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Characterization of a bla_(CTX-M-3),bla_(KPC-2)and bla_(TEM-1B)co-producing IncN plasmid in Escherichia coli of chicken origin
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作者 WANG Wen-jing WANG Yi-fu +7 位作者 JIN Ya-jie SONG Wu-qiang LIN Jia-meng ZHANG Yan TONG Xin-ru TU Jian LI Rui-chao LI Tao 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2023年第1期320-324,共5页
An extensively drug-resistant(XDR)Escherichia coli strain 258E was isolated from an anal swab sample of a chicken farm of Anhui province in China.Genomic analyses indicated that the strain 258E harbors an incompatibil... An extensively drug-resistant(XDR)Escherichia coli strain 258E was isolated from an anal swab sample of a chicken farm of Anhui province in China.Genomic analyses indicated that the strain 258E harbors an incompatibility group N(IncN)plasmid pEC258-3,which co-produces bla_(CTX-M-3),bla_(KPC-2),bla_(TEM-1B),qnrS1,aac(6')-Ib-cr,dfrA14,arr-3,and aac(6')-Ib3.Multiple genome arrangement analyses indicated that pEC258-3 is highly homologous with pCRKP-1-KPC discovered in Klebsiella pneumoniae from a patient.Furthermore,conjugation experiments proved that plasmid pEC258-3 can be transferred horizontally and may pose a significant potential threat in animals,community and hospital settings. 展开更多
关键词 bla_(ctx-m-3) bla_(KPC-2) bla_(TEM-1B) IncN PLASMID Escherichia coli
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CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶的序列分析与原核表达 被引量:2
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作者 徐韫健 廖伟娇 江洁华 《中国热带医学》 CAS 2007年第12期2180-2183,共4页
目的对肺炎克雷伯菌所产CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)进行基因克隆和重组表达,探讨其特性。方法以产CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌49号菌总基因组DNA为模板,PCR扩增CTX-M-3,将其克隆入pGEM-T载体后测定该核苷酸序列,再... 目的对肺炎克雷伯菌所产CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)进行基因克隆和重组表达,探讨其特性。方法以产CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌49号菌总基因组DNA为模板,PCR扩增CTX-M-3,将其克隆入pGEM-T载体后测定该核苷酸序列,再将CTX-M-3基因克隆到pBV220/DH5α系统进行重组,重组菌经42℃热诱导,SDS-PAGE电泳鉴定酶蛋白的表达。结果PCR扩增出大小为876bp的基因片段,与GenBank上同类酶的基因序列同源性为100%。大肠杆菌DH5α转化pBV220/CTX-M-3重组质粒后,ESBLs试验为阳性,药敏试验结果与原菌株相比耐药性下降。此基因能在大肠埃希菌中大量表达,SDS-PAGE电泳显示,蛋白分子质量大约为31KD。结论成功表达重组的CTX-M-3型酶,为进一步做酶动力学及酶的其他分子生物学特性研究奠定基础。 展开更多
关键词 超广谱Β-内酰胺酶 ctx-m-3 克隆 表达
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革兰阴性菌产CTX-M-3型超广谱β内酰胺酶分子传播机制的研究
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作者 陆坚 唐英春 +6 位作者 吴本权 张扣兴 张天托 黄再平 曹智忠 朱家馨 谈淑卿 《中国抗感染化疗杂志》 2002年第4期202-206,共5页
目的 :了解革兰阴性菌产CTX M 3型超广谱β内酰胺酶 (ESBLs)的分子传播机制 ,为临床防治提供依据。 方法 :收集革兰阴性菌医院感染无重复株共 378株 ,进行药敏试验和ESBLs产酶株的检测 ;肠杆菌科基因组内重复一致序列 聚合酶链反应 (ERI... 目的 :了解革兰阴性菌产CTX M 3型超广谱β内酰胺酶 (ESBLs)的分子传播机制 ,为临床防治提供依据。 方法 :收集革兰阴性菌医院感染无重复株共 378株 ,进行药敏试验和ESBLs产酶株的检测 ;肠杆菌科基因组内重复一致序列 聚合酶链反应 (ERIC PCR)进行克隆株的DNA分型 ;质粒转移实验、质粒谱及耐药质粒酶切指纹分析、等电聚焦电泳、PCR扩增TEM、CTX M基因及其克隆测序进行ESBLs基因分型和质粒定位。结果 :ESBLs的检出率为 16 .9% (6 4 / 378) ,其中CTX M 3型产酶株占 2 0 .3% (13/ 6 4 ) ;CTX M 3基因定位在 6 6kb和 75kb 2种接合性质粒上 ,6 6kb的质粒同时携带TEM 1基因 ;从不同来源的CTX M 3产酶株中可以分离到同种耐药质粒 ,染色体DNA同源性分析显示其为不同的克隆株。结论 :CTX M 3型ESBLs产酶株的传播机制以质粒介导为主 ,并可能存在局部携带CTX M 展开更多
关键词 革兰阴性菌 ctx-m-3型超广谱β内酰胺酶 分子传播机制 研究
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bla_(CTX-M)型鸡大肠杆菌中mcr-1的分子流行病学分析 被引量:1
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作者 李文娅 贾雅婷 +4 位作者 李垠树 丁海峰 孙华润 胡功政 苑丽 《江西农业学报》 CAS 2021年第7期99-103,共5页
检测了不同时期从河南省分离的162株bla_(CTX-M)型鸡大肠杆菌对黏菌素的耐药性,进行了耐药基因bla_(CTX-M)和mcr-1的质粒接合试验,并比较了各亚型的水平传播规律。结果表明:随着时间的推移,bla_(CTX-M)型鸡大肠杆菌对黏菌素的耐药率由0... 检测了不同时期从河南省分离的162株bla_(CTX-M)型鸡大肠杆菌对黏菌素的耐药性,进行了耐药基因bla_(CTX-M)和mcr-1的质粒接合试验,并比较了各亚型的水平传播规律。结果表明:随着时间的推移,bla_(CTX-M)型鸡大肠杆菌对黏菌素的耐药率由0%显著增加到42.2%;在头孢噻肟单药筛选下获得的21株接合子有5株同时携带mcr-1,在黏菌素单药筛选下获得的18株接合子有11株同时携带bla_(CTX-M),且bla_(CTX-M)和mcr-1基因的接合频率无明显差异;原菌及对应接合子的bla_(CTX-M)亚型均属于bla_(CTX-M-1)和bla_(CTX-M-9)亚群,部分原菌同时携带两种亚型,但接合子均仅携带一种亚型(bla_(CTX-M-9)亚群)。说明在单一药物(黏菌素或头孢噻肟)的选择性压力下,bla_(CTX-M)和mcr-1基因均易水平传播,且携带bla_(CTX-M)和mcr-1的质粒既可单独转移也可同时转移。 展开更多
关键词 mcr-1 bla_(ctx-m-1) bla_(ctx-m-9) 质粒接合 大肠杆菌 耐药性
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bla_(CTX-M),bla_(TEM),and bla_(SHV) in Enterobacteriaceae from North-Indian tertiary hospital:high occurrence of combination genes 被引量:2
5
作者 Mohammed Shahid Anuradha Singh +4 位作者 Farrukh Sobia Mohammad Rashid Abida Malik Indu Shukla Haris Manzoor Khan 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2011年第2期101-105,共5页
Objective:To delineate the frequency of occurrence of bla_(CTX-M),bla_(TEM),and bla_(SHV) in Enterobacteriaceae from North-Indian tertiary hospital.Methods:A random collection of a subset of 45 Escherichia coli(E.coli... Objective:To delineate the frequency of occurrence of bla_(CTX-M),bla_(TEM),and bla_(SHV) in Enterobacteriaceae from North-Indian tertiary hospital.Methods:A random collection of a subset of 45 Escherichia coli(E.coli) and 28 Klebsiella pneumoniae(K.pneumoniae) that was resistant to a third generation cephalosporin and obtained during 2007-2008 was selected for detailed screening for bla_(CTX-M),bla_(TEM),and bla_(SHV) by monoplex PCRs.The isolates demonstrating the presence of bla_(CTX-M) alleles were characterized for the specific CTX-M-genogroup by using a multiplex PCR.Results:Resistance to cefoperazone,ceftazidime,ceftriaxone,cefotaxime, cefoxitin and piperacillin was 100%each in K.pneumoniae isolates,whereas these resistancerates for E.coli isolates were 93.1%,83.8%,91.9%,93.6%,97.3%and 97.1%,respectively. Concomitant resistance to aminoglycosides,quinolones and aztreonam was also noticed.Presence of any of the bla genes(bla_(CTX-M),bla_(TEM),and bla_(SHV)) was noticed in a total of 28(38.4%) isolates of the 73 isolates studied.Many isolates demonstrated occurrence of these genes in various combinations.bla_(CTX-M),bla_(TEM),and bla_(SHV) were noticed in 28.8%,10.9%and 13.7%isolates, respectively.Multiplex PCR in bla_(CTX-M) harboring isolates demonstrated the presence of CTX-MGenogroup -1 and sequencing for the specific CTX-M-type revealed presence of CTX-M-15 type. RAPD typing showed wide diversity in isolates.Conclusions:This is amongst the premier report describing the simultaneous occurrence of blo_(TEM),bla_(SHV),and bla_(ampC) in Indian Enterobacteriaceae and that wider dissemination of these genes,as demonstrated by diversity of isolates,raises concern and emphasizes a need for extensive search for the presence of these gene pools in Indian subcontinent. 展开更多
关键词 Resistance genes bla_(ctx-m-15) bla_(TEM) bla_(SHV) Concomitant-occurrence ENTEROBACTERIACEAE
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肺炎克雷伯菌产ESBLs基因型分析 被引量:12
6
作者 陈淑贞 石蓉林 +2 位作者 姚芬 蔡应木 钱元恕 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2006年第4期236-239,共4页
目的分析我院临床分离的肺炎克雷伯菌产ESBLs基因型,为指导临床合理用药提供依据。方法用琼脂稀释法检测10种抗菌药物对已确定为产ESBLs肺炎克雷伯菌的MIC,分别用TEM、SHV、CTX-M、OXA通用引物进行PCR扩增、产物克隆测序分析。结果83株... 目的分析我院临床分离的肺炎克雷伯菌产ESBLs基因型,为指导临床合理用药提供依据。方法用琼脂稀释法检测10种抗菌药物对已确定为产ESBLs肺炎克雷伯菌的MIC,分别用TEM、SHV、CTX-M、OXA通用引物进行PCR扩增、产物克隆测序分析。结果83株产ESBLs肺炎克雷伯菌中,产TEM型75株,SHV型41株,CTX-M型25株,OXA型9株。其中,同时产3种酶有13株,占15.7%;同时产2种酶有59株,占71.1%;仅11株产单1种酶,占13.2%。而9株同时产TEM、SHV和CTX-M型,测序结果为CTX-M-3,TEM-1及多种SHV型(SHV-12、SHV-28)。药敏结果表明,同时产2或3种酶的菌株比产单1种酶的菌株耐药性更严重。结论所分离产ESBLs肺炎克雷伯菌主要为TEM、SHV、CTX-M、OXA型,且同时存在产2~3种酶,应引起临床高度重视。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 超广谱Β内酰胺酶 TEM-1 ctx-m-3 SHV
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CTX-M-3超广谱-和TEM-1广谱β-内酰胺酶基因同时存在于大肠埃希菌 被引量:14
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作者 孙景勇 倪语星 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第S1期79-81,共3页
目的 分析我院大肠埃希菌临床分离株中超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)的基因型。方法用NCCLS表型确证试验确定临床标本中产ESBLs的大肠埃希菌 ,用Etest检测其MIC值 ,分别用TEM、SHV和CTX M通用引物进行PCR扩增并对PCR产物进行序列分析。... 目的 分析我院大肠埃希菌临床分离株中超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)的基因型。方法用NCCLS表型确证试验确定临床标本中产ESBLs的大肠埃希菌 ,用Etest检测其MIC值 ,分别用TEM、SHV和CTX M通用引物进行PCR扩增并对PCR产物进行序列分析。结果 我院大部分产ESBLs的大肠埃希菌体外对头孢噻肟耐药而对头孢他啶敏感。这些菌株以TEM和CTX M引物的PCR扩增结果均出现阳性条带 ,而SHV引物的PCR均无条带产生 ,测序发现阳性条带分别为TEM 1和CTX M 3基因序列。结论 发现CTX M 3型ESBL和TEM 1广谱 β 展开更多
关键词 大肠埃希菌 超广谱Β-内酰胺酶 ctx-m-3 TEM-1
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革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究 被引量:3
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作者 侯晓娜 杨婧 +3 位作者 傅炜昕 何丽 高洪福 王月 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1180-1182,共3页
目的 分析革兰阴性杆菌中超广谱 β-内酰胺酶 (ESBLs)的基因型。 方法 采用双纸片协同法筛选ES BLs菌 ,用纸片扩散法检测其药敏结果 ,分别用TEM、SHV和CTX -M通用引物进行PCR扩增并对PCR产物进行序列分析。结果 大部分产ESBLs菌对头... 目的 分析革兰阴性杆菌中超广谱 β-内酰胺酶 (ESBLs)的基因型。 方法 采用双纸片协同法筛选ES BLs菌 ,用纸片扩散法检测其药敏结果 ,分别用TEM、SHV和CTX -M通用引物进行PCR扩增并对PCR产物进行序列分析。结果 大部分产ESBLs菌对头孢噻肟耐药 ,而对头孢他啶敏感 ,少部分对两者都耐药 ,这些菌株前者以CTX-M引物的PCR扩增结果 ,主要为CTX -M - 3,还检出CTX -M - 12、CTX -M - 14 ;后者以SHV引物的PCR扩增结果 ,主要为SHV - 12 ,还检出SHV - 4 0、SHV - 33和SHV - 5型。TEM引物扩增结果全部为TEM - 1型广谱酶。结论 革兰阴性杆菌中ESBLs主要是CTX -M - 3型 ,6 2 9%的菌同时存在 2~ 3种酶。 展开更多
关键词 革兰阴性杆菌 超广谱Β-内酰胺酶 ctx-m-3 SHV-12 TEM-1
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质粒介导产ESBLs与AmpC β-内酰胺酶基因弗氏柠檬酸杆菌的研究 被引量:1
9
作者 陈坚 余方友 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第21期4435-4437,共3页
目的研究一株同时产ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶弗氏柠檬酸杆菌(CFR)的耐药机制。方法 2008年1月从临床尿液标本中分离出多药耐药弗氏柠檬酸杆菌1株,采用双纸片扩散法检测产ESBLs,头孢西丁三维试验检测AmpC酶,E-test法测定抗菌药物最低抑菌... 目的研究一株同时产ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶弗氏柠檬酸杆菌(CFR)的耐药机制。方法 2008年1月从临床尿液标本中分离出多药耐药弗氏柠檬酸杆菌1株,采用双纸片扩散法检测产ESBLs,头孢西丁三维试验检测AmpC酶,E-test法测定抗菌药物最低抑菌浓度(MIC),聚合酶链反应(PCR)检测产ESBLs和AmpC酶基因,DNA测序决定基因型;接合试验测定耐药基因的转移性。结果临床分离出一株同时产ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶的多药耐药弗氏柠檬酸杆菌,对头孢他啶、头孢噻肟、头孢西丁、氨曲南、氨苄西林、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的MIC分别为96、96、256、192、>256、>32μg/ml,PCR扩增及测序临床分离株携带blaCTX-M-3和blaCMY-2,接合试验显示含blaCTX-M-3和blaCMY-2基因耐药质粒可以通过接合转移至受体菌大肠埃希菌J53。结论 CFR同时携带有ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶基因,ESBLs基因和AmpCβ-内酰胺酶基因由质粒介导。 展开更多
关键词 弗氏柠檬酸杆菌 产超广谱Β-内酰胺酶 ctx-m-3 AMPC β-内酰胺酶 CMY-2
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