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2022-2023年江苏省H3N2流感病毒分子特征及耐药性分析
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作者 邓斐 王慎骄 +3 位作者 余慧燕 祁贤 朱立国 戴启刚 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期848-854,共7页
目的根据2022-2023年江苏省监测年度流感病毒实验室检测结果,对H3N2流感病毒的基因特征和耐药性进行深度分析,评估疫苗和药物的有效性。方法对全省流感网络实验室分离的29株H3N2分离株进行全基因组扩增与测序,构建HA和NA基因进化树。分... 目的根据2022-2023年江苏省监测年度流感病毒实验室检测结果,对H3N2流感病毒的基因特征和耐药性进行深度分析,评估疫苗和药物的有效性。方法对全省流感网络实验室分离的29株H3N2分离株进行全基因组扩增与测序,构建HA和NA基因进化树。分析抗原表位、糖基化位点以及耐药位点的突变特性,并采用荧光发光法对流感病毒神经氨酸酶进行检测。结果江苏省29株H3N2分离株的同源性较高,与国内参考株和2021-2022年度疫苗株位于同一进化分支,与国外参考株和2022-2023年度疫苗株则处于不同进化分支。与2021-2022年度疫苗株A/Cambodia/e0826360/2020相比,江苏省2022-2023年度分离的H3N2流感病毒HA蛋白发生了4个氨基酸位点的替换,NA蛋白发生了2个氨基酸位点的替换,糖基化位点、受体结合位点以及氨基酸残基保守区域未发生改变。IC_(50)结果表明,29株H3N2分离株对奥司他韦和扎那米韦两种抗病毒药物均未产生耐药。结论江苏省2022-2023年监测年度的流感病毒主要为甲型H3N2流感病毒。通过对流感病毒的HA和NA基因变异位点以及耐药性监测,及时了解病毒基因的变异情况,为选择有效的疫苗株提供科学依据,从而有助于预防和控制流感病毒的暴发和流行。 展开更多
关键词 h3n2流感病毒 疫苗 药物 基因特征 进化分析
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2022至2023年吉林省甲型H3N2流感病毒的分子特征分析
2
作者 杨显达 吴东林 +5 位作者 柳鸿敏 孙杨 王艺儒 吴佳寅 崔芳健 李静 《中国实验诊断学》 2024年第6期721-726,共6页
目的通过对2022至2023年甲型H3N2流感病毒HA和NA基因特征分析,为吉林省H3N2流感病毒防控提供科学依据。方法随机选取2022至2023年吉林省23株H3N2流感病毒,对HA和NA基因进行序列同源性、基因进化特征、基因位点氨基酸变异分析。结果HA、N... 目的通过对2022至2023年甲型H3N2流感病毒HA和NA基因特征分析,为吉林省H3N2流感病毒防控提供科学依据。方法随机选取2022至2023年吉林省23株H3N2流感病毒,对HA和NA基因进行序列同源性、基因进化特征、基因位点氨基酸变异分析。结果HA、NA基因核苷酸序列种系进化树显示:23株甲型H3N2流感毒株全部属于3C.2a分支,其中4株为3C.2a1b.2a.1a分支,与2021至2022年推荐的疫苗株A/Cambodia/e0826360/2020在一个分支上;19株为3C.2a1b.2a.2a分支,与2022至2023年推荐的疫苗株A/Darwin/6/2021在一个分支上。与WHO推荐的2022至2023年北半球疫苗株A/Darwin/6/2021、A/Darwin/9/2021相比,4株甲型H3N2流感病毒HA蛋白氨基酸序列均发生了9个氨基酸位点变异,分别为I48T、S156H、N159Y、I160T、Q164L、K171N、D186S、N190D、S198P;HA蛋白抗原决定簇的氨基酸5处发生替换,分别为S156H、N159Y、I160T、D186S、N190D。19株甲型H3N2流感病毒HA基因蛋白氨基酸序列均发生了7个氨基酸位点变异,分别为G/D53N、N96S、N122D、I140K、I192F、I223V、N378S,除A/吉林船营/1615/2023(H3)外,其他18株均发生了E50K氨基酸位点变异;HA蛋白抗原决定簇的氨基酸4处发生替换,A区(N122D)B区(I192F)C区(E50K、G/D53N)。结论与WHO推荐的2022至2023年北半球疫苗株A/Darwin/6/2021、A/Darwin/9/2021相比,19株甲型H3N2流感病毒在HA蛋白抗原决定簇的氨基酸4处发生替换,分别是N122D、I192F、E50K、G/D53N,HA发生了抗原漂移。23株H3N2流感病毒NA基因存在12个氨基酸位点变异,但在NA酶活性催化位点和辅助位点均未发生变异,但有3株H3N2流感病毒存在S331G变异,与耐药变异S331R发生在同一位点上,应引起重视。 展开更多
关键词 流感病毒 h3n2 序列分析
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2022—2023年北京市通州区甲型H3N2亚型流感病毒血凝素基因特征分析
3
作者 张冲 邹林 +5 位作者 佟玲 刘肖 杨丽丽 高翔 王芳 张猛 《首都公共卫生》 2024年第4期221-227,共7页
目的分析2022—2023年北京市通州区流感病原学监测中甲型H3N2亚型流感病毒的血凝素(hemagglutinin,HA)基因特性,为流感防控提供科学依据。方法对通州区2022—2023年流感病原学监测结果进行统计分析,选取不同时间分离到的34株甲型H3N2亚... 目的分析2022—2023年北京市通州区流感病原学监测中甲型H3N2亚型流感病毒的血凝素(hemagglutinin,HA)基因特性,为流感防控提供科学依据。方法对通州区2022—2023年流感病原学监测结果进行统计分析,选取不同时间分离到的34株甲型H3N2亚型流感毒株,进行HA基因扩增和测序,应用MEGA11进行HA基因的核苷酸和氨基酸变异分析,采用邻接法构建HA基因遗传进化树,在线预测N-糖基化位点,分析其基因变异和进化特征。结果2022—2023年共检测流感病原学监测样本3660件,流感病毒核酸阳性率为21.50%,其中甲型H3N2亚型流感病毒占比为57.81%。发热疫情样本共计4855件,流感病毒核酸阳性率为54.25%,其中甲型H3N2亚型流感病毒占比为61.50%。34株甲型H3N2亚型流感病毒的HA基因序列与疫苗株A/Darwin/9/2021相比,核苷酸相似度为97.00%~98.50%,氨基酸相似度为97.40%~98.10%。基因进化分析显示,2022—2023均分布在3c.2a1b.2a分支,2022年8—11月分离的14株毒株分布在1a.1亚分支,2023年2—3月分离的20株毒株则分布在2a.3a.1亚分支。与疫苗株相比,2022—2023年的34株毒株在4个抗原决定簇上(B、C、D和E)发生了多位点氨基酸变异,且在186和225位点上均发生了替换。2022年的14株毒株,增加了158NYTY位点,存在13个潜在糖基化位点,2023年的20株分离株122NESF糖基化位点丢失,共有12个潜在糖基化位点存在。结论2022—2023年,北京市通州区人群中流行的甲型H3N2亚型流感病毒分布在2个进化分支上,2023年3C.2a1b.2a.2a.3a.1分支取代了2022年3C.2a1b.2a.1a.1分支,成为流行株。及时分析流感病毒基因特性和进化趋势,对流感的防控有重要意义。 展开更多
关键词 甲型h3n2亚型流感病毒 血凝素 基因特征
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7例儿童甲型H3N2流感病毒相关的致命性急性坏死性脑病
4
作者 蔡丹 陈媛媛 +3 位作者 朱友荣 吴华平 陈修文 罗强 《江西医药》 CAS 2024年第1期129-133,共5页
目的探讨H3N2流感病毒相关急性坏死性脑病的疾病特点,总结诊治经验。方法整理江西省儿童医院2022年6月1日至2022年6月30日收治的7例儿童急性坏死性脑病患儿的病例资料,分析此次流行季节甲型H3N2流感病毒相关急性坏死性脑病的临床表现、... 目的探讨H3N2流感病毒相关急性坏死性脑病的疾病特点,总结诊治经验。方法整理江西省儿童医院2022年6月1日至2022年6月30日收治的7例儿童急性坏死性脑病患儿的病例资料,分析此次流行季节甲型H3N2流感病毒相关急性坏死性脑病的临床表现、辅助检查、治疗方案及预后。结果7例患儿均有高热乃至超高热,其中4例患儿发热48 h内出现抽搐、意识障碍,随后迅速恶化出现脑干反射消失;3例患儿入院时即有DIC、休克、出血表现;其中5例患儿入院时流感快速抗原检测均阴性,行核酸检测甲型流感病毒呈阳性,7例患儿省疾控预防中心(CDC)病原学分型为H3N2,2例发病早期头颅CT检查为正常;7例患儿1例抢救无效死亡,4例因脑死亡放弃治疗后死亡,2例痊愈出院,死亡率71.4%。结论本文夏季流行的流感病毒为H3N2,快速抗原检测可为阴性,接种流感疫苗不能完全避免感染;甲流H3N2流感病毒致坏死性脑病病情进展迅速,易出现中枢性循环衰竭、出血、休克、DIC,救治困难,死亡率高。 展开更多
关键词 h3n2 甲型流感病毒 急性坏死性脑病 死亡病例
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Genetic and biological properties of H9N2 avian influenza viruses isolated in central China from2020 to 2022
5
作者 Libin Liang Yaning Bai +14 位作者 Wenyan Huang Pengfei Ren Xing Li Dou Wang Yuhan Yang Zhen Gao Jiao Tang Xingchen Wu Shimin Gao Yanna Guo Mingming Hu Zhiwei Wang Zhongbing Wang Haili Ma Junping Li 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2024年第8期2778-2791,共14页
The H9N2 subtype of avian influenza virus(AIV)is widely prevalent in poultry and wild birds globally,and has become the predominant subtype circulating in poultry in China.The H9N2 AIV can directly or indirectly(by se... The H9N2 subtype of avian influenza virus(AIV)is widely prevalent in poultry and wild birds globally,and has become the predominant subtype circulating in poultry in China.The H9N2 AIV can directly or indirectly(by serving as a"donor virus")infect humans,posing a significant threat to public health.Currently,there is a lack of in-depth research on the prevalence of H9N2 viruses in Shanxi Province,central China.In this study,we isolated 14 H9N2 AIVs from October 2020 to April 2022 in Shanxi Province,and genetic analysis revealed that these viruses belonged to 7 different genotypes.Our study on animals revealed that the H9N2 strains we identified displayed high transmission efficiency among chicken populations,and exhibited diverse replication abilities within these birds.These viruses could replicate efficiently in the lungs of mice,with one strain also demonstrating the capacity to reproduce in organs like the brain and kidneys.At the cellular level,the replication ability of different H9N2 strains was evaluated using plaque formation assays and multi-step growth curve assays,revealing significant differences in the replication and proliferation efficiency of the various H9N2 viruses at the cellular level.The antigenicity analysis suggested that these isolates could be classified into 2 separate antigenic clusters.Our research provides crucial data to help understand the prevalence and biological characteristics of H9N2 AIVs in central China.It also highlights the necessity of enhancing the surveillance of H9N2 AIVs. 展开更多
关键词 avian influenza virus h9n2 central China PAThOGEnICITY AnTIGEnICITY
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H3N2亚型犬流感病毒HA1基因的优化表达与间接ELISA检测方法的建立
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作者 秦海斌 包喜军 +2 位作者 朱骞 陈舒 贺星亮 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第11期114-120,共7页
为开展H3N2亚型犬流感的血清流行病学调查,本研究拟原核表达犬流感病毒(CIV)血凝素1(HA1)基因,建立一种灵敏、准确、稳定的ELISA检测方法。对地方毒株的HA1基因进行氨基酸序列优化,采用化学合成法合成目的基因,插入pET30a中并转化至大... 为开展H3N2亚型犬流感的血清流行病学调查,本研究拟原核表达犬流感病毒(CIV)血凝素1(HA1)基因,建立一种灵敏、准确、稳定的ELISA检测方法。对地方毒株的HA1基因进行氨基酸序列优化,采用化学合成法合成目的基因,插入pET30a中并转化至大肠杆菌表达,对蛋白进行纯化、鉴定,建立CIV间接ELISA方法。结果显示:优化后的HA1基因序列密码子对原核表达系统的CAI指数升至0.88,无复杂二级结构,蛋白可获得高效表达;原核表达后蛋白主要存在于包涵体中,经纯化、复性后的蛋白具备作为诊断抗原的应用价值;建立的间接ELISA方法检测国内采集的1690份犬血清,显示H3N2亚型CIV整体阳性率为9.23%,与商品化试剂盒符合率为97.9%。提示:建立的间接ELISA方法可靠,具备良好的应用前景。 展开更多
关键词 犬流感 h3n2 血凝素1 原核表达 间接ELISA
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In silico evaluation of kuwanon compounds as antiviral agents targeting H9N2 influenza virus
7
作者 Ansari Vikhar Danish Ahmad Yasar Qazi +4 位作者 Subur Wadood Khan Mohd Mukhtar Khan Altamash Ansari Sarfaraz Khan Syed iftequar Ahmed 《Infectious Diseases Research》 2024年第4期42-53,共12页
Background:The threat of avian influenza a subtype avian influenza A(H9N2)virus remains a significant concern,necessitating the exploration of novel antiviral agents.This study employs network pharmacology and computa... Background:The threat of avian influenza a subtype avian influenza A(H9N2)virus remains a significant concern,necessitating the exploration of novel antiviral agents.This study employs network pharmacology and computational analysis to investigate the potential of kuwanons,a natural compounds against H9N2 influenza virus.Methods:Leveraging comprehensive databases and bioinformatics tools,we elucidate the molecular mechanisms underlying Kuwanons pharmacological effects against H9N2 influenza virus.Network pharmacology identifies H9N2 influenza virus targets and compounds through integrated protein-protein interaction and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes analyses.Molecular docking studies were performed to assess the binding affinities and structural interactions of Kuwanon analogues with key targets,shedding light on their potential inhibitory effects on viral replication and entry.Results:Compound-target network analysis revealed complex interactions(120 nodes,163 edges),with significant interactions and an average node degree of 2.72.Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes analysis revealed pathways such as Influenza A,Cytokine-cytokine receptor interaction pathway in H9N2 influenza virus.Molecular docking studies revealed that the binding free energy for the docked ligands ranged between-5.2 and-9.4 kcal/mol for the human interferon-beta crystal structure(IFNB1,Protein Data Bank:1AU1)and-5.4 and-9.6 kcal/mol for Interleukin-6(IL-6,PDB:4CNI).Conclusion:Our findings suggest that kuwanon exhibits promising antiviral activity against H9N2 influenza virus by targeting specific viral proteins,highlighting its potential as a natural therapeutic agent in combating avian influenza infections. 展开更多
关键词 network pharmacology molecular docking kuwanons h9n2 influenza virus natural compounds
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Genetic Analysis and Rescue of a Triple-reassortant H3N2 Influenza A Virus Isolated From Swine in Eastern China 被引量:5
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作者 Xian QI Yong-jun JIAO +5 位作者 Hao PAN Lun-biao CUI Wei-xing FAN Bao-xu HUANG Zhi-yang SHI Hua WANG 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2009年第1期52-58,共7页
One influenza H3N2 virus, A/swine/Shandong/3/2005 (Sw/SD/3/2005), was isolated from pigs with respiratory disease on a farm in eastern China. Genetic analysis revealed that Sw/SD/3/2005 was a triple-reassortant virus ... One influenza H3N2 virus, A/swine/Shandong/3/2005 (Sw/SD/3/2005), was isolated from pigs with respiratory disease on a farm in eastern China. Genetic analysis revealed that Sw/SD/3/2005 was a triple-reassortant virus with a PB2 gene from human-like H1N1, NS from classical swine H1N1, and the remaining genes from human-like H3N2 virus. These findings further support the concept that swine can serve as reservoir or mixing vessels of influenza virus strains and maintain genetic and antigenic stability of viruses. Furthermore, we have successfully established a reverse genetics system based on eight plasmids and rescued Sw/SD/3/2005 through cell transfection. HI tests and RT-PCR confirmed that the rescued virus maintained the biological properties of the wild type Sw/SD/3/2005. The successful establishment of the reverse genetics system of Sw/SD/3/2005 will enable us to conduct extensive studies of the molecular evolution of H3N2 influenza viruses in swine. 展开更多
关键词 influenza A virus h3n2 reassortant Genetic analysis Reverse genetics system SWInE
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Sequence and phylogenetic analysis of hemagglutinin genes of H9N2 influenza viruses isolated from chicken in China from 2013 to 2015 被引量:5
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作者 SU Xiao-na XIE Qing-mei +4 位作者 LIAO Chang-tao YAN Zhuan-qiang CHEN Wei-guo BI Ying-zuo CHEN Feng 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2016年第11期2604-2612,共9页
H9N2 avian influenza virus(AIV) infection is a major problem in poultry industry worldwide. In this study, molecular characterizations and phylogenetic relationships of hemagglutinin(HA) gene sequences of H9N2 AIV... H9N2 avian influenza virus(AIV) infection is a major problem in poultry industry worldwide. In this study, molecular characterizations and phylogenetic relationships of hemagglutinin(HA) gene sequences of H9N2 AIV of 5 Chinese isolates in 2014 recently available in Gen Bank, 3 widely used vaccine strains, and 52 novel isolates in China from 2013 to 2015 were analyzed. The homology analysis showed that the nucleotide sequences of HA gene of these recent Chinese H9N2 AIV isolates shared homologies from 94.1 to 99.9%. Phylogenetic analysis showed that all isolates belonged to AIV lineage h9.4.2.5. Fifty-six out of the 57 recent Chinese H9N2 AIV isolates had the motifs PSRSSR↓GLF at the cleavage sites within the HA protein, while one isolate PWH01 harbored LSRSSR↓GLF. Remarkably, all of the recent Chinese H9N2 AIV strains had the Q216 L substitution in the receptor binding site, which indicated that they had potential to infect humans. Most of recent Chinese H9N2 AIV isolates lost the potential N-linked glycosylation site at residues 200–202 compared with vaccine strains. This present study demonstrated that AIV lineage h9.4.2.5 was more predominant in China than other lineages as it harbored all the H9N2 AIV isolated between 2013 and 2015. Also we showed the importance of continuous surveillance of emerging H9N2 AIV in China and update of vaccine formulation accordingly in order to prevent and control H9N2 AIV. 展开更多
关键词 avian influenza virus h9n2 subtype phylogenetic analysis hemagglutinin gene
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Clinical Predictors for Diagnosing Pandemic (H1N1) 2009 and Seasonal Influenza (H3N2) in Fever Clinics in Beijing,China 被引量:2
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作者 DAI Xiao Qiu LIU Min +6 位作者 ZHANG Tuo Hong YANG Xue Song LI Song Lin LI Xiao Guang LI Yu Ling KADEERBAI Hai San WU Huang 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2012年第1期61-68,共8页
Objective Symptomatic predictors of influenza could assess risks and improve decisions about isolation and outpatient treatment. To develop such predictors, we undertook a prospective analysis of pandemic (HIN1) 200... Objective Symptomatic predictors of influenza could assess risks and improve decisions about isolation and outpatient treatment. To develop such predictors, we undertook a prospective analysis of pandemic (HIN1) 2009 and seasonal influenza (H3N2) in patients attending fever clinics. Methods From 1 May 2009 to 1 January 2010, all adult patients admitted to fever clinics for suspected influenza, confirmed by real time RT-PCR, were enrolled. Predictors of influenza virus infection were selected with logistic regression models. Measures of sensitivity, specificity, positive and negative likelihood ratios (LRs) were calculated to identify the best predictors. Results The clinical features and routine blood test results of influenza (H1N1) 2009 and seasonal influenza were similar. The positive and negative LRs of current US CDC influenza-like illness (ILl) criteria were modest in predicting influenza infection. Our modified clinic predictors improved the ability of the positive and negative LRs to recognize pandemic (HIN1) 2009 and seasonal influenza. The revised criteria are: fever ~ 38 ~C accompanied by at least one of the following--cough, arthralgia or relative iymphopenia. Conclusion Patients with symptoms and signs that meet the new criteria are likely to have influenza and timely antiviral therapy may be appropriate. In addition, physicians should ascertain if influenza is circulating within the community or if there is a contact history of influenza and combine this information with the newly developed criteria to clinically diagnose influenza. 展开更多
关键词 Diagnosis FEVER influenza A h1n1 h3n2 Signs Symptoms
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A Novel Reassortant H2N3 Influenza Virus Isolated from China 被引量:2
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作者 LI Xiao Dan ZOU Shu Mei +5 位作者 ZHANG Ye BAI Tian GAO Rong Bao ZHANG Xin WU Jie SHU Yue Long 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2014年第4期240-249,共10页
Objective To analyze the genetic composition of a novel H2N3 virus isolate identified from a duck cage swab in a live poultry market (LPM) in 2009 in Guangdong province of China. Methods PCR-positive specimens were ... Objective To analyze the genetic composition of a novel H2N3 virus isolate identified from a duck cage swab in a live poultry market (LPM) in 2009 in Guangdong province of China. Methods PCR-positive specimens were inoculated into embryonated chicken eggs and subtyped by conventional RT-PCR. All segments of the virus A/environment/Guangdong/2/2009 were sequenced, and phylogenetic trees were constructed and analyzed. Results The genes of this virus belong to Eurasian-lineage avian viruses. The virus is a reassortant with the HA gene from an H2N2 virus and the NA gene from an H5N3 virus. The PB1, PB2, and NP genes were from an H4N6 virus, the PA was from an H3N8 virus, the M gene was from an H1N3 virus, and the NS gene was from an H10N6 virus. Conclusion market. Its A novel avian-origin reassortant H2N3 influenza virus was detected in a live poultry potential impacts and evolution should be closely monitored. 展开更多
关键词 Avian influenza Gene analysis h2n3
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猪流感病毒H1N1、H1N2和H3N2亚型多重RT-PCR诊断方法的建立 被引量:23
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作者 杨焕良 乔传玲 +3 位作者 陈艳 辛晓光 李一经 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期714-718,共5页
对我国分离到的猪流感病毒和GenBank数据库中已有的猪流感病毒H1N1、H1N2和H3N2亚型毒株的HA、NA基因核苷酸序列进行分析,分别选出各个病毒亚型HA和NA基因中高度保守且特异的核苷酸区域,设计扩增猪流感病毒H1和H3、N1和N2亚型的2套多重... 对我国分离到的猪流感病毒和GenBank数据库中已有的猪流感病毒H1N1、H1N2和H3N2亚型毒株的HA、NA基因核苷酸序列进行分析,分别选出各个病毒亚型HA和NA基因中高度保守且特异的核苷酸区域,设计扩增猪流感病毒H1和H3、N1和N2亚型的2套多重PCR特异性引物,建立了猪流感H1N1、H1N2和H3N2亚型病毒多重RT-PCR诊断方法。采用该方法对H1N1、H1N2、H3N2亚型猪流感病毒标准参考株进行RT-PCR检测,结果均呈阳性,对扩增得到的片段进行序列测定和BLAST比较,表明为目的基因片段。其它几种常见猪病病毒和其它亚型猪流感病毒的RT-PCR扩增结果都呈阴性。对107EID50/0.1mL病毒进行稀释,提取RNA进行敏感性试验,RT-PCR最少可检测到102EID50的病毒量核酸。对40份阳性临床样品的检测结果是H1N1、H1N2和H3N2亚型分别为16份、1份和20份,其它3份样品同时含有H1N1和H3N2亚型猪流感病毒,和鸡胚分离病毒结果100%一致。试验证明建立的猪流感病毒H1N1、H1N2和H3N2亚型多重RT-PCR诊断方法是一种特异敏感的诊断方法,可用于临床样品的早期快速诊断和分型。 展开更多
关键词 猪流感 病毒 hIn1 hIn2 h3n2 多重RT-PCR
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2017—2018年广州市H3N2流感病毒流行及血凝素基因分子特征分析 被引量:13
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作者 曹蓝 鲁恩洁 +4 位作者 陈艺韵 马钰 李魁彪 陆剑云 狄飚 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期899-904,921,共7页
目的对广州市H3N2流感病毒进行基因变异和进化分析,为H3N2流感科学防控提供科学依据。方法对广州市2017年1月-2018年9月流感监测标本进行H3N2病毒检测和分离,并对HA基因进行测序,通过生物信息学软件分析病毒变异和进化特点。结果所监测... 目的对广州市H3N2流感病毒进行基因变异和进化分析,为H3N2流感科学防控提供科学依据。方法对广州市2017年1月-2018年9月流感监测标本进行H3N2病毒检测和分离,并对HA基因进行测序,通过生物信息学软件分析病毒变异和进化特点。结果所监测的8 535份标本中,检出H3N2流感阳性标本386份,阳性率为4.52%。对其中16株分离株HA基因测序结果显示,与同年度疫苗推荐株A/Hong Kong/4801/2014相比,2017年广州H3N2病毒A 区抗原位点变异频率较高,多发生于140位、144位和150位,其中有7株病毒发生新抗原漂移,变异毒株占比43.75%。受体结合位点变异主要发生在前壁,位于T131K位和T135K(N)位。糖基化位点变异同样多发生于A区抗原位点和受体结合位点前壁。2017年广州H3N2流感病毒均位于3C.2a分支,但分支内又进一步进化形成3个不同的小流行分支,包括3C.2a1分支,以及与2016年北京、2017年美国分离株亲缘相近的另外两个小分支。结论 2017年广州H3N2流感病毒HA蛋白重要氨基酸位点的变异表现遗传多态性,特别是在抗原性上可能发生了较大变异。在基因进化上表现为多样性和复杂性,呈现多分支进化特点。因此有必要密切监测流行毒株的进化趋势,以期及时对疫苗株的匹配性进行有效评估。 展开更多
关键词 h3n2流感病毒 血凝素 基因变异 基因进化
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禽流感病毒H1、H3、H5、N2亚型多重RT-PCR检测方法的初步研究 被引量:8
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作者 韩雪清 林祥梅 +5 位作者 侯义宏 薄清如 廉慧锋 吴绍强 刘建 杨泽晓 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期993-996,共4页
目的根据禽流感病毒H1、H3、H5亚型的HA基因和N2型NA基因的保守序列,设计出四对RT-PCR引物,建立一步法多重RT-PCR对禽流感H1、H3、H5、N2四亚型进行快速检测。方法利用所设计的四对引物,通过对该方法扩增条件的优化,成功建立快速检测禽... 目的根据禽流感病毒H1、H3、H5亚型的HA基因和N2型NA基因的保守序列,设计出四对RT-PCR引物,建立一步法多重RT-PCR对禽流感H1、H3、H5、N2四亚型进行快速检测。方法利用所设计的四对引物,通过对该方法扩增条件的优化,成功建立快速检测禽流感病毒H1、H3、H5、N2四亚型的一步法多重RT-PCR。利用禽流感H1、H3、H5、N2四亚型毒株和其它相关标准毒株进行敏感性和特异性试验。结果与结论所建立的一步法多重RT-PCR具有较高的特异性和敏感性,与禽流感其它亚型和NDV、IBV、ARV?IBDV的核酸均无交叉反应。用该方法检测现场样品395份(4省20多个地区),结果与经典检测方法一致。 展开更多
关键词 禽流感病毒 多重RT-PCR h1亚型 h3亚型 h5亚型 n2亚型
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H_3N_2亚型人流行性感冒病毒HA_1的蛋白序列同源性比较、变异规律及结构与功能的分析 被引量:28
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作者 王勇 薛颖 +2 位作者 陈淑霞 金奇 侯云德 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期289-296,共8页
应用生物信息学数据库和工具,结合自身的实验结果,对现有的H3N2亚型人流行性感冒(流感)病毒全球分离株的HA1氨基酸序列和蛋白分子结构进行了分析研究。初步的进化分析结果表明,历史上的分离株大致分为以年代划分为特征的两大谱系,即1968... 应用生物信息学数据库和工具,结合自身的实验结果,对现有的H3N2亚型人流行性感冒(流感)病毒全球分离株的HA1氨基酸序列和蛋白分子结构进行了分析研究。初步的进化分析结果表明,历史上的分离株大致分为以年代划分为特征的两大谱系,即1968~1984/1985年的谱系,时间跨度为18年;1984/1985~1997/2000年的谱系,时间跨度为13~17年。它们分别起源于两类毒株,并在各自的谱系内发展演化,基本上不存在大规模相互交叉渗透的现象。在1984/1985年,两大谱系发生交替转换和过渡,说明流感病毒的起源、发展和演化是有一定规律性的,这可能对流感的监测预报有一定的指导意义。绝大多数毒株的二硫键组成位点和糖基化位点是极其保守的。受体结合位点(RBS)的一部分构成成份保守;其他构成成份发生变异甚至高变,并与某些抗原决定簇位点重合,可能参与了抗原抗体相互作用。5个抗原决定簇位点的变异各有其特点。A和B位点的变异表现最活跃,抗原性最强,但B位点稍弱于A位点。C和D位点的抗原性一般,且D位点的变异性低于C位点。E位点抗原性一般。在各位置的变异中,大多常是相同相近性质或相同种类的氨基酸相互替换。HA1蛋白全序列的熵(entropy)峰值作图的分析表明,HA1蛋白上121~126位等区域或位点可能独立,或参与构成了某些已知或未知? 展开更多
关键词 h3n2亚型 人流行性感冒病毒hA1 蛋白序列 同源性比较 变异规律 结构 功能 生物信息学
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H3N2亚型猪流感病毒实时荧光定量PCR快速检测方法的建立 被引量:10
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作者 陈艳 张春明 +5 位作者 乔传玲 杨焕良 张飞 吴运谱 辛晓光 陈化兰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期894-899,共6页
根据H3N2亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因保守序列,分别设计并合成了特异性引物和TaqMan MGB探针,利用实时荧光定量PCR技术检测SIV。使用含有选定检测序列的重组质粒pMD18-H3HA、pMD18-... 根据H3N2亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因保守序列,分别设计并合成了特异性引物和TaqMan MGB探针,利用实时荧光定量PCR技术检测SIV。使用含有选定检测序列的重组质粒pMD18-H3HA、pMD18-N2NA标准品绘制标准曲线,其相关系数分别为0.99015(H3HA)和0.99947(N2NA)。检测结果显示,该方法的敏感性可达100 copies/μL,除H3N2亚型SIV外,对H1亚型、H9亚型SIV以及猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪瘟病毒、猪生殖与呼吸综合征病毒和猪2型圆环病毒的检测均为阴性,应用该方法对实验室感染样品进行检测,其结果与病毒分离结果的符合率为95.83%。表明,该方法特异性强、重复性好,有望成为H3N2亚型SIV的一种特异、敏感、快速的定量检测方法。 展开更多
关键词 猪流感病毒 h3n2亚型 TAQ MAn MGB探针 实时荧光定量PCR
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H3N2亚型猪流感病毒中国分离株的克隆纯化及生物学特性 被引量:17
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作者 李海燕 辛晓光 +4 位作者 于康震 杨焕良 李雁冰 赵朴 毕英佐 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期560-563,共4页
以有限稀释克隆法对 2 9株 H3N2亚型猪流感病毒 ( SIV)不同地区分离株进行纯化 ,并对其生物学特性进行了研究。结果 ,8株对鸡呈现中等致病力 ,2 1株对鸡呈现低致病力。不同地区 SIV分离株 (第 5代 )的 EID50 差异较大 ,以安徽分离株最... 以有限稀释克隆法对 2 9株 H3N2亚型猪流感病毒 ( SIV)不同地区分离株进行纯化 ,并对其生物学特性进行了研究。结果 ,8株对鸡呈现中等致病力 ,2 1株对鸡呈现低致病力。不同地区 SIV分离株 (第 5代 )的 EID50 差异较大 ,以安徽分离株最高 ,为 10 - 1 0 .77/ 0 .2 m L,其他毒株在 10 - 5.5~ 10 - 1 0 .56 / 0 .2 m L 之间。黑龙江省分离株和浙江省分离株的L D50 高达 10 - 2 .84 / 0 .1m L ,其他分离株在 10 - 1 .1 7~ 10 - 2 .56 / 0 .1m L之间。经鸡胚分离传代后 ,SIV分离株均能凝集0 .7%人“O”型血、绵羊、兔、豚鼠、小鼠、大鼠及鸡的红细胞 ,其红细胞凝集谱的差异主要表现在对马、牛、驴、猪红细胞的凝集特性上。大部分 SIV分离株为热不稳定型 ,部分毒株表现为中等热稳定型和热稳定型。从其抗原特性看 ,大部分 SIV分离株表现为亲和相 ,对 AIV参考毒株 DKUK6 3和 SIV参考毒株 SWTN77表现出较高的 HI滴度 ;部分分离株经鸡胚传代后 ,出现了相别的变异。 展开更多
关键词 流感 流感病毒 h3n2亚型 中国分离株 克隆 纯化 生物学特性 有限稀释克隆法
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类人H3N2犬流感病毒广西分离株的鉴定及其遗传演化分析 被引量:10
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作者 陈樱 莫彦宁 +8 位作者 周华波 肖雄 於庆雄 杨文娟 韦祖樟 谢婷 韦志文 侯韶毅 黄伟坚 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期401-404,共4页
为了解广西各地区宠物犬流感病毒(CIV)的流行情况,本研究从9个地级市宠物医院采集了326份犬鼻拭子样品,经RT-PCR检测为CIV阳性后对其进行MDCK细胞分离病毒,并对分离株进行全基因组测序和序列分析。结果表明获得2株CIVs分离株,均属于... 为了解广西各地区宠物犬流感病毒(CIV)的流行情况,本研究从9个地级市宠物医院采集了326份犬鼻拭子样品,经RT-PCR检测为CIV阳性后对其进行MDCK细胞分离病毒,并对分离株进行全基因组测序和序列分析。结果表明获得2株CIVs分离株,均属于人源谱系,与Moscow/10/99(H3N2)人流感病毒株的同源性大于99%。8个基因节段的核苷酸序列遗传演化分析显示,这2株CIVs与人源H3N2亚型猪流感病毒(SIV)最为相近,同在Moscow/99分支。HA1蛋白氨基酸位点分析显示aa190~aa196位点处仍保留SIV的受体相关结合位点(DQISVYA),但却改变了流行于人类的部分受体结合位点(DQTSLYT)。本研究为有效预防人-犬流感病毒传播提供了实验依据。 展开更多
关键词 宠物犬 类人h3n2亚型 流感病毒 遗传演化
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2010-2012年福建省H3N2亚型流感病毒血凝素基因特征分析 被引量:8
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作者 谢剑锋 沈晓娜 +7 位作者 王美爱 杨式芹 修文琼 黄萌 张炎华 翁育伟 严延生 郑奎城 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1157-1161,共5页
目的通过对2010—2012年福建省分离的H3N2亚型流感毒株血凝素HA1基因进行分析,了解2010-2012年福建省H3N2亚型流感病毒的基因特征和变异规律。方法随机选择28株毒株,提取病毒RNA,采用RT-PCR扩增目的片段,纯化PCR产物后进行测序;利... 目的通过对2010—2012年福建省分离的H3N2亚型流感毒株血凝素HA1基因进行分析,了解2010-2012年福建省H3N2亚型流感病毒的基因特征和变异规律。方法随机选择28株毒株,提取病毒RNA,采用RT-PCR扩增目的片段,纯化PCR产物后进行测序;利用DNAstar和Mega4.0等生物信患学软件进行核苷酸整理、拼接、校对、差异性比较以及基因进化树构建等分析研究。结果28株H3N2亚型流感病毒HAl区核苷酸同源性在96.4%~100%之间。基因系统进化分析显示,其进化规律都是沿着树枝主干随着时闻推移向,上延伸,序列的差异和年代成正比。2010—2012年间HAl区共出现43个氨基酸位点的变化,其中有10个氨基酸位点变异累计涉及4个抗原决定簇,2个变异位点发生在受体结合位点(RBS)及其附近,应予高度重视。结论相对于A/Perth/16/2009疫苗代表株,2012年的部分H3N2亚型流感出现了抗原漂移;部分毒株已出现氨基酸位点的改变,并涉及抗原决定簇及受体结合位点,提示2010—2012年福建省人群中流行的H3N2亚型流感正逐渐发生变异,应加强流感病原学监测,以及时发现新的流感变异株,为福建省流感防控提供科学依据。 展开更多
关键词 甲型流感 h3n2亚型 hA1基因 特征 变异
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2009~2013年广西H1N1和H3N2亚型猪流感病毒血清学调查 被引量:8
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作者 陈樱 於庆雄 +9 位作者 银凤桂 薛辉 李法凯 莫彦宁 肖雄 杨文娟 韦祖樟 刘芳 蹇慧 黄伟坚 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期155-159,共5页
摘要:【目的】了解广西H1N1和H3N2亚型猪流感病毒(SIV)的存在形势及其流行规律,为下一步有效监测和防控猪流感(SI)提供理论依据和原始溯源。【方法】对2009~2013年于广西11个地级市的屠宰场、规模化养猪场和个体养殖户采集的117... 摘要:【目的】了解广西H1N1和H3N2亚型猪流感病毒(SIV)的存在形势及其流行规律,为下一步有效监测和防控猪流感(SI)提供理论依据和原始溯源。【方法】对2009~2013年于广西11个地级市的屠宰场、规模化养猪场和个体养殖户采集的1170份猪血清进行血凝抑制(Hr)试验检测,统计欧洲禽源H1N1(EA.H1N1)亚型和新型人源重组H3N2(Hu.H3N2)亚型4株毒株(LB144和BB2、NNXD和JGB4)的抗体阳性率,并分析H1N1和H3N2亚型毒株的存在形势及其流行规律。【结果】2009-2013年,EA.H1N1亚型LB144毒株的平均抗体阳性率高达20.68%,且保持稳定,是广西地区主要的流行毒株;Hu.H3N2亚型JGB4毒株从2010年开始流行,且呈逐渐蔓延的趋势,平均抗体阳性率为19.96%。广西北海、南宁、玉林、贺州、桂林、贵港和柳州市受到EA—H1N1和Hu—H3N2亚型毒株多重感染,且感染程度较严重;百色、河池和防城港市的感染程度相对较低。育肥猪最易感染SIV,尤其是BB2和JGB4毒株,其抗体阳性率分别达66.00%和40.00%。EA—H1N1亚型毒株间的交叉感染阳性率(21.52%)略低于Hu—H3N2亚型毒株间的交叉感染阳性率(27.45%),而两株不同亚型毒株交叉感染时以BB2与JGB4毒株的交叉感染阳性率最高(16.23%),3株交叉感染时以BB2、NNXD和JGB4毒株间的交叉感染阳性率最高(11.60%),4株同时交叉感染阳性率也有6.96%。【结论】广西猪群已普遍存在EA-H1N1和Hu.H3N2亚型毒株混合感染的现象,尤其是地处两省边界上的地级市感染更严重,并以育肥猪和保育猪较易感。因此在sI防控工作中,除做好哺乳仔猪和种猪的日常管理外,还应减少保育猪的外来应激,适当调整育肥猪的饲养密度,以减少新型SIV重组毒株的产生。 展开更多
关键词 猪流感病毒(SIV) h1n1亚型 h3n2亚型 血清学调查 重组毒株
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