c—myc在大鼠耳蜗组织发育和耳蜗前体细胞分化过程中的表达变化

目的通过检测c—myc基因在大鼠耳蜗组织发育及前体细胞分化过程中的表达情况，探讨其在哺乳动物耳蜗发育中的作用。方法①取E10、E15、P1、P7和P14的SD大鼠耳蜗组织，应用RT--PCR、Western blot的方法检测c-myc在大鼠耳蜗组织发育过程中的表达情况。②取耳蜗前体细胞和分化7天后的分化细胞，用RT-PCR、免疫细胞化学染色和Western blot的方法检测c—myc在耳蜗前体细胞分化过程中的表达情况。结果从胚胎至出生后的耳蜗发育过程中，c-myc表达量呈现逐渐下降趋势；在前体细胞的分化过程中，c-myc的表达量也呈现下降趋势。结论c-myc可能参与调控大鼠耳蜗组织的发育及前体细胞的分化。

P16Bmi-1和C—myc检测在宫颈癌早期诊断中的应用

目的探讨P16、Bmi-1和C—myc表达在宫颈癌（SCC）早期诊断中的价值。方法选取2014年1月至2016年12月宫颈上皮内瘤变（CIN）144例，SCC患者37例和健康体检（对照组）30例为研究对象，采用免疫组织化学SP方法检测其组织中P16、Bmi-1和C—myc的表达水平。结果P16、Bmi-1和C—myc在对照组标本中表达阳性率显著低于CIN及SCC组，CINI组阳性率显著低于CINⅡ、CINⅢ及SCC组Bmi-1和C—myc在CINⅡ组阳性率显著低于SCC组，Bmi—1在CINⅢ组阳性率显著低于SCC组（P〈0．05）。P16、Bmi-1和C—myc在SCC组Ⅰ～Ⅱ期表达阳性率显著低于Ⅲ～Ⅳ期，P16在淋巴结转移组显著高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。单独检测敏感度较低，联合检测能达到89．19％。结论P16、Bmi-1和c—myc表达水平与SCC发生及发展相关，可作为宫颈CIN分级与SCC早期诊断的重要辅助指标。

鸟氨酸脱羧酶和c—myc在胃癌及其癌前病变组织中的表达及意义

目的：检测ODC和c—myc在不同阶段胃粘膜病变组织中的表达水平，探讨ODC和c—myc的表达与胃癌癌前病变发生的关系和意义。方法：应用逆转录聚合酶链反应和免疫组化方法测定不同阶段的胃粘膜病变组织中ODC和c—mycmRNA及蛋白的表达。结果：ODCmRNA及蛋白在萎缩性胃炎肠化生（CAG与IM）、不典型增生（DYS）及胃癌（GC）组织中的表达水平显著高于浅表性胃炎（CSG）（P〈O．01）。c—mycmRNA及蛋白在胃癌（GC）组织中的表达水平显著高于浅表性胃炎（CSG）、萎缩性胃炎肠化生（CAG withIM）（P〈0．01），ODC和c—myc在中低分化腺癌的表达水平显著高于高分化腺癌（P〈0．05）。ODC与c—myc在胃粘膜癌变多阶段中的表达呈正相关（P〈0．01）。结论：ODC作为致癌因子在胃癌发生中有重要作用，且c—myc通过促进ODC的表达促进细胞增殖，将2指标联合检测，有助于胃癌及其癌前病变的早期诊断。

C—myc基因在肿瘤发生过程中的作用

原癌基因C—myc普遍地存在于正常人类细胞中,调控正常细胞的生长分化。然而在许多肿瘤细胞中,都发现其异常高度表达。本文综述了C—myc基因与肿瘤发生的关系。1 单一活化的C—myc基因不能使细胞充分转化鸟MC—29病毒V—myc转染鼠胚胎成纤维细胞,未发现转化灶的形成。

荧光定量聚合酶链反应检测c—myc基因在乳腺癌诊断中的应用

目的荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）技术检测c—myc基因表达，探讨其在乳腺癌诊断中的应用。方法采用FQ—PCR法，并以甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）为内对照测定15名健康女性体检者、30例良性乳腺疾病患者和80例乳腺癌患者外周血中c—myc的表达量。结果正常对照组和良性乳腺疾病组c—myc和c—myc／GAPDH差异无统计学显著性意义（P〉0．05），乳腺癌组均显著高于前两组，差异有统计学显著性意义（P〈O．05），GAPDH在三组闻差异均无统计学显著性意义（P〉0．05）。若以c—myc表达量和c—myc／GAPDH高于正常对照组为阳性，乳腺癌组的阳性率为41．3％（33／80），良性乳腺疾病组则无1例阳性。27例乳腺癌患者手术前到化疗后第1，28d和56dc—myc和c—myc／GAPDH均呈下降趋势，但第1d和第28d与手术前比较，差异无统计学显著性意义（P〉O．05），而第56d与手术前比较，c—myc和c—myc／GAPDH均显著低于手术前，差异有统计学显著性意义（尸〈O．05）。结论FQ—PCR技术是高灵敏度、高特异度的快速定量检测c—myc方法，可有效监测乳腺癌的诊断、疗效扣转移。

大肠癌组织中C—myc基因的表达及临床意义分析

目的检测大肠癌组织中原癌基因（C—mye）的表达，探讨其在大肠癌的发生和发展中的作用。方法收集60例大肠癌组织标本，免疫组化及半定量聚合酶链反应法（RT—PCR）检测C—mye蛋白及基因表达情况。咎果60例大肠癌标本中C—mye蛋白共有38例（63．3％）阳性表达；RT—PER见C—mye基因阳性标本占91．7％（55／60），表达均随大肠癌的分化程度递减而增加（P〈0．05）。结论C—mye基因在不同分化程度的大肠癌中表达差异有统计学意义，对肿瘤的发生发展起重要作用。

携带c—myc基因重组腺病毒的构建和鉴定及其在豚鼠耳蜗中的表达与分布

目的构建携带c—myc基因的重组腺病毒表达载体，并观察其在豚鼠耳蜗内的表达分布，为探讨该基因的功能奠定实验基础。方法利用细菌内同源重组的方法，构建携带c—myc基因的重组腺病毒表达载体（Ad．c--myc--EGFP），并分别应用酶切、逆转录聚合酶链反应（RT--PCR）和测序方法鉴定腺病毒的构建情况。利用豚鼠耳蜗内显微注射术、Westernblot及荧光显微镜观察注射后该蛋白在耳蜗中的表达及分布特性。结果经酶切、RT--PCR和测序鉴定，质粒构建正确，重组腺病毒Ad．c--myc--EGFP构建成功。Ad．cmmyc--EGFP腺病毒豚鼠耳蜗内注射后第三天便可通过荧光显微镜观察到绿色荧光蛋白的广泛分布，且WesternBlot方法证实它可以上调耳蜗内c-Myc蛋白的表达。结论本实验成功构建了携带c—myc基因的重组腺病毒表达载体，它可以有效地感染豚鼠耳蜗内各种细胞，为深入研究c—myc基因在耳蜗中的作用奠定了实验基础。

针刺对再狭窄血管平滑肌中原癌基因c—myc及c—focmRNA表达的影响

目的探讨针刺对家兔实验性动脉血管平滑肌细胞c—myc及c—foc基因表达的影响。方法家兔随机分为正常对照组（8只），再狭窄组（24只）。再狭窄组应用PTCA球囊导管对实验兔行双侧髂动脉内膜剥脱以建立动脉粥样硬化模型，术后1month髂动脉造影示50％以上狭窄者再行PTCA球囊扩张术，以建立再狭窄模型成功后，将造模动物随机分成模型组、针刺组、药物组，每组8只。自术前2d至术后14d为l疗程，针刺内关（双）、厥阴俞（双）、心俞（双）、膻中、足三里（双）等穴。标本石蜡切片，免疫组化，DAB显色，苏木素复染。观察各组血管平滑肌细胞c—myc、c—foc基因表达。结果模型组平滑肌细胞c—myc及c—foc基因表达明显高于正常组（P〈0．01）；针刺组c—myc及e—foc基因表达明显低于模型组（P〈0．01）。结论针刺能抑制兔再狭窄血管平滑肌细胞增殖，抑制c—myc及c—fnc基因表达，调节平滑肌凋亡，可能是针刺预防动脉再狭窄的作用机制之一。

磷酸胆碱聚合物载反义c—myc寡核苷酸对兔髂动脉球囊损伤后血管狭窄的影响

目的探讨局部转运磷酸胆碱聚合物MPC30-DEA70载反义c—myc寡核苷酸（c—mycAS—ODN）基因复合物对兔髂动脉球囊损伤后血管狭窄的影响。方法40只家兔随机分为对照组、多聚赖氨酸（PLL）组、裸c—mycAS—ODN组、PLL载基因复合物N／P=3：1组和N／P=5：1组，每组各8只。构建兔髂动脉球囊损伤模型，于血管损伤段行PLL、c—mycAS—ODN、PLL载N／P=3：1和N／P=5：1基因复合物的局部转运。24h后应用共聚焦显微镜观察基因复合物在髂动脉的分布情况；4周后苏木精-伊红染色光镜下观察髂动脉的组织形态学变化，包括新生内膜面积（NIA）、中膜面积（MA）和新生内膜／中膜面积比（I／M）；Western blot法检测各组损伤血管处c—myc蛋白的表达情况。结果共聚焦显微镜可见转染N／P=3：1、N／P=5：1基因复合物的血管内膜有均匀的绿色荧光分布。苏木精-伊红染色光镜下对照组、PLL组、裸c—mycAS—ODN组均可见显著的内膜增生，组间比较NIA、I／M无显著性差异（P〉0．05）；与对照组比较，N／P=3：1组和N／P=5：1组NIA、I／M均明显减少（P〈0．05），后两组间比较无显著性差异（P〉0．05）。Western blot显示对照组、PLL组、裸c—mycAS—ODN组c—myc蛋白表达均明显增高，组间比较无显著性差异（P〉0．05）；与对照组比较，N／P=3：1组和N／P=5：1组c—myc蛋白表达明显减少（P〈0．05），后两组间比较无显著性差异（P〉0．05）。结论多聚赖氨酸可促进MPC30-DEA70／c—myc AS—ODN复合物进入髂动脉血管，有效抑制球囊损伤后新生内膜的过度增生，为基因治疗血管内狭窄提供了新型的非病毒类转基因手段。

反义核酸对人白血病HL—60细胞中c—myc基因表达的抑制

研究两个反义核酸（18mer，21mer）对人白血病HL—60细胞中c－myc基因表达的抑制作用。用HL－60活细胞计数，RNA含量的RT－PCR测定和c－myc基因蛋白的免疫组化染色检查。结果：两个反义寡核苷酸都能抑制HL－60细胞的增殖，增殖抑制率为11％～75％。反义核酸还抑制c－mycmRNA和Myc蛋白的表达，而对c－mcy基因正常表达的红白血病细胞K562的增殖和PHA刺激的人淋巴细胞的增殖没有影响。结论：反义寡核苷酸能抑制c－myc基因的过度表达。

反义c—myc寡聚核苷酸对动脉平滑肌细胞的生长抑制及其Myc蛋白合成的抑制

本文合成了反义和正义c—myc 5′—端编码区的前6个密码子。分别导入培养的WKY太鼠主动脉平滑肌细胞(SMCs),同时用内皮素(ET)诱导SMCs增殖,反义c—myc寡核苷酸(ODNs)抗细胞增殖作用随浓度(6μmol/L至12μmol/L)增加而增加。用12μmol/L反义ODNs抗细胞增殖能力随时间廷长而下降。免疫组化显示受抑制细胞Myc水平较同期对照组或正义ODNs组低。本研究为反义ODNs抑制外源性生长因子或细胞因子诱导靶基因的高表达和细胞增殖提供了新的线索,同时为探讨癌基因表达调控与动脉SMCs增殖的关系提供了一种新方法。

羊水脱落细胞中c—myc基因检测在诊断葡萄胎中的意义

目的研究羊水脱落细胞中c—mycmRNA的检测在葡萄胎的诊断意义.方法以53例健康妊娠女性为对照，采用RT—PCR检测50例良性葡萄胎患者和48例恶性葡萄胎患者羊水脱落细胞中c—mycmRNA的表达.结果健康组女性阳性率为5．7%（3/53），良性葡萄胎患者阳性率为26%（13/50），恶性葡萄胎患者阳性率为75%（36/48），三者之间差异有统计学显著性意义（P〈0．05或P〈0．01）.结论检测羊水脱落细胞中c—mycmRNA的表达有助于恶性葡萄胎的诊断，对良性葡萄胎的诊断也有一定的参考意义.

脑胶质细胞瘤C—myc癌基因蛋白的表达

目的：研究脑胶质细胞瘤中C－myc癌基因蛋白产物的表达。方法：利用SP免疫组织化学方法，检测66例脑胶质细胞瘤。结果：C－myc癌基因蛋白在脑胶质瘤中的表达率为37．88％，星形细胞瘤与室管膜瘤表达率之间，Ⅰ、Ⅱ级肿瘤与Ⅲ、Ⅳ级肿瘤表达率之间均无显著性差异（P＞0．05），但高强度表达的病例大部分见于Ⅲ、Ⅳ级肿瘤（6／9）。结论：脑肢质细胞瘤中存在C—myc癌基因蛋白产物的表达，其表达率与胶质瘤的组织学类型及分化程度无关，但表达量的多寡反映种瘤的恶性程度。

EBV病毒PCNAKi-67和C—myc癌基因蛋白在鼻咽癌中的表达及预后意义

目的探讨EBV病毒、PCNA、Ki-67、C—mye癌基因蛋白在鼻咽癌中表达及预后意义。方法收集鼻咽角化性鳞状细胞癌20例，鼻咽非角化性癌40例和对照组鼻咽粘膜慢性炎组织30例。用原位分子杂交方法检测EBV（EBER）病毒及采用免疫组织化二步法检测PCNA、Ki-67和C—mye癌基因蛋白的表达。结果EBER在对照组鼻咽粘膜慢性炎30例及角化性癌鳞状细胞癌20例中均阴性0％（0／30，0／20）；而EBER在鼻咽非角化性癌中阳性表达率100％（40／40）；对照组和角化性鳞状细胞癌与非角化性癌比较差异有统计学意义（P〈0．05）。生存期〈5年的40例鼻咽非角化性癌（NKC）组织中PCNA、Ki-67、C—mye分别为67．5％（27／40），65．7％（23／35），66．6％（16／24）；生存期≥5年分别为32．5％（13／40）、34．2％（12／35）、33．3％（8／24）。以上可见40例NKC患者中生存期〈5年及I〉5年的生存率有明显的相关性（P〈0．05）。除此之外，在40例非角化性癌组织中PCNA、Ki-67、C—mye癌基因阳性率在有远处转移的患者中分别为60％（24／40）、62．8％（22／35）、62．5％（15／24）；在无远处器官转移的患者中分别为40％（16／40）、37．1％（13／35）、37．5％（9／24），显示与有无远处器官转移有明显的相关性（P〈0．05）。结论鼻咽非角化性癌几乎100％有EBV病毒感染；PCNA、Ki-67、C—mye蛋白表达与鼻咽癌的生存率及预后密切相关。

c—myc反义RNA转录体的构建及其对HL60细胞恶性表型的影响

本研究构建了c-myc反义RNA真核细胞可诱导表达质粒PGXC.用PGXC及PSV_(2)neo质粒共转染人早幼粒细胞白血病细胞HL60,经G418抗性筛选得到转染细胞HL_(60)L^R,与亲本细胞相比其生长速率明显减低;细胞周期中G1期细胞增多,而S期细胞相应减少;细胞形态及功能呈现分化诱导;在软琼脂上不能形成集落;该细胞在裸鼠体内的致瘤性亦显著减弱以至消失.

慢性宫颈炎活检组织中人巨细胞病毒(HCMV)DNA和C—MYC癌基因的检测及相关性研究

宫颈癌是妇科常见的恶性肿癌之一,而慢性宫颈炎是宫颈癌的高危因素。研究表明,人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)感染与宫颈癌的发生有关。并已从宫颈癌组织中鉴定出了C-myc癌基因。为了探讨HCMV感染与C-myc癌基因表达的关系,本文应用核酸杂交技术对87例慢性宫颈炎患者的宫颈活检组织进行了HCMVDNA序列和C-myc癌基因序列的检测。结果87例慢性宫颈炎患者宫颈活检组织中HCMV检出率为11％(10/87),C-myc癌基因的检出率为12％(11/87)。HCMV DNA序列阳性标本中同时C-myc癌基因阳性者有5例(5/10),77例HCMV DNA序列阳性患者中,有6例(6/77),C-myc癌基因阳性。结果提示,HCMV感染对C-myc癌基因表达可能起活化作用。

C—myc和P^(53)与子宫平滑肌肿瘤的关系

应用地高辛精标记C—myc和P^(53)基因探针原位杂交技术检测18例子宫肌瘤,48例交界性子宫平滑肌瘤和6例子宫平滑肌肉瘤中C—myc和P^(53)的定位及表达,探讨肿瘤基因与子宫平滑肌肿瘤的发生和发展有无相关性,以及交界性子宫平滑肌瘤与子宫肌瘤和平滑肌肉瘤间的内在联系。结果显示C—myc和P^(53)的表达产物均定位于细胞核中,在三型肿瘤中C—myc的表达率分别为5.6％、33.3％、50％;P^(53)的表达率分别为11.1％、39.8％、66.7％(P<0.05)。在肿瘤中的表达强度与细胞增殖程度成正比。推测C—myc和P^(53)突变及过量表达可能是子宫平滑肌肿瘤发生和发展的一个因素,交界性子宫平滑肌瘤可能为平滑肌肉瘤的前驱病变,具有特殊的生物学行为,经手术治疗,预后良好。

鼻咽癌中P_(16),C—myc和PCNA的表达

目的 :探讨鼻咽癌组织中P16,基因myc(C—myc)和增殖细胞核抗原 (PCNA)表达异常的意义。方法 :采用免疫组织化学 (S—P)方法。结果 :4 7例鼻咽癌组织中P16阳性 13例 (13 4 7) 2 8 5 % ,C—myc阳性38例 (38 4 7) 81% ,PCNA阳性 4 7例 (47 4 7) 10 0 %。结论 :P16的低表达 ,C—myc和PCNA的过表达在鼻咽癌细胞增殖和癌变过程中起重要作用。

细胞凋亡及C—myc蛋白表达与胃癌发生的关系

目的:了解胃癌及癌前病变的细胞凋亡与 C-myc 表达的关系。方法:采用原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。采用 LSAB 免疫组化法检测 C-myc 蛋白表达。结果慢性活动性胃炎、胃溃疡、轻度不典型增生、重度不典型增生、早期胃癌、进展期胃癌的凋亡指数分别为16.8%±12.3%、24.1%±20.0%、19.31%±6.4%、15.7%±15.2%、10.1%±9.1%和6.3%±6.0%,进展期胃癌显著低于早期胃癌和不典型增生(p<0.05)。而 C-myc 蛋白的阳性表达率分别为15.6%、20.7%、35.3%、50.0%、66.7%。胃癌和重度不典型增生的阳性表达率明显高于胃溃疡和活动性胃炎(p<0.01),进展期胃癌明显高于轻度不典型增生(p<0.05)。在胃癌患者中,C-myc 阳性组与阴性组凋亡指数分别为8.2%±6.0%和3.5%±2.1%,两组比较有显著差异(p<0.05)。结论:在胃粘膜不典型增生、早期胃癌到进展期胃癌的发展中,细胞凋亡逐渐受到抑制。其 C-myc 蛋白的阳性表达率有逐渐升高的趋势.尤胃癌和重度不典型增生有较高的阳性表达率。C-myc 阳性的胃癌有更高的凋亡指数。

c-Myc、CDK12在胃癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨胃癌组织中c-Myc、细胞周期蛋白依赖性激酶12(CDK12)表达及其与患者临床特征及预后的关系。方法 收集80例胃癌患者的胃癌组织和癌旁组织标本,采用免疫组化法检测标本中的c-Myc、CDK12表达水平。比较胃癌组织和癌旁组织中c-Myc、CDK12阳性表达情况;分析胃癌组织中c-Myc、CDK12阳性表达与患者临床病理特征的关系;分析c-Myc与CDK12阳性表达的相关性,胃癌组织中c-Myc、CDK12阳性表达与胃癌患者预后的关系。结果 胃癌组织中c-Myc、CDK12阳性表达率(77.5%、87.5%)均明显高于癌旁组织(13.8%、15.0%)(P<0.05)。不同年龄、性别、肿瘤最大直径患者胃癌组织中c-Myc、CDK12阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05);中低分化、Ⅲ~Ⅳ期、侵犯浆膜、有淋巴结转移患者胃癌组织中c-Myc和CDK12阳性表达率分别为88.0%、87.0%、88.9%、90.0%和94.0%、92.6%、97.2%、100.0%,均明显高于高分化、Ⅰ~Ⅱ期、未侵犯浆膜、无淋巴结转移患者胃癌组织的60.0%、57.7%、68.2%、70.0%和76.7%、76.9%、79.5%、80.0%(P<0.05)。相关分析发现,c-Myc、CDK12在胃癌组织中的表达呈正相关性(r=0.487,P=0.016<0.05)。胃癌组织中c-Myc、CDK12阳性患者的3年生存率分别为19.4%、21.4%,均明显低于c-Myc、CDK12阴性患者的55.6%、70.0%(P<0.05)。结论 c-Myc、CDK12在胃癌组织中异常高表达,两者呈正相关性,并与肿瘤的TNM分期、分化程度、肿瘤侵袭深度及淋巴结转移有关,对患者的预后有明显影响,通过检测两者水平可能评估胃癌患者的预后。