Changes in blood sugar levels of rats experimentally infected with Trypanosoma brucei and treated with imidocarb dipropionate and diminazene aceturate

Objective:To determine the effect of Trypanosoma brucei(T.brucei)on blood sugar level of infected rats.Methods:The experiment was done with 42 albino rats grouped into 3 groups of 14 members each.Group A was uninfected(control group),Group B was infected with T.brucei and treated with diminazene aceturate,and Group C was infected with T.brucei and treated with imidocarb dipropionate.Blood samples were collected from the media canthus of the experimental rats on Days 0,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10 for the assessment of change in blood sugar levels.The blood sugar levels were determined with a glucometer(Accu-chek active serial No.GN:10023338).Results:By 4 to 5 days post infection,there was a significant increase(P<0.05)in the blood sugar of Group B and Group C.By Day 6 post infection(Day 2 post treatment),no significant difference(P>0.05)was observed in the groups when compared with the control group till Day 12 of the experiment.Conclusions:T.brucei caused a significant increase in blood sugar of infected rats.

高效液相色谱-串联质谱法检测牛组织和奶中咪多卡残留的研究

建立了一种检测牛组织和牛奶中咪多卡残留检测的高效液相色谱-串联质谱法。牛组织(肌肉、肝脏、肾脏、脂肪)和奶在NaAc缓冲体系中酶解,经HCl溶液提取,WCX固相萃取柱净化,以0.3%甲酸水溶液(含20 mM甲酸铵)和0.3%甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱,在HILIC色谱柱上分离,在电喷雾正离子(ESI^(+))模式下,用多反应监测(MRM)模式检测,同位素内标法定量。结果表明:咪多卡在2.5~1000 ng/mL的浓度范围内呈现良好线性关系,相关系数(R^(2))大于0.99;咪多卡在牛组织和奶中的检测限均为10μg/kg,定量限均为20μg/kg;咪多卡在牛组织和奶中20~4000μg/kg添加浓度水平上的回收率在70.9%~109%范围内;批内RSD在0.55%~9.59%之间,批间RSD在2.21%~12.1%之间。该方法具有灵敏度高、定量准确,重复性好等特点,可以满足牛组织和奶中咪多卡残留检测的要求。

一种通用型半抗原免疫层析试纸的制备及在双咪苯脲上的应用

为了提高单克隆抗体筛选效率,降低免疫层析检测方法建立门槛,利用生物素标记人工抗原为探针,以亲和素固定于硝酸纤维素膜上为检测线,建立了通用型半抗原免疫层析试纸,并将其应用于双咪苯脲(IM)单克隆抗体的筛选及残留检测。结果表明,利用碳二亚胺法成功制备了IM人工抗原及生物素探针;通过免疫小鼠及杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体;应用试纸筛选,成功获得IM单克隆抗体细胞株1株,其效价为1∶32000,灵敏度为6.25 ng/mL。基于该单抗及通用型半抗原免疫层析试纸建立了IM免疫层析检测试纸,检测牛奶中IM的灵敏度为7 ng/mL。该试纸及其探针制备方法可以通用于半抗原抗体筛选,为抗体筛选提供了一种更高效的方法;无需免疫层析试纸研发平台即可建立半抗原免疫层析检测方法,为免疫层析试纸的研发提供了新的技术手段。

动物专用抗原虫药咪唑苯脲研究进展

咪唑苯脲是一种具有良好治疗和预防作用的动物专用抗原虫药。文章综述了其理化性质、抗原虫机理、药代动力学、毒性、残留和临床应用等方面的研究进展,旨在为其在兽医临床的合理使用提供理论依据。

高效液相色谱法测定猪组织中残留的咪唑苯脲

建立了高效液相色谱(HPLC)测定猪可食性组织中咪唑苯脲残留的方法。猪组织经β-葡萄糖苷酶水解后,用1mol/L盐酸提取,再用正己烷-异戊醇(3∶2,v/v)混合溶剂萃取净化。以乙腈和0.0075mol/L戊烷磺酸钠水溶液(含0.1%三乙胺,pH3.0)作为流动相,经C18反相色谱柱分离后用紫外检测器检测。结果表明:该方法在咪唑苯脲含量为10～10000μg/L范围内呈现良好的线性关系,相关系数大于0.999;空白组织中加标样品的检出限(LOD)为10μg/kg,定量限(LOQ)为20μg/kg。在定量限、最高残留限量(MRL)、2倍MRL添加水平下,不同组织的平均回收率为80.04%～110.32%,相对标准偏差为0.82%～10.00%。表明该检测方法简单、灵敏,适用于猪组织中咪唑苯脲残留的定量检测。

盐酸咪唑苯脲的合成

苄腈经混酸硝化、与乙二胺在硫粉催化下环合、铁粉还原得2-(3-氨基苯基)-4,5-二氢-1H-咪唑二盐酸盐,再与双光气缩合后成盐,制得抗梨形虫病药盐酸咪唑苯脲,总收率约50%。

高效液相色谱法测定牛奶及牛可食性组织中咪唑苯脲

建立了高效液相色谱法(HPLC)测定牛奶及牛可食性组织中咪唑苯脲(IMD)残留.牛奶或已匀浆组织先用β-葡萄糖苷酶水解,组织用盐酸超声提取,再用提取液萃取,牛奶直接用提取液提取.用乙腈-戊烷磺酸钠水溶液作为流动相,经高效液相色谱C18柱分离后用紫外检测器检测.咪唑苯脲质量浓度在0.01～10.00μg/mL的范围内呈现良好的线性关系,相关系数大于0.999;组织加标样品检出限为0.01μg/g,定量限为0.02μg/g.在定量限、最高残留限量、2倍最高残留限量添加水平下的平均回收率为80.02%～114.72%,批内相对标准偏差为0.83%～10.92%,批间相对标准偏差为7.45%～12.69%.表明该检测方法简单、灵敏、可靠,适用于牛奶及牛组织中咪唑苯脲残留的分析.

丙酸咪唑苯脲的研制及其对梨形虫病的治疗试验

以苯甲腈为起始原料 ,经硝化、环化、还原、缩合、成盐等五步反应合成抗梨形虫病新药丙酸咪唑苯脲 ,用 IR、UV、MS、1HNMR、13 CNMR、元素分析等对其化学结构进行了确证。UV法测定牛血药浓度及组织残留量。小白鼠 i P丙酸咪唑苯脲 ,LD50 =84.4± 1 3.5mg/kg。该药无致突变性和无致畸效应。用其治疗家畜梨形虫病 ,临床治愈率为 75%～ 1 0 0 %;预防水牛巴贝西虫病 ,试验组和对照组的发病率分别为 0 .72 %和 1 0 %,两组差异特别显著 ( P<0 .0 1 )

动物肌肉、内脏和牛奶中咪唑脲苯残留量的高效液相色谱测定及液相色谱-串联质谱确证

目的：建立固相萃取净化-高效液相色谱和液相色谱-串联质谱测定动物组织和牛奶中咪唑脲苯残留量的分析方法。方法残留的咪唑脲苯采用1%三氟乙酸-乙腈(1：4, v/v)提取, Oasis WCX固相萃取柱净化,高效液相色谱外标法定量,并经液相色谱-串联质谱确证。结果咪唑脲苯检出限为10μg/kg(S/N≥3),定量限为25μg/kg(S/N≥10)；在LOQ、MRL和2MRL三个添加水平下重复分析6次,回收率为72.7%~101%,相对标准偏差为1.2%~6.9%。结论该方法稳定、可靠,适用于动物组织和牛奶中咪唑脲苯的测定。

盐酸咪唑苯脲W/O/W型复乳制剂处方的研制

采用单因素分析方法对乳化剂的用量、外水相与初乳体积比及一些药用辅料进行筛选,确定了盐酸咪唑苯脲W/O/W型复乳的基础处方,并对处方进行了质量评定。最终确定了初乳中乳化剂OP-10的最佳用量为处方量的10%,外水相中乳化剂泊洛沙姆188的用量为7%,蜂胶的最佳用量为处方量的5%,明胶为稳定剂,最佳外水相与初乳比例为5∶5。制备的盐酸咪唑苯脲W/O/W型复乳,稳定性较好,常温放置1个月未见分层,粒径小且分布均匀,包封率高。

紫外系数倍率法测定盐酸咪唑苯脲缓释剂在奶牛中的血药浓度

本试验以261nm为测定波长,277nm为参比波长,采用紫外系数倍率法测定盐酸咪唑苯脲缓释剂在奶牛体内不同时间的血浆药物浓度,并用药动学计算软件拟合处理得药动学参数。结果表明:此方法能不经分离直接消除血浆的背景干扰,咪唑苯脲标准品在0.1～5.0μg/mL的范围与ΔA呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率96.16%,日内、日间RSD(%)均小于5.00%。药时曲线符合一室吸收模型,药动学方程为:C=2.2540(e-0.0088t-e-0.4223t),r=0.9980。与肌肉注射咪唑苯脲水剂相比,消除半衰期[T1/2(Ke)]延长了75.402h,药物峰浓度时间[Tmax]延长了7.631h。咪唑苯脲缓释剂优于咪唑苯脲水剂。

盐酸咪唑苯脲复乳注射液在山羊体内的药动学

为研究盐酸咪唑苯脲复乳注射液在山羊体内的药动学,将12只崂山奶山羊随机分为2组,每组6只,公母各半,分别肌注盐酸咪唑苯脲复乳和盐酸咪唑苯脲粉针剂,给药剂量均为1 mg/kg b.w.。血浆样品经固相萃取柱处理后,采用HPLC法测定山羊血浆中咪唑苯脲的血药浓度,用3P97药动学软件处理药时数据。山羊肌注盐酸咪唑苯脲复乳和粉针剂的药时数据均符合一级吸收一室模型,主要药动学参数分别为:t1/2ka(4.089±0.082)h和(0.400±0.012)h;t1/2β(219.572±4.340)h和(3.883±0.415)h;T max(23.946±2.153)h和(1.462±0.236)h;C max(0.587±0.091)μg/mL和(0.680±0.014)μg/mL;AUC(231.997±5.284)[(μg/mL)·h]和(4.434±0.561)[(μg/mL)·h];CL/F(s)(0.004±0.001)(μg·mL-1)/h和(0.226±0.021)(μg·mL-1)/h;与肌注IMD粉针剂相比,肌注IMD复乳注射液后,T max和t1/2β显著延长(P<0.01),AUC显著增加(P<0.01)。结果表明,肌肉注射盐酸咪唑苯脲复乳注射液后,药物吸收缓慢、达峰时间延长、消除缓慢。

盐酸咪唑苯脲W/O型乳剂的处方工艺筛选

旨在筛选盐酸咪唑苯脲W/O型乳剂的基础处方。采用单因素分析方法对油相、乳化剂的种类及用量、油水比例进行筛选以及采用正交试验对处方工艺进行优化;确定了盐酸咪唑苯脲W/O型乳剂的基础处方,最终筛选出白油为最佳油相、亲水性乳化剂OP-10为最佳乳化剂,初步确定白油、亲脂性乳化剂司盘-80、亲水性乳化剂OP-10为最佳处方组合,乳化剂的最佳用量为处方量的10%,油水最佳比例为7∶3。确定最佳乳化温度为50℃,最佳乳化时间为3min,最佳乳化速度为8000r/min。通过上述处方筛选及工艺优化,制备了2%的盐酸咪唑苯脲W/O型乳剂。

二盐酸双咪苯脲结构解析与含量测定方法的研究

采用元素分析、IR、UV、MS和NMR方法测定了二盐酸双咪苯脲的化学结构并进行解析,同时建立了二盐酸双咪苯脲的UV含量检测方法。结果,波谱和元素分析等确证了二盐酸双咪苯脲的化学结构。用UV法测定其水溶液含量时,浓度与吸收度呈良好的线性关系,重现性和稳定性都较好。

高效液相色谱法测定盐酸咪唑苯脲的含量

建立了高效液相色谱法测定盐酸咪唑苯脲的含量。采用Amethyst C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm);以乙腈-缓冲液(缓冲液为5mmol/L辛烷磺酸钠溶液,含0.1%(体积分数)三乙胺,用冰乙酸调节pH值为3.2)为流动相,乙腈与缓冲液体积比为30︰70;流速为1.0mL/min;检测波长为239nm;柱温为30℃。在39.32～137.62μg/mL范围内,盐酸咪唑苯脲峰面积与质量浓度呈良好的线性关系(r=0.999 3),平均回收率约为99.50%(n=9),RSD值约为0.52%。

咪唑苯脲注射液特殊安全性试验研究

通过豚鼠、新西兰大白兔的皮肤致敏、皮肤刺激、肌肉刺激、红细胞溶血试验,考察咪唑苯脲注射液的安全性。试验用新西兰大白兔6只进行皮肤刺激,染毒剂量为咪唑苯脲注射液0.5 mL/只(规格:1211.5 mg/mL);用白化豚鼠进行皮肤致敏试验,按0.5 mL/kg剂量,以豚鼠背部左侧皮肤进行染毒;用新西兰大白兔8只,进行肌肉刺激试验,在右侧股四头肌注入0.1、0.2、0.5 mL/kg bw,左侧股四头肌注入同样体积的灭菌0.9%氯化钠溶液作对照;用新西兰大白兔2只,进行红细胞溶血试验,采用体外试管法进行,采心脏血50 mL,制成红细胞悬液,加入受试药物原液温育3 h。结果显示,皮肤刺激试验:受试物咪唑苯脲注射液各个时间点的刺激反应积分均值为0;皮肤致敏试验:受试药物组和阴性对照组豚鼠的皮肤过敏反应率为0;肌肉刺激试验:给予受试物各个时间点的刺激反应积分均值为0;红细胞溶血试验:受试药物及阴性对照在3 h内红细胞全部下沉,上清液体均为澄明,溶液中未见棕红色或红棕色絮状沉淀。试验表明,咪唑苯脲注射剂无皮肤刺激性、不出现过敏反应、无肌肉刺激性、无溶血和凝聚作用,临床上可以肌肉注射使用。

驱虫药咪唑苯脲的临床应用研究进展

咪唑苯脲是一种世界公认较安全可靠的动物专用抗原虫药,被广泛应用于治疗和预防梨形虫病、边虫病、锥虫病和附红细胞体病等。该药具有代谢吸收快、分布广泛、消除缓慢、血药半衰期长的特点,常用于牛、羊、猪等规模养殖动物的原虫病治疗,近年也常被用于宠物原虫病的治疗,获得了良好效果。大多数情况下此药副作用微小,但应禁止与胆碱酯酶抑制剂联合使用。目前在牛羊组织和奶中均能够检测到该药的残留,是否对人体有危害尚不清楚。由于长期被广泛使用,近年研究发现一些原虫对咪唑苯脲产生了耐药性。未来应对咪唑苯脲的杀虫效果做深入探索,确定更准确的杀虫谱和给药方案;同时进一步研究其对人体是否存在危害,进而确定停药时间和最大残留量。本文主要对咪唑苯脲的临床应用效果、药物残留、副作用和耐药性方面进行了综述,旨在为临床上合理使用该药提供参考。

盐酸咪唑苯脲复乳制备条件的优化研究

为了优化盐酸咪唑苯脲复乳制剂的配方和乳化条件,首先通过单因素筛选试验,确定最佳油相和乳化剂的种类、浓度及油水比例、乳化条件确定初乳制备条件;再通过选择不同外水相乳化剂、外水相与初乳体积比、内水相稳定剂与用量以及乳化条件,确定复乳制备条件。结果表明,选择白油作为油相、10%的OP-10为乳化剂、油相和水相比例7∶3,乳化温度为40℃,乳化时间为3 min,乳化速度为10000 rpm时为制备乳剂的最佳条件;选择7%浓度的外水相乳化剂,外水相与初乳体积比为5∶5,选择10%明胶液稳定剂,采用25℃、1 min、4000 rpm的乳化条件制备的复乳制剂效果最佳,研究初步获得了盐酸咪唑苯脲复乳制剂配方和乳化条件。

二丙酸咪唑苯脲的合成工艺改进

目的对二丙酸咪唑苯脲的合成工艺进行改进。方法以间硝基苯甲腈为原料,经与乙二胺环化,硝基还原,与尿素缩合制得咪唑苯脲粗品,再与丙酸成盐制得二丙酸咪唑苯脲。结果合成的目标产物收率为69.7%,纯度为99.3%。所得产物经熔点、质谱(MS)和核磁共振氢谱(1H-NMR)等方法确证。结论改进后的工艺减少了废弃物的产生,实现了绿色化生产,收率高,操作简便,适合工业化生产。

国产咪唑苯脲对小鼠和水牛人工感染伊氏锥虫病的治疗试验

应用国产咪唑苯脲,以0.5mg、0.75mg两种剂量及1、2、3 d不同疗程,对人工感染伊氏锥虫的小鼠进行了治疗试验。结果,0.75mg×2 d组连续观察15 d以上,大多数小鼠存活,而未经治疗的对照组小鼠全部死亡。对3头人工感染伊氏锥虫的水牛,以4 mg/kg剂量一次皮下注射治疗后24 h,血液压滴标本检查虫体阴性,但1周后集虫检查和小鼠接种试验均为阳性,后改用3mg/kg×2d疗法,全部治愈。另外3头人工感染伊氏锥虫的水牛,以3mg/kg×2d疗法治疗后,用血液压滴法,集虫法及小鼠接种法检查虫体均为阴性,连续观察3个月未见复发。