0.05);炎调Ⅱ号方组、四妙勇安汤组大鼠TF、TFPI、vWF、TM、SEPCR水平较模型组显著降低(P<0.05)。炎调Ⅱ号方组TF、TM水平较四妙勇安汤组下降明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:炎调Ⅱ号方可能通过干预血管内皮细胞功能改善脓毒症大鼠凝血功能障碍,从而有效减轻脓毒症大鼠肺内微血栓形成,改善肺组织的损伤和实变程度。