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QUANTITATIVE ANALYSIS OF CYTOSKELETON PROTEIN IN REGENERATING NERVE
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作者 范明 甘思德 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1989年第24期2067-2070,共4页
One of the outstanding features of neuron is that axon lacks the ability to synthesize protein. The structural and functional materials needed for axonal regeneration have to be prepared in its cell body, and then sup... One of the outstanding features of neuron is that axon lacks the ability to synthesize protein. The structural and functional materials needed for axonal regeneration have to be prepared in its cell body, and then supplied by axoplasmic transport. From this point, axoplasmic transport not only provides a material source but also serves as an important modulator for nerve regeneration. Some studies have been reported about the changes 展开更多
关键词 regenerating NERVE cytoskeleton protein quantitation.
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Actin-binding Rho activating protein is expressed in the central nervous system of normal adult rats 被引量:2
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作者 Lihua Liu Mingying Luo +7 位作者 Baolin Yang Xiaoqiong Wu Wu Zhu Yinglu Guan Weijun Cai Kerstin Troidl Wolfgang Schaper Jutta Schaper 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2012年第13期965-970,共6页
Previous studies show that actin-binding Rho activating protein (Abra) is expressed in cardiomyocytes and vascular smooth muscle cells. In this study, we investigated the expression profile of Abra in the central ne... Previous studies show that actin-binding Rho activating protein (Abra) is expressed in cardiomyocytes and vascular smooth muscle cells. In this study, we investigated the expression profile of Abra in the central nervous system of normal adult rats by confocal immunofluorescence. Results showed that Abra immunostaining was located in neuronal nuclei, cytoplasm and processes in the central nervous system, with the strongest staining in the nuclei; in the cerebral cortex, Abra positive neuronal bodies and processes were distributed in six cortical layers including molecular layer, external granular layer, external pyramidal layer, internal granular layer, internal pyramidal layer and polymorphic layer; in the hippocampus, the cell bodies of Abra positive neurons were distributed evenly in pyramidal layer and granular layer, with positive processes in molecular layer and orien layer; in the cerebellar cortex, Abra staining showed the positive neuronal cell bodies in Purkinje cell layer and granular layer and positive processes in molecular layer; in the spinal cord, Abra-immunopositive products covered the whole gray matter and white matter; co-localization studies showed that Abra was co-stained with F-actin in neuronal cytoplasm and processes, but weakly in the nuclei. In addition, in the hippocampus, Abra was co-stained with F-actin only in neuronal processes, but not in the cell body. This study for the first time presents a comprehensive overview of Abra expression in the central nervous system, providing insights for further investigating the role of Abra in the mature central nervous system. 展开更多
关键词 actin-binding Rho activating protein actin cytoskeleton confocal immunofluorescence striated muscle nervous tissue neural regeneration
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VISUALIZATION OF DYNAMIC ORGANIZATION OF CYTOSKELETON GELS IN LIVING CELLS BY HYBRID-SPM 被引量:4
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作者 K.Kawabata Y.Sado +4 位作者 M.Nagayama T.Nitta K.Nemoto Y.Koyama H.Haga 《Chinese Journal of Polymer Science》 SCIE CAS CSCD 2003年第2期169-174,共6页
We succeeded in performing of hybrid Scanning Probe Microscopy (hybrid-SPM) in which mechanical-SPM andfluorescence microscopy are combined. This technique is able to measure simultaneously mechanical properties anddi... We succeeded in performing of hybrid Scanning Probe Microscopy (hybrid-SPM) in which mechanical-SPM andfluorescence microscopy are combined. This technique is able to measure simultaneously mechanical properties anddistribution of cytoskeletons of living cells by using green fluorescent protein. We measured evolution of both local elasticityand distributions of actin stress fibers in an identical fibroblast living in physiological conditions. The SPM experimentsrevealed that stiffer lines develop in living cells, which correspond to actin stress fibers. The elasticity of the actin stressfibers is as high as 100 kPa. We discuss mechanical effects on the development of actin filament networks. 展开更多
关键词 Scanning probe microscopy Green fluorescent protein FIBROBLAST Cell migration cytoskeleton ELASTICITY
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Neural stem cells over-expressing brain-derived neurotrophic factor promote neuronal survival and cytoskeletal protein expression in traumatic brain injury sites 被引量:10
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作者 Tao Chen Yan Yu +5 位作者 Liu-jiu Tang Li Kong Cheng-hong Zhang Hai-ying Chu Liang-wei Yin Hai-ying Ma 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2017年第3期433-439,共7页
Cytoskeletal proteins are involved in neuronal survival.Brain-derived neurotrophic factor can increase expression of cytoskeletal proteins during regeneration after axonal injury.However,the effect of neural stem cell... Cytoskeletal proteins are involved in neuronal survival.Brain-derived neurotrophic factor can increase expression of cytoskeletal proteins during regeneration after axonal injury.However,the effect of neural stem cells genetically modified by brain-derived neurotrophic factor transplantation on neuronal survival in the injury site still remains unclear.To examine this,we established a rat model of traumatic brain injury by controlled cortical impact.At 72 hours after injury,2 × 10~7 cells/m L neural stem cells overexpressing brain-derived neurotrophic factor or naive neural stem cells(3 m L) were injected into the injured cortex.At 1–3 weeks after transplantation,expression of neurofilament 200,microtubule-associated protein 2,actin,calmodulin,and beta-catenin were remarkably increased in the injury sites.These findings confirm that brain-derived neurotrophic factor-transfected neural stem cells contribute to neuronal survival,growth,and differentiation in the injury sites.The underlying mechanisms may be associated with increased expression of cytoskeletal proteins and the Wnt/β-catenin signaling pathway. 展开更多
关键词 nerve regeneration brain-derived neurotrophic factor neural stem cells transfect differentiation traumatic brain injury cytoskeleton NEUROFILAMENT microtubule-associated proteins CALMODULIN Wnt/β-catenin neural regeneration
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Intracellular Transport of HIV-1 Matrix Protein Associated with Viral RNA
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作者 Anatoliy I. Gozhenko Valentina A. Divocha +2 位作者 Galina K. Vorkunova Alissa G. Bukrinskaya Sergey I. Lupandin 《World Journal of AIDS》 2013年第1期33-35,共3页
HIV-1 matrix protein (MA) is a multifunctional structural protein localized on N terminus of Gag precursor p55. MA participates in HIV-1 assembly as membranotropic part of Gag precursor as well as an individual protei... HIV-1 matrix protein (MA) is a multifunctional structural protein localized on N terminus of Gag precursor p55. MA participates in HIV-1 assembly as membranotropic part of Gag precursor as well as an individual protein spliced from Gag early in infection. MA is found in the nuclei of infected cells and in plasma membrane, the site of virus assembly, in association with viral genome RNA. MA mutated variant M4 which contains two changed amino acids in N-terminal regions is also associated with viral RNA, but it is localized in the nuclear and cytoskeleton fractions but not in the plasma membrane suggesting that the mutant is deprived of membranotropic signal and “sticks” in the nuclei an d cytoskeleton, its previous location sites. These data allow suggesting that MA involved into transmission of viral RNA is transported to plasma membrane by cytoskeleton. 展开更多
关键词 HIV-1 Matrix protein GAG PRECURSOR P55 cytoskeleton VIRAL RNA Transport of VIRAL Complex Plasma Membranes Cell Fractionatiomn
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ATP5J通过TOMM20调节线粒体功能并促进人肝细胞癌细胞转移 被引量:1
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作者 冷君志 王根旺 +3 位作者 刘迪 柳科军 王琦 惠永峰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期431-437,共7页
目的:探讨ATP合成酶H+转运线粒体F0复合体亚基F6(ATP5J)通过调节肝癌细胞线粒体功能介导细胞骨架重塑影响肝癌细胞转移的作用及其机制。方法:培养人肝细胞癌Li-7细胞株,基因修饰ATP5J表达(过表达和敲减)。使用JC-1染色检测每组细胞线粒... 目的:探讨ATP合成酶H+转运线粒体F0复合体亚基F6(ATP5J)通过调节肝癌细胞线粒体功能介导细胞骨架重塑影响肝癌细胞转移的作用及其机制。方法:培养人肝细胞癌Li-7细胞株,基因修饰ATP5J表达(过表达和敲减)。使用JC-1染色检测每组细胞线粒体膜电位情况;利用DCFH-DA荧光探针检测Li-7细胞的活性氧(ROS)含量;线粒体ATP荧光探针检测线粒体功能;微丝绿色荧光探针(Actin-Tracker Green-488)检测细胞骨架重塑情况;Transwell检测细胞侵袭能力;Western blot检测ATP5J和线粒体外膜转位酶20(TOMM20)的表达水平。结果:过表达ATP5J可上调线粒体膜电位水平和线粒体ATP荧光强度、诱导细胞骨架重塑、促进细胞侵袭和TOMM20蛋白表达,抑制ROS生成(P<0.01)。相反,敲减ATP5J显著降低线粒体膜电位和线粒体ATP荧光强度,显著降低细胞侵袭能力和TOMM20表达,促进ROS产生,阻断细胞骨架重塑(P<0.01)。结论:ATP5J可调节肝癌细胞线粒体能量转化,其通过TOMM20调节线粒体膜电位水平和线粒体ATP产生介导细胞骨架重塑影响肝癌细胞转移。 展开更多
关键词 肝细胞癌 线粒体功能 ATP5J蛋白 细胞骨架
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JWA as a functional molecule to regulate via MAPK cascades and F-actin cancer cells migration cytoskeleton 被引量:1
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作者 Chen, H. R. Bai, J. Ye, J. Liu, Z. L. Chen, R. Mao, W. G. Li, A. P. Zhou, J. W. 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1114-1114,共1页
关键词 JWA基因 白血病 分裂素相关蛋白激酶 细胞骨架 肿瘤转移
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环境污染物诱导细胞膜损伤的研究进展
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作者 李瑞雪 杜雨莹 +2 位作者 李伟 高珂 鲁理平 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期184-194,共11页
细胞膜是保护细胞免受外源性污染物破坏的屏障,在细胞与外界进行物质运输、能量转换、信息传递等活动中具有不可替代的作用。当前针对环境污染物诱导细胞膜损伤的研究相对零散,未成体系。本文聚焦近5年国内外环境污染物诱导细胞膜损伤... 细胞膜是保护细胞免受外源性污染物破坏的屏障,在细胞与外界进行物质运输、能量转换、信息传递等活动中具有不可替代的作用。当前针对环境污染物诱导细胞膜损伤的研究相对零散,未成体系。本文聚焦近5年国内外环境污染物诱导细胞膜损伤的相关研究并对其进行归纳总结,主要从脂质双分子层、膜蛋白、细胞骨架以及膜微结构域4个方面分析了环境污染物对细胞膜的损伤影响。从脂质双分子层结构变化、脂质过氧化以及膜通透性和完整性等方面描述了环境污染物对脂质双分子层的损伤;从膜蛋白活性、蛋白表达等方面阐述了环境污染物对细胞膜蛋白的损伤;从微管、微丝和中间纤维的变化归纳了环境污染物对细胞骨架的损伤;从脂筏和小窝的变化概括了环境污染物对细胞膜微结构域的损伤。最后,对环境污染物诱导细胞膜损伤的研究现状进行了思考,并对未来研究趋势进行了展望。 展开更多
关键词 环境污染物 细胞膜损伤 脂质双分子层 膜蛋白 细胞骨架 膜微结构域 毒性
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CKAP2与恶性肿瘤
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作者 林港回 蔡炳君 周宇 《基础医学与临床》 CAS 2024年第10期1470-1473,共4页
细胞骨架相关蛋白2(CKAP2)基因位于人染色体13q14.3上,编码细胞骨架相关蛋白2,参与调控有丝分裂染色体的分离。CKAP2在多项研究中被证实是一个促癌基因,能调控JAK2/STAT3、FAK-ERK2和NF-κB等信号通路影响肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭等... 细胞骨架相关蛋白2(CKAP2)基因位于人染色体13q14.3上,编码细胞骨架相关蛋白2,参与调控有丝分裂染色体的分离。CKAP2在多项研究中被证实是一个促癌基因,能调控JAK2/STAT3、FAK-ERK2和NF-κB等信号通路影响肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭等生物学行为,改变肿瘤微环境、调节肿瘤免疫。CKAP2还与有丝分裂中纺锤体的形成密切相关,CKAP2失调会导致染色体的错误分离,促进肿瘤的发生。此外,CKAP2与肿瘤的化疗耐药性密切相关,相关机制尚不明确。CKAP2或许能成为一个新型的肿瘤标志物和有效的治疗靶点,在肿瘤的诊断及其治疗方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 细胞骨架相关蛋白2 肿瘤 有丝分裂
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微丝骨架结合蛋白在未成熟树突状细胞抗原吞噬过程中的差异表达分析
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作者 李道红 罗代琴 +8 位作者 曾宪琳 张帅 徐朴 吴翠芳 王赟 叶远浓 胡祖权 龙金华 曾柱 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期814-822,共9页
目的探讨未成熟树突状细胞(immature dendritic cells,imDCs)发挥抗原吞噬功能时关键微丝骨架结合蛋白(microfilament cytoskeleton-binding proteins,MCBPs)的差异表达情况。方法从健康人外周血中分离单核细胞(monocytes,MOs),经重组人... 目的探讨未成熟树突状细胞(immature dendritic cells,imDCs)发挥抗原吞噬功能时关键微丝骨架结合蛋白(microfilament cytoskeleton-binding proteins,MCBPs)的差异表达情况。方法从健康人外周血中分离单核细胞(monocytes,MOs),经重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony stimulating factor,rhGM-CSF)、重组人白介素-4(recombinant human interleukin-4,rhIL-4)诱导培养6天获得imDCs;将imDCs与低分子量(40 kDa)和高分子量(150 kDa)的右旋糖酐分别孵育1、3和6 h,流式细胞仪检测imDCs吞噬右旋糖酐的比率及免疫表型分子的表达;免疫荧光检测丝状肌动蛋白(filamentous actin,F-actin)及PFN1、WASP、α-actinin在细胞中的定位情况;qPCR和Western blotting分别检测MCBPs在mRNA和蛋白水平的表达差异;最后,基于系统生物学算法中的逐步回归和主成分分析方法筛选成分系数最大的MCBPs。结果在吞噬抗原的过程中,imDCs对低分子量抗原的吞噬速度更快,吞噬时长可维持约3 h,其细胞表型和细胞形态逐渐向mDCs分化,且F-actin发生明显的重塑,PFN1、CDM、WASP、CAPZB、Filamin A、α-actinin等MCBPs的表达下调,WAVE1、Arp2/3复合体、Fascin的表达上调;信号蛋白Rac1的mRNA表达上调,CDC42和RhoA的mRNA表达下调;免疫荧光结果显示,PFN1、WASP、α-actinin在imDCs吞噬抗原过程中发生转位;逐步回归和主成分分析结果显示PFN1的成分系数最大。结论PFN1可能是imDCs吞噬抗原过程中的关键MCBPs,这对于深入理解imDCs细胞骨架结构变化与免疫学功能之间的关系具有重要意义。 展开更多
关键词 未成熟树突状细胞 吞噬 微丝骨架 微丝骨架结合蛋白 系统生物学
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CKAP2L在卵巢癌中的表达及临床意义
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作者 柴莹 倪妍 +2 位作者 赵媛 王晓 杨晓洁 《循证医学》 2024年第3期150-154,177,共6页
目的本研究主要分析细胞骨架相关蛋白2样蛋白(cytoskeleton associated protein 2 like protein,CKAP2L)在卵巢癌中的表达及临床意义。方法选取2018年2月至2020年5月在太原市中心医院行卵巢癌根治术的卵巢癌患者87例,收集其卵巢癌组织... 目的本研究主要分析细胞骨架相关蛋白2样蛋白(cytoskeleton associated protein 2 like protein,CKAP2L)在卵巢癌中的表达及临床意义。方法选取2018年2月至2020年5月在太原市中心医院行卵巢癌根治术的卵巢癌患者87例,收集其卵巢癌组织及距癌灶边缘>2 cm的癌旁组织。实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法测定卵巢癌组织及癌旁组织中CKAP2L的mRNA表达,免疫组化法分析卵巢癌组织及癌旁组织中CKAP2L的蛋白表达。Kaplan-Meier法分析卵巢癌组织中CKAP2L表达与患者预后的关系。结果CKAP2L在卵巢癌组织中mRNA表达显著高于癌旁组织(P<0.05)。卵巢癌组织中CKAP2L的蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05)。卵巢癌组织中CKAP2L mRNA表达与患者肿瘤分化程度、淋巴结转移、FIGO分期、浸润深度有关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析结果表明,卵巢癌患者3年总生存率为80.46%;CKAP2L低表达患者3年总生存率为显著高于CKAP2L高表达患者(Log-rankχ^(2)=8.316,P=0.004)。患者3年无复发生存率为77.01%;CKAP2L低表达患者3年无复发生存率显著高于CKAP2L高表达患者(Log-rankχ^(2)=8.921,P=0.003)。结论CKAP2L在卵巢癌组织中高表达,与FIGO分期、淋巴结转移等有关,是卵巢癌患者死亡的影响因素。 展开更多
关键词 细胞骨架相关蛋白2样蛋白 卵巢癌 临床意义
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二氢嘧啶酶样蛋白3在肿瘤中的表达
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作者 谢峻 施鸿金 +5 位作者 毛秋玉 陈俊豪 黄应龙 韦海荣 张贵福 王海峰 《泌尿外科杂志(电子版)》 2024年第2期82-88,共7页
二氢嘧啶酶样蛋白3(dihydropyrimidinase-like 3,DPYSL3)又称塌陷反应调节蛋白4(collapse response mediator protein 4,CRMP4),是一种在神经系统中高表达的胞质磷蛋白。其不仅参与细胞伪足中肌动蛋白的组成,也用于组装细胞骨架,还与细... 二氢嘧啶酶样蛋白3(dihydropyrimidinase-like 3,DPYSL3)又称塌陷反应调节蛋白4(collapse response mediator protein 4,CRMP4),是一种在神经系统中高表达的胞质磷蛋白。其不仅参与细胞伪足中肌动蛋白的组成,也用于组装细胞骨架,还与细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程有关,这些特性可能与肿瘤增殖与转移功能有关。近年来有研究表明,DPYSL3参与多种癌细胞的增殖与侵袭过程,例如前列腺癌、膀胱癌、胃癌与肝癌等。然而,DPYSL3在不同肿瘤中的表达与预后存在明显的异质性。因此,进行DPYSL3在肿瘤表达水平的研究有望成为在不同肿瘤恶性程度与诊断过程中的生物标志物,从而提高肿瘤诊断率与患者预后水平。本文对DPYSL3在不同肿瘤中的表达、生物学功能及其对肿瘤的诊断、治疗及预后价值进行总结与探索,为肿瘤研究提供新思路。 展开更多
关键词 二氢嘧啶酶样蛋白3 塌陷反应调节蛋白4 上皮-间质转化 肿瘤 细胞骨架
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雷公藤甲素干预足细胞病变的体外观察 被引量:45
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作者 陈朝红 刘志红 +3 位作者 孙骅 姚根宏 秦卫松 黎磊石 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 2007年第2期119-126,200,共9页
目的:雷公藤甲素对Heymann肾炎和嘌呤霉素肾病大鼠的疗效及其对足细胞病变的影响提示,雷公藤甲素有可能直接作用于足细胞,从而改善其病变状况。本研究借助小鼠足细胞系,体外观察了雷公藤甲素对足细胞损伤的保护和修复作用,并对其作用机... 目的:雷公藤甲素对Heymann肾炎和嘌呤霉素肾病大鼠的疗效及其对足细胞病变的影响提示,雷公藤甲素有可能直接作用于足细胞,从而改善其病变状况。本研究借助小鼠足细胞系,体外观察了雷公藤甲素对足细胞损伤的保护和修复作用,并对其作用机制进行了研究。方法:体外采用氨基核苷嘌呤霉素(puromycin aminonucleo-side,PAN)致足细胞损伤模型。观察雷公藤甲素对足细胞损伤的保护作用研究中,雷公藤甲素与足细胞预孵育30min后,再加入含PAN的培养基,继续作用24h;观察雷公藤甲素对足细胞损伤的修复作用研究中,PAN作用足细胞24h,造成足细胞明显损伤后,再加入含或不含雷公藤甲素的培养基,继续培养3天。免疫荧光法和流式细胞仪分析足细胞骨架相关蛋白F-actin和Synaptopodin的变化,并进一步观察了细胞内调节骨架装配的Rho/ROCK信号通路的活性,即采用Western Blot检测ROCK-I底物——肌球蛋白磷酸酶结合亚单位(MBS)磷酸化水平,以及Rho/ROCK信号通路选择性阻断剂Y-27632对雷公藤甲素作用的影响。同时采用免疫荧光法和流式细胞仪分析足细胞裂孔膜相关分子Nephrin和Podocin在足细胞的分布及表达量的变化。结果:正常分化足细胞F-actin呈丝状结构,密度大,丝强劲有力,沿细胞极性分布;Synaptopodin呈颗粒状沿细胞骨架分布。裂孔膜蛋白Nephrin沿足细胞膜和细胞骨架分布,Podocin呈线状均匀分布于胞浆内,PAN作用24h后,细胞足突回缩,F-actin几乎完全解聚,Synaptopodin表达消失。Nephrin和Podocin表达减弱,正常丝状结构消失。而经过雷公藤甲素的预处理,PAN诱导的足细胞损伤明显减弱,足细胞未表现出上述骨架结构的改变,Synaptopodin表达没有明显减弱。同时我们的结果显示,在PAN造成足细胞明显损伤后再加入雷公藤甲素,足细胞损伤能够得到一定修复,细胞内重新出现极性分布的微丝,同时,Synaptopod-in的表达也得以修复。Rho/ROCK信号通路研究显示,100μg/mlPAN明显降低Rho/ROCK通路活性。雷公藤甲素能有效遏制MBS磷酸化水平的降低,维持足细胞Rho/ROCK通路的活性状态。Rho/ROCK信号通路选择性抑制剂Y-27632可阻断雷公藤对足细胞骨架结构的保护作用。此外,对裂孔膜蛋白Nephrin,Podocin的研究表明,不论是在预防组和治疗组,PAN对Nephrin和Podocin的损伤可在一定程度上被雷公藤甲素预防和修复。结论:雷公藤甲素可稳定足细胞的细胞骨架,拮抗PAN对足细胞的损伤。在足细胞损伤已经发生后,雷公藤甲素可逆转足细胞的损伤,修复足细胞骨架结构和相关分子的表达。雷公藤甲素的上述作用与细胞内Rho/ROCK信号通路密切相关。雷公藤甲素对足细胞的影响可能是其降低肾小球肾炎患者尿蛋白的重要机制之一。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 足细胞 嘌呤霉素氨基核苷 细胞骨架 裂孔膜分子
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应用酵母双杂交系统筛选与新基因nelin相互作用的蛋白质 被引量:3
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作者 王震 刘冬青 +5 位作者 王茵 曹慧青 丁金凤 郭莲军 屈伸 孟宪敏 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期1-4,9,共5页
 目的 通过筛选能够与新基因nelin的心肌特异表达产物相互作用的蛋白质从而揭示nelin的生物功能。方法 构建表达nelin阅读框全长的诱饵质粒并利用酵母双杂交系统筛选人心脏cDNA文库, 以寻找与nelin蛋白发生相互作用的蛋白质。并利用...  目的 通过筛选能够与新基因nelin的心肌特异表达产物相互作用的蛋白质从而揭示nelin的生物功能。方法 构建表达nelin阅读框全长的诱饵质粒并利用酵母双杂交系统筛选人心脏cDNA文库, 以寻找与nelin蛋白发生相互作用的蛋白质。并利用生物信息学方法对筛选得到的蛋白质进行功能结构域分析。结果 筛选得到3 个蛋白质分别为肌联蛋白 (Titin ) N2B亚型, 细丝蛋白 (Filamin ) C亚型即γ Filamin和α胰蛋白酶抑制物重链前体 (inter alphatrypsin inhibitor heavy chain precursor, ITIH)。对这3种蛋白的C末端结构域进行分析发现Titin和Filamin均含有免疫球蛋白样结构域 (Ig- like domain)。结论 实验结果揭示了新基因nelin很可能表达一个细胞骨架相关蛋白, 它可通过其蛋白质的C末端同Titin和Filamin的免疫球蛋白样结构域发生相互作用而参与细胞骨架网络的形成。 展开更多
关键词 新基因 蛋白质 筛选 细胞骨架 免疫球蛋白 特异表达 酵母双杂交系统 结构域 相互作用 末端
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FAT10通过激活RhoA介导肝细胞性肝癌侵袭 转移 被引量:6
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作者 胡威 董忠谊 吴德华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2015年第14期689-694,共6页
目的:探讨FAT10与肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)恶性病理特征间的相关性,及FAT10对细胞骨架蛋白F-actin的影响及可能的机制。方法:通过免疫组织化学技术检测108例肝癌组织标本中FAT10及active-Rho A蛋白表达,分析它们与... 目的:探讨FAT10与肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)恶性病理特征间的相关性,及FAT10对细胞骨架蛋白F-actin的影响及可能的机制。方法:通过免疫组织化学技术检测108例肝癌组织标本中FAT10及active-Rho A蛋白表达,分析它们与患者临床病理特征之间的相关性及二者间的相关性;用7721、Hep G2肝癌细胞株瞬时转染质粒过表达FAT10,用Huh7及LM3细胞株转染si RNA干扰FAT10表达,利用Western blot方法检测过表达和干扰FAT10后肝癌细胞中active-、total-Rho A和ROCK蛋白表达的变化;利用免疫荧光检测7721细胞过表达FAT10后细胞骨架蛋白F-action的变化。结果:免疫组织化学结果及临床数据的关联性分析表明:高表达FAT10或active-Rho A均与肝癌转移和复发密切相关(FAT 10:复发P=0.004,转移P=0.031;active-Rho A:复发P=0.026,转移P=0.036),且二者的表达水平之间呈明显正相关(P<0.001);生存分析的结果表明:高表达FAT10或Rho A组患者预后明显差于各自低表达组(FAT10:P=0.026;active-Rho A:P=0.019)。Western blot检测显示过表达FAT10增加active-Rho A和ROCK蛋白表达;反之,干扰FAT10则抑制active-Rho A和ROCK蛋白表达(均P<0.01)。免疫荧光显示肝癌细胞株7721过表达FAT10可促进细胞骨架蛋白F-actin的表达和胞膜聚积及连续性变化。结论:FAT10与肝癌恶性病理特征密切相关;并可能通过激活Rho A促进肝癌细胞骨架改变。 展开更多
关键词 FAT10 active—RhoA 肝细胞性肝癌 细胞骨架蛋白 侵袭转移
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Ezrin蛋白在肿瘤转移中的作用及机制研究 被引量:6
16
作者 杨晔 褚福浩 +3 位作者 杜世豪 李涛 薄荣强 丁霞 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第3期538-543,共6页
肿瘤转移是肿瘤恶化及死亡的主要原因,近年来研究发现,许多microRNA(miR)、蛋白分子、细胞信号转导通路等均可介导肿瘤迁移侵袭。Ezrin蛋白又称细胞绒毛蛋白,属埃兹蛋白/根蛋白/膜突蛋白(Ezrin/Radixin/Moesin,ERM)家族最早发现的一员,... 肿瘤转移是肿瘤恶化及死亡的主要原因,近年来研究发现,许多microRNA(miR)、蛋白分子、细胞信号转导通路等均可介导肿瘤迁移侵袭。Ezrin蛋白又称细胞绒毛蛋白,属埃兹蛋白/根蛋白/膜突蛋白(Ezrin/Radixin/Moesin,ERM)家族最早发现的一员,广泛分布于人体细胞内,是细胞骨架与细胞膜之间的连接蛋白,参与许多复杂的细胞生命活动。Ezrin作为近年来肿瘤转移相关研究的热点分子,可通过不同机制促进肌动蛋白的重新组装及肿瘤细胞间的起泡内吞影响肿瘤细胞运动,不仅影响肿瘤细胞转移的某一阶段,还可通过多种途径影响不同肿瘤及肿瘤转移的不同阶段。因此,Ezrin是肿瘤转移过程中的重要分子,也是肿瘤诊疗的创新靶点。本文对Ezrin的生物学结构及功能进行简要介绍,并对Ezrin影响多种肿瘤细胞转移途径做一概括和总结。 展开更多
关键词 EZRIN ERM 细胞骨架蛋白 肿瘤转移
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氧化型低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞磷酸酶PTEN活性的影响 被引量:4
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作者 吴兴利 王士雯 +3 位作者 杨中苏 徐雅琴 杨丁友 刘秀云 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2002年第6期505-508,共4页
为探讨氧化型低密度脂蛋白促血管平滑肌细胞增殖的细胞内信号转导机制 ,将兔血管平滑肌细胞分为对照组、低密度脂蛋白组和氧化型低密度脂蛋白组。以细胞计数和噻唑蓝比色法测定细胞增殖能力 ,Westernblot定量与细胞骨架蛋白同源在 10号... 为探讨氧化型低密度脂蛋白促血管平滑肌细胞增殖的细胞内信号转导机制 ,将兔血管平滑肌细胞分为对照组、低密度脂蛋白组和氧化型低密度脂蛋白组。以细胞计数和噻唑蓝比色法测定细胞增殖能力 ,Westernblot定量与细胞骨架蛋白同源在 10号染色体有缺失的磷酸酶 (PTEN)表达水平 ,免疫沉淀和特异底物diC1 6 PIP3脱磷酸绿色试剂法检测该磷酸酶活性。实验发现氧化型低密度脂蛋白 (5 0mg L)可使细胞计数及噻唑蓝比色吸光值分别增加 1.78和 3.2 1倍 ,而低密度脂蛋白 (5 0mg L)无明显作用。各浓度低密度脂蛋白及氧化型低密度脂蛋白对该磷酸酶蛋白表达水平均无显著影响。氧化型低密度脂蛋白对PTEN活性的抑制在 2 0~ 5 0mg L范围内呈浓度依赖性。时间曲线表现为 10min作用最强 ,并可持续达 2 4h(与对照组比较 ,均P <0 .0 1)。结果提示 ,氧化型低密度脂蛋白可能通过对负性调节蛋白PTEN磷酸酶的抑制而发挥促进血管平滑肌细胞增殖功能。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞磷酸酶 PTEN 活性 低密度脂蛋白
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未分化和分化足细胞生物学性状及相关结构蛋白表达的变化 被引量:4
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作者 姜华军 张春 +3 位作者 常莹 朱忠华 刘建社 邓安国 《细胞生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第1期82-88,共7页
体外33℃许可条件下培养由H-2Kb-tsA58转基因小鼠所建立的未分化足细胞系,并在37℃非许可条件下诱导其分化。观察足细胞分化后形态学改变;MTT法测定细胞的生长曲线;红色荧光染料PKH-26标记足细胞,追踪其在子代细胞中的分布,检测细胞增... 体外33℃许可条件下培养由H-2Kb-tsA58转基因小鼠所建立的未分化足细胞系,并在37℃非许可条件下诱导其分化。观察足细胞分化后形态学改变;MTT法测定细胞的生长曲线;红色荧光染料PKH-26标记足细胞,追踪其在子代细胞中的分布,检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞周期的改变;Western印迹检测足细胞相关蛋白CD2AP、α-actinin和足细胞分化相关蛋白nephrin的表达;免疫荧光结合激光共聚焦方法检测CD2AP、nephrin、α-actinin、F-肌动蛋白和微管蛋白的表达变化。结果显示:与未分化足细胞相比,分化足细胞形态发生改变,生长速度减慢,增殖能力下降;细胞周期表现为G0/G1期细胞比例的增多和S期及G2/M期的细胞比例下降;CD2AP、nephrin和α-actinin的表达明显增高;CD2AP、nephrin、α-actinin、F-肌动蛋白和微管蛋白在表达分布上均发生明显的改变。以上结果表明,足细胞分化后生物学性状明显发生改变,细胞骨架重新分布;CD2AP、nephrin、α-actinin、F-肌动蛋白和微管蛋白均在足细胞的分化过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 足细胞 分化 足细胞相关蛋白 细胞骨架 CD2相关蛋白
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低氧调控EIMD后calpain活性与肌细胞膜损伤机制的探索研究 被引量:2
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作者 徐飞 覃丽凤 +3 位作者 黄巧婷 曹建民 王平 徐玉明 《中国体育科技》 CSSCI 北大核心 2019年第2期54-63,共10页
目的:观察低氧对运动性肌损伤(exercise-induced muscle damage,EIMD)后肌细胞膜损伤、钙激活中性蛋白酶(calpain)和肌细胞膜骨架蛋白(dystrophin、utrophin和dysferlin)的影响,探索低氧调控EIMD后肌细胞膜损伤的可能机制。方法:110只雄... 目的:观察低氧对运动性肌损伤(exercise-induced muscle damage,EIMD)后肌细胞膜损伤、钙激活中性蛋白酶(calpain)和肌细胞膜骨架蛋白(dystrophin、utrophin和dysferlin)的影响,探索低氧调控EIMD后肌细胞膜损伤的可能机制。方法:110只雄性SD健康大鼠分两批进行实验。研究Ⅰ:70只大鼠随机均分为安静对照组、常氧24 h、48 h和72 h组以及低氧24 h、48 h和72 h组,每组10只。大鼠在-16°跑台上以26.8 m/min速度持续运动5 min,运动10次,组间休息1 min。低氧和常氧各组大鼠运动后注射伊文氏蓝荧光染色剂观察膜损伤情况,用RT-q PCR和Western blot测定腓肠肌calpain和膜骨架蛋白的mRNA表达和蛋白含量。研究Ⅱ:40只大鼠随机均分为空白对照组、安慰剂24 h、48 h组和calpain抑制剂24 h、48 h组,每组8只。测定calpain抑制剂对其蛋白含量的影响,观察膜损伤情况,并验证calpain在EIMD后低氧损伤肌细胞膜中所起的作用。结果:大鼠EIMD后,1)低氧各组膜的通透性增加、完整性被破坏,阳性细胞率(positive ratio of cell,PRC)与对照组和常氧对应组相比有显著差异(P<0.01);2)低氧72 h组calpain1、calpain2的mRNA表达显著高于常氧72 h组(P<0.05),低氧各组calpain1、calpain2和calpain3的蛋白含量与常氧对应组相比无显著差异(P>0.05);3)低氧24 h组dystrophin、utrophin的m RNA表达显著低于常氧24 h组(P<0.01),但两组的蛋白含量无显著差异(P>0.05)。低氧各组dys-ferlin的mRNA表达和蛋白含量与常氧各组相比无显著差异(P> 0.05)。4)抑制calpain1、calpain2活性后,低氧24 h组calpain蛋白含量显著降低(P<0.05),低氧各组阳性细胞率显著低于安慰剂各组(P<0.01),但仍显著高于对照组(P<0.05)。结论:1) calpain1、calpain2被激活与低氧加剧大鼠EIMD后的肌细胞膜损伤有关,但calpain并非通过降解膜骨架蛋白dystrophin、utrophin和dysferlin的途径而导致膜损伤。2)抑制calpain1、calpain2活性能有效减轻但不能避免低氧加剧EIMD后的膜损伤,其中还可能存在其它的调节机制。 展开更多
关键词 运动性肌损伤 低氧 钙激活中性蛋白酶 肌细胞膜损伤 膜骨架蛋白 蛋白降解
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利用亚细胞组分蛋白分离技术有效提取细胞骨架及其相关蛋白 被引量:2
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作者 蔡贞 熊石龙 +3 位作者 周园 籍会彩 向春艳 郑磊 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期698-702,共5页
目的建立一种可用于后续双向电泳研究的细胞骨架及相关蛋白的提取方法。方法采用亚细胞组分蛋白分步提取方法,根据提取过程中细胞形态变化,提取后组分蛋白电泳图谱等优化提取条件。用双向凝胶电泳、免疫印迹分析、蛋白质点质谱鉴定等方... 目的建立一种可用于后续双向电泳研究的细胞骨架及相关蛋白的提取方法。方法采用亚细胞组分蛋白分步提取方法,根据提取过程中细胞形态变化,提取后组分蛋白电泳图谱等优化提取条件。用双向凝胶电泳、免疫印迹分析、蛋白质点质谱鉴定等方法验证该提取方法的重复性和各组分蛋白提取纯度。结果各组分蛋白的双向电泳蛋白图谱差异明显,具备各自特征性的蛋白点分布,各组分标志蛋白FAK、Integrin-β1、Histone H1和cytokeratin 19分别只表达在细胞浆、细胞膜、细胞核和细胞骨架组分。细胞骨架蛋白组分中约90%以上的蛋白质点经质谱鉴定为细胞骨架及相关蛋白。结论亚细胞组分蛋白顺序提取方法具有较好的重复性,提取组分选择性较高,并且能够有效提高低丰度蛋白的检出效率,是一种比较理想的进行蛋白质组学研究的样本预处理方法。 展开更多
关键词 组分蛋白提取 细胞骨架蛋白 双向凝胶电泳
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