镇心省睡益智方及其精油对AD模型小鼠学习记忆的影响

目的:观察镇心省睡益智方水提液及其精油对β淀粉样前体蛋白基因/早老素基因(APP/PS1)双转基因小鼠学习记忆的影响并探讨其可能机制。方法:采用APP/PS1双转基因痴呆小鼠及同月龄相同遗传背景C57BL/6JNju小鼠2种小鼠。C57BL/6JNju小鼠作为正常组,APP/PS1双转基因痴呆小鼠随机分为模型组,镇心省睡益智方精油低、高质量浓度组(12.13,48.50 mg·L^(-1)),镇心省睡益智方水提液组(0.46 g·kg^(-1)),每组12只。每天给药1次,连续给药22 d。给药结束后采用跳台实验、Morris水迷宫实验对小鼠行为学能力进行检测,采用尼氏染色观察海马CA1区神经元变化,采用硫磺素(Th S)染色观察海马DG区老年斑(SP)沉积,采用免疫组化法检测小鼠脑组织中葡萄糖转运蛋白1(GLUT1),胰岛素受体底物-1(IRS-1)的表达,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠海马组织中乙酰胆碱(ACH),γ-氨基丁酸(GABA),谷氨酸(GLU)含量的变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠跳台实验潜伏期显著缩短,错误次数显著增加(P<0.01),Morris水迷宫实验定位航行逃避潜伏期明显延长(P<0.05,P<0.01),海马CA1区神经元出现缺失,DG区出现明显的老年斑沉积(P<0.05),ACH,GLUT1含量均显著下降(P<0.01),GABA,GLU水平及IRS-1的表达均显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组均可显著延长小鼠跳台实验潜伏期、减少跳台错误次数(P<0.01),明显降低定位航行小鼠逃避潜伏期(P<0.05,P<0.01),可一定程度保护小鼠海马CA1区神经元,减少DG区老年斑沉积(P<0.05,P<0.01),明显增加小鼠脑组织中ACH,GLUT1表达(P<0.05,P<0.01),显著降低GABA,GLU水平及IRS-1的表达(P<0.01)。结论:镇心省睡益智方水提液及其精油能够改善APP/PS1小鼠的学习记忆行为,保护神经元,增加脑组织GLUT1的表达,减少脑组织IRS-1的表达,减少老年斑沉积,升高ACH含量,降低GABA,GLU含量,可能是其防治阿尔茨海默症的机制。

镇心省睡益智方及其挥发油对记忆损伤小鼠的保护作用研究

目的:观察镇心省睡益智方(省睡方)水提液及其省睡方药对益智-石菖蒲挥发油对Aβ1-42诱导阿尔茨海默病(AD)小鼠学习记忆及神经递质的影响。方法:运用ICR小鼠侧脑室注入Aβ1-42复制记忆损伤模型小鼠,将省睡方水提液(0.455 g/kg)进行灌胃给药,不同剂量益智-石菖蒲挥发油(12.13μg/mL、48.50μg/mL)进行吸嗅给药,采用跳台实验、Morris水迷宫实验对小鼠行为学能力进行检测,采用尼氏染色光镜下观察海马CA1区神经元变化,运用Elisa法检测小鼠海马组织中乙酰胆碱(Ach)、伽马氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)含量的变化。结果:跳台实验中,与空白组相比,模型组跳台实验潜伏期明显缩短、错误次数明显增加;与模型组相比,各给药组均可以显著延长小鼠跳台实验潜伏期、减少跳台错误次数;Morris水迷宫定位航行实验显示,模型组小鼠基本丧失学习记忆能力;各给药组与第一天相比,逃避潜伏期明显减少;空间探索实验显示各组之间无显著差异;在尼氏染色中,镇心省睡益智方灌胃给药和益智-石菖蒲挥发油吸嗅给药均可以一定程度保护小鼠海马CA1区神经元;Elisa结果显示,与空白组相比,模型组小鼠海马组织中Ach含量显著降低,GABA、Glu含量显著性升高;与模型组相比,镇心省睡益智方灌胃0.455 g/kg组及益智-石菖蒲挥发油吸嗅给药12.13μg/mL、48.50μg/mL组小鼠海马组织中Ach含量明显升高,GABA、Glu含量明显降低。结论:镇心省睡益智方水提液及挥发油灌胃及吸嗅给药可以改善Aβ1-42所致AD模型小鼠的学习记忆行为、保护神经元,升高Ach含量,降低GABA、Glu含量可能是其防治AD的机制之一。