双绒毛膜双胎之一胎盘植入性疾病临床及超声征象分析(附7例报道)

目的探讨双绒毛膜双胎之一胎盘植入性疾病(placenta accreta spectrum,PAS)的高危因素及产前超声征象。方法回顾性选取2013年1月至2023年4月首都医科大学附属北京妇产医院双绒毛膜双胎之一PAS患者7例,总结患者临床资料及超声声像图特点。结果7例患者年龄31~52岁,中位年龄37岁,均合并3种及以上高危因素。4例产前经超声诊断PAS,存在胎盘植入的典型征象,3例产前超声漏诊,均无剖宫产手术史;4例双活胎,经剖宫产分娩,3例双胎之一胚胎停育;2例术中出血量为8000 ml及3500 ml,行全子宫切除术,余5例保留子宫。结论双绒毛膜双胎妊娠孕妇合并前置胎盘、剖宫产史、高龄及体外受精-胚胎移植等高危因素时,发生PAS的风险增高。规范产前超声检查可提高双绒毛膜双胎之一PAS早期检出率,改善妊娠结局。

多环芳烃相关代谢酶CYP1A1和GSTP1基因多态性与胎停育中的交互作用分析

目的 分析多环芳烃相关代谢酶CYP1A1和GSTP1基因多态性与胎停育中的交互作用。方法 随机选择2022年2月至2023年2月诊断为胎停育的50例孕妇为研究组,同期进行人工流产的50例正常孕产史的孕妇为对照组。比较2组孕产妇的一般资料、生活环境危险因素、孕妇生活信息特征,采集DNA多环芳烃相关代谢酶细胞色素P450 1A1(PCYP1A1)和谷胱甘肽转移酶1(GSTP1)基因多态性进行分析。结果 2组一般资料、房子通风情况、做饭燃料类型、3年内有无装修史、附近是否有化工厂、孕期吃海产品情况、孕期吃蔬菜水果情况、1年内家庭装修或购买家具以及孕期是否常吃油炸和烧烤食物均差异无统计学意义(P>0.05)。研究组CYP1A1基因型GG分布比例显著高于对照组(P<0.05);GSTP1基因型GG分布比例显著高于对照组(P<0.05);Logistic回归模型分析CYP1A1基因多态性和GSTP1基因多态性可能使胎停育发生的风险增加,但未发现两者的交互作用(P<0.05)。结论 相关代谢酶CYP1A1和GSTP1基因多态性增加胎停育的风险,未发现两者之间与发生胎停育的情况存在着交互作用。

白介素-6、基质金属蛋白酶-2在早期胚胎发育中的作用

目的:探讨白介素-6(IL-6)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在胚胎发育中的可能作用。方法:对30例不明原因胚胎停止发育病例(研究组)和30例正常早孕吸宫流产病例(对照组)的绒毛组织及血清进行研究。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应技术(Real time-PCR)和免疫组织化学技术(SP法)检测两组绒毛组织中IL-6和MMP-2 mRNA的表达和蛋白定位、表达强度;采用双抗体酶联免疫夹心法(ELISA法)测定IL-6在两组血清中的浓度。结果:绒毛组织中,IL-6与MMP-2在合体及绒毛滋养层细胞中均有表达,Real time-PCR及免疫组化结果均显示IL-6在研究组中的表达水平低于对照组,MMP-2在研究组中的表达水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);IL-6在血清中的表达水平组间无统计学差异(P>0.05)。结论:孕早期绒毛组织中IL-6和MMP-2的正常表达对维持早期胚胎发育起到一定作用。

胚胎质量对冻融周期中生化妊娠和胚胎早期停止发育的影响

目的·探讨在体外受精-胚胎移植冻融周期中,胚胎的质量是否会影响临床结局导致生化妊娠或早期胚胎停止发育。方法·回顾性分析2015年1月至2016年6月在上海交通大学医学院附属瑞金医院生殖中心行冻融胚胎移植治疗后生化妊娠的115个周期、早期胚胎停止发育的64个周期、继续妊娠的871个周期的临床资料,比较移植后第3天(D3)胚胎质量及评分和囊胚发育速度、囊胚级别在3组之间的差异。结果·在男女双方年龄、不孕年限、排卵日子宫内膜厚度、移植日雌二醇和孕酮水平等方面3组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。多数D3冻融胚的评分为6~8分,且各分值所占比例在3组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3组中移植的D5囊胚所占的比例均高于D6囊胚所占的比例,但3组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。评级为A、B的囊胚内细胞团比例和评级为C的囊胚内细胞团比例在3组中分别比较,差异均无统计学意义;但在胚胎停止发育组中,评级为C的囊胚滋养层所占的比例为52.2%,明显高于生化妊娠组(35%)和继续妊娠组(29.3%)中相应的比例,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论·胚胎质量与生化妊娠没有必然关系,而囊胚滋养层的评级可能是胚胎早期停止发育的主要原因之一。

输卵管上皮细胞共培养对小鼠早期胚胎发育阻滞的影响

研究输卵管上皮细胞共培养对小鼠早期胚胎发育的影响,探索输卵管上皮细胞共培养克服胚胎发育阻滞的机理。建立纯化的小鼠输卵管上皮细胞系,并与合子进行共培养,用DCHFDA测定胚胎内部的H2O2含量,以MTT法测定输卵管上皮细胞活力,用RT-PCR检测CAT及GPX的转录状况。输卵管上皮细胞共培养能够显著提高2-细胞早期、4-细胞期胚胎发育率(P<0.05),囊胚率也有所提高(P>0.05)。输卵管上皮细胞共培养能够显著降低2-细胞早期胚胎内部的H2O2含量(P<0.05)。小鼠阻滞胚胎中有H2O2蓄积,输卵管上皮细胞共培养能够降低Ⅰ和Ⅱ型阻滞胚胎的比例(P>0.05),显著地提高Ⅲ型阻滞胚胎的比例(P<0.05)。当胚胎发育到2-细胞早期时共培养细胞活力上升(P>0.05),抗氧化基因CAT及GPX转录量增加(P>0.05)。以上结果表明,输卵管上皮细胞共培养通过细胞-细胞间的相互作用降低胚胎细胞内部的活性氧,克服胚胎发育阻滞,促进胚胎发育,提高胚胎质量。

发生早期胚胎发育阻滞的IVF周期临床结局探讨

目的探讨IVF周期中发生早期胚胎发育阻滞现象是否影响患者的临床结局。方法回顾性分析自2008年1月至2012年12月于本院生殖医学中心行IVF治疗且于取卵后第3天行新鲜胚胎移植的3 030个周期,根据移植周期中是否发生早期胚胎发育阻滞现象分为A组(发育阻滞组,移植日至少有1枚胚胎发生早期胚胎发育阻滞)及B组(正常对照组,移植日没有胚胎发生早期胚胎发育阻滞),比较两组患者的一般情况及临床结局。结果 A组患者的基础FSH水平低于B组患者,窦卵泡数多于B组患者,获卵数与成熟卵数均多于B组患者,具统计学差异(P<0.01);但A组患者的可用胚胎率、优质胚胎率及移植优质胚胎率均显著低于B组患者(P<0.01),同时A组患者的临床妊娠率与活产率均显著低于B组患者,具统计学差异(P<0.05)。结论 IVF周期中发生早期胚胎发育阻滞的周期与正常对照组相比有较差的胚胎质量与临床结局。

早期停育胚胎组织Bcl-2、c-Myc癌基因和P53、P16抑癌基因的表达

目的:探索早期停育胚胎组织与正常发育的早期胚胎组织癌基因、抑癌基因表达差异。方法:应用免疫组化法分析56例早期正常发育清宫的胚胎组织和68例早期停育胚胎组织Bcl-2、c-Myc癌基因及P53、P16抑癌基因表达差异。结果:Bcl-2、c-Myc癌基因在早期正常发育清宫的胚胎组织和早期停育胚胎组织中的阳性率分别为53.57%(30/56)、30.36%(17/56)和77.94%(53/68)、45.59%(31/68);P53、P16抑癌基因在早期正常发育清宫的胚胎组织和早期停育胚胎组织中的阳性率分别为39.29%(22/56)、73.21%(41/56)和27.94%(19/68)、47.06%(32/68)。结论:癌基因、抑癌基因在调控早期胚胎分化发育过程中起重要作用。

八珍汤对胚胎停育患者血清血管内皮生长因子、促红细胞生成素的影响

目的研究胚胎停育患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、促红细胞生成素(EPO)水平变化以及八珍汤对其影响,揭示胚胎停育的发病机制并为临床治疗提供思路。方法选取胚胎停育患者48例作为治疗组,同时选取正常早孕者48例作为对照组,测定对照组及治疗组治疗前以及八珍汤治疗后再次怀孕达相同孕周的VEGF、EPO水平。结果治疗组治疗前血清VEGF、EPO水平明显低于对照组(P=0.00,P=0.00),八珍汤治疗后血清VEGF、EPO水平明显升高(P=0.00,P=0.00),但仍低于对照组(P=0.01,P=0.00)。结论胚胎停育患者VEGF、EPO水平明显低于正常早孕妇女,对胚胎停育诊断具有标志性意义。传统方剂八珍汤能显著提高胚胎停育患者血清VEGF、EPO水平,对胚胎停育具有一定的治疗作用。

应用荧光原位杂交技术检测54例胚胎停育患者绒毛染色体数目异常的分析

目的应用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)方法对胚胎停育的绒毛组织进行分析,明确胚胎停育与染色体数目异常的情况。方法选择针对13、16、18、21、22、X、Y染色体特异性荧光探针,应用FISH方法,对154例胚胎停育的绒毛组织中的染色体数目进行分析,并了解胚胎停育患者绒毛染色体数目异常情况及其与患者年龄及流产次数的差异。结果 1154例胚胎停育患者染色体数目异常56例(36.4%),其中,常染色体三体40例(71.4%),多倍体4例(7.1%),45,XO 12例(21.4%)。2绒毛染色体数目异常患者的年龄[(32.14±5.21)岁]与染色体数目正常患者的年龄[(29.49±4.07)岁]比较,差异有统计学意义(u=2.145,P<0.05)。3流产次数2次及以上的染色体数目异常发生率(44.8%)高于流产次数为1次的发生率(25.4%),差异有统计学意义(χ2=6.19,P<0.05)。结论染色体数目异常是胚胎停育的重要发病因素,其中常染色体三体最多见;对2次及以上的流产患者,更应关注是否有染色体异常的发生。

共培养对小鼠胚胎内部活性氧含量影响

文章旨在研究输卵管上皮细胞共培养对小鼠胚胎内部活性氧含量影响,探索共培养克服胚胎发育阻滞机理。用小鼠输卵管上皮细胞对合子进行共培养,DCFDA测定胚胎内部H2O2含量,以外源性H2O2对输卵管上皮细胞和胚胎进行阴性对照,用Hochest 33342和PI染色检测细胞凋亡情况,以MTT法测定输卵管上皮细胞活力。结果表明,共培养能显著提高2-细胞发育率、降低胚胎内部H2O2含量(P<0.05),提高4-细胞率及降低胚胎内部H2O2含量(P>0.05)。外源性H2O2能够使合子凋亡甚至死亡,导致共培养细胞活力下降(P<0.05),未能显著地促进胚胎发育(P>0.05)。结果表明共培养能够降低胚胎细胞内部活性氧,克服胚胎发育阻滞,促进胚胎发育。

MicroRNA-126和血管内皮生长因子在胚胎停育绒毛组织中的表达及相关性研究

目的通过分析孕早期胚胎停育与正常胚胎绒毛组织中microRNA-126(miR-126)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达差异,探讨其在早期胚胎停育中的相关性。方法收集孕早期胚胎停育和正常胚胎绒毛组织各28例作为胚胎停育组和对照组,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组miR-126和VEGF mRNA表达水平的变化。结果 1两组绒毛组织中均有miR-126表达,胚胎停育组绒毛组织中miR-126的表达高于对照组,但差异无统计学意义。2胚胎停育组绒毛组织中VEGF的表达低于对照组,差异有统计学意义。3胚胎停育组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈负相关;对照组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈正相关。结论 1胚胎停育绒毛组织中VEGF的表达低于正常胚胎。2VEGF的表达变化与胚胎停育的发生有一定的相关性。

胚胎停育绒毛中HLA-G mRNA和蛋白水平的表达及差异

研究HLA-G mRNA及蛋白在早孕绒毛和胚胎停育绒毛中的表达及意义,在50例正常早期妊娠妇女和50例胚胎停育妇女绒毛中,半定量RT-PCR法检测HLA-G mRNA的水平。S-P免疫组织化学染色法检测HLA-G蛋白的水平。两组标本中HLA-G mRNA水平差异不具有统计学意义(P>0.05);胚胎停育绒毛标本中HLA-G蛋白水平降低,与正常早孕绒毛标本相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。说明HLA-G分子可能参与了胚胎停育的发生发展。

体外受精-胚胎移植结局中胚胎停育的相关因素分析

目的探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局中胚胎停育的原因。方法选取2020年1月至2021年3月青海省人民医院生殖医学中心收治的396对接受IVF-ET助孕并临床妊娠的不孕夫妇作为研究对象。按妊娠结局是否发生胚胎停育分为对照组(n=340)和胚停组(n=56),对两组的男方年龄、女方年龄、不孕症的类型、精液参数、男性异常染色体核型比例、受精率、平均胚胎数及平均优质胚胎数、新鲜胚胎移植、解冻胚胎移植进行比较,并进行统计学分析。结果胚停组女方平均年龄为(33.29±3.69)岁,大于对照组的(31.59±3.92)岁,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组男方年龄、不孕症的类型(原发不孕症和继发不孕症)、精液参数、男性异常染色体核型比例、受精率、平均胚胎数、平均优质胚胎数、新鲜胚胎移植比例、解冻胚胎移植比例比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在IVF-ET助孕过程中,女方年龄过大是引起胚胎停育的主要原因,因此,女方年龄较大的不孕患者应尽早行IVF-ET助孕,以防发生胚胎停育的不良妊娠结局。

体外受精-胚胎移植后妊娠早期胚胎停止发育相关因素分析

目的探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)术后早期妊娠胚胎停止发育的相关因素。方法回顾性分析2004年1月至2009年2月IVF-ET周期助孕临床妊娠后发生早期胚胎停止发育34例患者的临床资料,选择同期IVF-ET后妊娠并正常分娩患者266例为对照。结果胚胎停止发育组短方案促排卵所占比例高于分娩组,但无统计学意义(P=0.055),胚胎停止发育组年龄、促性腺激素(Gn)用量高于分娩组(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,年龄是胚胎停止发育的危险因素(P<0.05)。结论高龄是体外受精-胚胎移植术后早期妊娠胚胎停止发育的危险因素。

补肾益气养血方治疗复发性不明原因胚胎停育的疗效及机制探讨

目的探讨补肾益气养血方治疗复发性不明原因胚胎停育的临床疗效及其作用机制。方法选取82例复发性不明原因胚胎停育患者,根据患者意愿分为2组各41例,对照组给予孕酮、绒毛膜促性腺激素保胎治疗,治疗组给予口服补肾益气养血方3个疗程后自然受孕,妊娠后给予孕酮、绒毛膜促性腺激素保胎治疗,达前次妊娠相同孕周采血,测定血管内皮生长因子水平;当孕龄高于前次孕周2周以上记为妊娠成功,比较2组妊娠成功率。结果治疗组血清VEGF水平明显高于对照组(P<0.05);对照组成功率58%,治疗组成功率88%,治疗组高于对照组(P<0.01)。结论补肾益气养血方联合传统西药保胎治疗不明原因胚胎停育疗效显著,其作用机制与上调血清中VEGF含量、改善生殖器官血液供应有关。

早期胚胎停育绒毛中Survivin与Bcl-2基因表达的研究

目的探讨Survivin及Bcl-2在早期胚胎停育中的临床意义。方法前瞻性研究,采用免疫组化法检测济南市第五人民医院妇科30例正常早期妊娠、27例早期胚胎停育绒毛中Survivin及Bcl-2的表达情况。结果 Survivin在胚胎停育组绒毛中的表达阳性率(51. 85%)低于正常早期妊娠组(93. 33%),差异具有统计学意义(P <0. 01);正常早期妊娠组中,Survivin++表达率、+++表达率均高于胚胎停育组,差异具有统计学意义(P <0. 05)。Bcl-2在胚胎停育组绒毛中的表达阳性率(62. 96%)低于正常早期妊娠组(96. 67%),差异具有统计学意义(P <0. 01)。胚胎停育组绒毛中Bcl-2++表达率低于正常早期妊娠组(P <0. 01)、+++表达率低于正常早期妊娠组(P <0. 05),差异均具有统计学意义。结论 Survivin、Bcl-2在胚胎早期发育过程中起重要作用,两者低表达或缺失可能导致胚胎停育。

胚胎停育绒毛组织中TGF-β1、MMP-9及TIMP-1的表达及意义

目的:探讨TGF-β1、MMP-9及TIMP-1 mRNA的表达在胚胎停育发病机制中的作用。方法:用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测正常人工流产(20例)和胚胎停育(25例)患者绒毛组织中TGF-β1、MMP-9与TIMP-1 mRNA的表达量。结果:(1)与对照组相比,实验组绒毛中TGF-β1 mRNA和TIMP-1 mRNA的表达量降低(P<0.05),而MMP-9 mRNA表达量升高(P<0.05);(2)绒毛组织中TGF-β1 mRNA与MMP-9 mRNA的表达呈负相关(r=-0.82,P<0.05)。结论:胚胎停育患者绒毛组织TGF-β1、MMP-9以及TIMP-1 mRNA表达有明显改变;TGF-β1表达的降低可能上调MMP-9表达,通过破坏MMPs/TIMPs动态平衡,最终导致胚胎停育发生。

端粒及端粒酶活性检测方法研究进展

缩短的端粒是细胞老化的信号,检测端粒酶活性可间接测定细胞状态。端粒酶通过p66Shc信号通路对胚胎发育永久性停滞产生影响。本文对哺乳动物卵母细胞或胚胎永久性停育与端粒酶活性水平变化的关系、端粒酶活性检测方法研究进展及各种方法的优缺点进行综述,包括端粒重复扩增法(TRAP)、TRAP-酶联免疫吸附(ELISA)法、TRAP-银染法、杂交链式信号放大反应结合磁分离技术法和亚甲蓝MB作为G-四联体结合探针法、H-GNs比色法、依赖无标记分子信标的级联放大DNA机制法。

单细胞转录组测序分析人类胚胎发育阻滞的潜在机制

目的探讨胚胎发育阻滞的分子机制,为提高辅助生殖成功率提供新思路。方法单细胞转录组测序技术研究发育阻滞胚胎(包括体外受精和胞质内单精子注射过程)及对照组的转录组情况,利用加权基因共表达网络分析(WGCNA)等生物信息学手段分析与胚胎阻滞相关的信号通路和关键基因。结果阻滞胚胎中与细胞分裂、细胞周期等相关的信号通路表达异常。与ICSI组相比,IVF组阻滞胚胎的细胞骨架、氧化磷酸化等通路表达异常。结论通过单细胞转录组测序技术分析阻滞胚胎转录组的结果说明细胞分裂、周期、代谢等通路可能影响胚胎正常发育,ICSI过程影响了线粒体功能、结构的变化。

不育症及自然流产、胚胎发育停滞与男性精液质量参数的相关性分析

目的探讨男性精液质量参数与自然流产、胚胎发育停滞及不育症的相关性。方法筛选80例自然流产或胚胎发育停滞患者男性配偶的精液标本与60例有正常生育史继发不育的患者男性配偶的精液标本的质量参数进行比较分析。结果自然流产、胚胎发育停滞(研究组)与继发不育症组(对照组)精液质量参数比较差异无统计学意义(P>0.05)。仅a级精子率有统计学意义(P=0.04<0.05)。结论精液质量、畸形精子率的高低可能是造成不育症的主要原因,但是否是影响自然流产、胚胎发育停滞的主要因素尚不明确,还需进一步的研究。