骨疏康干预破骨细胞:激活核因子E2相关因子2调控c-Fos/NFATc1通路

背景:已有研究表明,骨疏康通过调节核苷酸、氨基酸代谢和免疫机制影响骨骼代谢,目前骨疏康治疗骨质疏松症的机制研究主要聚焦于调控成骨细胞,对破骨细胞的关注较少。目的:以RAW 264.7细胞为实验对象,从破骨细胞角度探讨骨疏康治疗骨质疏松症的机制。方法:取8周龄雌性SD大鼠24只,采用随机数字表法分为4组(n=6),3个实验组分别灌胃给予1,2,4 g/kg的骨疏康药液(2次/d),对照组灌胃给予等量蒸馏水(2次/d),连续灌胃7 d后抽取大鼠主动脉血,离心收集血清,同组血清合并,获得低、中、高浓度的骨疏康含药血清及正常血清,进行后续实验。①将RAW 264.7细胞分6组培养:对照组加入正常血清,低、中、高浓度组分别加入低、中、高浓度的骨疏康含药血清,Nrf2抑制剂组加入核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)抑制剂ML385,Nrf2激活剂组加入Nrf2激活剂t-BHQ,采用CCK8法检测细胞相对活性。②将第3代RAW 264.7细胞分5组培养:空白对照组加入正常血清,破骨组加入核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factorκB ligand,RANKL),低、中、高浓度组在加入RANKL的基础上分别加入低、中、高浓度的骨疏康含药血清,培养5 d后进行抗酒石酸酸性磷酸染色。③将RAW 264.7细胞分5组培养:空白对照组加入正常血清,破骨组加入正常血清与RANKL,高浓度+破骨组加入RANKL+高浓度骨疏康含药血清,破骨+Nrf2激动剂组加入RANKL+t-BHQ,高浓度+破骨+Nrf2抑制剂组加入RANKL+高浓度骨疏康含药血清+ML385,培养5 d后进行Western Blot与活性氧含量检测。结果与结论:①CCK8检测结果显示,骨疏康含药血清及Nrf2抑制剂、激动剂对RAW 264.7细胞活力无明显影响;②抗酒石酸酸性磷酸染色结果显示,骨疏康含药血清呈浓度依赖性抑制破骨细胞的分化;③Western Blot与活性氧含量检测结果显示,与空白对照组比较,破骨组Nrf2蛋白表达降低(P<0.05),c-Fos、NFATc1蛋白表达与活性氧含量升高(P<0.05);与破骨组比较,高浓度+破骨组、破骨+Nrf2激动剂组、高浓度+破骨+Nrf2抑制剂组Nrf2蛋白表达升高、活性氧含量降低(P<0.05),高浓度+破骨组、破骨+Nrf2激动剂组c-Fos、NFATc1蛋白表达降低(P<0.05);与高浓度+破骨组比较,高浓度+破骨+Nrf2抑制剂组Nrf2蛋白表达降低(P<0.05),活性氧含量升高(P<0.05);④结果表明,骨疏康通过激活Nrf2减少活性氧生成,进而抑制下游c-Fos/NFATc1通路表达和破骨细胞分化。

二仙丸加减方含药血清抑制巨噬细胞焦亡的物质基础和作用机制

背景:课题组前期研究发现二仙丸加减方可以缓解胶原诱导性关节炎大鼠炎症反应,但其作用机制尚需进一步验证。目的:分析二仙丸加减方入血成分,观察二仙丸加减方含药血清对J774A.1巨噬细胞焦亡的影响。方法:①二仙丸加减方入血成分分析:采用超高效液相色谱-高分辨质谱(UHPLC-HRMS)对二仙丸加减方及入血成分进行检测和鉴定。②二仙丸加减方含药血清对J774A.1巨噬细胞焦亡的影响:采用分子对接技术对二仙丸加减方入血成分倍半萜类化合物与NLRP3进行初步验证。将J774A.1巨噬细胞随机分为空白对照组、脂多糖+三磷酸腺苷组及脂多糖+三磷酸腺苷+二仙丸加减方含药血清低(2.5%)、中(5%)、高(10%)剂量组。根据试剂盒说明书检测各组细胞上清液中乳酸脱氢酶释放情况;ELISA检测各组细胞上清液中白细胞介素1β、白细胞介素18水平;Hoechst/PI染色法检测各组细胞膜受损情况;Western blot检测各组细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达水平。结果与结论:①共鉴定出二仙丸加减方药效成分32个,入血成分21个,其中入血成分主要包括多种倍半萜类化合物;②分子对接结果显示3-O-Acetyl-13-deoxyphomenone、Incensol oxide、Atractylenolide Ⅲ、Rupestonic acid、3,7-Dihydroxy-9,11-eremophiladien-8-one与NLRP3之间结合活性较好;③与空白对照组相比,脂多糖+三磷酸腺苷组细胞上清中乳酸脱氢酶活性及白细胞介素1β、白细胞介素18水平均显著升高(P<0.001),Hoechst/PI染色可见PI阳性细胞数量显著增加。脂多糖+三磷酸腺苷+二仙丸加减方含药血清各组上述指标均显示不同程度降低;④与空白对照组相比,脂多糖+三磷酸腺苷组NLRP3、Caspase-1、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达显著升高(P<0.05);与脂多糖+三磷酸腺苷组相比,脂多糖+三磷酸腺苷+二仙丸加减方含药血清各组细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达均有不同程度降低(P<0.05),且具有一定的剂量依赖性。结果表明:二仙丸加减方含药血清可能通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路抑制J774A.1巨噬细胞焦亡。

麝香黄芪复方滴丸含药血清促进骨髓间充质干细胞增殖分化

背景:骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)已被广泛用于治疗神经系统疾病,但由于血脑屏障的限制以及干细胞在受损部位存活率、分化率低,导致治疗效果有限。目的:探讨麝香黄芪复方滴丸含药血清对BMSCs增殖、迁移和向星形胶质细胞分化的影响。方法:SD雄性大鼠连续灌胃麝香黄芪复方滴丸5 d后进行腹主动脉取血,分离血清备用。采用CCK-8法检测体积分数5%,10%,20%含药血清对BMSCs增殖的影响;划痕实验观察体积分数10%含药血清对BMSCs横向迁移的影响;Transwell小室培养BMSCs,用结晶紫染色和DAPI核染色观察体积分数10%含药血清对BMSCs纵向迁移的影响;用含体积分数10%含药血清的诱导液或与星形胶质细胞共培养观察BMSCs向星形胶质细胞分化情况。结果与结论:①体积分数10%和20%含药血清在第2,3天促进细胞增殖更明显,且两种体积分数无统计学差异;②在划痕30,48 h时,10%含药血清组BMSCs迁移量显著高于对照组;③10%含药血清组BMSCs穿过Transwell小室滤过膜的数量高于对照组;④体积分数10%含药血清可能促进BMSCs向星形胶质细胞方向分化,但分化作用较弱,星形胶质细胞能进一步促进含药血清诱导BMSCs向星形胶质细胞方向分化;⑤结果表明,体积分数10%含药血清能促进BMSCs体外增殖、迁移;与星形胶质细胞共培养可能促进BMSCs向星形胶质细胞方向分化。

负载EPZ6438牛血清白蛋白-壳聚糖纳米粒抑制骨肉瘤的效应

背景:骨肉瘤肿瘤干细胞激活最显著的转录因子是EZH2,据报道沉默EZH2可以抑制骨肉瘤细胞生长。研究证实,牛血清白蛋白-壳聚糖纳米粒是一种具有优异生物相容性和生物降解性的药物传递载体,且白蛋白载体可提供靶向肿瘤的药物递送功能。目的:探讨负载EPZ6438(EZH2抑制剂)血清白蛋白-壳聚糖纳米粒抑制骨肉瘤的效应及机制。方法:①制备未负载与负载EPZ6438的血清白蛋白-壳聚糖纳米粒,检测载EPZ6438血清白蛋白-壳聚糖纳米粒的药物包载率及药物释放率。②将MG-63细胞分4组培养,分别加入PBS(对照组)、血清白蛋白-壳聚糖纳米粒浸提液(空白纳米粒组)、EPZ6438溶液(游离药物组)及负载EPZ6438的血清白蛋白-壳聚糖纳米粒浸提液(载药纳米粒组),培养3 d后,利用流式细胞仪检测细胞凋亡、RT-PCR法检测细胞caspase3 mRNA的表达。③取12只裸鼠,通过腋下注射MG-63细胞悬液建立皮下荷瘤小鼠模型,造模成功后随机分4组干预,分别向肿瘤组织内注射生理盐水(对照组)、血清白蛋白-壳聚糖纳米粒溶液(空白纳米粒组)、EPZ6438溶液(游离药物组)及负载EPZ6438的血清白蛋白-壳聚糖纳米粒溶液(载药纳米粒组),每组3只。注射7 d后,观察肿瘤体积及肿瘤组织冰冻切片TUNEL染色。结果与结论:①载药纳米粒的药物包载率约为8.8%,该纳米粒在纯水中具有良好的药物释放效果,24 h药物释放量为(34.72±1.93)μg,72 h为(48.58±1.10)μg,120 h为(49.18±1.24)μg,168 h(50.25±1.13)μg,药物释放在120 h到达平台期,释放率约为97.9%;②与MG-63细胞培养3 d后,对照组、空白纳米粒组细胞凋亡率低于游离药物组、载药纳米粒组(P<0.001),caspase3 mRNA的表达低于游离药物组、载药纳米粒组(P<0.0001);③注射7 d后,载药纳米粒组裸鼠肿瘤体积小其他3组(P<0.05),肿瘤组织TUNEL染色阳性细胞比率高于其他3组(P<0.0001);④结果显示,负载EPZ6438的血清白蛋白-壳聚糖纳米粒可通过诱导肿瘤细胞的凋亡来抑制骨肉瘤生长。

基于不同群体药动学分析工具建立真实世界丙戊酸群体药代动力学模型

目的:基于NONMEM和MONOLIX 2种不同群体药动学分析工具建立真实世界丙戊酸群体药动学模型(PPK),探索可能影响丙戊酸血药浓度的潜在协变量,为癫痫患者使用丙戊酸提供科学依据。方法:回顾性收集2021年1月—2022年12月南京医科大学第二附属医院收治的167例癫痫患者239个丙戊酸稳态血药浓度数据资料,按随机数字表法将其分为模型组(n=111)与验证组(n=56)。2种群体药动学分析工具同时建立适合真实世界的群体药动学模型,采用拟合度优度诊断、可视化预测检验对所得的模型进行内部验证和外部验证,评估模型的预测能力。结果:该群体药动学为一室模型,在使用NONMEM软件建立的最终模型中纳入了联合用药(DDI)-美罗培南和给药方式(ROUTE)作为协变量;而在使用MONOLIX软件建立的最终模型中纳入了联合用药(DDI)-美罗培南和体质量(BW)作为协变量。与此同时,与NONMEM相比较,MONOLIX软件所得到的最终模型具有更好的精密度和准确度。结论:本研究初步构建了适用于癫痫患者给予丙戊酸剂量指导的群体药动学模型。

补肾化痰方含药血清对HepG2肝癌细胞增殖、迁移的实验研究

目的:研究补肾化痰方(BHF)对小鼠脏器指数及BHF含药血清对HepG2肝癌细胞增殖、迁移的影响。方法:将小鼠随机分为对照组、BHF高剂量组、BHF中剂量组、BHF低剂量组,灌胃7 d后,采血制备含药血清,处死后取材测定各组小鼠脏器指数。体外培养HepG2肝癌细胞,设置空白组、对照组、BHF高剂量组、BHF中剂量组、BHF低剂量组,每组设3个浓度(20%、10%、5%),3个复孔。各组加入相应的含药血清,培养24、48、72 h后,采用CCK8法测算细胞增殖抑制率。采用Transwell细胞培养24 h后镜下观察各组细胞的形态学改变。进行细胞划痕实验,检测各组HepG2细胞迁移的水平。结果:在20%血清浓度下,与对照组比较,24 h时BHF高、低剂量组细胞增殖抑制率显著增加(P<0.05)。72 h时BHF各剂量组细胞增殖抑制率均显著增加(P<0.05),且高、低剂量组均高于中剂量组(P<0.05)。在10%血清浓度下,与对照组比较,24 h时BHF低剂量组细胞增殖抑制率显著增加(P<0.05),72 h时BHF各剂量组细胞增殖抑制率均显著增加(P<0.05),且高剂量组显著高于低剂量组(P<0.05)。在5%血清浓度下,与对照组比较,48 h时BHF高剂量组显著增加(P<0.05)。72 h时BHF各剂量组细胞增殖抑制率均显著增加(P<0.05),且高剂量组显著高于中、低剂量组(P<0.05)。与空白组比较,72 h时BHF高剂量组划痕迁移率显著降低(P<0.05)。结论:BHF含药血清对HepG2肝癌细胞增殖、迁移具有抑制作用,且高剂量组表现最优。

两种不同取血部位制备桂枝汤含药血清对其抗炎作用影响差异的研究

目的基于两种不同取血部位制备桂枝汤含药血清,探讨其抗炎作用差异。方法取雄性SD大鼠按10倍临床剂量给药(桂枝汤汤剂生药1 g/mL),取门静脉血、外周血含药血清,采用快速液相-三重四级杆质谱联用仪(rapid resolution liquid chromatography-triple quadrupole mass spectrometry,RRLC-QQQ-MS/MS),建立桂枝汤汤剂、含药血清中8种化学成分含量测定方法,并对含量进行测定。取对数生长期小鼠脑微血管内皮细胞(brain-derived endothelial cells.3,bEnd.3)模型,用白细胞介素(interleukin,IL)-1β刺激,建立细胞炎症模型,使用bEnd.3细胞作为正常组。除正常组、模型组外,设置桂枝汤汤剂高、中、低剂量组(分别含5%、2.5%、1.25%桂枝汤汤剂),门静脉含药血清高、中、低剂量组(分别含20%、10%、5%门静脉含药血清)和外周血含药血清高、中、低剂量组(分别含20%、10%、5%外周血含药血清),ELISA法测定细胞外液中的前列腺素(prostaglandin,PG)E_(2)含量。结果含量测定结果显示汤剂中芍药苷、芍药内酯、甘草苷、甘草酸比例相对较高,血清中肉桂酸、6-姜酚含量相对较高,较汤剂中新出现甘草次酸等代谢物。门静脉血清中以上8种化合物含量均高于外周血血清。5%桂枝汤汤剂中甘草酸含量为798.13 ng/mL,20%门静脉含药血清中甘草酸含量为316.22 ng/mL,20%外周血中甘草酸含量为481.17 ng/mL,药物中成分的含量在同一数量级。与模型组比较,将高、中、低剂量桂枝汤汤剂添加到bEnd.3细胞培养体系中,高、中、低剂量桂枝汤组细胞外液中PGE_(2)的水平均明显高于模型组(P<0.05),而门静脉或外周血含药血清组细胞外液中PGE_(2)的水平均明显低于模型组(P<0.05),且门静脉血清的药效作用显著强于相同浓度的外周血血清(P<0.05)。结论桂枝汤汤剂经胃肠道给药后,门静脉含药血清相较外周血含药血清显示出更高的成分含量与抗炎作用。这一发现提示采用门静脉含药血清而非传统的外周血含药血清在中药方剂研究中的重要性。

壮骨健膝方对巨噬细胞极化的影响及作用机制研究

目的:探讨壮骨健膝方对巨噬细胞经典活化型(M1)/替代活化型(M2)极化的影响及作用机制。方法:佛波酯诱导人单核白血病细胞分化为非活化巨噬细胞(M0),脂多糖刺激M0复制M1极化模型,将细胞分为空白组(M0+空白血清)、模型组(M1+空白血清)、抑制剂组(M1+NF-κB抑制剂+空白血清)、壮骨健膝方组(M1+含药血清)。干预24 h后,检测各组M1标志分子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、主要组织相容性复合体Ⅱ(MHC-Ⅱ)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1),M2标志分子分化簇206、163、209(CD206、163、209)mRNA表达,炎症介质白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α),抗炎因子IL-4、IL-10水平及mRNA表达,核因子κB(NF-κB)信号通路中节点蛋白核内NF-κBp65、NF-κBp50及NF-κB抑制蛋白α(IκBα)表达。结果:模型组M1标志分子、炎症介质及NF-κBp65、NF-κBp50蛋白均高于空白组(P<0.05),CD206、IL-4 mRNA及IκBα蛋白,IL-4水平均低于空白组(P<0.05);抑制剂及壮骨健膝方组M1标志分子、炎症介质及NF-κBp65、NF-κBp50蛋白均低于模型组(P<0.05),M2标志分子、抗炎因子及IκBα蛋白均高于模型组(P<0.05);壮骨健膝方组MHC-Ⅱ、MCP-1 mRNA及炎症介质均低于抑制剂组(P<0.05),CD206、CD209、IL-10 mRNA及IL-4、IL-10水平均高于抑制剂组(P<0.05)。结论:壮骨健膝方可抑制脂多糖诱导的巨噬细胞M1极化,促进M2极化,其机制可能与降低细胞中NF-κB信号通路活性有关。

荧光法测定四种肾上腺素药物与牛血清白蛋白的相互作用

运用荧光光谱法研究生理pH条件下四种肾上腺素药物与牛血清白蛋白(BSA)在不同温度下的相互作用。固定BSA浓度,梯度变化药物浓度,混合溶液分别在25℃及37℃水浴中温浴2h后进行荧光强度测定,运用Stern-Volmer方程及改进的双对数方程求出不同温度下药物与BSA的结合常数(K)和结合位点数(n)。结果表明,四种肾上腺素药物均与BSA形成结合物,对BSA荧光猝灭机制均为静态猝灭;不同温度下与BSA的K值顺序为硫酸沙丁胺醇>重酒石酸去甲肾上腺素>酒石酸美托洛尔>盐酸肾上腺素,37℃时的结合常数(K)和结合位点数(n)均大于25℃时的结果;热力学参数表明四种肾上腺素药物与BSA之间的结合均为自发过程,与BSA分子间主要作用力类型为疏水作用力。分子对接结果和实验结果符合较好。

载药微球联合TACE治疗原发性肝癌患者的效果观察

目的观察载药微球联合肝动脉化疗栓塞术(TACE)治疗原发性肝癌患者的效果。方法选取2021年6至12月收治的原发性肝癌患者60例,根据患者住院序号分为研究组和对照组各30例。研究组采用TACE联合CalliSpheres载药微球治疗,对照组接受传统TACE治疗。观察2组临床疗效、血常规、肝功能指标、甲胎蛋白(AFP)水平,并评估安全性。结果2组治疗后血红蛋白、血小板计数、白蛋白较治疗前降低,总胆红素、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶较治疗前升高(P<0.05);2组治疗后1周上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。研究组治疗后AFP水平低于对照组(P<0.05)。研究组并发症及毒副反应发生率低于对照组(P<0.05)。研究组总有效率[86.67%(26/30)]高于对照组[63.33%(19/30)](P<0.05)。研究组术后1、2年的总体生存与局部控制率均高于对照组(P<0.05)。研究组满意度评分[(79.14±16.37)分]高于对照组[(64.35±17.22)分](P<0.01)。结论载药微球联合TACE治疗原发性肝癌效果较好,可有效延长患者生存时间,减轻并发症及毒副反应,提高生存质量。

基于血清药理学的肝龙胶囊含药血清制备方法的初步探究

目的:利用血清药理学,探究用于肝细胞脂肪变性药效观察的肝龙胶囊(GLC)含药血清的最佳取血时间和含药血清体积分数。方法:C57BL/6J小鼠60只,灌胃GLC(90 mg/kg),每日两次,连续7 d,分别在末次给药0.5、1、2和4 h心脏采血,收集血清。对照组小鼠灌胃同体积的生理盐水。LC-MS/MS技术检测空白血清及不同采血时间含药血清肌苷含量,确定最佳采血时间。应用0%、1%、3%和10%GLC血清处理棕榈酸(PA)刺激的小鼠肝细胞NCTC1469,尼罗红染色检测细胞脂滴生成,RT-qPCR检测细胞内脂肪酸生成基因Fabp1和Scd1,及脂肪酸β-氧化基因Pparα的表达。结果:(1) LC-MS/MS检测发现在末次给药2 h后血清中肌苷浓度最高。(2)尼罗红染色显示GLC血清对PA诱导的肝细胞脂质积累具有剂量依赖性的减少趋势。(3) 1%和3%和10%GLC血清处理均能显著下调PA刺激的肝细胞内Fabp1和Scd1的表达,且具有剂量依赖性的减少趋势;1%、3%和10%GLC血清处理均能显著上调PA刺激的肝细胞内Pparα的表达,且具有剂量依赖性的增加趋势。结论:小鼠给药后2 h的10%GLC血清是用于肝细胞脂肪变性药效观察的最佳血清干预浓度。

信迪利单抗相关嗜血细胞综合征1例

1例64岁女性患者,因经典霍奇金淋巴瘤接受信迪利单抗免疫治疗,7个周期后患者出现发热、乏力、纳差等症状,入院后辅助检查示:血红蛋白、血小板、白细胞、纤维蛋白原下降,肝酶升高,血清铁蛋白显著上升(3 727.56μg·L^(-1)),脾脏肿大,考虑为信迪利单抗相关嗜血细胞综合征。给予甲泼尼龙琥珀酸钠60 mg·d^(-1)静脉滴注2 d,40 mg·d^(-1)静脉滴注4 d,30 mg·d^(-1)静脉滴注1 d,患者症状明显好转,且体温、血象、氨基转移酶等指标逐渐恢复正常,出院后序贯为泼尼松30 mg·d^(-1)口服治疗,每周减量10 mg,直至停药。患者出院后未再重启信迪利单抗,后续随访血清铁蛋白逐渐恢复正常水平,并再未出现嗜血细胞综合征相关症状。该病例提示使用免疫检查点抑制剂期间,患者出现不明原因发热以及血象下降,且抗感染治疗无好转,应考虑嗜血细胞综合征的可能,并尽早完善血清铁蛋白等相关诊断检查,开启糖皮质激素治疗,以免延误病情。

基于JAK2/STAT3通路研究周氏固金消瘤汤含药血清对人肺腺癌A549细胞侵袭迁移能力的影响

目的:探讨周氏固金消瘤汤(ZSGJXLT)含药血清对人肺腺癌A549细胞侵袭迁移能力的影响及其机制。方法:应用健康SD大鼠制备ZSGJXLT含药血清与空白血清,将0%(空白血清)及5%、10%、20%、30%、40%ZSGJXLT含药血清作用于A549细胞,CCK-8法测算细胞活性抑制率和半数抑制浓度(IC_(50))。用0%ZSGJXLT(空白对照组)、5%ZSGJXLT(ZSGJXLT低剂量组)、10%ZSGJXLT(ZSGJXLT中剂量组)及20%ZSGJXLT(ZSGJXLT高剂量组)含药血清培养A549细胞,细胞划痕实验及高内涵细胞成像技术观察细胞运动情况;Transwell侵袭及迁移实验观察细胞侵袭及迁移情况;Western blot法检测A549细胞JAK2/STAT3通路相关蛋白表达情况。结果:与空白对照组相比,不同浓度ZSGJXLT含药血清组A549细胞活性受到不同程度的抑制,与时间及浓度呈正相关性,24 h的IC_(50)为25.42%。与空白对照组相比,ZSGJXLT中、高剂量组A549细胞划痕愈合率、细胞移动速度均显著下降(均P<0.05),不同浓度ZSGJXLT含药血清组A549细胞侵袭及迁移数量明显减少(均P<0.05)。与空白对照组比较,ZSGJXLT中、高剂量组A549细胞的p-JAK2、p-STAT3、VEGFA蛋白表达水平显著降低(均P<0.05);不同浓度ZSGJXLT含药血清组MMP-2、MMP-9、N-cadherin蛋白表达有下调趋势,而E-cadherin蛋白表达有上调趋势,呈剂量依赖性,其中ZSGJXLT高剂量组与空白对照组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:周氏固金消瘤汤含药血清能抑制A549细胞侵袭迁移能力,其机制可能与调控JAK2/STAT3通路有关。

万古霉素治疗药物监测中不同牛血清替代人血清可行性分析

目的分析万古霉素治疗药物监测(TDM)中不同牛血清替代人血清作为空白基质的可行性。方法建立测定万古霉素血药浓度的高效液相色谱(HPLC)法。收集医院2022年1月至2023年1月接受万古霉素治疗患者的血清样本105份(已检测血药浓度),关联人血清和不同厂家(厂家1和厂家2)的不同牛血清(小牛血清、新生牛血清、胎牛血清)作为空白基质的标准曲线,得到相应的血药浓度。采用Passing-Bablok回归分析法和Bland-Altman法考察测定结果的相关性和一致性。结果以人血清和不同牛血清作为空白基质时,万古霉素质量浓度在1~100 mg/L范围内与峰面积线性关系均良好(R^(2)>0.999);日内精密度、日间精密度的RSD均小于15%,相对回收率均在85%~115%范围内。人血清与不同牛血清作为空白基质均有良好的相关性(r>0.999),但均有系统误差和比例误差。厂家1的3种牛血清(小牛血清1、新生牛血清1、胎牛血清1)对比人血清作为空白基质检测值的相对平均偏差和95%一致性界限均小于50%允许总误差(±15%),厂家2的3种牛血清(小牛血清2、新生牛血清2、胎牛血清2)对比人血清作为空白基质检测值的相对平均偏差或95%一致性界限超出±15%。结论使用HPLC法进行万古霉素TDM时,部分厂家生产的牛血清能替代人血清作为空白基质进行检测。

原位合成Au/泡沫镍磁性基底用于表面增强拉曼快速检测血清中免疫抑制剂代谢物

该文采用处理后的泡沫镍为反应模板,直接还原氯金酸溶液,经实验条件优化,原位制备了纳米金-泡沫镍多孔磁性复合表面增强拉曼散射(SERS)基底(Au-NFs)。泡沫镍三维网状具有大的比表面积和粗糙度,可稳定负载纳米金,通过Au—S键化学吸附更多的目标分子6-巯基嘌呤。复合基底的磁特性易于磁分离富集,避免血液共存物对SERS检测6-巯基嘌呤的干扰。利用磁场诱导纳米金-泡沫镍聚集,可进一步优化纳米金局域等离子场分布,形成SERS热点,大大提升了分析灵敏度,对于探针分子4-巯基吡啶的检出限可达5×10^(-9)mol/L。在外磁场优化条件下,基于Au-NFs复合SERS基底定量检测6-巯基嘌呤,在5×10^(-7)~1×10^(-8) mol/L浓度范围内有良好的线性,检出限为1×10^(-9) mol/L。该Au-NFs基底无需样品预处理,可实现血清中6-巯基嘌呤的快速分析,加标回收率在92.8%~107%范围内,表明方法可靠。

血清乙型肝炎表面抗原及乙型肝炎病毒RNA水平在预测核苷(酸)类药物治疗慢性乙型肝炎患者停药后复发中的价值

目的分析乙型肝炎表面抗原(HbsAg)及乙型肝炎病毒RNA(HBV RNA)水平检测对核苷(酸)类药物(NAs)治疗慢性乙型肝炎(CHB)患者停药后复发的预测效果。方法选取2020年1月至2021年1月在赣州市人民医院使用NAs治疗并达到停药标准的80例CHB患者,展开1年随访,根据有无病毒学复发分为复发组和未复发组。采集两组患者血液标本,展开HBV RNA及HBsAg定量检测,分析HBsAg和HBV RNA定量对NAs药物停药后复发的预测价值。结果80例患者复发率17.50%,复发组的停药时HBV DNA载量、停药时HBsAg定量高于未复发组,差异有统计学意义(P<0.05)。复发组停药6、12、18、24个月,HBsAg及HBV RNA定量水平比较,停药24个月HBsAg及HBV RNA定量水平高于其他时间点,差异有统计学意义(P<0.05)。HBV RNA预测疾病复发的敏感度为85.71%,特异度80.30%,HBsAg对应数值为78.57%、89.39%。结论HBsAg和HBV RNA定量对NAs药物停药后CHB复发有预测价值,值得推广。

药师干预对外科手术人血白蛋白使用的影响

目的探讨外科手术人血白蛋白(HSA)使用中药师干预的作用。方法依据国内外指南,并结合医院实际制订HSA点评标准,临床药师据此对HSA的使用进行干预。分别抽取干预前后首都医科大学附属北京胸科医院外科手术病例1632例(2021年1月至7月)和3205例(2021年8月至2022年8月),比较干预前后患者的性别、年龄、住院天数、手术类别、切口愈合等级(≥2级)占比、HSA的使用情况,进行合理性评价,并评估点评效果。结果干预前后患者的性别、年龄、手术类别(胸外科和骨科)、切口愈合等级均无显著差异(P>0.05)。与干预前比较,干预后患者的住院天数明显减少(P<0.01)。HSA人均用量由干预前的(64.5±43.8)g减至干预后的(54.1±50.7)g,使用率由70.77%降至26.83%,不合理使用率由95.67%降至42.09%,差异均有统计学意义(P<0.01)。干预后,HSA费用大幅降低[(2272±2132)元比(2709±1841)元,P<0.01],且排名由干预前的第5降至干预后的第18,总体费用、药费和药占比也随之减少。结论药师干预外科手术中HSA的使用,手术患者在住院时间减少的情况下,可减少HSA的平均用量,并降低其使用率和不合理使用率,以及减少患者的总费用、药费和药占比。

血清降钙素原水平监测指导儿童轻度社区获得性肺炎临床用药的价值研究

目的探讨血清降钙素原(PCT)水平监测指导儿童轻度社区获得性肺炎(CAP)用药中的临床应用价值。方法选取2019年1月至2022年3月无锡市第八人民医院收治的207例轻度CAP患儿作为研究对象,按照随机信封法分为常规组(n=103)与PCT组(n=104)。常规组予以常规抗生素治疗,PCT组在PCT水平监测指导下给予抗生素治疗。比较两组临床疗效、炎症因子水平[PCT、C-反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、血清淀粉样蛋白A(SAA)]、负性情绪评分[汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)]及不良反应发生情况。结果PCT组治疗总有效率高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。PCT组临床症状消失时间、抗菌药物使用时间及住院时间均短于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,PCT组血清PCT、CRP、ESR、SAA水平均低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,PCT组HAMA、HAMD评分均低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。PCT组不良反应发生率低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PCT水平监测指导下给予抗生素治疗轻度CAP患儿效果显著,可改善患儿临床指标和负性情绪,降低血清炎症因子水平及不良反应发生率,安全性较高。

云南省2016—2022年志贺氏菌分子分型及耐药性分析

目的对云南省2016—2022年食源性疾病主动监测分离的志贺氏菌进行血清、分子分型和药敏试验等分析,了解云南省志贺氏菌的病原学特性,为志贺氏菌感染的防控和治疗提供数据支持。方法2016年1月至2022年12月从患者粪便中分离志贺氏菌,采用玻片凝集法进行血清学分型,脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子分型分析,微量肉汤稀释法进行药敏试验。结果共分离志贺氏菌89株,其中福氏志贺氏菌占52.81%,宋内志贺氏菌占47.19%。PFGE分析发现,2种志贺氏菌均分为A和B 2个聚类簇,B簇为优势簇。47株福氏志贺氏菌分为30种PFGE带型,有3组优势带型,42株宋内志贺氏菌分为22种PFGE带型,有4组优势带型,并识别两起疑似暴发事件。志贺氏菌对13种抗生素存在不同程度的耐药,78.65%的菌株为多重耐药菌株。结论云南省志贺氏菌PFGE优势带型明显,部分带型聚集分布。耐药形势严峻,多重耐药现象严重。福氏志贺氏菌和宋内志贺氏菌耐药表型存在差异。

儿童侵袭性肺部真菌感染患者伏立康唑血药浓度与肝肾功能指标的关联性

目的 探讨伏立康唑血药浓度对肺部真菌感染患儿肝肾功能的影响,为临床合理用药提供参考。方法 回顾性分析河南省人民医院2021年8月至2022年8月肺部真菌感染患儿的临床资料,以伏立康唑血药浓度进行四分位数分层,比较各组年龄、肝、肾功能和联合用药等指标差异。结果 本次研究共入组103例儿童患者,测定的伏立康唑谷浓度中位值为2.59(0.21,13.74)mg·L^(-1),其中80例(77.67%)达到目标浓度范围(0.5~5.0 mg·L^(-1))。以伏立康唑血药浓度高低进行四分位数分层,共分为4组(Q_(1)~Q_(4)),Q_(1)组(26例)0.44(0.21,0.62 mg·L^(-1),Q_(2)组(26例)1.34(0.72,1.81)mg·L^(-1),Q_(3)组(26例)2.58(1.82,3.54)mg·L^(-1),Q_(4)组(25例)6.11(3.71,13.74)mg·L^(-1)。不同伏立康唑浓度分层组间的天冬氨酸氨基转移酶(AST)及间接胆红素(IBIL)比较,差异有统计学意义(P<0.05);而其他肝功能及肾功能指标组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在女性患儿组中,不同伏立康唑浓度分层组间的IBIL比较,差异有统计学意义(P<0.05);在男性患儿组内肝功能指标AST不同组间差异有统计学意义(P<0.05)。男性伏立康唑浓度与肝功能指标AST存在正相关(P<0.05)。结论 儿童患者伏立康唑谷浓度及肝功能指标在男性中有差异,存在相关性,受浓度影响比较大,临床应用时应进行个体化给药,注意性别差异。